检索结果-内蒙古大学图书馆

中国医药生物技术 2007年第3期2卷 194-196页

作者：刘晓岚宋志军吴红刘海静王立赞陈一强孔晋亮王恒壮陈海荣济宁医学院病理生理学教研室 272013 广西医科大学病理生理学教研室丹麦国家医院临床微生物科广西医科大学第一附属医院呼吸内科

目的研究群体感应系统在铜绿假单胞菌(PA)生物膜形成中的作用。方法采用生理盐水-吸痰管系统进行群体感应系统完整的PAO1野生型菌株与群体感应系统缺陷(lasI rhlI基因缺陷)型菌株的体外培养,分别于培养第3、7天用扫描电镜观察两种类型P... 详细信息

目的研究群体感应系统在铜绿假单胞菌(PA)生物膜形成中的作用。方法采用生理盐水-吸痰管系统进行群体感应系统完整的PAO1野生型菌株与群体感应系统缺陷(lasI rhlI基因缺陷)型菌株的体外培养,分别于培养第3、7天用扫描电镜观察两种类型PAO1的生物膜形成情况。结果培养第3天PAO1野生型菌株可形成较厚、有孔状通道的成熟生物膜结构,而lasI rhlI基因缺陷型菌株仅形成明显稀薄的早期生物膜结构;培养第7天PAO1野生型菌株的生物膜增厚,lasI rhlI基因缺陷型菌株所形成的生物膜结构呈薄膜状,显著薄于野生型菌株。结论lasI rhlI基因缺陷明显影响PA的生物膜形成能力,群体感应系统在PA生物膜形成中发挥重要作用。

关键词：生物膜假单胞菌,铜绿基因表达调控,细菌

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铜绿假单胞菌QS系统缺陷对生物膜形成及大鼠肺部慢性感染的影响

铜绿假单胞菌QS系统缺陷对生物膜形成及大鼠肺部慢性感染的影响

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第11届全国内科学术会议

作者：孔晋亮王恒壮陈海荣蔡双启宋志军刘晓岚陈一强王立赞广西医科大学第一附属医院呼吸内科(530021) 广西医科大学病理生理学教研室济宁医学院病理生理学教研室

目的：研究lasl rhll基因缺陷对铜绿假单胞菌体外生物膜形成的影响;观察铜绿假单胞菌PAO1野生型及其群体感应(QS)系统的lasl rhll基因缺陷型菌株人工生物膜致病性的差异，了解QS系统的lasl rhll基因在PA生物膜感染致病过程中的地位。 ... 详细信息

目的：研究lasl rhll基因缺陷对铜绿假单胞菌体外生物膜形成的影响;观察铜绿假单胞菌PAO1野生型及其群体感应(QS)系统的lasl rhll基因缺陷型菌株人工生物膜致病性的差异，了解QS系统的lasl rhll基因在PA生物膜感染致病过程中的地位。方法：采用生理盐水-吸痰管系统进行铜绿假单胞菌体外生物膜的培养，3d后用扫描电子显微镜观察PAO1、PAO1 lasl rhll形成生物膜的情况。从大鼠支气管内直接予以PA(菌种为铜绿假单胞菌PAO1野生型，PAO1 laslrhll基因缺陷型)海藻酸盐微菌粒悬液(1*109CFU/mL)攻击，建立PAO1野生型及QS系统的lasl rhll基因缺陷型菌株人工生物膜肺部感染动物模型。于感染2周后评估各组大鼠的肺部病理学、细菌学的变化。结果：3d后PAO1野生型的生物膜较厚，lasl rhll基因缺陷型菌株所形成的生物膜结构呈薄膜状，明显薄于PAO1野生型。感染2周后，PAO1野生型组的病理学改变和细菌学指标均显著重于lasl rhll基因缺陷组(P<0.001)。结论：QS系统的lasl和rhll基因影响铜绿假单胞菌体外形成生物膜的能力，并且在PA肺部感染过程中发挥着重要作用。

关键词：铜绿假单胞菌群体感应系统生物膜肺部感染

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浅谈人体机能教学

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继续医学教育 2007年第34期21卷 57-58页

作者：李秀娟张志强买买提祖农.买苏尔克拉拉.阿巴斯新疆医科大学基础医学院病理生理教研室乌鲁木齐830054 新疆医科大学第一附属医院消化科

从转变教育观念,分析新教材特点,改进教学方法,提高教学质量,理论和实验教学密切配合,针对学生特点,因材施教以及建立有效的教学检验、评价体系等方面探讨人体机能学教学体系的构建和教学效果的优化,以培养出高素质的综合性人才。

关键词：人体机能学教学体系教学效果

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问题教学法在呼吸内科研究生教学中的应用

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现代医药卫生 2007年第18期23卷 2836-2837页

作者：孔晋亮闫萍刘晓岚广西医科大学第一附属医院呼研所广西南宁530021 济宁医学院病理生理学教研室山东济宁272013

呼吸内科学是一门涉及面广泛的学科,它不仅要求有扎实的内科基础,而且其治疗范围专业内容繁杂,与很多学科既有交叉,又有联系。在呼吸内科研究生的教育中,其临床教学时间短,内容多。问题教学法（problem-based learning,PBL）目前已成为... 详细信息

呼吸内科学是一门涉及面广泛的学科,它不仅要求有扎实的内科基础,而且其治疗范围专业内容繁杂,与很多学科既有交叉,又有联系。在呼吸内科研究生的教育中,其临床教学时间短,内容多。问题教学法（problem-based learning,PBL）目前已成为发达国家较流行的一种新颖的教学方法,其核心是以学生为中心进行启发式教学，以培养学生的自学能力和独立解决实际问题的能力为重点，这与呼吸内科教学特点相符。

关键词：呼吸内科学研究生教学问题教学法以学生为中心自学能力启发式教学教学时间教学方法

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食管鳞状细胞癌组织中凋亡抑制蛋白Livin的表达

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郑州大学学报（医学版） 2007年第4期42卷 615-617页

作者：何群力赵国新苗立群孙翔王永玲张明智新乡医学院微生物学教研室新乡453003 河南省医学科学研究所郑州450052 宝鸡市第二人民医院检验科宝鸡721000 新乡医学院病理生理学教研室新乡453003 郑州大学第一附属医院肿瘤科郑州450052

目的:探讨食管鳞状细胞癌组织中凋亡抑制蛋白家族新成员Livin及其2种异构体Livinα和Livinβ的表达情况。方法:采用实时逆转录PCR(real-time RT-PCR)方法检测46例食管鳞状细胞癌组织及其对应的癌旁正常组织中Livinα mRNA和Livinβ mRN... 详细信息

目的:探讨食管鳞状细胞癌组织中凋亡抑制蛋白家族新成员Livin及其2种异构体Livinα和Livinβ的表达情况。方法:采用实时逆转录PCR(real-time RT-PCR)方法检测46例食管鳞状细胞癌组织及其对应的癌旁正常组织中Livinα mRNA和Livinβ mRNA的表达,并用免疫组织化学方法检测Livin蛋白的表达。结果:46例食管鳞状细胞癌组织中Livinα mRNA、Livinβ mRNA和蛋白的阳性表达率分别为82.6%(38/46)、82.6%(38/46)和93.5%(43/46),而对应癌旁正常组织中Livinα mRNA、Livinβ mRNA和蛋白的阳性表达率分别为43%(2/46)、6.5%(3/46)和6.5%(3/46),均低于癌组织中的表达(P<0.05)。食管鳞状细胞癌组织中Livin2种异构体同时表达,且Livinβ mRNA与Livinα mRNA表达量差异无统计学意义(P>0.05)。结论:食管鳞状细胞癌组织中存在LivinmRNA及蛋白高表达现象,可能与食管鳞状细胞癌的发生、发展密切相关。

关键词：凋亡抑制蛋白 Livin 食管肿瘤鳞状细胞癌

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靶向Livin基因siRNA载体的构建和沉默效应观察

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郑州大学学报（医学版） 2007年第4期42卷 617-620页

目的:构建针对人Livin基因的小干扰RNA(siRNA)表达载体,并观察该载体对食管癌细胞Livin基因表达的沉默效应。方法:依据siRNA设计原则,分析Livin mRNA序列,设计并合成2个Livin靶向的发夹状siRNA靶序列,退火后分别连接入pSUPER-neo载体,... 详细信息

目的:构建针对人Livin基因的小干扰RNA(siRNA)表达载体,并观察该载体对食管癌细胞Livin基因表达的沉默效应。方法:依据siRNA设计原则,分析Livin mRNA序列,设计并合成2个Livin靶向的发夹状siRNA靶序列,退火后分别连接入pSUPER-neo载体,转化扩增后进行序列测定。用脂质体包裹法将重组质粒转染人食管癌细胞EC9706,采用RT-PCR检测转染细胞Livin mRNA的表达。结果:经过酶切鉴定与测序,构建的靶向Livinα和Livinβ基因的siRNA载体,结果正确;RT-PCR检测显示,转染细胞Livin mRNA的表达水平降低。结论:成功构建沉默细胞Livin基因表达的siRNA载体。

关键词： RNA干扰 Livin 载体

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调控Livin基因表达对食管癌EC9706细胞生物学行为的影响

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郑州大学学报（医学版） 2007年第4期42卷 -页

作者：何群力苗立群赵国新孙翔王永玲张明智新乡医学院微生物学教研室新乡4530032 宝鸡市第二人民医院检验科宝鸡721000 河南省医学科学研究所郑州450052 新乡医学院病理生理学教研室新乡453003 郑州大学第一附属医院肿瘤科郑州450052

目的:探讨调控Livin基因表达对食管癌EC9706细胞生长速度、细胞凋亡以及放射线敏感性的影响。方法:取EC9706细胞,分7组,siRNA组、Livinα组、Livinβ组分别用脂质体包裹法转染沉默Livin表达的siRNA载体pSUPER-neo-Sli1、Livinα表达载体... 详细信息

目的:探讨调控Livin基因表达对食管癌EC9706细胞生长速度、细胞凋亡以及放射线敏感性的影响。方法:取EC9706细胞,分7组,siRNA组、Livinα组、Livinβ组分别用脂质体包裹法转染沉默Livin表达的siRNA载体pSUPER-neo-Sli1、Livinα表达载体pIRES2-AcGFP-Livinα及Livinβ表达载体pIRES2-AcGFP-Livinβ;Livinα/β组同时转染pIRES2-AcGFP-Livinα和pIRES2-AcGFP-Livinβ,空siRNA载体组转染pSUPER-neo,空表达载体组转染pIRES2-AcGFP,空白对照组不转染。取各组细胞,荧光定量RT-PCR法检测Livin mRNA表达情况,MTT法测定细胞生长曲线,TUNEL法检测细胞凋亡,同时检测Caspase-3活性及放射线敏感性。结果:与空白对照组比较,空表达载体组、空siRNA载体组细胞倍增时间、凋亡指数、Caspase-3活性和放射线敏感性差异均无统计学意义(P>0.05)。与空白对照组比较,Livinα组、Livinβ组和Livinα/β组细胞倍增时间、凋亡指数、Caspase-3活性和放射线敏感性均降低(P<0.05);siRNA组细胞凋亡指数、Caspase-3活性和放射线敏感性增加(P<0.05),细胞倍增时间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:调控EC9706细胞Livin基因的表达,可有效改变细胞的生物学行为;Livin基因可能成为肿瘤治疗的新靶点。

关键词： Livin 真核表达 RNA干扰凋亡 Caspase-3 放射线敏感性

来源：评论

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凋亡抑制蛋白Livin真核表达载体的构建及表达

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郑州大学学报（医学版） 2007年第4期42卷 -页

作者：何群力苗立群赵国新孙翔王永玲张明智新乡医学院微生物学教研室新乡453003 宝鸡市第二人民医院检验科宝鸡721000 河南省医学科学研究所郑州450052 新乡医学院病理生理学教研室新乡453003 郑州大学第一附属医院肿瘤科郑州450052

目的:构建凋亡抑制蛋白Livin真核表达载体pIRES2-AcGFP-Livin。方法:设计合成扩增Livinα和Livinβ基因全长cDNA序列的特异性PCR引物,以食管鳞状细胞癌EC9706细胞总RNA为模板,进行RT-PCR,将获得的cDNA序列克隆入T载体,再用BglⅡ和EcoR... 详细信息

目的:构建凋亡抑制蛋白Livin真核表达载体pIRES2-AcGFP-Livin。方法:设计合成扩增Livinα和Livinβ基因全长cDNA序列的特异性PCR引物,以食管鳞状细胞癌EC9706细胞总RNA为模板,进行RT-PCR,将获得的cDNA序列克隆入T载体,再用BglⅡ和EcoRⅠ双酶切,亚克隆入真核表达载体pIRES2-AcGFP,将重组质粒用脂质体包裹转染NIH3T3细胞,G418筛选得到稳定表达的细胞克隆,Western-blot检测转染细胞Livinα和Livinβ蛋白的表达情况。结果:构建了真核表达载体pIRES2-AcGFP-Livinα和pIRES2-AcGFP-Livinβ,测序分析证实插入序列正确;转染的NIH3T3细胞,可稳定表达Livinα或Livinβ蛋白。结论:成功构建Livinα和Livinβ真核表达载体。

关键词： Livin 真核表达载体凋亡抑制蛋白

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黄芩水煎液对生物被膜的抑制作用及对左氧氟沙星的增效作用

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中华微生物学和免疫学杂志 2007年第3期27卷 241-241页

作者：孔晋亮刘晓岚陈一强王立赞闫萍覃雪军朱莲娜广西医科大学第一附属医院呼吸内科南宁530021 广西医科大学第一附属医院细菌室南宁530021 济宁医学院病理生理学教研室

生物被膜（biomm，BF）使细菌能够逃逸抗生素的杀菌作用和机体免疫系统的清除，造成感染的反复发作。铜绿假单胞菌（Pa）在院内获得性感染中检出率较高，也是BF相关感染的重要病原菌。本文探讨黄芩水煎液和左氧氟沙星（LFX）联用以后，... 详细信息

生物被膜（biomm，BF）使细菌能够逃逸抗生素的杀菌作用和机体免疫系统的清除，造成感染的反复发作。铜绿假单胞菌（Pa）在院内获得性感染中检出率较高，也是BF相关感染的重要病原菌。本文探讨黄芩水煎液和左氧氟沙星（LFX）联用以后，对Pa的BF内细菌的抗菌活性的影响。

关键词：左氧氟沙星黄芩水煎液生物被膜增效作用抑制作用院内获得性感染机体免疫系统铜绿假单胞菌

来源：评论

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蛋白磷酸酶LY1基因原核表达载体的构建及蛋白的初步表达

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疾病控制杂志 2007年第5期11卷 456-458页

作者：彭万仁陈兵倪芳鲁云霞郑红李菲菲汪思应安徽医科大学第一附属医院肿瘤内科安徽合肥230022 安徽医科大学基础医学院生化教研室安徽合肥230032 安徽医科大学基础医学院病理生理教研室安徽合肥230032

目的构建蛋白磷酸酶LY1基因的原核表达载体,并在***21(DE3)中表达。方法PCR扩增LY1的CDs基因片段,并将其克隆入原核表达载体pET28a(+)中构建重组质粒pET28a(+)-LY1。经限制性内切酶Nhe I、XhoⅠ双酶切鉴定及序列测定后,转化***21(DE3),... 详细信息

目的构建蛋白磷酸酶LY1基因的原核表达载体,并在***21(DE3)中表达。方法PCR扩增LY1的CDs基因片段,并将其克隆入原核表达载体pET28a(+)中构建重组质粒pET28a(+)-LY1。经限制性内切酶Nhe I、XhoⅠ双酶切鉴定及序列测定后,转化***21(DE3),经IPTG诱导表达组氨酸融合蛋白。SDS-PAGE、Western blot方法检测重组蛋白的表达。结果获得全长为1179bp的LY1基因片段,以构建的重组质粒pET28a(+)-LY1转化***21(DE3)后,经IPTG诱导,表达出分子量约为42kD的重组蛋白。SDS-PAGE分析显示,表达的蛋白主要以不溶性包涵体的形式存在于***21(DE3)的胞质中。Western blot方法检测出LY1融合蛋白的表达。结论成功构建了原核表达载体pET28a(+)-LY1,并表达出重组LY1蛋白,为进一步单克隆抗体的制备和生物信号转导的相关研究奠定了实验基础。

关键词：基因蛋白基因表达

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