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中华肿瘤防治杂志 2013年第21期20卷 1657-1660页

作者：竺炎吴传高刘少平邱惠谢丛华周福祥武汉大学中南医院放化疗科.肿瘤生物学行为湖北省重点实验室.湖北省肿瘤医学临床研究中心湖北武汉430071

目的:探讨干扰Wrap53基因表达对肿瘤细胞放射敏感性的作用及其分子机制。方法:构建针对Wrap53的干扰质粒;脂质体转染法转染至p53野生型(wtp53)的人骨肉瘤U2OS细胞;RT-PCR和蛋白质印迹法检测Wrap53和wtp53基因的mRNA和蛋白表达;克隆形成... 详细信息

目的:探讨干扰Wrap53基因表达对肿瘤细胞放射敏感性的作用及其分子机制。方法:构建针对Wrap53的干扰质粒;脂质体转染法转染至p53野生型(wtp53)的人骨肉瘤U2OS细胞;RT-PCR和蛋白质印迹法检测Wrap53和wtp53基因的mRNA和蛋白表达;克隆形成实验测定放射敏感性参数;流式细胞术(flow cytometry,FCM)分析细胞周期变化。结果:Wrap53的特异性shRNA质粒转染U2OS细胞后,细胞内Wrap53和wtp53的mRNA和蛋白表达水平均受到明显抑制;Wrap53基因干扰组U2OS细胞的D0值为0.44±0.01,明显高于阴性对照组0.37±0.01,P=0.001,Wrap53基因干扰组SF2值为0.72±0.10,高于阴性对照组0.44±0.02,P=0.047;Wrap53干扰细胞在放射后16h(P=0.014)和24h(P=0.011)的G2/M期阻滞更加明显,显著高于对照组;但Wrap53干扰细胞在放射后出现G1期阻滞减少,以放射后24h最为显著,P=0.001。结论:干扰Wrap53基因表达降低了U2OS细胞的放射线敏感性,该作用可能与下调wtp53表达和诱导细胞放射后G2/M期阻滞有关。

关键词： Wrap53 RNAi wtp53 放射敏感性细胞周期

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金属硫蛋白家族对膀胱癌预后和免疫微环境的影响

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武汉大学学报（医学版） 2022年第2期43卷 250-256页

作者：丁燕鹏刘诺敏陈梦戈方莎向文彬於海军武汉大学中南医院放化疗科/湖北省肿瘤生物学行为重点实验室/湖北省肿瘤医学临床研究中心湖北武汉430071

目的:探讨金属硫蛋白(MT)家族在膀胱癌中的免疫调节功能及临床价值。方法:应用GEPIA和UALCAN数据库筛选金属硫蛋白家族在膀胱癌中与正常组织存在表达差异及与总体生存期显著相关的基因;利用TIMER和TISIDB数据库探讨MT1L在膀胱癌中的免... 详细信息

目的:探讨金属硫蛋白(MT)家族在膀胱癌中的免疫调节功能及临床价值。方法:应用GEPIA和UALCAN数据库筛选金属硫蛋白家族在膀胱癌中与正常组织存在表达差异及与总体生存期显著相关的基因;利用TIMER和TISIDB数据库探讨MT1L在膀胱癌中的免疫调节功能,使用逻辑回归和多因素Cox回归分析探讨了MT1L在膀胱癌中的预后价值;应用GSEA数据库分析了在膀胱癌中MT1L可能的生物学功能。结果:两个数据库一致显示,金属硫蛋白家族中只有MT1L在膀胱癌组织与正常组织之间存在显著的表达差异,并与总体生存期显著相关。此外,MT1L的表达与膀胱癌的T/N分期、肿瘤分级显著相关,并且是膀胱癌的独立预后因素。MT1L还参与膀胱癌的免疫细胞浸润的调节,是免疫微环境的重要影响因素。结论:MT1L是膀胱癌免疫微环境中重要的调节因子,并且是膀胱癌的独立预后因子。

关键词：膀胱癌金属硫蛋白 MT1L 免疫微环境

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转化生长因子Ⅱ型受体在宫颈癌及其癌前病变中的表达及临床意义

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武汉大学学报（医学版） 2017年第2期38卷 247-252页

作者：张红艳杨慧周福祥周云峰武汉大学中南医院肿瘤放化疗科/湖北省肿瘤生物学行为重点实验室/湖北省肿瘤医学临床研究中心湖北武汉430071

目的:研究宫颈癌癌前病变及其癌组织中转化生长因子Ⅱ型受体(TGFBR2)的表达及临床意义。方法:取13例慢性宫颈炎、102例宫颈上皮内瘤变和167例宫颈癌组织,构建成四块组织芯片;采用链霉卵白素-过氧化物酶连结(SP)免疫组化方法,检测四块组... 详细信息

目的:研究宫颈癌癌前病变及其癌组织中转化生长因子Ⅱ型受体(TGFBR2)的表达及临床意义。方法:取13例慢性宫颈炎、102例宫颈上皮内瘤变和167例宫颈癌组织,构建成四块组织芯片;采用链霉卵白素-过氧化物酶连结(SP)免疫组化方法,检测四块组织芯片中TGFBR2蛋白的表达,并分析其与宫颈癌临床病理特征和预后的关系。结果:成功对11例慢性宫颈炎、97例宫颈上皮内瘤变和164例宫颈癌组织中TGFBR2蛋白的表达进行检测。在慢性宫颈炎、宫颈上皮内瘤变、宫颈癌组织中,TGFBR2蛋白的阳性表达率分别为45.5%(5/11)、20.6%(20/97)、3.0%(5/164),差异均有统计学意义(P<0.05)。TGFBR2的表达与肿瘤的FIGO分期、浸润深度及淋巴结转移密切相关,即分期越晚、浸润深度越深、伴随淋巴结转移者,TGFBR2蛋白表达水平越低(P<0.05)。随访的164例宫颈癌患者中,TGFBR2阳性和阴性患者的5年生存率分别为72.4%和69.2%,两者差异有统计学意义(P<0.05)。多因素分析显示,TGFBR2表达情况和淋巴结转移情况为影响宫颈癌预后的独立因素。结论:TGFBR2表达下降与宫颈癌发生发展过程密切相关,可作为肿瘤治疗的靶点及预后的预测指标。

关键词：宫颈肿瘤宫颈上皮内瘤样病变免疫组织化学转化生长因子Ⅱ型受体

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表皮生长因子通过PI-3K信号通路诱导非小细胞肺癌细胞表达CXCR4

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武汉大学学报（医学版） 2012年第6期33卷 775-778页

作者：阿莉娅巴拉克杨垒徐会谢丛华周福祥周云峰武汉大学中南医院放化疗科湖北武汉430071 湖北省肿瘤生物学行为重点实验室/湖北省肿瘤医学临床研究中心湖北武汉430071

目的:研究非小细胞肺癌细胞株A549中表皮生长因子受体(EGFR)和CXCR4之间的关系。方法:用不同浓度(20,40,60μg/L)的表皮生长因子(EGF)处理血清饥饿的A549细胞24 h,RT-PCR检测CXCR4 mRNA;血清饥饿的A549细胞用AG1478(EGFR磷酸化特异性抑... 详细信息

目的:研究非小细胞肺癌细胞株A549中表皮生长因子受体(EGFR)和CXCR4之间的关系。方法:用不同浓度(20,40,60μg/L)的表皮生长因子(EGF)处理血清饥饿的A549细胞24 h,RT-PCR检测CXCR4 mRNA;血清饥饿的A549细胞用AG1478(EGFR磷酸化特异性抑制剂,10μmol/L)处理24 h,分别用RT-PCR和Westernblot检测CXCR4 mRNA和蛋白表达水平;分别在有/无LY294002(PI-3K通路抑制剂)情况下,用EGF处理血清饥饿的A549细胞,检测CXCR4 mRNA水平。结果:EGF使非小细胞肺癌细胞CXCR4表达上调约3-4倍,EGFR磷酸化抑制剂AG1478能降低CXCR4表达,EGF通过PI-3K信号通路上调CXCR4表达且CXCR4 mRNA含量以浓度依赖的方式增加。结论:EGF通过EGFR和PI-3K信号通路上调CXCR4表达,CXCR4和EGFR胞内信号通路之间的交互作用可能促进肿瘤进展,对于协同表达CXCR4和EGFR的非小细胞肺癌患者,同时抑制EGFR和CXCR4可能是潜在的治疗靶点。

关键词：非小细胞肺癌 EGFR PI-3K CXCR4

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ATP柠檬酸盐裂合酶在肝细胞癌中的表达及临床意义

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武汉大学学报（医学版） 2015年第1期36卷 39-44页

作者：丁千山周福祥武汉大学中南医院肿瘤放化疗科/湖北省肿瘤生物学行为重点实验室/湖北省肿瘤医学临床研究中心湖北武汉430071

目的:通过GEO公共数据库,探讨ATP柠檬酸盐裂合酶(ACLY)在多种肿瘤中的表达情况,并进一步探索其与肝细胞癌临床病理特征的关系,评价ACLY对肝细胞癌术后患者预后评价的意义,预测ACLY推动肝细胞癌发展的机制。方法:收集NCBI的肿瘤公共数据... 详细信息

目的:通过GEO公共数据库,探讨ATP柠檬酸盐裂合酶(ACLY)在多种肿瘤中的表达情况,并进一步探索其与肝细胞癌临床病理特征的关系,评价ACLY对肝细胞癌术后患者预后评价的意义,预测ACLY推动肝细胞癌发展的机制。方法:收集NCBI的肿瘤公共数据集,对表达谱资料及临床信息进行分析;利用基因富集分析(GSEA)方法,分析受ACLY调控的相关基因。结果:ACLY在多种肿瘤中高表达(P<0.05);在不同年龄、AFP、肿瘤大小、T分期、BCLC分期的肝细胞癌患者中,ACLY的表达均有显著性差异(P<0.05);ACLY的表达状态与肝细胞癌患者术后的总体生存和复发相关(P<0.05);ACLY高表达样本富集了与有丝分裂、细胞周期调控、血管生成、E2F1信号通路、myc信号通路相关的基因集。结论:ACLY在多种肿瘤中高表达,且可以作为潜在的判断肿瘤患者预后的标志物和治疗肿瘤的靶标。

关键词：肝细胞癌 ACLY 病理预后

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乳腺癌根治术后调强放疗的一体化射野设计

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中华放射医学与防护杂志 2020年第2期40卷 116-121页

作者：赵洪利陈颖王骁踊张红艳钟亚华刘晖武汉大学中南医院肿瘤放化疗科湖北省肿瘤生物学行为重点实验室湖北省肿瘤医学临床研究中心 430071 荆门市第二人民医院放疗科 448000

目的比较一种一体化调强射野设计方式与常规射野设计方法在乳腺癌根治术后调强放疗中的剂量学差异。方法选取41例左侧乳腺癌根治术后患者的CT图像,进行胸壁、部分腋窝、锁骨上、内乳等靶区及危及器官(OAR)勾画。对每一套CT图像分别制作... 详细信息

目的比较一种一体化调强射野设计方式与常规射野设计方法在乳腺癌根治术后调强放疗中的剂量学差异。方法选取41例左侧乳腺癌根治术后患者的CT图像,进行胸壁、部分腋窝、锁骨上、内乳等靶区及危及器官(OAR)勾画。对每一套CT图像分别制作一体化射野设计的调强计划和常规调强计划。评估两种计划靶区和OAR剂量学分布。结果两种计划靶区剂量分布和OAR受照剂量均满足临床要求,靶区剂量学参数差异无统计学意义(P>0.05)。一体化调强计划相比于常规计划:患侧肺V5降低9.7%(t=2.407,P<0.05)、V10降低11.2%(t=2.160,P<0.05)、V20降低17.3%(t=2.465,P<0.05)、V30降低13.4%(t=2.119,P<0.05)、Dmean降低13.8%(t=2.258,P<0.05);心脏V30下降28.4%(t=2.589,P<0.05)、Dmean下降23.2%(t=2.409,P<0.05);其他OAR剂量学差异不具有统计学意义(P>0.05)。结论一体化调强射野设计技术显著降低了患侧肺和心脏的受照体积与受照剂量,有望减轻乳腺癌根治术后放疗的不良反应。新型设计方案选取了较多的样本,包含不同分期的左乳癌根治术患者,对乳腺癌根治术后调强放疗临床应用具有普遍性,可以作为一种新的照射方式推广。

关键词：乳腺癌根治术后调强放疗危及器官心脏晚期疾病临床应用

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放射诱导辣根过氧化物酶/吲哚乙酸自杀基因表达对肺癌细胞系的生物效应研究

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中华放射肿瘤学杂志 2010年第4期19卷 364-368页

作者：熊杰周云峰王伟锋孙文洁廖正凯周福祥谢丛华武汉大学中南医院放化疗科肿瘤生物学行为湖北省重点实验室湖北省肿瘤医学临床研究中心 430071

目的检测放射诱导的肿瘤特异性嵌合启动子介导的辣根过氧化物酶/吲哚乙酸自杀基因系统对肺癌细胞A549、SPC-A1的生物效应.方法构建含有6个CArG元件的人端粒酶逆转录酶基因嵌合启动子调控的辣根过氧化物酶表达的质粒载体,及单个端粒酶... 详细信息

目的检测放射诱导的肿瘤特异性嵌合启动子介导的辣根过氧化物酶/吲哚乙酸自杀基因系统对肺癌细胞A549、SPC-A1的生物效应.方法构建含有6个CArG元件的人端粒酶逆转录酶基因嵌合启动子调控的辣根过氧化物酶表达的质粒载体,及单个端粒酶逆转录酶启动子质粒和对照质粒,分别为pE6-hTERT-HRP、phTERT-HRP、pControl-HRP、pControl-luc.分别用细胞计数法、Annexin V-FITC染色检测此嵌合启动子质粒系统对肺癌细胞A549、SPC-A1和正常人胚肺细胞（hEL）的生长抑制及凋亡效应.利用成克隆分析法检测此系统对肺癌细胞A549、SPC-A1放射敏感性的影响.结果在6 Gy放射线诱导下质粒pE6-hTERT-HRP、phTERT-HRP、pControl-HRP、pControl-luc介导的自杀基因系统对A549细胞的平均生长抑制率分别为72.92%、40.60%、51.00%、25.19%（F=67.31,P〈0.01）,对SPC-A1细胞的平均抑制率分别为64.63%、30.02%、48.23%、23.16%（F=64.94,P〈0.01）,而对正常hEL细胞则分别为20.81%、18.05%、44.20%、18.32%（F=52.19,P〈0.01）.同样四种质粒对A549细胞的平均早期凋亡率分别为36.63%、22.30%、24.33%、12.53%（F=50.99,P〈0.01）,对SPC-A1细胞的平均早期凋亡率分别为33.73%、17.37%、22.43%、11.20%（F=20.76,P〈0.01）,而对正常hEL细胞则分别为13.53%、12.5%、21.93%、12.16%（F=15.08,P〈0.01）.同样四种质粒对A549细胞放射增敏比分别为3.45、2.29、3.05、1.21,对SPC-A1细胞的放射增敏比则分别为2.68、2.15、2.28、1.15.结论放射诱导的肿瘤特异性嵌合启动子介导的辣根过氧化物酶/吲哚乙酸自杀基因系统对肺癌细胞A549、SPC-A1具有特异杀伤作用,具有很好的应用前景.

关键词：细胞系肺肿瘤自杀基因系统嵌合基因启动子放射生物效应

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放射性肺损伤与Th1／Th2免疫失衡研究进展

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中华放射肿瘤学杂志 2017年第6期26卷 706-710页

作者：程静姚晔谢丛华武汉大学中南医院放化疗科肿瘤生物学行为湖北省重点实验室肿瘤学湖北省临床研究中心 430071

胸部肿瘤放疗过程中正常肺组织不可避免受到照射,发生放射性肺损伤,主要病理表现为受照区域炎性细胞聚集、细胞因子释放、成纤维细胞聚集和增殖以及肺泡间隔胶原过度沉积。放射性肺损伤严重影响胸部放疗患者治疗顺应性和生存质量,甚至... 详细信息

胸部肿瘤放疗过程中正常肺组织不可避免受到照射,发生放射性肺损伤,主要病理表现为受照区域炎性细胞聚集、细胞因子释放、成纤维细胞聚集和增殖以及肺泡间隔胶原过度沉积。放射性肺损伤严重影响胸部放疗患者治疗顺应性和生存质量,甚至威胁其生命。近年来,大量研究发现Th1、Th2免疫失衡与放射性肺损伤的发生发展关系密切,相关细胞因子网络在放射性肺损伤进展过程中发挥执行作用,因此恢复体内Th1、Th2免疫平衡可能为防治放射性肺损伤提供新途径。

关键词：放射性肺炎放射性肺纤维化 Th1/Th2免疫应答细胞因子

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A549细胞线粒体DNA缺失模型建立及其放射敏感性变化

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中华放射医学与防护杂志 2014年第4期34卷 255-258页

作者：何为周福祥徐会江换钢胡柳谢丛华周云峰湖北省肿瘤生物学行为重点实验室湖北省肿瘤医学临床研究中心武汉大学中南医院放化疗科武汉430071 湖北省中山医院

目的建立肺癌A549细胞线粒体DNA（mtDNA）缺失模型（p°细胞），观察其放射敏感性变化。方法用含微量溴化乙锭（EB）的特殊培养液持续培养正常的A549细胞（p°细胞）以获得mtDNA完全缺失的p°细胞，利用生长缺陷及PCR鉴定... 详细信息

目的建立肺癌A549细胞线粒体DNA（mtDNA）缺失模型（p°细胞），观察其放射敏感性变化。方法用含微量溴化乙锭（EB）的特殊培养液持续培养正常的A549细胞（p°细胞）以获得mtDNA完全缺失的p°细胞，利用生长缺陷及PCR鉴定该细胞模型。利用克隆形成实验分别检测两种细胞的放射敏感性，利用碘化丙啶（PI）染色法及二氯荧光素双醋酸盐（***）染色法，分析两种细胞在6MVX射线照射后的细胞周期及活性氧簇（ROS）变化情况。结果成功建立A549P”细胞。p°细胞较p°细胞放射敏感性降低（t=12．57，P〈0．01）。放射照射8Gy后，p°细胞较p°细胞G：期阻滞时间延长，G：期细胞比例降低（t=6．82，P〈0．01），p°细胞ROS升高水平明显低于p°细胞（t=14．51，P〈0．01）。结论p°细胞较p‘细胞放射敏感性降低，其机制可能与放射照射后ROS产量降低及G2期阻滞延长有关。

关键词：线粒体DNA缺失p°细胞 mtDNA A549 放射敏感性

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放射诱导的肿瘤特异性嵌合启动子研究

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中华放射医学与防护杂志 2010年第2期30卷 152-155页

作者：熊杰周云峰孙文洁王伟峰廖正凯周福祥谢丛华武汉大学中南医院放化疗科肿瘤生物学行为湖北省重点实验室湖北省肿瘤医学临床研究中心 430071

目的将放射敏感性的CArG元件与肿瘤特异性的人端粒酶反转录酶（hTERT）基因启动子相结合，构建新的嵌合启动子。方法构建含不同CArG元件数量的嵌合hTERT启动子，在放射线诱导下（单剂量或分割照射），利用荧光素酶报告基因检测其在肿瘤... 详细信息

目的将放射敏感性的CArG元件与肿瘤特异性的人端粒酶反转录酶（hTERT）基因启动子相结合，构建新的嵌合启动子。方法构建含不同CArG元件数量的嵌合hTERT启动子，在放射线诱导下（单剂量或分割照射），利用荧光素酶报告基因检测其在肿瘤细胞（HeLa、A549、MHCC97细胞）及正常细胞（hEL细胞）中的活性。结果包含6个CArG元件的hTERT嵌合启动子较含其他数量CArG的嵌合启动子显示了更好的放射诱导性，并在4～6Gy时达到顶峰，而构建的嵌合启动子在正常的hEL细胞中活性很低。在肿瘤细胞中，3次2Gy与单次6Gy剂量照射相比较，报告基因的表达相当。结论包含6个CArG元件的肿瘤特异性嵌合启动子具备良好的放射诱导性，这种嵌合的启动子系统具有肿瘤基因治疗的潜力。

关键词：人端粒酶反转录酶启动子 CArG元件基因治疗

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