检索结果-内蒙古大学图书馆

中国科学基金 2023年第2期 256-257页

作者：蓝柯庄柯武汉大学武汉大学病毒学国家重点实验室武汉大学生物安全三级动物实验室/动物实验中心

多发性硬化症（Multiple Sclerosis,MS）是一种中枢神经系统慢性炎症性脱髓鞘疾病。EBV病毒（Epstein-Barr Virus,EBV）感染一直被认为是MS可能的病因。为了探究EBV感染与MS之间的因果关系，哈佛大学科学家研究了不同时期共约1 000多万...

多发性硬化症（Multiple Sclerosis,MS）是一种中枢神经系统慢性炎症性脱髓鞘疾病。EBV病毒（Epstein-Barr Virus,EBV）感染一直被认为是MS可能的病因。为了探究EBV感染与MS之间的因果关系，哈佛大学科学家研究了不同时期共约1 000多万美国军人20年的医疗记录，并使用储存血液样本分析EBV感染状态以及EBV感染与军人服役期间MS发病之间的关系。结果发现，感染EBV后罹患MS的风险增加了32倍，提示EBV是导致MS的原因。

关键词：

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汽化过氧化氢在动物生物安全三级实验室终末消毒中的应用观察

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中国消毒学杂志 2024年第8期41卷 565-568,572页

作者：张晶王蓓胡慧郭铭苏珊余倩代明饶艳武汉大学动物实验中心/动物生物安全三级实验室湖北武汉430071 武汉大学中南医院武汉大学生命科学学院病毒学国家重点实验室

目的探索汽化过氧化氢在动物生物安全三级实验室(absl-3实验室)终末消毒中对空间和风口型排风高效过滤器原位消毒的最优空间分布浓度和方案。方法分别采用5、8、10和15 g/m^(3)的过氧化氢对不同体积的空间进行消毒处理,通过化学指示卡... 详细信息

目的探索汽化过氧化氢在动物生物安全三级实验室(absl-3实验室)终末消毒中对空间和风口型排风高效过滤器原位消毒的最优空间分布浓度和方案。方法分别采用5、8、10和15 g/m^(3)的过氧化氢对不同体积的空间进行消毒处理,通过化学指示卡和生物指示菌法对汽化过氧化氢灭菌效果进行验证,并观察其对室内彩钢板的腐蚀性;分别采用10、12和15 g/m^(3)的过氧化氢对排风高效过滤器进行原位消毒并筛选最佳空间分布浓度。结果10 g/m^(3)的汽化过氧化氢可有效对≤200 m^(3)的实验室空间进行消毒处理,对彩钢板无腐蚀。在消毒循环风机的辅助下,15 g/m^(3)的汽化过氧化氢可对实验室风口型排风高效过滤器进行原位有效消毒。结论汽化过氧化氢消毒机配合消毒循环风机的消毒方案可在absl-3实验室终末消毒时实现对房间和排风高效过滤器的同步消毒。

关键词：汽化过氧化氢 absl-3实验室终末消毒消毒效果验证

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程序性死亡蛋白-1单克隆抗体治疗艾滋病合并恶性肿瘤的可行性分析

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中华传染病杂志 2022年第9期40卷 533-537页

作者：王闪邓涤庄柯莫平征马智勇熊勇陈小平张永喜武汉大学中南医院感染科武汉430000 武汉大学中南医院肿瘤放化疗科武汉430000 武汉大学动物实验中心(病毒学国家重点实验室) 武汉430000

目的探讨程序性死亡蛋白-1(programmed death-1,PD-1)抑制剂在艾滋病合并恶性肿瘤患者中的可行性、疗效和不良反应。方法纳入2020年9月至2021年8月于武汉大学中南医院使用PD-1单克隆抗体的艾滋病合并恶性肿瘤患者,收集患者基本情况、实... 详细信息

目的探讨程序性死亡蛋白-1(programmed death-1,PD-1)抑制剂在艾滋病合并恶性肿瘤患者中的可行性、疗效和不良反应。方法纳入2020年9月至2021年8月于武汉大学中南医院使用PD-1单克隆抗体的艾滋病合并恶性肿瘤患者,收集患者基本情况、实验室检查结果、CD4^(+)T细胞计数、人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)载量。PD-1单克隆抗体持续用药直至疾病进展或出现不可耐受的毒性反应,记录治疗期间患者的不良反应,每12周评估1次疗效。在治疗后每周检测1次HIV载量,连续4次,随后每4周1次,连续2次,其后每12周1次动态监测。结果共10例患者纳入研究,其中男7例,女3例;霍奇金淋巴瘤3例,宫颈癌和肝细胞癌各2例,非霍奇金淋巴瘤、非小细胞肺癌和肛门癌各1例。治疗前4例患者CD4^(+)T细胞计数为100~200/μL,2例CD4^(+)T细胞计数<100/μL。所有患者均至少完成3个周期PD-1单克隆抗体治疗,HIV载量均<20拷贝/mL。3例患者完全缓解,3例患者部分缓解。7例患者发生皮肤毛细血管增生症,3例发生大出血,1例发生听力障碍。结论PD-1抑制剂对HIV载量持续抑制无不良影响,且对肿瘤控制可发挥有效作用,可用于艾滋病合并肿瘤患者的治疗。但因其不良反应较多,故需多学科合作以降低合并症出现风险及处理严重并发症。

关键词：获得性免疫缺陷综合征恶性肿瘤程序性死亡蛋白-1单克隆抗体治疗

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唑来膦酸/白介素-2诱导的中国恒河猴外周血γδT细胞体外扩增

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武汉大学学报（理学版） 2020年第1期66卷 81-86页

作者：龚睿周艳郭晓萍郭铭刘金彪庄柯张晶周立湖北国际旅行卫生保健中心湖北武汉430070 武汉大学动物实验中心动物生物安全三级实验室/病毒学国家重点实验室湖北武汉430071

建立了一种培养及大量扩增中国恒河猴外周血γδT细胞的方法。采用Ficoll密度梯度离心法分离中国恒河猴(rhesus macaque)外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),用含5%猴自体血清、1 000 U·mL^-1白介素-2(IL-2... 详细信息

建立了一种培养及大量扩增中国恒河猴外周血γδT细胞的方法。采用Ficoll密度梯度离心法分离中国恒河猴(rhesus macaque)外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),用含5%猴自体血清、1 000 U·mL^-1白介素-2(IL-2)和不同浓度唑来膦酸(1,5,10μmol·L^-1)的OpTmizer细胞培养基进行培养,并使用流式细胞仪进行纯度及表型分析。结果显示:使用含不同浓度唑来膦酸培养基诱导第8 d时,1μmol·L^-1和5μmol·L^-1处理组的猴γδT细胞分别扩增至总细胞的91. 4%和93. 1%;5μmol·L^-1处理组表达CD56、CD69及HLA-DR蛋白的猴γδT细胞占总细胞的比例分别为75. 6%、75. 5%以及78. 0%;5μmol·L^-1处理组表达干扰素IFN-γ的猴γδT细胞比例为84. 8%。本研究通过优化培养基的组成成分,仅添加猴自体血清和IL-2即能有效诱导猴γδT细胞在体外的大量扩增,且培养得到的猴γδT细胞能够显著表达CD56、CD69、HLADR及IFN-γ,并具有较强的免疫激活和细胞杀伤作用。

关键词：恒河猴 γδT细胞唑来膦酸免疫激活

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细胞自噬的调控与自噬程序性死亡的研究进展

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国际免疫学杂志 2016年第5期39卷 493-497页

作者：韦勇杨四军武汉大学生命科学学院 430072 病毒学国家重点实验室武汉大学动物实验中心/ABsL-Ⅲ实验室430071

自噬（autophagy）是一种溶酶体依赖性降解途径,涉及细胞内长寿蛋白和受损伤细胞器的降解,其既是细胞保守的自我防御机制,又是一种程序性细胞死亡机制（PCD）,与机体的多种疾病有密切关系.自噬具有独特的形态改变和特有的调控通路,自噬... 详细信息

自噬（autophagy）是一种溶酶体依赖性降解途径,涉及细胞内长寿蛋白和受损伤细胞器的降解,其既是细胞保守的自我防御机制,又是一种程序性细胞死亡机制（PCD）,与机体的多种疾病有密切关系.自噬具有独特的形态改变和特有的调控通路,自噬的调控涉及到多种机制、如翻译后修饰等.凋亡是研究最清楚的程序性细胞死亡机制,凋亡与细胞自噬程序性死亡之间存在着复杂的关系.对哺乳动物细胞自噬的分子调控机制,自噬程序性细胞死亡过程及其与凋亡的关系等方面进行探讨很有意义.

关键词：自噬自噬分子机制细胞自噬性死亡

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SARS冠状病毒灭活疫苗在恒河猴中抗体依赖感染增强作用研究

SARS冠状病毒灭活疫苗在恒河猴中抗体依赖感染增强作用研究

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中华医学会2016年全国临床微生物与免疫学术年会暨第十二次全球华人临床微生物学与感染症学术年会

作者：罗凡朱薿王辉廖凡路汤宏斌杨占秋侯炜病毒学国家重点实验室/武汉大学基础医学院医学病毒研究所病毒学国家重点实验室/武汉大学基础医学院医学病毒研究所湖北科技学院基础医学院武汉大学中南医院检验科武汉大学动物实验中心/ABSL-Ⅲ实验室

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HIV-1与γδT细胞相互作用机制的研究进展

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武汉大学学报（医学版） 2015年第3期36卷 494-500页

作者：周立庄柯高建峰刘金彪桑明郭铭霍文哲武汉大学病毒学国家重点实验室动物实验中心/动物生物安全三级实验室湖北武汉430071

γδT细胞是外周血T淋巴细胞的重要组成部分,分为Vδ1T和Vδ2T细胞亚群。γδT细胞在控制HIV-1感染中发挥着重要作用。HIV-1感染会增加Vδ1T细胞数量而减少Vδ2T细胞数量,这种改变会破坏机体γδT各亚型之间的比例平衡,导致Vδ2/Vδ1倒... 详细信息

γδT细胞是外周血T淋巴细胞的重要组成部分,分为Vδ1T和Vδ2T细胞亚群。γδT细胞在控制HIV-1感染中发挥着重要作用。HIV-1感染会增加Vδ1T细胞数量而减少Vδ2T细胞数量,这种改变会破坏机体γδT各亚型之间的比例平衡,导致Vδ2/Vδ1倒置。该综述阐述了γδT细胞免疫调控的特点以及HIV-1感染对Vδ2T细胞功能影响的研究进展。

关键词： HIV-1 γδT细胞机制

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恒河猴外周血单核巨噬细胞体外培养方法的建立

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中国实验动物学报 2015年第1期23卷 18-24页

作者：桑明代明周立刘金彪郭铭马同翠肖前浩霍文哲武汉大学动物实验中心/动物生物安全三级实验室病毒学国家重点实验室武汉430071

目的建立一种简单、经济、高效的培养恒河猴外周血单核巨噬细胞（monocyte-derived macrophage,MDM）的方法.方法用肝素钠抗凝管采集成年恒河猴（Macaca mulatta）全血,密度梯度离心法分离外周血单核细胞（peripheral blood mononucle... 详细信息

目的建立一种简单、经济、高效的培养恒河猴外周血单核巨噬细胞（monocyte-derived macrophage,MDM）的方法.方法用肝素钠抗凝管采集成年恒河猴（Macaca mulatta）全血,密度梯度离心法分离外周血单核细胞（peripheral blood mononuclear cells,PBMCs）.同时用无抗凝剂采血管采集同一只猴外周血,自凝后分离血清.将猴PBMCs置于CellBIND Surface的96孔（0.8 ×10^6个细胞/孔）或48孔培养板（3×10^6个细胞/孔）中,用含不同百分比的猴自体血清或胎牛血清（fetal calf serum,FCS）的RPMI 1640培养液培养24 h后洗弃未贴壁细胞,加入含有猴自体血清或FCS的新鲜培养基继续培养7d后观察细胞形态学.分化良好的猴单核巨噬细胞贴壁能力强,占据板底大部分区域.胞体形态多样,多数呈长梭形.用巨噬细胞标记受体（CD14）抗体染色判断细胞纯度.并用细菌内毒素（LPS）刺激分化的巨噬细胞,检测巨噬细胞炎性因子的表达.此外,用猴艾滋病毒（SIVmac17E-Br、SIV-mac251）和人-猴嵌合体艾滋病毒（SHIV KU-1）感染分化良好的猴巨噬细胞,检测病毒在猴巨噬细胞中的复制.结果在含2％猴自体血清的RPMI 1640培养条件下,大多数（＞85％）猴单核细胞能在24 h内贴壁,体外分化5-7d后,猴巨噬细胞纯度大于96％.相比而言,含较高浓度（4％,8％或10％）猴自体血清或FCS的RPMI 1640培养基对猴单核细胞的贴壁和分化作用较差.分化良好的猴巨噬细胞对LPS刺激敏感,可产生多种巨噬细胞炎性因子.此外,这些细胞对SIV或SHIV均易感,产生感染性病毒.结论含2％猴自体血清的RPMI 1640培养基适于原代猴单核细胞的贴壁和分化.该方法简单、花费少,无需生长因子,且分化效果好,是培养猴艾滋病毒及开展相关免疫学实验的重要手段.

关键词：恒河猴艾滋病毒单核细胞巨噬细胞

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可诱导肺部特异表达白介素22转基因小鼠模型的建立

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武汉大学学报（理学版） 2015年第3期61卷 203-207页

作者：周立袁宝军周宇麒董佳佳方萍郑涛朱舟武汉大学病毒学国家重点实验室动物实验中心/ABSL-Ⅲ实验室湖北武汉430071 约翰霍普金斯大学医学院过敏和临床免疫学系马里兰巴尔的摩21224 耶鲁大学医学院过敏和临床免疫学系康涅狄格纽黑文06511

建立了一种肺部特异性、高效表达鼠源白介素22（mIL-22）的转基因小鼠模型.将TRE-Tight-mIL-22转基因片段显微注射入C57BL/6J小鼠受精卵细胞中,得到转基因小鼠,与能够控制TRE-Tight下游基因在肺部特异性表达的CC10-rtTA-hGH转基因小鼠交... 详细信息

建立了一种肺部特异性、高效表达鼠源白介素22（mIL-22）的转基因小鼠模型.将TRE-Tight-mIL-22转基因片段显微注射入C57BL/6J小鼠受精卵细胞中,得到转基因小鼠,与能够控制TRE-Tight下游基因在肺部特异性表达的CC10-rtTA-hGH转基因小鼠交配,获得同时含有CC10-rtTA-hGH和TRE-Tight-mIL-22这两段基因的双阳性子代转基因小鼠（IL-22转基因小鼠）.使用强力霉素（Dox）持续诱导6周龄IL-22转基因小鼠6周,用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测小鼠肺部灌洗液中IL-22蛋白的表达量.结果表明,在野生型和未诱导的IL-22转基因小鼠的肺部均未发现IL-22表达,而经Dox诱导后,与野生型C57BL/6J小鼠（〈10ng·L-1）比较,IL-22转基因小鼠肺部发现高表达量IL-22（~400ng·L-1,p〈0.05）.免疫组化染色结果显示,经Dox诱导,IL-22主要在IL-22转基因小鼠的肺部气道上皮细胞特异性表达.

关键词：白介素22 强力霉素 Tet-on/TRE-Tight诱导表达系统

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精液促进猴艾滋病毒体外感染

精液促进猴艾滋病毒体外感染

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第十一届全国病毒学学术研讨会暨第六届武汉现代病毒学国际研讨会

作者：周润宏周立庄柯李结良王旭孟凤珍刘金彪刘航肖前浩霍文哲武汉大学动物实验中心/ABSL-3实验室病毒学国家重点实验室武汉 430071中国美国天普大学医学院病理系费城 19140美国武汉大学动物实验中心/ABSL-3实验室病毒学国家重点实验室武汉 430071中国美国天普大学医学院病理系费城 19140美国

目的：已知人精液源性病毒增强因子(Semen-derived enhancer of viral infection,SEVI),可促进HIV体外感染.由于体内研究依赖于恒河猴模型,我们研究了人和猴来源SEVI是否能促进猴艾滋病毒(Simian immunodeficiency virus,SIV)体外感染.... 详细信息

目的：已知人精液源性病毒增强因子(Semen-derived enhancer of viral infection,SEVI),可促进HIV体外感染.由于体内研究依赖于恒河猴模型,我们研究了人和猴来源SEVI是否能促进猴艾滋病毒(Simian immunodeficiency virus,SIV)体外感染.方法：将5,10,25,50 ug/ml的人来源SEVI以及猴来源SEVI分别与三种猴艾滋病毒SIVmac239,SIVmac251,SHIVsf162p3n在37℃下预混1小时后,分别感染TZM-b1细胞和猴PBMCs,3小时后使用PBS洗去未结合的病毒并更换培养液,继续培养两天后检测细胞以及培养液上清中病毒载量;两种来源的SEVIs(50 ug/ml)分别处理TZM-b1细胞以及猴PBMCs,3小时后使用PBS洗去未结合的病毒并更换培养液,培养6,12,18小时后检测细胞内mRNA水平变化;SIVmac239与猴来源SEVI(25 ug/ml)预混1小时后,再与绿茶酚EGCG(5,10,50uM)混合处理0.5小时,使用这些预混物分别感染TZM-b1细胞或EGCG预处理TZM-b1细胞,3小时后使用PBS洗去未结合的病毒并更换培养液,培养两天后检测检测细胞以及培养液上清中病毒载量;猴来源SEVI(1 mg/ml)与EGCG(2mM)37℃混合后,按不同时间点(0,0.5,1,2,4,6,12,24,48小时)进行刚果红染色,检测EGCG对SEVI淀粉样结构的影响.

关键词：精液源性病毒增强因子猴艾滋病毒绿茶酚

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