检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：钮慧敏李银黄欣梅刘宇卓赵冬敏张敬峰韩凯凯周晓波江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心南京农业大学动物医学院

用鹅源坦布苏病毒JS804株E蛋白免疫BAlB/c鼠,通过杂交瘤技术,共获得6株分泌抗鹅坦布苏病毒E蛋白抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为2A、3B、3D、3E、3H5H6株阳性杂交瘤细胞的培养上清及腹水对JS804株病毒的ELISA抗体效价分别为10、10、10～2... 详细信息

用鹅源坦布苏病毒JS804株E蛋白免疫BAlB/c鼠,通过杂交瘤技术,共获得6株分泌抗鹅坦布苏病毒E蛋白抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为2A、3B、3D、3E、3H5H6株阳性杂交瘤细胞的培养上清及腹水对JS804株病毒的ELISA抗体效价分别为10、10、10～2、10～3、10～2、10～2和10～3、10～3、10～4、10～6、10～5、10～4。特异性试验表明,该6株单抗均不与NDV、AIV、IBV、IBDV、DHV和GPV发生交叉反应。单抗2A和3B亚类为IgA,3E和3H亚类为IgG1,3D亚类为IgG2a,5H亚类为IgG2b。所有单抗的轻链均为κ型。Western-blot方法以及间接免疫荧光试验结果表明,六株单抗均具有良好的特异性。其中单抗3E和3H对鹅源坦布苏病毒JS804毒株有中和活性。

关键词：坦布苏病毒中和试验单克隆抗体中和活性

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分泌犬瘟热病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

分泌犬瘟热病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次人兽共患病学术研讨会暨第六届第十四次教学专业委员会

作者：毕振威王永山范红结江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心南京农业大学动物医学院

用纯化的犬瘟热病毒(CDV)免疫BALB/c小鼠,制备脾细胞,与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经间接ELISA筛选和克隆化,获得5株能稳定分泌CDV单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为3H11、1D7、2C9、1F8和3G3,抗体亚类分别为IgG2bκ、IgGlκ、IgG2bκ、I... 详细信息

用纯化的犬瘟热病毒(CDV)免疫BALB/c小鼠,制备脾细胞,与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经间接ELISA筛选和克隆化,获得5株能稳定分泌CDV单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为3H11、1D7、2C9、1F8和3G3,抗体亚类分别为IgG2bκ、IgGlκ、IgG2bκ、IgG1κ和IgG1κ,诱生腹水的抗体效价分别为109、107、106、107和106。细胞染色体分析表明,5株杂交瘤细胞株染色体平均数为88～96条,高于SP2/0骨髓瘤细胞或脾细胞的染色体数;间接免疫荧光试验(IFA)证明,5株单抗均与CDV发生特异性反应;免疫印迹(western blotting)分析,单抗1F8和3G3能特异地识别CDV的N蛋白;在病毒中和试验中,单抗3H111和1D7的病毒中和效价分别为105和106,其它3株单抗则没有中和活性;经ELISA相加试验证实,5株单抗作用的抗原位点不同。

关键词：犬瘟热病毒杂交瘤细胞单克隆抗体中和活性

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近年我国兔瘟流行特点分析与疫苗研究动态

近年我国兔瘟流行特点分析与疫苗研究动态

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第二届(2012)中国兔业发展大会

作者： FAN Zhi-yu 范志宇 HU Bo 胡波 WEI Hou-jun 魏后军 XU Wei-zhong 除为中 WANG Fang 王芳 XUE Jia-bin 薛家宾 Veterinary Institute of Jiangsu Agricultural Sciences Academy Veterinary Bio-engineering Technologie 江苏省农业科学院兽医研究所·农业部兽用生物制品工程技术重点实验室·国家兽用生物制品工程技术研究中心南京210014 Veterinary Institute of Jiangsu Agricultural Sciences Academy Veterinary Bio-engineering Technologie 江苏省农业科学院兽医研究所·农业部兽用生物制品工程技术重点实验室·国家兽用生物制品工程技术研究中心南京210014 南京天邦生物科技有限公司南京211102

兔瘟是由兔出血症病毒引起的一种急性、高度接触性、高致死性的疾病，对养兔业的危害巨大。本文介绍了兔瘟流行的特点及兔瘟疫苗的研究进展，分析了兔瘟疫苗免疫失败的原因，提出了综合防治的措施。

关键词：兔瘟流行特点疫苗免疫防治措施

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传染性法氏囊病病毒感染细胞内源性microRNA表达差异分析

传染性法氏囊病病毒感染细胞内源性microRNA表达差异分析

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次人兽共患病学术研讨会暨第六届第十四次教学专业委员会

作者：欧阳伟王永山王永强王笑梅朱向东毕振威范红结江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室南京农业大学动物医学院

细胞内源性microRNA(miRNA)在宿主与病原相互作用过程中发挥着重要的调节功能。为了分析细胞内源性miRNA与传染性法氏囊病病毒(IBDV)的相互作用,用IBDV弱毒和强毒分别感染鸡胚成纤维细胞(CEF)和SPF鸡,24 h后,取感染CEF和法氏囊组织,提... 详细信息

细胞内源性microRNA(miRNA)在宿主与病原相互作用过程中发挥着重要的调节功能。为了分析细胞内源性miRNA与传染性法氏囊病病毒(IBDV)的相互作用,用IBDV弱毒和强毒分别感染鸡胚成纤维细胞(CEF)和SPF鸡,24 h后,取感染CEF和法氏囊组织,提取细胞总RNA,用Hy3/Hy5双色荧光标记,与miRNA芯片杂交,经芯片内标准化、芯片间标准化、表达差异比较以及聚类分析。结果显示:在IBDV弱毒感染的CEF中,有17个细胞内源性miRNA表达上调,17个miRNA表达下调;在IBDV强毒感染的鸡法氏囊组织细胞中,有30个细胞内源性miRNA表达上调,18个miRNA表达下调。根据表达差异显著的miRNA序列设计引物,用荧光定量RT-PCR方法验证芯片检测结果,两种方法的检测结果一致。本实验结果表明,IBDV感染可诱导细胞内源性miRNA表达变化,这些上调/下调的miRNA调控细胞内多种代谢和信号传导途径发生异常,引起细胞及组织器官发生病理变化。

关键词：传染性法氏囊病病毒(IBDV) microRNA(miRNA) 芯片荧光定量PCR 分析

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传染性法氏囊病病毒感染细胞内源性microRNA表达差异分析

传染性法氏囊病病毒感染细胞内源性microRNA表达差异分析

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中国畜牧兽医学会禽病学分会第十六次学术研讨会

作者：欧阳伟王永山王永强王笑梅马金荣吴晓悠张海彬范红结江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室南京农业大学动物医学院

本研究拟在前期RNAi研究工作的基础上,进一步用IBDV感染鸡胚成纤维细胞和SPF鸡,以基因芯片技术检测感染前后CEF miRNA和法氏囊组织miRNA表达差异,用荧光定量RT-PCR验证芯片检测结果。为阐明IBDV诱导表达差异的细胞内源性miRNA对IBDV感... 详细信息

本研究拟在前期RNAi研究工作的基础上,进一步用IBDV感染鸡胚成纤维细胞和SPF鸡,以基因芯片技术检测感染前后CEF miRNA和法氏囊组织miRNA表达差异,用荧光定量RT-PCR验证芯片检测结果。为阐明IBDV诱导表达差异的细胞内源性miRNA对IBDV感染的分子调控机制奠定基础。1材料与方法用IBDV弱毒和强毒分别感染鸡胚成纤维细胞(CEF)和SPF鸡,24 h后,用microRNA芯片和荧光定量RT-PCR定量检测感染的CEF和法氏囊组织microRNA的表达水平。

关键词：传染性法氏囊病 miRNA CEF 鸡胚成纤维细胞法氏囊内源性 microRNA 差异分析病毒感染细胞

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传染性法氏囊病病毒VP2与C3d串联基因重组表达质粒的构建及其免疫功能分析

传染性法氏囊病病毒VP2与C3d串联基因重组表达质粒的构建及其免疫...

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次人兽共患病学术研讨会暨第六届第十四次教学专业委员会

作者：马金荣欧阳伟王永山吴晓悠朱向东张海彬范红结王忠灿唐雨德江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心南京农业大学动物医学院南京军区军事医学研究所南京军区疾病预防控制中心

为了提高传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2基因核酸疫苗的免疫效力,根据已发表的鸡源C3d序列,设计并合成在5'端添加连接肽(Gly4Ser)2序列的C3d基因。用同尾酶BglⅡ和BamHⅠ构建含有3拷贝C3d与VP2的的重组表达质粒pcDNA-VP2-3C3d。用脂... 详细信息

为了提高传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2基因核酸疫苗的免疫效力,根据已发表的鸡源C3d序列,设计并合成在5'端添加连接肽(Gly4Ser)2序列的C3d基因。用同尾酶BglⅡ和BamHⅠ构建含有3拷贝C3d与VP2的的重组表达质粒pcDNA-VP2-3C3d。用脂质体法转染BHK21细胞,48 h后,Western blot分析表明,表达的重组蛋白为162 ku;间接免疫荧光试验检测转染细胞中具有特异性荧光。用重组表达质粒pcDNA-VP2-3C3d、与前期构建的真核表达质粒pcDNA-VP2免疫2周龄SPF鸡,二免14 d后,间接ELISA法检测IBDV抗体效价,pcDNA-VP2-3C3d组抗体水平显著高于pcDNA-VP2组,MTT法检测鸡脾淋巴细胞增殖活性,pcDNA-VP2-3C3d组免疫诱导的特异性淋巴细胞增殖活性显著高于pcDNA-VP2组(P<0.05)。本研究表明C3d可增强VP2基因免疫诱导的IBDV特异性体液和细胞免疫应答。

关键词：传染性法氏囊病病毒(IBDV) VP2基因鸡补体C3d 分子免疫佐剂基因免疫

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传染性法氏囊病病毒VP2与C3d串联基因重组表达质粒的构建及其免疫功能分析

传染性法氏囊病病毒VP2与C3d串联基因重组表达质粒的构建及其免疫...

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中国畜牧兽医学会禽病学分会第十六次学术研讨会

作者：马金荣欧阳伟王永山吴晓悠朱向东张海彬范红结王忠灿唐雨德江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心南京农业大学动物医学院南京农业大学动物医学院南京军区军事医学研究所南京军区疾病预防控制中心

为了提高传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2基因核酸疫苗的免疫效力,本实验在前期工作基础上,设计合成鸡补体C3d基因,利用同尾酶获得C3d的3拷贝串联体3C3d,与IBDV VP2基因串联,构建VP2-3C3d串联基因的重组真核表达质粒,在BHK21细胞中表达。... 详细信息

为了提高传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2基因核酸疫苗的免疫效力,本实验在前期工作基础上,设计合成鸡补体C3d基因,利用同尾酶获得C3d的3拷贝串联体3C3d,与IBDV VP2基因串联,构建VP2-3C3d串联基因的重组真核表达质粒,在BHK21细胞中表达。并进一步对动物进行基因免

关键词：传染性法氏囊病病毒 C3d VP2 重组表达质粒串联基因免疫功能

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浅谈中小型规模猪场场长的素质

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中国畜牧兽医文摘 2012年第5期28卷 3-页

作者：华利忠刘茂军冯志新邵国青江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心南京210014

随着经济的发展,我国养猪业已逐渐向集约化和规模化发展。然而,中小型规模猪场仍是国内养猪场的主体。中小规模猪场存在猪场选址和布局不合理、猪场性质和规模不合理、投资评估偏差大、技术人才缺乏等问题。如何避免和改善,猪场场长肩... 详细信息

随着经济的发展,我国养猪业已逐渐向集约化和规模化发展。然而,中小型规模猪场仍是国内养猪场的主体。中小规模猪场存在猪场选址和布局不合理、猪场性质和规模不合理、投资评估偏差大、技术人才缺乏等问题。如何避免和改善,猪场场长肩负着使命和责任。

关键词：养猪场育肥猪母猪门卫制度

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鸭副粘病毒与H9亚型禽流感病毒双重PCR检测方法的初步建立

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东北农业大学学报 2011年第12期42卷 55-59页

作者：刘宇卓魏雪涛李银张敬峰江苏省农业科学院兽医研究所南京210014 农业部兽用生物制品工程技术重点实验室南京210014 国家兽用生物制品工程技术研究中心南京210014

通过对GenBank发表的鸭副粘病毒(DPV)和鸭H9亚型禽流感病毒(AIV,H9)基因序列分析,针对保守区分别设计并合成2对特异性引物。通过对扩增条件的优化,建立了检测两种病毒的快速双重PCR方法。结果表明,该检测方法可同时扩增出DPV(363 bp)和H... 详细信息

通过对GenBank发表的鸭副粘病毒(DPV)和鸭H9亚型禽流感病毒(AIV,H9)基因序列分析,针对保守区分别设计并合成2对特异性引物。通过对扩增条件的优化,建立了检测两种病毒的快速双重PCR方法。结果表明,该检测方法可同时扩增出DPV(363 bp)和H9亚型AIV(732 bp)的特异性片段,而对照DHV、IBV、IBDV及SPF鸡胚尿囊液均未见条带。该方法具敏感性,对鸡胚感染尿囊液中两种病原核酸的检出率均为2 ng.μL。对保存不同时间的两种病毒及临床可疑病料均可检测到阳性条带。试验证明该方法具有良好的特异性、敏感性和稳定性,可以用于临床样品的早期快速检测和鉴别诊断。

关键词：鸭副粘病毒 H9亚型禽流感双重RT—PCR 检测

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猪IL-1β与IL-18 SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法的建立

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江苏农业学报 2011年第6期27卷 1289-1294页

作者：汪伟倪艳秀温立斌吕立新周俊明俞正玉茅爱华张雪寒李彬郭容利王小敏范红结何孔旺江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 南京农业大学动物医学院江苏南京210095

IL-1β和IL-18是重要的促炎症细胞因子,在介导机体炎症反应中起重要作用。为了建立在体外定量检测猪细胞因子IL-1β和IL-18 mRNA表达水平的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法,依据GenBank中登录的猪细胞因子基因IL-1β、IL-18及管家基因β-ac... 详细信息

IL-1β和IL-18是重要的促炎症细胞因子,在介导机体炎症反应中起重要作用。为了建立在体外定量检测猪细胞因子IL-1β和IL-18 mRNA表达水平的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法,依据GenBank中登录的猪细胞因子基因IL-1β、IL-18及管家基因β-actin核苷酸序列,设计特异性引物,经RT-PCR从3D4猪肺泡巨噬细胞系中克隆和扩增了上述3个因子核苷酸片段,构建含有各自引物扩增序列的重组质粒作为阳性模板,建立了检测IL-1β、IL-18及β-actin SYBR GREEⅠ荧光定量PCR方法。该方法起始模板数与Ct值之间线性关系好,相关系数达到0.990以上;特异性强,扩增产物形成单一的特异性熔解峰;敏感性高,初始模板的检出下限达到了1μl 1.0×102拷贝;重复性好,组内变异系数均小于4%。

关键词：猪促炎症细胞因子 IL-1β IL-18 荧光定量PCR

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