检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：郁达威胡肄农谭业平陆昌华江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心

本研究根据OIE统计的2013年12月5日-2015年8月31日的小反刍兽疫PPR事件报告249件,结合发病地区的水系和交通数据试分析环境参数对小反刍兽疫的发病与传播相关性,显示PPR发病空间变化规律,绘制根据环境参数和周边发病事件确立的PPR风险... 详细信息

本研究根据OIE统计的2013年12月5日-2015年8月31日的小反刍兽疫PPR事件报告249件,结合发病地区的水系和交通数据试分析环境参数对小反刍兽疫的发病与传播相关性,显示PPR发病空间变化规律,绘制根据环境参数和周边发病事件确立的PPR风险评估图,为人们的防治决策提供了重要理论基础和数量依据

关键词：小反刍兽疫 PPR 空间分析

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1株猪鼻支原体特异性单克隆抗体的制备及鉴定

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中国人兽共患病学报 2017年第11期33卷 962-966页

作者：田瑞雨熊祺琰倪博王佳韦艳娜冯志新邵国青江苏省农业科学院兽医研究所.农业部兽用生物制品工程技术重点实验室.国家兽用生物制品工程技术研究中心南京210014 南京农业大学动物医学院南京210095 省部共建国家重点实验室培育基地 -江苏省食品质量安全重点实验室南京210014 江苏省肉类生产与加工质量安全控制协同创新中心南京210095

目的制备与鉴定猪鼻支原体单克隆抗体,用于猪鼻支原体诊断及致病机理的研究。方法将猪鼻支原体全菌蛋白免疫小鼠,利用杂交瘤技术制备单克隆抗体。鉴定其抗体亚型并对纯化单抗的效价、特异性进行鉴定。将该单抗用于菌落免疫杂交试验、间... 详细信息

目的制备与鉴定猪鼻支原体单克隆抗体,用于猪鼻支原体诊断及致病机理的研究。方法将猪鼻支原体全菌蛋白免疫小鼠,利用杂交瘤技术制备单克隆抗体。鉴定其抗体亚型并对纯化单抗的效价、特异性进行鉴定。将该单抗用于菌落免疫杂交试验、间接免疫荧光试验。结果获得了1株猪鼻支原体单抗,命名为Mhr-08。该单抗的亚型属于IgG1,轻链为κ型。ELISA测定该纯化单抗效价为1∶102 400,Western-blot检测结果表明,该单抗与猪鼻支原体全菌蛋白在43kDa处出现特异性反应条带,与猪其他支原体、大肠杆菌及KM2培养基无交叉反应;该单抗为猪鼻支原体表面膜蛋白抗体,可成功应用于菌落免疫杂交试验;将其用于间接免疫荧光试验可成功检测出黏附于猪气管上皮细胞上的猪鼻支原体。结论成功制备和鉴定出1株猪鼻支原体单克隆抗体,该特异性单抗的获得为猪鼻支原体的诊断及致病机理的研究提供了工具。

关键词：猪鼻支原体单克隆抗体特异性

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EHEC O157:H7 z3276基因缺失株构建及其生物学特性

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微生物学通报 2017年第12期44卷 2958-2966页

作者：张碧成张雪寒孙小涵范红结何孔旺江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 省部共建国家重点实验室培育基地-江苏省食品质量安全重点实验室江苏南京210014 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009 南京农业大学动物医学院江苏南京210095

【目的】肠出血性大肠杆菌O157:H7是世界范围内重要的动物源性致病菌之一,可感染人。I型菌毛是多种致病性大肠杆菌(如肾盂肾炎型大肠杆菌等)可表达的一种黏附结构,与细菌吸附黏膜表面密切相关。然而,O157:H7 fim操纵子上几个核苷酸的缺... 详细信息

【目的】肠出血性大肠杆菌O157:H7是世界范围内重要的动物源性致病菌之一,可感染人。I型菌毛是多种致病性大肠杆菌(如肾盂肾炎型大肠杆菌等)可表达的一种黏附结构,与细菌吸附黏膜表面密切相关。然而,O157:H7 fim操纵子上几个核苷酸的缺失却导致其不能表达I型菌毛。BLAST比对结果表明O157:H7独有的开放阅读框z3276编码的氨基酸序列与其他大肠杆菌I型菌毛高度同源,这可能是对O157:H7不能表达I型菌毛的补偿机制,但确切功能尚不清楚。本文探究z3276基因的生物学功能。【方法】利用O157:H7 86-24参考菌株构建z3276基因缺失株(?z3276),并构建其互补株(C?z3276),进而比较亲本株、?z3276与C?z3276的生物学特性及对小鼠致病性差异。【结果】与亲本株相比,?z3276进入对数生长期的时间延后,在半固体琼脂平板上的迁移直径明显缩小,生物被膜形成能力显著减弱。?z3276对HEp-2细胞的黏附和侵袭能力并无明显变化,但对IPEC-J2细胞的侵袭能力明显减弱。在小鼠攻毒试验中,?z3276组排菌数量减少、排菌持续时间缩短。C?z3276各项特性均能回复到与亲本株一致的水平。【结论】z3276基因可能是O157:H7重要的毒力相关因子。

关键词： O157:H7 z3276基因缺失株致病性

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鸭抗病毒基因Viperin的克隆、表达及其抗原性研究

鸭抗病毒基因Viperin的克隆、表达及其抗原性研究

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第五届全国禽病分子生物技术青年工作者会议

作者：韩凯凯李银毕可然刘宇卓刘青涛赵冬敏杨婧黄欣梅江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

Viperin是一种由Ⅰ型和Ⅱ型干扰素诱导的宿主蛋白,广泛存在于低等生物到哺乳动物体内,在进化上高度保守.本研究以鸭外周血淋巴细胞为原材料,通过RT-PCR扩增得到完整开放阅读框的基因序列,成功亚克隆并构建了真核表达载体pEGFP-N1-viper... 详细信息

Viperin是一种由Ⅰ型和Ⅱ型干扰素诱导的宿主蛋白,广泛存在于低等生物到哺乳动物体内,在进化上高度保守.本研究以鸭外周血淋巴细胞为原材料,通过RT-PCR扩增得到完整开放阅读框的基因序列,成功亚克隆并构建了真核表达载体pEGFP-N1-viperin,并转染至DF-1细胞,用坦布苏病毒攻击后,比较转染pEGFP-N1-viperin质粒与转染空载体组,病毒在细胞中的增殖情况.结果表明:鸭Viperin基因开放阅读框有1092bp,编码蛋白由363个氨基酸构成.转染结果显示,构建的pEGFP-N1-viperin真核表达质粒在DF-1细胞中成功表达.坦布苏病毒攻击后,与转染空载体组相比,转染pEGFP-N1-vi-perin可以显著抑制坦布苏病毒在DF-1细胞上的增殖.这表明鸭viperin作为抗病毒蛋白,具有良好的抑制坦布苏病毒增殖的作用.综上,本试验为进一步研究鸭viperin的抗病毒生物学功能奠定了良好的基础.

关键词：鸭坦布苏病毒病毒感染抗病毒基因基因克隆基因表达抗原性

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基于无线测温云平台的家兔体温变化规律及热原实验的研究

基于无线测温云平台的家兔体温变化规律及热原实验的研究

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中国畜牧兽医学会信息技术分会第十二届学术研讨会

作者：张波郝飞王丰邵国青金陵科技学院江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心

【目的】探讨生理状况下普通级日本大耳白兔和新西兰兔的体温变化规律及热原实验的可靠性。【方法】在23.5～28℃、相对湿度54%5%的环境下,利用稻盛弘无线自动测温云平台对处于自由状态下的家兔进行自动连续测温。先经比较无线自动测温... 详细信息

【目的】探讨生理状况下普通级日本大耳白兔和新西兰兔的体温变化规律及热原实验的可靠性。【方法】在23.5～28℃、相对湿度54%5%的环境下,利用稻盛弘无线自动测温云平台对处于自由状态下的家兔进行自动连续测温。先经比较无线自动测温技术与常规水银体温计对兔子体温检测的符合率合格后,再对31.2万次形成12480个家兔时点体温数据分析。【结果】研究结果表明,无线自动测温技术与常规水银体温计对兔子体温检测的符合率高达98.81%,温差≤0.5℃,且不受环境温度、湿度的影响,对被检动物安全。早晚定时定量饲喂条件下,参试动物昼夜体温呈W型规律性波动。体温波动较小的区间适合进行热原实验。【结论】体温连续远程监测平台因高频率的实时监测,其鉴定结果的准确性与可靠性优于人工监测中的常规水银体温计。热原检查试验适合在0:00～3:00和12:00～15:00进行。因此目前生物制品所涉及动物实验中被广泛采用的按24h平均时间间隔测温的方法或有商榷余地。平台将无线测温与互联网、云计算技术结合,实现了温度检测与分析的远程操作,大大提高了实验质检的便捷性。

关键词：无线测温大数据云平台物联网体温变化规律热原实验

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H9N2亚型禽流感病毒感染对鸡的免疫抑制机理研究

H9N2亚型禽流感病毒感染对鸡的免疫抑制机理研究

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第五届全国禽病分子生物技术青年工作者会议

作者：刘青涛李银韩凯凯赵冬敏刘宇卓黄欣梅杨婧刘娜江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

H9N2亚型禽流感病毒感染可导致鸡的疫苗免疫失败,但该病毒对鸡的免疫抑制机理目前仍不清楚.本研究的结果显示,H9N2病毒感染可降低鸡对鸡新城疫、传染性支气管病毒活疫苗的抗体应答,但与对照组相比差异并不显著;而对外周血淋巴细胞的亚... 详细信息

H9N2亚型禽流感病毒感染可导致鸡的疫苗免疫失败,但该病毒对鸡的免疫抑制机理目前仍不清楚.本研究的结果显示,H9N2病毒感染可降低鸡对鸡新城疫、传染性支气管病毒活疫苗的抗体应答,但与对照组相比差异并不显著;而对外周血淋巴细胞的亚群分析显示,与对照组相比H9N2病毒感染可显著降低鸡外周血中CD4+和CD8+T淋巴细胞的比率;并且,H9N2病毒感染鸡外周血T淋巴细胞的增殖活性与对照鸡相比显著下降(P＜0.05);另外,H9N2病毒感染还导致了鸡血清中的IFN-γ和IL-4应答水平的下降,其中IFN-γ的应答水平与对照组相比差异显著(P＜0.05).以上结果说明,H9N2病毒感染可抑制鸡对疫苗的免疫应答,并且对细胞免疫应答的抑制更为明显.

关键词：鸡禽流感病毒病毒感染免疫抑制机理

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猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)风险评估系统开发

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)风险评估系统开发

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中国畜牧兽医学会信息技术分会第十二届学术研讨会

作者：谭业平胡肄农郁达威黄小国何孔旺陆昌华江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心常州市枫华牧业有限公司

为建立规模猪场PRRS风险数据采集与评估系统,本文在PRRS风险因素分析和评估模型构建的基础上,应用***动态网页开发技术,C#编程语言、***技术及MYSQL数据库管理系统,设计开发了具有前台信息采集评估和后台数据库管理两大主功能模块和8个... 详细信息

为建立规模猪场PRRS风险数据采集与评估系统,本文在PRRS风险因素分析和评估模型构建的基础上,应用***动态网页开发技术,C#编程语言、***技术及MYSQL数据库管理系统,设计开发了具有前台信息采集评估和后台数据库管理两大主功能模块和8个子模块组成的基于Web的规模猪场PRRS风险评估系统。通过该系统可对个体规模化猪场PRRS风险相关数据进行在线采集,并针对各级风险指标提供风险评估报告和管理措施改进建议,有助于猪场疫病风险管理和预防。

关键词：规模猪场猪繁殖与呼吸综合征风险评估系统

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基于物联网的智慧猪场信息化平台的建设与应用

基于物联网的智慧猪场信息化平台的建设与应用

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中国畜牧兽医学会信息技术分会第十二届学术研讨会

作者：黄小国吕向阳陆昌华谭业平胡肄农常州市枫华牧业有限公司江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心

畜牧业正全面步入数字化、平台化、智能化时代,本文介绍的基于物联网的智慧猪场信息化平台,涵盖养殖企业管理的多方面业务,建立精准、实时、多维、全息的数据化云平台,并基于智能传感网、RFID识别、ZigBee无线通信和动物生理参数监测等... 详细信息

畜牧业正全面步入数字化、平台化、智能化时代,本文介绍的基于物联网的智慧猪场信息化平台,涵盖养殖企业管理的多方面业务,建立精准、实时、多维、全息的数据化云平台,并基于智能传感网、RFID识别、ZigBee无线通信和动物生理参数监测等物联网技术设备,实现全自动饲喂系统、全自动环境控制系统、全自动种猪性能测定系统及个体健康监测系统。信息化平台在加强生产管理模块功能的同时,通过对供应链与财务等环节的管理,实现各种生产数据的可追溯性,降低生产运营成本,实现养猪企业精细化管理。

关键词：智慧猪场信息化平台物联网

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兔出血症病毒衣壳蛋白P区二聚体的表达及其与受体结合能力分析

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畜牧兽医学报 2016年第2期47卷 325-330页

作者：胡波范志宇王芳魏后军宋艳华仇汝龙徐为中薛家宾江苏省农业科学院兽医研究所.农业部兽用生物制品工程技术重点实验室.国家兽用生物制品工程技术研究中心南京210014

为检测兔出血症病毒(RHDV)衣壳蛋白(VP60)P区形成二聚体的能力及其与HBGAs受体结合的能力,作者以pMD19T-VP60为模板扩增包含铰链区H的P区基因(HP)并克隆至原核表达载体pET28a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,经IPTG诱导表达,获得HP蛋... 详细信息

为检测兔出血症病毒(RHDV)衣壳蛋白(VP60)P区形成二聚体的能力及其与HBGAs受体结合的能力,作者以pMD19T-VP60为模板扩增包含铰链区H的P区基因(HP)并克隆至原核表达载体pET28a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,经IPTG诱导表达,获得HP蛋白。经SDS-PAGE和Western blot检测,结果显示,HP蛋白主要以包涵体的形式高效表达,经HisTrap亲和柱纯化后可形成二聚体结构。通过HBGAs受体结合试验表明,P区与完整病毒衣壳相似,能与唾液中的HBGAs受体发生结合。本研究为进一步开展RHDV衣壳蛋白与受体的相互作用研究奠定基础。

关键词：兔出血症病毒衣壳蛋白 P区组织血型抗原受体结合

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肝片吸虫Fh8明显增强STEC的Stx1可溶性表达及Stx1单克隆抗体制备

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华北农学报 2016年第5期31卷 44-49页

作者：张雪寒张碧成张强汪伟何孔旺江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

志贺毒素1（Shiga toxin 1,Stx1）,系五聚体蛋白,是产志贺毒素性大肠杆菌（Shiga Toxin-producing Escherichia coli,STEC）主要的毒素因子,但Stx1体外极不易可溶性表达,旨在克隆和表达志贺毒素1（Shiga toxin 1,Stx1）A亚基,体外获得... 详细信息

志贺毒素1（Shiga toxin 1,Stx1）,系五聚体蛋白,是产志贺毒素性大肠杆菌（Shiga Toxin-producing Escherichia coli,STEC）主要的毒素因子,但Stx1体外极不易可溶性表达,旨在克隆和表达志贺毒素1（Shiga toxin 1,Stx1）A亚基,体外获得可溶性表达的Stx1,以研制单克隆抗体。生物信息学软件分析Stx1A亚基氨基酸序列,Stx1A1亚基N端为信号肽段,其C端高疏水性和低免疫原性。PCR扩增stx1A亚基73~759的687个核苷酸,与肝片吸虫Fh8基因串联,克隆到低温表达载体p ColdⅠ以构建重组菌,诱导表达重组毒素His-Fh8-Stx1A,SDS-PAGE分析蛋白表达形式。重组毒素His-Fh8-Stx1A免疫Balb/c小鼠,Sp2/0细胞融合筛选、制备阳性杂交瘤和单克隆抗体。PCR扩增Fh8和stx1a亚基并构建重组质粒p ColdⅠ-His-Fh8-stx1,重组蛋白在原核细胞中得到高效表达,且以可溶性形式存在于菌体胞浆中。以重组His-Fh8-Stx1A为免疫原,成功制备3株能稳定传代并分泌Stx1的单克隆抗体（Mc Ab）的杂交瘤细胞株,取其中1株成功制备高ELISA效价的腹水。Western Blot显示,纯化的单克隆抗体可与重组免疫原His-Stx1A和天然志贺毒素1发生特异性反应。本试验成功可溶性表达志贺毒素1A亚基,并获得多株单克隆抗体,为研制用于检测STEC的夹心ELISA和胶体金试纸条奠定理论基础。

关键词：产志贺毒素大肠杆菌志贺毒素1 肝片吸虫 Fh8 可溶性表达单克隆抗体

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