检索结果-内蒙古大学图书馆

南京林业大学学报(自然科学版) 2015年第1期39卷 142-148页

作者：季孔庶王潘潘王金铃阮倩倩潘婷朱沛煌郭天玮刘靖南京林业大学林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室

松科树种的离体培养技术相关研究从20世纪70年代开始至今一直备受关注,并取得了不断的突破。笔者综述了松科树种离体培养的研究进展,对松科树种在直接器官发生、间接器官发生、体细胞胚胎发生、原生质体培养等不同离体培养方式所取得的... 详细信息

松科树种的离体培养技术相关研究从20世纪70年代开始至今一直备受关注,并取得了不断的突破。笔者综述了松科树种离体培养的研究进展,对松科树种在直接器官发生、间接器官发生、体细胞胚胎发生、原生质体培养等不同离体培养方式所取得的研究结果进行了总结,并介绍了外植体、培养基、激素等影响离体培养的因素和条件,对松科树种离体培养中有待进一步开展的机理性研究、成年母树营养器官离体培养技术、褐化问题、诱导生根和再生植株移栽技术、商业化生产应用、离体材料的超低温保存研究等方面进行了展望。

关键词：松科树种离体培养器官发生体胚发生原生质体培养超低温保存

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马尾松RCA基因的克隆和序列分析

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分子植物育种 2015年第2期13卷 391-400页

作者：潘婷张逢凯王晓锋阮倩倩刘靖盛璐季孔庶林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室南京林业大学南京210037

1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶(Rubis CO)活化酶(RCA)是体内活化光合作用限速酶—Rubis CO的重要酶。本研究通过反转录PCR和c DNA末端快速扩增技术,从马尾松中分离得到了Pmrca1(登录号KF420118)和Pmrca2(登录号KF420119)两条RCA基因c DN... 详细信息

1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶(Rubis CO)活化酶(RCA)是体内活化光合作用限速酶—Rubis CO的重要酶。本研究通过反转录PCR和c DNA末端快速扩增技术,从马尾松中分离得到了Pmrca1(登录号KF420118)和Pmrca2(登录号KF420119)两条RCA基因c DNA序列。两条序列均包含完整的编码区与5'端和3'非翻译区,长度分别为1 816 bp和1 953 bp,编码Pm RCA1和Pm RCA2两个蛋白,长度分别为480和440个氨基酸。序列分析发现两个蛋白质都具有RCA和AAA+蛋白家族(ATPase associated with various cellular activities)特异性结构域和定位于叶绿体的转运肽,Pm RCA1还具有RCA大同工型特有的由两个半胱氨酸(Cys)残基组成的保守结构。多重序列比对显示,这两个蛋白质序列分别与红花槭的RCA大同工型和小同工型的相似性达到78%。将Pm RCA1和Pm RCA2与20种不同物种RCA构建进化树,发现其与地中海松属于同一分支。研究结果为进一步分析马尾松RCA的功能和光合作用机制奠定了基础。

关键词：马尾松 RCA RACE c DNA克隆序列分析

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一个与亚洲百合无花粉性状紧密连锁的SRAP标记

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分子植物育种 2015年第10期13卷 2299-2304页

作者：王帅辛昊阳甄艳刘光欣施季森匡华琳席梦利南京林业大学林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室南京210037

为了探讨亚洲百合无花粉性状的分子遗传机制,筛选与该性状紧密连锁的分子标记,实现分子辅助选择。本研究以无花粉与有花粉亚洲百合杂交创制的F1单株为试验材料,采用BSA法,对亚洲百合无花粉性状进行SRAP标记分析。在无花粉基因池和有花... 详细信息

为了探讨亚洲百合无花粉性状的分子遗传机制,筛选与该性状紧密连锁的分子标记,实现分子辅助选择。本研究以无花粉与有花粉亚洲百合杂交创制的F1单株为试验材料,采用BSA法,对亚洲百合无花粉性状进行SRAP标记分析。在无花粉基因池和有花粉基因池之间共筛选了108对SRAP引物组合,获得了1对在两基因池间扩增存在显著差异的引物组合EM2/ME3,并成功对两基因池间扩增出的差异片段进行回收、克隆和测序,得到了该片段375 bp的碱基序列,并将该特异标记命名为E2M3-375。

关键词：亚洲百合无花粉 SRAP

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不同分离缓冲液对杉木根尖细胞核悬液DNA分辨率的影响

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分子植物育种 2015年第1期13卷 190-196页

作者：沈捷徐进刘光欣施季森林木遗传和生物技术省部共建教育部重点实验室、南京林业大学南京210037

为制备高纯度的杉木细胞核悬液供BD Influx TM流式细胞分选仪使用,本研究配制了6种细胞核分离缓冲液制备样品,就不同分离缓冲液对DNA分辨效果进行比较。研究结果显示,WPB buffer不能获得有效分辨的峰形,而OTTO＇s buffer表现为最高的分... 详细信息

为制备高纯度的杉木细胞核悬液供BD Influx TM流式细胞分选仪使用,本研究配制了6种细胞核分离缓冲液制备样品,就不同分离缓冲液对DNA分辨效果进行比较。研究结果显示,WPB buffer不能获得有效分辨的峰形,而OTTO＇s buffer表现为最高的分辨率,G0/G1峰的变异系数为4.61%。其余4种细胞核分离缓冲液（Arumuganathan＇s buffer,Galbraith＇s buffer,Lysis buffer LB01和Marie＇s nuclear isolation buffer）的变异系数在5%~8%之间（分别为5.49%,7.30%,5.12%和6.89%）。本研究分别选用了DAPI和PI对细胞核悬液进行染色发现,利用DAPI染料获得的柱状图CV值更小、分辨率更高。研究结果表明,利用Lysis buffer LB01分离缓冲液,结合DAPI染色,可以制备得高纯度的杉木根尖细胞核悬液。这一结果为杉木根尖细胞有丝分裂中期同步化和染色体分选提供实验依据。

关键词：杉木流式细胞术细胞核悬液细胞核分离缓冲液

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多孔硅基复合纳米材料的制备及其在活体成像和光热治疗中的应用

多孔硅基复合纳米材料的制备及其在活体成像和光热治疗中的应用

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中国化学会第30届学术年会-第三十八分会：纳米生物效应与纳米药物化学

作者：夏兵林木遗传与生物技术省部共建重点实验室理学院化学与材料科学系现代分析测试中心南京林业大学

多孔硅纳米颗粒因其独特的荧光特性、纳米多孔结构、生物可降解性,以及良好的生物相容性等物理化学特性,使其在细胞成像、肿瘤成像、生物传感、药物载体等领域具有巨大的应用价值。为此,我们首先通过电化学腐蚀、超声粉碎、离心沉降、... 详细信息

多孔硅纳米颗粒因其独特的荧光特性、纳米多孔结构、生物可降解性,以及良好的生物相容性等物理化学特性,使其在细胞成像、肿瘤成像、生物传感、药物载体等领域具有巨大的应用价值。为此,我们首先通过电化学腐蚀、超声粉碎、离心沉降、透析等多种手段制备了具有良好荧光特性、尺寸均一的多孔硅纳米颗粒。在此基础之上,我们再利用微波诱导硅氢烷基化反应,对多孔硅纳米颗粒表面进行进一步的生物功能化修饰,系统开展了荧光性质调谐、胞内离子检测、体内稳定性改善,以及抗癌药物的载入和智能释放等方面的研究。

关键词：多孔硅纳米颗粒光热效应药物载体

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多孔硅基复合纳米材料的制备及其在活体成像和光热治疗中的应用

多孔硅基复合纳米材料的制备及其在活体成像和光热治疗中的应用

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中国化学会第30届学术年会

作者：夏兵林木遗传与生物技术省部共建重点实验室理学院化学与材料科学系现代分析测试中心南京林业大学210037

多孔硅纳米颗粒因其独特的荧光特性、纳米多孔结构、生物可降解性，以及良好的生物相容性等物理化学特性，使其在细胞成像、肿瘤成像、生物传感、药物载体等领域具有巨大的应用价值。为此，我们首先通过电化学腐蚀、超声粉碎、离心沉降... 详细信息

多孔硅纳米颗粒因其独特的荧光特性、纳米多孔结构、生物可降解性，以及良好的生物相容性等物理化学特性，使其在细胞成像、肿瘤成像、生物传感、药物载体等领域具有巨大的应用价值。为此，我们首先通过电化学腐蚀、超声粉碎、离心沉降、透析等多种手段制备了具有良好荧光特性、尺寸均一的多孔硅纳米颗粒。

关键词：多孔硅纳米颗粒光热效应药物载体

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外源添加代谢中间产物对米根霉生产富马酸的影响

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生物加工过程 2016年第5期14卷 1-5页

作者：李鑫欧阳水平陈晓佩周瑾南京林业大学江苏省林业资源高效加工利用协同创新中心江苏南京210037 南京林业大学林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室江苏南京210037 南京林业大学化学工程学院江苏南京210037

通过外源添加代谢中间产物(苹果酸、草酰乙酸和丙酮酸),研究其对米根霉积累富马酸及代谢关键酶的影响。结果表明,添加4.0 g/L苹果酸时,富马酸质量浓度可达34.0 g/L,与对照相比提高了24.5%,同时提高富马酸酶(FUMR)比酶活,抑制乙醇脱氢酶(... 详细信息

通过外源添加代谢中间产物(苹果酸、草酰乙酸和丙酮酸),研究其对米根霉积累富马酸及代谢关键酶的影响。结果表明,添加4.0 g/L苹果酸时,富马酸质量浓度可达34.0 g/L,与对照相比提高了24.5%,同时提高富马酸酶(FUMR)比酶活,抑制乙醇脱氢酶(ADH)比酶活。添加少于1.0 g/L草酰乙酸可提高FUMR比酶活,降低ADH比酶活,促进富马酸积累;但添加高于1.0 g/L草酰乙酸抑制了FUMR和ADH比酶活,导致富马酸和乙醇产量下降。添加1.5 g/L丙酮酸,使富马酸的质量浓度从27.3 g/L增加到38.7 g/L,提高了41.8%,但FUMR比酶活下降34.7%,而ADH比酶活保持稳定。

关键词：米根霉代谢中间产物富马酸富马酸酶乙醇脱氢酶

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米根霉两段式利用板栗栗苞生产富马酸

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生物加工过程 2016年第4期14卷 1-4,11页

作者：李鑫周瑾虞慧欧阳水平南京林业大学江苏省林业资源高效加工利用协同创新中心江苏南京210037 南京林业大学林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室江苏南京210037 南京林业大学化学工程学院江苏南京210037

通过自水解预处理板栗栗苞,以预水解液组成增殖培养基培养米根霉,增殖的米根霉再利用栗苞酶解液生产富马酸。结果表明:220℃自水解预处理栗苞,有效疏解栗苞紧密的木质纤维结构,以50 FPIU(以1 g纤维素计)纤维素酶水解50 g/L预处理栗苞,... 详细信息

通过自水解预处理板栗栗苞,以预水解液组成增殖培养基培养米根霉,增殖的米根霉再利用栗苞酶解液生产富马酸。结果表明:220℃自水解预处理栗苞,有效疏解栗苞紧密的木质纤维结构,以50 FPIU(以1 g纤维素计)纤维素酶水解50 g/L预处理栗苞,酶解得率大于95%;经增殖培养基培养米根霉,菌体生物量达4.5 g/L;增殖的米根霉利用栗苞酶解液发酵产富马酸,富马酸质量浓度为15.78 g/L,糖酸转化率为0.34 g/g。通过两段式发酵工艺,米根霉有效利用板栗栗苞生产富马酸。

关键词：板栗栗苞自水解预处理米根霉两段式发酵富马酸

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基于CODEHOP克隆杉木种子14-3-3基因片段

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林业科技开发 2015年第1期29卷 13-16页

作者：李春映仇伟杨立伟施季森甄艳南京林业大学林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室南京210037

对于未测序的物种,利用常规的引物设计很难扩增出蛋白质组获得的蛋白质基因。利用CODEHOP设计杉木种子14-3-3蛋白质的简并引物来进行反转录PCR,从杉木未成熟的种子中扩增出1 000 bp左右的产物。将PCR产物构建p MD-19Vector载体上并转化J... 详细信息

对于未测序的物种,利用常规的引物设计很难扩增出蛋白质组获得的蛋白质基因。利用CODEHOP设计杉木种子14-3-3蛋白质的简并引物来进行反转录PCR,从杉木未成熟的种子中扩增出1 000 bp左右的产物。将PCR产物构建p MD-19Vector载体上并转化JM109菌感受态细胞中,菌落PCR扩增测序。结果显示,利用CODEHOP方法设计简并引物扩增的目标片段的大小及序列与预期的一致。这将为杉木其他蛋白质基因的克隆和研究提供参考。

关键词： CODEHOP 杉木 14-3-3蛋白质简并引物

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杨树新品种的SSR指纹图谱构建和倍性检测

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林业科学 2015年第2期51卷 69-79页

作者：贾会霞姬慧娟胡建军卢孟柱林木遗传育种国家重点实验室国家林业局林木培育重点实验室中国林业科学研究院林业研究所北京100091 南京林业大学林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室南京210037

【目的】对24份杨树种质进行指纹图谱构建、系谱关系鉴定和遗传多样性分析，并进行倍性检测，为杨树新品种鉴定和知识产权保护提供科学的理论依据，同时为杨树的育种工作奠定坚实的基础。【方法】利用 TP-M13-SSR 技术对24份杨树种质进... 详细信息

【目的】对24份杨树种质进行指纹图谱构建、系谱关系鉴定和遗传多样性分析，并进行倍性检测，为杨树新品种鉴定和知识产权保护提供科学的理论依据，同时为杨树的育种工作奠定坚实的基础。【方法】利用 TP-M13-SSR 技术对24份杨树种质进行指纹图谱构建和系谱关系鉴定。从杨树 SSR 数据库中选取200对 SSR 引物，利用遗传背景差异大的 4份杨树种质进行引物筛选，选出19对扩增条带清晰、具有多态性且重复性好的引物对24份杨树种质进行扩增，利用 GeXP 毛细管电泳对 PCR 荧光产物进行检测，采用非加权组平均法（UPGMA）进行聚类分析，利用流式细胞术（FCM）进行倍性检测。【结果】19对 SSR 引物共扩增出102条条带，多态性条带97条，占95．10%，每个位点的等位基因数为2～11个，平均每对引物为5．37个。19对 SSR 引物均未检测到中林2025杨、中红杨和全红杨的条带差异，这3份种质相对于其他21份种质有特异的共同指纹条带；3对高效引物 ORPM_103，ORPM_180和 GCPM_1255可以将剩余21份杨树种质完全区分开。SSR 标记构建的指纹图谱与其系谱关系基本一致。对24份种质进行聚类分析，相似系数在0.50～1.00之间。当相似系数为0．56时，可分为5大类：第1类包括50号杨、中怀1号、中怀2号、I-69、帝国杨、中林2025杨、中红杨和全红杨；第2类包括青杨、森海 1号和森海 2号；第3类包括36号杨、丹红杨、南杨、239、1-116、中成 1号、中成 2号、中成3号、中成4号和中豫1号；第4类包括北抗杨和创新杨；第5类只有中林46杨。SSR 检测发现中怀 1号、森海 1号、森海 2号、青杨和中林46杨扩增出3个不同等位基因位点，其余19份杨树种质只出现 1个或2个等位基因位点；FCM 检测结果证实这5份种质均为三倍体，与 SSR 检测结果一致。【结论】本研究对24份杨树种质进行指纹图谱构建、遗传多样性分析和倍性测试，证实用 SSR标记可有效地检测亲本与子代之间的系谱关系，并准确地反映植物的倍性。筛选出 3对快速鉴别其中21份杨树种质的 SSR 引物，发现5个杨树种质为三倍体。本研究结果可为杨树新品种鉴定和知识产权保护提供理论依据。

关键词：杨树 TP-M13-SSR 指纹图谱系谱分析倍性检测

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