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中国医科大学学报 2012年第7期41卷 577-579页

作者：郭凤姚阳孙威孙雪菲宫建郝丽英中国医科大学药学院药物毒理学教研室沈阳110001 沈阳医学院生理学教研室沈阳110034 沈阳药科大学生命科学与生物制药学院临床药学教研室沈阳110016

目的利用无镁细胞外液诱导原代培养大鼠海马神经元和SH-SY5Y细胞建立癫痫放电模型。方法采用新生24 h内Wistar大鼠,分离海马神经元进行原代培养。无镁细胞外液处理体外培养至10 d的神经元和传代培养的SH-SY5Y细胞3 h后恢复正常细胞外液... 详细信息

目的利用无镁细胞外液诱导原代培养大鼠海马神经元和SH-SY5Y细胞建立癫痫放电模型。方法采用新生24 h内Wistar大鼠,分离海马神经元进行原代培养。无镁细胞外液处理体外培养至10 d的神经元和传代培养的SH-SY5Y细胞3 h后恢复正常细胞外液,应用全细胞膜片钳技术记录2种细胞的放电情况。结果无镁处理后的神经元存在自发性的"癫痫样"放电;SH-SY5Y细胞未出现"癫痫样"放电。结论细胞间通过突触联系形成网状结构可能是诱导"癫痫样"放电的必要条件之一。

关键词：海马膜片钳癫痫

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番石榴叶总三萜对2型糖尿病大鼠的降血糖和血脂作用

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中国病理生理杂志 2012年第6期28卷 1109-1113页

作者：王婧茹赵晶晶叶春玲叶开和张晓琦王英叶文才暨南大学药学院药理学教研室广东省妇幼保健院药学部广东广州510010 暨南大学药学院中药及天然药物研究所暨南大学中药药效物质基础及创新药物研究广东省高校重点实验室广东广州510632

目的:探讨番石榴叶总三萜(TTPGL)对2型糖尿病大鼠血糖及血脂的影响。方法:采用高糖高脂饮食加腹腔注射小剂量链脲佐菌素(STZ,35 ***-1)方法建立2型糖尿病大鼠模型。将造模成功的糖尿病大鼠随机分为5组:糖尿病模型组,TTPGL低、中、高剂量... 详细信息

目的:探讨番石榴叶总三萜(TTPGL)对2型糖尿病大鼠血糖及血脂的影响。方法:采用高糖高脂饮食加腹腔注射小剂量链脲佐菌素(STZ,35 ***-1)方法建立2型糖尿病大鼠模型。将造模成功的糖尿病大鼠随机分为5组:糖尿病模型组,TTPGL低、中、高剂量组(60、120、240 ***-1),罗格列酮阳性对照组(3 ***-1)。另取12只正常大鼠设为正常对照组。给药组每天灌胃给药1次,连续给药6周;模型组和正常对照组则给予同体积的生理盐水灌胃。给药6周后,采用葡萄糖氧化酶法测定大鼠的空腹血糖(FBG);放射免疫法测定空腹胰岛素(FINS),并计算胰岛素敏感指数(ISI);酶联免疫法测定大鼠的甘油三酯(TG)、总胆固醇(TCH)、游离脂肪酸(FFA)和糖化血红蛋白(GHb);果糖胺法测定糖化血清蛋白(GSP);Western blotting检测脂肪组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的表达情况。结果:与正常对照组相比,糖尿病模型组血脂、FBG以及GHb显著升高,FINS及ISI显著下降,脂肪细胞PPARγ蛋白表达水平降低。与模型组相比,TTPGL中、高剂量组大鼠的FBG和GSP显著降低,FINS以及ISI显著升高,脂肪组织PPARγ蛋白的表达水平升高(P<0.01或P<0.05);此外,TTPGL能显著降低糖尿病大鼠血脂水平,TG、TCH和FFA含量均明显降低(P<0.01或P<0.05)。结论:TTPGL能显著降低2型糖尿病大鼠的血糖和血脂水平,明显改善糖尿病动物的糖脂代谢紊乱,升高血清胰岛素水平,提高胰岛素敏感指数;其抗糖尿病作用机制可能与其增加PPARγ蛋白的表达有关。

关键词：番石榴叶总三萜糖尿病,2型血糖血脂过氧化物酶体增殖物激活受体γ

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部分纯化的牛心细胞质提取物对心肌细胞膜“run-down”L-型钙通道活性的恢复作用

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中国医科大学学报 2012年第12期41卷 1060-1064页

作者：赵金生赵妍赵美眯刘书源侯平郝丽英中国医科大学药学院药物毒理学教研室沈阳110001 中国医科大学药学院药剂学教研室沈阳110001 辽宁中医药大学附属医院心血管内科沈阳110032

目的研究牛心细胞质部分纯化提取物及钙调蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)对大鼠心肌细胞膜L-型钙通道活性的调节作用。方法采用常规的蛋白提取方法制备牛心细胞质提取物,离子交换方法进行部分纯化。应用膜片钳制技术的细胞贴附和膜内向外记录模式... 详细信息

目的研究牛心细胞质部分纯化提取物及钙调蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)对大鼠心肌细胞膜L-型钙通道活性的调节作用。方法采用常规的蛋白提取方法制备牛心细胞质提取物,离子交换方法进行部分纯化。应用膜片钳制技术的细胞贴附和膜内向外记录模式记录大鼠心室肌细胞单通道钙电流,观察牛心细胞质部分纯化提取物和CaMKⅡ对"run-down"L-型钙通道活性的恢复作用。Western blot方法验证活性蛋白。结果膜内向外记录模式下,L-型钙通道出现"run-down"现象,活性下降至细胞贴附记录模式的(0.46±0.15)%;牛心细胞质部分纯化提取物使"run-down"的通道活性恢复至细胞贴附记录模式的(44.29±13.51)%(P<0.01),加入CaMKⅡ抑制剂KN-62(1μmol/L)后活性仅恢复至(1.30±0.94)%,与未加抑制剂组相比差异有统计学意义(P<0.05);Western blot方法验证牛心细胞质部分纯化提取物中含有CaMKⅡ;基因重组融合蛋白法制备的CaMKⅡ也可将"run-down"后的钙通道活性恢复至细胞贴附记录模式的(71.59±14.76)%(P<0.05)。结论牛心细胞质部分纯化提取物对"run-down"钙通道活性具有恢复作用,该作用可能与CaMKⅡ密切相关。

关键词： L-型钙通道钙调蛋白激酶Ⅱ 膜片钳制技术单通道记录模式

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网络PBL在药物毒理学教学中的应用及实践体会

网络PBL在药物毒理学教学中的应用及实践体会

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第八次全国药理学教学学术会议

作者：郝丽英郭凤封瑞胡慧媛赵金生赵美眯孙雪菲蔡际群中国医科大学药学院药物毒理学教研室

药物毒理学是临床药学专业的特色课程之一,其知识贯穿制药、药物安全性评价,新药审批,临床合理用药及不良反应监测的全过程。通过药物毒理学教学可以培养学生的专业意识及责任感。然而,药物毒理学涉及知识面广,内容繁琐、学生普遍反应... 详细信息

药物毒理学是临床药学专业的特色课程之一,其知识贯穿制药、药物安全性评价,新药审批,临床合理用药及不良反应监测的全过程。通过药物毒理学教学可以培养学生的专业意识及责任感。然而,药物毒理学涉及知识面广,内容繁琐、学生普遍反应难学。同时,教学和学习

关键词：临床药师临床药学专业 PBL 实践体会教学中的应用

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小鼠羊膜干细胞的分离与培养

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中国老年学杂志 2012年第19期32卷 4215-4218页

作者：滕赞王嫘李智岡部素典吉田淑子二階堂敏雄中国医科大学附属第一医院肿瘤内科辽宁沈阳110001 中国医科大学附属第一医院老年病科中国医科大学药学院药物毒理学教研室日本富山大学医学部再生医学教研室

目的探索小鼠羊膜细胞(mAMCs)分离、培养方法及其体外增殖分化的特性。方法应用不同浓度胰蛋白酶及与胶原酶按不同的先后顺序作用小鼠羊膜,并采用不同的细胞接种浓度培养细胞,分别考核最佳的分离及体外培养方案。免疫荧光及免疫组化法鉴... 详细信息

目的探索小鼠羊膜细胞(mAMCs)分离、培养方法及其体外增殖分化的特性。方法应用不同浓度胰蛋白酶及与胶原酶按不同的先后顺序作用小鼠羊膜,并采用不同的细胞接种浓度培养细胞,分别考核最佳的分离及体外培养方案。免疫荧光及免疫组化法鉴定mAMCs的干细胞标志。结果胰蛋白酶消化及与胶原酶合用顺序不同,导致收获上皮细胞与间质细胞的数量和比例明显不同,先用胰蛋白酶消化将得到较多的上皮细胞,反之先用胶原酶消化将得到较多的间质细胞。以不同浓度接种上皮和间质细胞,原代培养2 w后生长曲线可见原代培养的mAMCs在y轴为对数坐标时呈长尾s型曲线。原代培养的上皮和间质细胞有较长的停滞期(2～4 d),指数增长期的细胞倍增时间间质细胞相对上皮细胞短,因此融合期时间间质细胞明显较短。接种浓度对间质细胞的生长曲线影响不大,但对上皮细胞有较大影响。在Chang medium C营养液中原代附壁培养mAMCs OCT3/4及SSEA-1阳性。结论应用0.25%胰蛋白酶及与0.075%胶原酶作用小鼠羊膜,可获得分离的mAMCs,原代培养mAMCs干细胞标志OCT3/4及SSEA-1阳性。

关键词：小鼠羊膜干细胞胰蛋白酶胶原酶 OCT3/4 SSEA-1

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蒙药乳腺-Ⅰ号对乳腺增生大鼠抗氧化能力、乳腺组织雌激素受体和孕激素受体表达的影响

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吉林大学学报（医学版） 2012年第6期38卷 1052-1057,F0002页

作者：王忠超李敏张彬任立群额都张秋丽秀兰刘一飞刘蓝涛长春医学高等专科学校病理学教研室吉林长春130031 吉林大学药学院实验药理与毒理学教研室吉林长春130051 内蒙古民族大学附属医院心胸外科内蒙古通辽028007 内蒙古民族大学蒙西医结合药物研究所内蒙古通辽028007

目的:观察蒙药乳腺-Ⅰ(M-Ⅰ)号对乳腺增生大鼠体内抗氧化能力及乳腺组织雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)表达的影响,为药物的临床应用提供实验依据。方法:48只雌性未孕Wistar大鼠,随机选出8只作为正常对照组,其余动物每天肌肉注射苯甲... 详细信息

目的:观察蒙药乳腺-Ⅰ(M-Ⅰ)号对乳腺增生大鼠体内抗氧化能力及乳腺组织雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)表达的影响,为药物的临床应用提供实验依据。方法:48只雌性未孕Wistar大鼠,随机选出8只作为正常对照组,其余动物每天肌肉注射苯甲酸雌二醇(0.5mg·kg-1)1次,连续25d,随后每天肌肉注射黄体酮(4mg·kg-1)1次,连续5d,复制大鼠乳腺增生模型,同时正常对照组大鼠肌肉注射生理盐水。模型复制成功后,随机分为5组,模型对照组大鼠给予生理盐水灌胃;阳性药对照组大鼠给予三苯氧胺1.8mg·kg-1灌胃;M-Ⅰ号低剂量组、中剂量组和高剂量组大鼠分别给予M-Ⅰ号0.5、1.0和3.0g·kg-1灌胃。给药结束后,检测各组大鼠乳头高度,观察大鼠乳腺组织病理学特征,检测大鼠血清及乳腺组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平,Western blotting法检测各组大鼠乳腺组织ER和PR的表达水平。结果:与正常对照组比较,模型对照组大鼠乳头高度仍显著增高(P<0.01),光镜下观察乳腺组织病理改变明显,血清SOD和GSH-Px水平均显著降低(P<0.05),MDA水平显著升高(P<0.05),乳腺组织ER、PR的蛋白表达量显著增加(P<0.01)。与模型对照组比较,M-Ⅰ号各剂量组大鼠乳头高度明显偏小(P<0.05或P<0.01);乳腺组织病理学改变明显减轻,M-Ⅰ号高剂量组大鼠乳腺组织结构接近正常对照组;血清及乳腺组织中SOD和GSH-Px水平较模型对照组均显著升高(P<0.05或P<0.01),MDA水平显著降低(P<0.01或P<0.05),乳腺组织中ER和PR的蛋白表达水平亦显著降低(P<0.01)。结论:M-Ⅰ号对乳腺增生大鼠有较好的治疗作用,其治疗机制可能与增强乳腺增生大鼠体内抗氧化能力、降低乳腺组织中ER和PR表达水平有关。

关键词：大鼠,Wistar 蒙药乳腺-Ⅰ号雌激素乳腺增生雌激素受体

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精制蛇毒酶的毒理学研究

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医药导报 2012年第3期31卷 282-285页

作者：刘海军梁再赋詹丽芬孙晋民中国医科大学实验技术中心一部暨国家中医药管理局中药生物工程科研Ⅲ级实验室沈阳110001 中国医科大学药学院药物毒理学教研室沈阳110001

目的观察精制蛇毒酶的安全性。方法小鼠100只,随机分成两组,尾静脉注射或腹腔注射精制蛇毒酶后观察动物出现的急性毒性反应,计算半数致死量(LD50)。小鼠120只,随机分为4组,各30只;家兔40只,随机分成4组。观察不同剂量组小鼠连续腹腔给药... 详细信息

目的观察精制蛇毒酶的安全性。方法小鼠100只,随机分成两组,尾静脉注射或腹腔注射精制蛇毒酶后观察动物出现的急性毒性反应,计算半数致死量(LD50)。小鼠120只,随机分为4组,各30只;家兔40只,随机分成4组。观察不同剂量组小鼠连续腹腔给药90 d,家兔静脉给药45 d(隔天一次)的健康状况。在给药后第91天采血,检测丙氨酸氨基转移酶、尿素氮和血常规,并对肝肾组织作病理学检查。结果精制蛇毒酶小鼠尾静脉给药的半数致死量(ivLD50)为6.695 ***-1,90%的可信限为5.434～7.956 ***-1;小鼠腹腔给药的半数致死量(ipLD50)为4.599 ***-19,0%的可信限为3.735～5.462 ***-1;各剂量小鼠和家兔肝、肾功能及血常规指标与空白组比较均差异无统计学意义(均P>0.05),病理组织学检查未见明显异常。结论在实验剂量范围内,精制蛇毒酶属低毒性。乳膏中蛇毒酶的含量为1.25×10-2 U.g-1,按成人用量0.05 ***-1(6.25×10-4 ***-1酶活力)局部用药,其用量安全可靠。

关键词：蛇毒酶,精制毒性,急性毒性,慢性半数致死量

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滨蒿内酯对豚鼠肥大细胞释放组胺、类胰蛋白酶及细胞内钙的影响

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中国现代医学杂志 2012年第13期22卷 1-5页

作者：滕赞姜晖王嫘李智中国医科大学附属第一医院肿瘤内科辽宁沈阳110001 中国医科大学药学院药物毒理学教研室辽宁沈阳110001 中国医科大学附属第一医院老年病科辽宁沈阳110001

目的滨蒿内酯(Soparone,Sco.)通过松弛气道平滑肌、清除气道氧自由基、抑制气道炎症等多种途径起到抗炎平喘作用,该实验基于前期所做的研究工作,进一步探讨了Sco对肥大细胞(mast cells,MCs)脱颗粒及其炎症介质的释放作用的影响及可能的... 详细信息

目的滨蒿内酯(Soparone,Sco.)通过松弛气道平滑肌、清除气道氧自由基、抑制气道炎症等多种途径起到抗炎平喘作用,该实验基于前期所做的研究工作,进一步探讨了Sco对肥大细胞(mast cells,MCs)脱颗粒及其炎症介质的释放作用的影响及可能的调控途径。方法不同浓度的Sco(10-5、10-6和10-7mol/L)分别作用于正常及致敏MCs,并设立正常及致敏MCs的溶剂对照组(control,asthma),比较各组MCs脱颗粒百分数、类胰蛋白酶活力、组胺释放率及MCs细胞内钙([Ca2+])i的变化。结果 1×10-5和1×10-6mol/L Sco.组MCs脱颗粒百分数分别为(39.10±2.81)%和(11.40±2.37)%,明显低于asthma组的(78.90±4.12)%(P<0.05),且以上Sco.组MCs的组胺和类胰蛋白酶释放亦较asthma组显著减少(P<0.05);在无细胞外钙条件下,不同浓度的Sco(10-5、10-6和10-7mol/L)对正常MCs[Ca2+]i的影响分别为(-12.1±2.2)%、(-6.1±2.4)%和(-2.1±0.7)%,对致敏MCs[Ca2+]i的影响分别为(-75.6±2.2)%、(-33.9±2.5)%和(-4.0±0.02)%,相同浓度Sco.对正常组和致敏组MCs[Ca2+]i的降低作用的组间差异有显著性(P<0.05)。结论 Sco.可剂量依赖性抑制豚鼠MCs脱颗粒从而抑制MCs组胺及类胰蛋白酶的释放;Sco.能够抑制豚鼠正常MCs以及致敏MCs[Ca2+]i水平。

关键词：哮喘肥大细胞脱颗粒组胺类胰蛋白酶细胞内钙

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滨蒿内酯对ryanodine介导哮喘豚鼠气道平滑肌细胞内钙释放的抑制作用

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中国现代医学杂志 2012年第4期22卷 24-28页

作者：滕赞王嫘李智中国医科大学附属第一医院肿瘤内科辽宁沈阳110001 中国医科大学附属第一医院老年病科辽宁沈阳110001 中国医科大学药学院药物毒理学教研室辽宁沈阳110001

目的该实验就滨蒿内酯(Scoparone,Sco)降低气道平滑肌细胞(airway smooth muscle Cells,ASMC)细胞内钙浓度(cytoplasmic Ca2+concentration,[Ca2+]i)的途径及平喘作用的机理进行初步的探讨。方法建立卵蛋白诱导的哮喘豚鼠模型,通过离体... 详细信息

目的该实验就滨蒿内酯(Scoparone,Sco)降低气道平滑肌细胞(airway smooth muscle Cells,ASMC)细胞内钙浓度(cytoplasmic Ca2+concentration,[Ca2+]i)的途径及平喘作用的机理进行初步的探讨。方法建立卵蛋白诱导的哮喘豚鼠模型,通过离体豚鼠气管环的舒缩实验和测定培养的ASMCs[Ca2+]i浓度的方法,分析Sco对哮喘豚鼠ryanodine受体介导的内钙释放的影响。结果显示在细胞外含钙或无钙时,预先给予Scoparone可抑制5μmol/L ryanodine引起的正常、哮喘组豚鼠离体气管环收缩反应;Scoparone可明显降低对照组及哮喘组豚鼠原代培养ASMCs[Ca2+]i水平且哮喘组更为明显(P<0.01);Scoparone明显降低原代培养的ASMCs[Ca2+]i对5μmol/L ryanodine的反应性(P<0.01)。结论 Sco明显降低正常和哮喘豚鼠原代培养的ASMCs[Ca2+]i,对后者的作用明显大于前者;Sco对ASMCs的[Ca2+]i降低作用主要是通过抑制细胞内钙释放途径实现的,明显抑制哮喘豚鼠ASMCs ryanodine受体介导的内钙释放。

关键词：滨蒿内酯气道高反应性 ryanodine 内钙释放

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ATP regulates Cav1.2 channel activity via directly binding to the channel in guinea pig heart

ATP regulates Cav1.2 channel activity via directly binding t...

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2012中国生理学会心血管生理学术研讨会

作者：封瑞 Jianjun Xu Etsuko Minobe Asako Kameyama Liying Hao Masaki Kameyama 中国医科大学药学院药物毒理学教研室 Department of Physiology Graduate School of Medical & Dental SciencesKagoshima University

Adenosine。triphosphate（ATP）is composed of the nucleobase adenine.L-type Ca channel（LTCC）is a type of voltage-dependent calcium *** plays a vital role in regulmion of *** is generally accepted that ATP in regulation of cardiac L-type Ca channel（Cav l.2）activities involves protein ***,several studies demonstrate that the protein phosphorylation-independent pathway also involves in the

关键词： ATP regulates Cav1.2 channel activity via directly binding to the channel in guinea pig heart

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