检索结果-内蒙古大学图书馆

重庆医学 2017年第11期46卷 1555-1558页

作者：王家卉陈艺璐洪芬芳杨树龙南昌大学医学部基础医学院生理教研室南昌330000 南昌大学医学部临床医学1203班南昌330000 南昌大学医学部医学实验教学中心南昌330000

阿尔茨海默病（alzheimer′s disease,AD）是一种进行性发展的神经系统退行性疾病,以认知障碍、智力衰退和人格改变为特征。NO是神经系统中的重要信号分子,参与了AD的发病过程。NO与Aβ生成密切相关,并通过影响脑血管血流、氧化氮化应... 详细信息

阿尔茨海默病（alzheimer′s disease,AD）是一种进行性发展的神经系统退行性疾病,以认知障碍、智力衰退和人格改变为特征。NO是神经系统中的重要信号分子,参与了AD的发病过程。NO与Aβ生成密切相关,并通过影响脑血管血流、氧化氮化应激、异常的相关信号通路以及炎症因子等影响AD发病，本文对NO参与AD的发病机制及治疗的相关研究最新进展进行了综述。

关键词：阿尔茨海默病一氧化氮淀粉样β蛋白老年人

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四引物法快速检测白细胞介素1A基因3'UTR插入/缺失多态性

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实验与检验医学 2018年第2期36卷 147-149,203页

作者：贾二娟吴梦怡柴丽娜余乐涵万福生朱伟锋许昌市中心医院检验科河南许昌461000 南昌大学医学部第一临床医学院江西南昌330006 南昌大学医学实验教学部江西南昌330006 南昌大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室江西南昌330006

目的建立四引物扩增受阻突变体系聚合酶链反应(tetra-primer amplification refractory mutation system polymerase chain reaction,T-ARMS-PCR)检测白细胞介素1A基因3'UTR插入/缺失多态性的方法。方法使用试剂盒提取100例志愿者血样的基因组DNA,设计四引物检测白细胞介素1A基因3'UTR插入/缺失多态性的引物,对PCR的反应体系和扩增条件优化后对100例样本分型。DNA测序验证四引物法的准确性。结果 100例样本中Del/Del基因型39例,Ins/Ins基因型10例,Ins/Del基因型51例。DNA测序与四引物法的分型结果完全一致。结论四引物法可以实现白细胞介素1A基因3'UTR插入/缺失多态性的快速、简便、低成本检测。

关键词：白细胞介素1A 插入/缺失多态性四引物扩增受阻突变体系聚合酶链反应

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应用酵母双杂交系统筛选与蛋白激酶Pkmyt1相互作用的候选分子

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解剖学报 2017年第1期48卷 48-53页

作者：刘超孟智超栾治东任丽莉刘乙蒙肖建英锦州医科大学锦州医科大学基础医学院发育生物学教研室辽宁锦州121101 锦州医科大学基础医学实验教学中心辽宁锦州121101 锦州医科大学神经生物学教研室辽宁锦州121101 锦州医科大学教务处辽宁锦州121101

目的蛋白激酶Pkmyt1负调控小鼠1-细胞期受精卵有丝分裂的进程,但具体调控机制还不清楚。因此,利用酵母双杂交系统从人卵巢c DNA文库中筛选与Pkmyt1相互作用的候选蛋白,为研究Pkmyt1调控小鼠受精卵早期发育提供新线索。方法以小鼠卵巢组... 详细信息

目的蛋白激酶Pkmyt1负调控小鼠1-细胞期受精卵有丝分裂的进程,但具体调控机制还不清楚。因此,利用酵母双杂交系统从人卵巢c DNA文库中筛选与Pkmyt1相互作用的候选蛋白,为研究Pkmyt1调控小鼠受精卵早期发育提供新线索。方法以小鼠卵巢组织c DNA为模板,构建p GBKT7-Pkmyt1诱饵质粒,转化酵母感受态细胞后,分别接种于SD/-Trp(SDO)、SD/-Trp/X-α-Gal(SDO/X)和SD/-Trp/X-α-Gal/Ab A plates(SDO/X/A)培养板,检测其对酵母的毒性和自身激活能力,Western blotting法检测p GBKT7-Pkmyt1在酵母细胞中的表达。将人卵巢c DNA文库与含有p GBKT7-Pkmyt1的酵母感受态细胞融合,PCR筛选出阳性克隆,提取质粒,测序鉴定,再次检测其对酵母自激活能力,利用生物信息学分析筛选蛋白与胚胎发育的关系。结果酶切鉴定和Blast分析表明p GBKT7-Pkmyt1质粒构建成功。将该质粒转入Y2H golden中,在SDO板上克隆均匀生长,在SDO/X/A平皿上无克隆生长,Western blotting检测Pkmyt1在酵母细胞中有表达。PCR验证融合后的阳性克隆质粒有插入片段。通过初步筛选得到182种能够与Pkmyt1相互作用的蛋白质,经回复性实验进一步验证有46个与Pkmyt1之间存在相互作用的蛋白。结论通过筛选发现46个蛋白可能通过与Pkmyt1相互作用调控小鼠卵母细胞成熟和受精卵早期发育。

关键词： Pkmyt1 酵母双杂交蛋白-蛋白相互作用免疫印迹法小鼠

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牛磺酸对心肌细胞缺氧/复氧凋亡的保护及机制

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南昌大学学报（理科版） 2017年第4期41卷 349-354,367页

作者：韩畅畅杨晓红万慧芳余乐涵余波万福生南昌大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室江西南昌330031 南昌大学医学实验教学中心江西南昌330031

为探讨牛磺酸对心肌缺血/再灌注(I/R)损伤的细胞保护作用及分子机制。采用大鼠乳鼠心肌细胞制备缺氧/复氧(H/R)损伤模型,用基因转染及siRNA靶向基因沉默技术,MTT法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡率,RT-PCR检测mRNA表达、Western... 详细信息

为探讨牛磺酸对心肌缺血/再灌注(I/R)损伤的细胞保护作用及分子机制。采用大鼠乳鼠心肌细胞制备缺氧/复氧(H/R)损伤模型,用基因转染及siRNA靶向基因沉默技术,MTT法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡率,RT-PCR检测mRNA表达、Western blot检测蛋白表达。结果显示:与H/R组比较,3个牛磺酸保护组的心肌细胞凋亡率均有显著下降(P<0.05);随着牛磺酸浓度的增加,H/R心肌细胞中Bcl-2蛋白表达逐渐升高(P<0.05),而PUMA、CHOP、Bax、Grp78和Caspase-3蛋白表达则逐渐下降(P<0.01);牛磺酸对心肌细胞转染PUMA过表达有较强的下调作用;靶向沉默PUMA后细胞凋亡率呈显著下降,靶向沉默CHOP后PUMA表达下调(P<0.05)。结果表明牛磺酸对心肌细胞H/R导致的凋亡有较好的抑制作用,其机制可能与牛磺酸能下调CHOP表达,进而抑制促凋亡蛋白PUMA表达有关。

关键词：牛磺酸缺血/再灌注损伤细胞凋亡 C/EBP同源蛋白心肌

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低浓度胰蛋白酶原代培养大鼠血管内皮细胞实验方法研究

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药物资讯 2017年第5期6卷 108-114页

作者：郭发先魏志萍苏湾英邵亚兰李莉萍刘雅珺杨蓓吴磊洪芬芳杨树龙基础医学院生理学教研室江西南昌医学实验教学部寄生虫实验室江西南昌

目的:探索改进一种简单、经济和高纯度的大鼠血管内皮细胞分离培养方法。方法:采用2%戊巴比妥钠麻醉Wistar大鼠,在无菌条件下截取主动脉约3~4 cm,再将主动脉血管外翻使内膜暴露,用丝线结扎动脉两端,以0.125%胰蛋白酶消化18~20 min,在倒... 详细信息

目的:探索改进一种简单、经济和高纯度的大鼠血管内皮细胞分离培养方法。方法:采用2%戊巴比妥钠麻醉Wistar大鼠,在无菌条件下截取主动脉约3~4 cm,再将主动脉血管外翻使内膜暴露,用丝线结扎动脉两端,以0.125%胰蛋白酶消化18~20 min,在倒置相差显微镜下直接观察细胞生长和细胞形态特征,分别应用免疫组化和免疫荧光方法检测第VIII因子相关抗原抗体结合情况,对培养传代的血管内皮细胞进行鉴定。结果:采用0.125%胰蛋白酶直接消化可获得高纯度的大鼠主动脉血管内皮细胞。经过3~4天培养,细胞呈集落样散在分布于六孔培养板底,到10~12天时,细胞贴壁增长至覆盖大部分培养板底,约85%的细胞汇合成单层,呈现典型的“鹅卵石”样内皮细胞特征;此外,免疫组化和免疫荧光方法检测第VIII因子相关抗原抗体结合情况,发现大多数细胞胞浆呈现棕黄色和绿色荧光的阳性反应,显示分离培养的细胞主要是血管内皮细胞。结论:本改良的细胞培养方法操作简便,只需浓度低至0.125%胰蛋白酶即可获取较高纯度的血管内皮细胞,不需要较昂贵的胶原酶及内皮细胞生长因子,与现有的其他培养方法相比更为经济实用。

关键词：血管内皮细胞原代细胞培养胰蛋白酶方法学大鼠

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人ZNF580基因的原核表达及单克隆抗体的制备

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武警后勤学院学报（医学版） 2017年第3期26卷 194-197页

作者：牟心红温晓昶李海生张文成武警后勤学院临床医学系基础医学实验技术教研室天津300309 武警后勤学院临床医学系生理学与病理生理学教研室天津300309

【目的】原核表达纯化人锌指蛋白(zinc finger protein 580,ZNF580)并制备抗人ZNF580单克隆抗体。【方法】将构建的重组质粒pET30a-ZNF580转化大肠杆菌BL21(DE3),由异丙基-β-D-半乳糖苷(Isopropyl beta-D-galactosidase,IPTG)诱导表达并纯化目的蛋白。将纯化的蛋白免疫BALB/c小鼠,制备针对ZNF580的特异性单克隆抗体并通过ELISA和Western blotting方法鉴定。【结果】含有该质粒的大肠杆菌BL21(DE3)经IPTG诱导表达后,产物蛋白分子量约为19 kDa,通过将Sp2/0细胞与免疫鼠的脾细胞融合获得了1株能稳定表达ZNF580抗体的杂交瘤细胞株(H4E4C5),其分泌的单克隆抗体的IgG亚类IgG2b,ELISA检测腹水抗体效价为1:1.28×10~5,Western blotting结果显示抗ZNF580单克隆抗体具有良好的特异性。【结论】本实验成功表达并纯化了ZNF580蛋白并制备了抗ZNF580蛋白的单克隆抗体,为进一步研究锌指蛋白ZNF580的功能奠定了基础。

关键词：锌指蛋白580 原核表达单克隆抗体

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重度子痫前期患糊S6基因834＋7G／A和＋1332C／T多态性的研究

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中华医学遗传学杂志 2017年第1期34卷 45-49页

作者：叶丽燕关林波范平刘兴会刘瑞陈瑾歆朱月魏星刘宇白怀四川大学华西第二医院遗传代谢性疾病及围生医学实验室成都610041 四川大学华西第二医院妇产科成都610041 华西医院人类疾病相关多肽研究室华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学教研室

目的探讨生长停滞特异基因6（growth arrest specific gene6，GAS6）多态性是否与重度子痫前期发病有关联。方法采用聚合酶链反应一限制性片段长度多态性分析法对成都地区167例重度子痫前期患者和312名健康孕妇GAS6基因834＋7G／A和＋13... 详细信息

目的探讨生长停滞特异基因6（growth arrest specific gene6，GAS6）多态性是否与重度子痫前期发病有关联。方法采用聚合酶链反应一限制性片段长度多态性分析法对成都地区167例重度子痫前期患者和312名健康孕妇GAS6基因834＋7G／A和＋1332C／T多态性进行分析。结果GAS6基因＋1332C／T位点C、T等位基因的频率在重度子痫前期组为85．63％、14．37％，在正常孕妇组为78．04％、21．96％。＋1332C／T位点基因型和等位基因频率在重度子痫前期组和正常妊娠对照组之间差异具有统计学意义（均P〈0．05），CT＋TT基因型携带者在患者组的频率显著低于对照组（28．14％VS39．42％），发生重度子痫前期的风险降低（OR=0．602，95o．4CI：0．401～0．904，x^2=6．045，P=0．014）。834＋7G／A位点G、A等位基因的频率在重度子痫前期组为72．75％、27．25％，在正常孕妇组为74．36％、25．64％。两组之间基因型和等位基因频率差异无统计学意义（均P〉0．05）。此外，重度子痫前期组和正常妊娠对照组GAS6基因两位点基因型对血压水平未见显著影响。结论中国成都地区汉族人GAS6基因＋1332T等位基因与重度子痫前期发病的风险降低可能存在关联，但未见834＋7G／A位点与重度子痫前期的发生有关。

关键词：妊娠高血压疾病子痫前期生长停滞特异基因6 基因多态性

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NKT细胞在小鼠母胎免疫耐受微环境中作用的初步研究

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南昌大学学报（医学版） 2017年第6期57卷 1-5,107页

作者：刘仁平邵淑馨孙樱殷任敏戴群丁南华王力薇黎曰真徐良全俞晓春王晶磊南昌大学基础医学院生理学教研室南昌330006 南昌大学医学实验教学中心南昌330006

目的探讨自然杀伤T(NKT)细胞在小鼠母胎免疫耐受微环境中的调节作用。方法将48只孕鼠随机分为4组:α-GalCer 1组、α-GalCer 2组、α-GalCer 3组和正常对照组,每组12只。α-GalCer 1、2、3组分别给予α-GalCer 10.3、20.6、41.2mg·... 详细信息

目的探讨自然杀伤T(NKT)细胞在小鼠母胎免疫耐受微环境中的调节作用。方法将48只孕鼠随机分为4组:α-GalCer 1组、α-GalCer 2组、α-GalCer 3组和正常对照组,每组12只。α-GalCer 1、2、3组分别给予α-GalCer 10.3、20.6、41.2mg·L^(-1)腹腔注射,1次·d-1;正常对照组给予0.9%氯化钠注射液0.2mL腹腔注射,1次·d-1。每组实验重复3次。在干预24h后,免疫组织化学SP法检测孕鼠子宫内膜组织中CD3的表达,RT-PCR检测孕鼠外周血单核细胞、子宫蜕膜组织中IL-4mRNA、IFN-γmRNA的表达水平及IFN-γmRNA/IL-4mRNA相对灰度比值。结果在妊娠第3天小鼠干预24h后,与正常对照组比较,20.6mg·L^(-1)的α-GalCer(α-GalCer 2组)明显抑制外周血单核细胞和子宫内膜组织中IFN-γ以及外周血单核细胞中IL-4的mRNA表达,但促进子宫内膜组织中IL-4的mRNA表达(P<0.05)。20.6 mg·L^(-1)的α-GalCer(α-GalCer 2组)促进了外周血单核细胞中IFN-γ/IL-4相对灰度比值的升高,而明显抑制了子宫内膜组织中IFN-γmRNA/IL-4mRNA相对灰度的比值(P<0.05)。在子宫着床期间,由α-GalCer诱导的子宫内膜T细胞数量明显增多。结论围着床期α-GalCer诱导外周NKT细胞活化,可促使外周单核细胞中IFN-γ/IL-4的平衡向Th1漂移,而子宫内膜中活化的NKT细胞使IFN-γ/IL-4的平衡向Th2漂移,有利于子宫内膜形成免疫耐受微环境。

关键词： T细胞自然杀伤T细胞免疫耐受微环境免疫细胞因子外周血单核细胞

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血清淀粉样蛋白A与2型糖尿病合并颈内动脉狭窄关系的研究

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锦州医科大学学报 2017年第3期38卷 15-18页

作者：郑晓明单伟李德华刘学锦州医科大学基础医学实验教学中心锦州医科大学基础医学院解剖学教研室辽宁锦州121001

目的探讨血清淀粉样蛋白A(SAA)与2型糖尿病(T2DM)合并颈内动脉狭窄的关系,判断其是否可以作为T2DM合并颈内动脉狭窄的早期预测因子。方法选择60例男性2型糖尿病合并颈内动脉狭窄患者为研究对象,年龄在50~60岁之间。对入选患者行颈部血... 详细信息

目的探讨血清淀粉样蛋白A(SAA)与2型糖尿病(T2DM)合并颈内动脉狭窄的关系,判断其是否可以作为T2DM合并颈内动脉狭窄的早期预测因子。方法选择60例男性2型糖尿病合并颈内动脉狭窄患者为研究对象,年龄在50~60岁之间。对入选患者行颈部血管超声,按颈部血管超声所测血流速度把颈内动脉狭窄程度分为轻度狭窄组(A组)20例、中度狭窄组(B组)20例和重度狭窄组(C组)20例,比较3组间患者的年龄、体重指数(BMI)、空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、血脂(SAA)、同型半胱氨酸(HCY)等指标之间的差异,并进行比较。结果 (1)C组甘油三酯(TG)、血清胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)、血糖(FBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)均高于B组(P<0.05),差异具有统计学意义;(2)各组间同型半胱氨酸浓度(HCY)比较,A组HCY明显低于B组(P<0.01),B组HCY低于C组(P<0.01),差异具有统计学意义;(3)各组间血清淀粉样蛋白A(SAA)比较,A组SAA明显低于B组(P<0.01),B组SAA低于C组(P<0.01),差异具有统计学意义。结论血清淀粉样蛋白A在2型糖尿病合并颈内动脉狭窄过程中随着血管病变程度的加重而增高,说明对早期血管病变初筛具有重要意义。

关键词： 2型糖尿病颈内动脉狭窄同型半胱氨酸

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临床解剖学课程中基于小组合作学习的标本考试

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解剖学研究 2017年第6期39卷 495-497页

作者：姚伙生徐达政钟光明郭开华周丽华初国良中山大学中山医学院基础医学实验教学中心人体解剖学教研室广东广州510080

为了寻找临床解剖学课程中有效的标本考试方法,促进合作学习,设计了小组成果共享法来评价学生辨认、确定解剖结构的能力。实践证明:小组成果共享法是一种有效的小组合作学习评价方法,能充分调动每个组员的积极性和创造性,互相配合、互... 详细信息

为了寻找临床解剖学课程中有效的标本考试方法,促进合作学习,设计了小组成果共享法来评价学生辨认、确定解剖结构的能力。实践证明:小组成果共享法是一种有效的小组合作学习评价方法,能充分调动每个组员的积极性和创造性,互相配合、互相支持,实现人人能发展,个个有价值。

关键词：临床解剖学合作学习标本考试

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