葡萄糖调节蛋白94(glucose-regulated protein 94,Grp94)是Hsp90在内质网中的亚型,其调控的客户蛋白较专一。选择性抑制Grp94已经成为靶向Hsp90伴侣系统开发药物的新方向。本研究以前期得到的高活性、高选择性Grp94抑制剂DDO-5813为基础...
详细信息
葡萄糖调节蛋白94(glucose-regulated protein 94,Grp94)是Hsp90在内质网中的亚型,其调控的客户蛋白较专一。选择性抑制Grp94已经成为靶向Hsp90伴侣系统开发药物的新方向。本研究以前期得到的高活性、高选择性Grp94抑制剂DDO-5813为基础,设计并合成得到了Grp94特异性荧光探针Grp94-Probe。采用荧光偏振实验和细胞内与ER-Red共染色实验证明Grp94-Probe与Grp94特异性结合作用。荧光偏振实验结果表明,Grp94-Probe能够较好地与Grp94~N结合(EC_(50)=117.9 nmol/L),且其作为探针分子可以较好的区分化合物对Grp94~N抑制活性的强弱。细胞内荧光成像实验结果显示,Grp94-Probe能够在细胞内质网与ER-Red共染色,表明Grp94-Probe能在细胞内与Grp94结合。该荧光探针为开发Grp94抑制剂提供了活性测试工具分子,为探索细胞内Grp94的化学生物学功能提供了有利工具。
SNIPERs(specific and nongenetic IAP-dependent protein erasers)是一类由凋亡抑制蛋白IAPs(inhibitor of apoptosis proteins)的配体与靶蛋白的配体嵌合而成的小分子蛋白降解剂。这类分子可以利用IAPs的E3泛素连接酶的性质促使靶蛋...
详细信息
SNIPERs(specific and nongenetic IAP-dependent protein erasers)是一类由凋亡抑制蛋白IAPs(inhibitor of apoptosis proteins)的配体与靶蛋白的配体嵌合而成的小分子蛋白降解剂。这类分子可以利用IAPs的E3泛素连接酶的性质促使靶蛋白泛素化,从而使靶蛋白被蛋白酶体降解。本文对近年来SNIPERs的研究进展进行了总结,并对将来的工作进行了展望。
为了定量测定依卡倍特钠中潜在遗传毒性杂质依卡倍特磺酸乙酯(杂质Ⅰ),参考文献方法合成依卡倍特磺酸乙酯。采用高分辨质谱、结合二级质谱与核磁共振确定其相对分子质量及化学结构。采用Thermo C18色谱柱,以5 mmol/L乙酸铵溶液(甲酸调p H至3.0)为流动相A;乙腈为流动相B,按照梯度:0 min 50%B,4 min 50%B,12 min 80%B,16 min 80%B,16.1 min 50%B,20 min 50%B进行洗脱,柱温40℃;采用电喷雾负离子化-MS/MS选择反应监测。杂质Ⅰ的线性质量浓度范围为4~150 ng/m L,且线性关系良好(r=0.999);最低定量限为4 ng/m L;杂质Ⅰ的进样精密度、重复性和加标回收率良好,耐用性良好。方法操作简便,灵敏度高,可用于依卡倍特钠原料药中潜在遗传毒性杂质依卡倍特磺酸乙酯的含量测定。
暂无评论