检索结果-内蒙古大学图书馆

Acta Biochimica et Biophysica Sinica 1996年第5期 20-26页

作者：顾建明刘跃万海英李佩霞阮长耿苏州医学院血栓与止血研究室江苏省血液研究所

ＳＺ－５１是一种抗人活化血小板单克隆抗体，并显示了很好的导向血栓显像与导向溶栓性能。为了减少该单抗的免疫原性以及能获得高效表达的ＳＺ－５１“人源化”单抗，我们构建了真核表达载体ａ－Ｌｙｓ１７－５１ＶＫ／Ｈｕ．ａ－Ｌｙ... 详细信息

ＳＺ－５１是一种抗人活化血小板单克隆抗体，并显示了很好的导向血栓显像与导向溶栓性能。为了减少该单抗的免疫原性以及能获得高效表达的ＳＺ－５１“人源化”单抗，我们构建了真核表达载体ａ－Ｌｙｓ１７－５１ＶＫ／Ｈｕ．ａ－Ｌｙｓ３０－５１ＶＨ／Ｈｕ。应用Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ方法分别将重、轻链表达载体导入骨髓瘤细胞ＳＰ２／０中，并在相应的选择性培养基中进行耐药克隆筛选，经过体外长期传代培养和二次单克隆化，获得了一株高效表达重组ＳＺ－５１嵌合抗体的细胞株。培养上清中抗体蛋白的表达量为５ｍｇ／Ｌ，经Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ证实重组嵌合抗体具有与亲本鼠源单抗相同的ＧＭＰ－１４０结合特性，而且能与鼠源ＳＺ－５１单抗竞争结合活化血小板。本研究结果表明，基因工程“人源化”ＳＺ－５１单抗可以作为导向载体进行导向显像与导向溶栓，并为今后进一步应用于临床展示了良好的前景。

关键词：单克隆抗体嵌合抗体 a－颗粒膜蛋白（GMP）－140

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凝血因子ⅤG1691A点突变的多聚酶链反应分析

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中华血液学杂志 1996年第9期17卷 490-491页

作者：何杨金坚阮长耿江苏省血液研究所苏州医学院血栓与止血研究室法国巴黎RobertDe-bre'医院

凝血因子ⅤＧ１６９１Ａ点突变的多聚酶链反应分析何杨ＬＭａｉｓｏｎｎｅｕｖｅ金坚ＳＢｉｎａｒｄＮＳｃｈｌｅｇｅｌ阮长耿最近，发现一些静脉血栓形成患者的血浆具有抗活化的蛋白Ｃ（ＡＰＣ）现象，其主要原因是因子Ⅴ基因１６９１... 详细信息

凝血因子ⅤＧ１６９１Ａ点突变的多聚酶链反应分析何杨ＬＭａｉｓｏｎｎｅｕｖｅ金坚ＳＢｉｎａｒｄＮＳｃｈｌｅｇｅｌ阮长耿最近，发现一些静脉血栓形成患者的血浆具有抗活化的蛋白Ｃ（ＡＰＣ）现象，其主要原因是因子Ⅴ基因１６９１核苷酸位置上的鸟嘌呤核苷（Ｇ）被腺...

关键词：凝血因子点突变聚合酶链反应血栓形成

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11－去氢－血栓烷B_2测定及其临床应用

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中华血液学杂志 1996年第9期17卷 472-474页

作者：王兆钺王山喜阮长耿江苏省血液研究所苏州医学院血栓与止血研究室镇江医学院临床医学系内科教研室

为了评估１１－去氢－血栓烷Ｂ２（ＤＨ－ＴＸＢ２）作为体内血小板活化标志物的价值，测定了１００例患者（脑梗塞３２例，脑出血３４例，糖尿病１６例，妊娠高血压综合征１８例）血浆ＤＨ－ＴＸＢ２和血栓烷Ｂ２（ＴＸＢ２）的浓度，... 详细信息

为了评估１１－去氢－血栓烷Ｂ２（ＤＨ－ＴＸＢ２）作为体内血小板活化标志物的价值，测定了１００例患者（脑梗塞３２例，脑出血３４例，糖尿病１６例，妊娠高血压综合征１８例）血浆ＤＨ－ＴＸＢ２和血栓烷Ｂ２（ＴＸＢ２）的浓度，并与对照组相比。结果显示患者组ＤＨ－ＴＸＢ２较ＴＸＢ２升高更多；急性期脑血管病患者血浆ＤＨ－ＴＸＢ２均高于对照组最高值，无重叠；而其ＴＸＢ２及α颗粒膜蛋白－１４０（ＧＭＰ－１４０）浓度均与对照组有较多的重叠。结果表明，血浆ＤＨ－ＴＸＢ２浓度测定不受体外血小板活化的影响。

关键词：血小板活化血栓烷B2 血栓形成脑血管疾病

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酶联前列腺素E_2方法的建立及临床应用

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中国实验血液学杂志 1996年第1期4卷 110-112页

作者：何杨王兆钺阮长耿苏州医学院血栓与止血研究室江苏省血液学研究所

前列腺素E2（prjostaglandin E2,PGE2）是机体花生四烯酸代谢的主要活性产物之一。白细胞、内皮细胞、平滑肌细胞及某些组织与器官均可生成PGE2。PGE2在调节血流、细胞增殖、组织保护与修复,以及在调节消化、呼吸与泌尿生殖系统的功能... 详细信息

前列腺素E₂（prjostaglandin E₂,PGE₂）是机体花生四烯酸代谢的主要活性产物之一。白细胞、内皮细胞、平滑肌细胞及某些组织与器官均可生成PGE₂。PGE₂在调节血流、细胞增殖、组织保护与修复,以及在调节消化、呼吸与泌尿生殖系统的功能中起着重要作用。最近我们成功地建立了PGE₂酶联免疫分析法,并在临床上观察了胃癌、感染与脑血管意外患者血浆PGE₂的变化。

关键词：前列腺素E2 酶联免疫抗体测定

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8－表氧－前列腺素F_（2α）酶免疫测定及临床应用

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中华医学检验杂志 1996年第4期19卷 238-241页

作者：王兆钺王山喜阮长耿苏州医学院血栓与止血研究室江苏省血液研究所镇江医学院临床医学系内科教研室

目的建立乙酰胆碱酯酶标记的８－表氧－前列腺素Ｆ２α（８－表氧－ＰＧＦ２α）酶免疫法测定方法，并观察其在脑血栓患者与慢性肾功能衰竭患者血浆中的改变。方法将８－表氧－ＰＧＦ２α与人血清白蛋白共价联接完全抗原后，免疫家兔制... 详细信息

目的建立乙酰胆碱酯酶标记的８－表氧－前列腺素Ｆ２α（８－表氧－ＰＧＦ２α）酶免疫法测定方法，并观察其在脑血栓患者与慢性肾功能衰竭患者血浆中的改变。方法将８－表氧－ＰＧＦ２α与人血清白蛋白共价联接完全抗原后，免疫家兔制备抗血清，将８－表氧－ＰＧＦ２α与乙酰胆碱酯酶联接成酶标记物。在确定酶免疫法有关质量参数后，测定１７例正常人、１８例急性脑血栓患者及１６例慢性肾功能衰竭患者透析前后血浆８－表氧－ＰＧＦ２α的含量。用ＳｉｇｍａＳｔａｔ计算机软件进行统计与线性回归，标本数据用配对Ｓｔｕｄｅｎｔ′ｓ检验。结果８－表氧－ＰＧＦ２α抗体效价在５次加强免疫后达１／３０００００；酶免疫测定的线性范围为２～１２５ｎｇ／Ｌ，ＩＣ５０（结合率为５０％时的浓度）为８ｎｇ／Ｌ，抗血清与其他前列腺素及有关代谢产物的交叉反应甚低。批内变异系数４．８％（ｎ＝１４），批间变异系数７．５％（ｎ＝９）。急性脑血栓与慢性肾功能衰竭患者血浆浓度均显著高于正常人，慢性肾功能衰竭患者血液透析后降至正常范围。结论８－表氧－ＰＧＦ２α酶免疫法测定具有很高的敏感性与特异性，该指标可作为体内脂质过氧化及有关疾病研究的一个新的特异指标。

关键词：前列腺素F 酶免疫测定脑血栓肾功能衰竭

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国人St14(DXS52)VNTR及其对血友病甲基因诊断价值的探讨

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苏州医学院学报 1996年第1期16卷 38-40页

作者：王晓冬储小红阮长耿江苏省血液研究所苏州医学院血栓与止血研究室

应用聚合酶链反应(PCR)对56名健康国人的78条 X 染色体 St14(DXS52)可变数目串联重复序列(VNTR)研究结果显示,在国人群中至少存在700bp(60.3%),1220(1.3%),1300(2.6%),1390(11.5%),1570(12.8),1630(6.4%),1690(5.1%)等等位基因。总理论杂合子检出率为60%。该 VNTR 低分子量片段的等位基因频率比白种人明显升高,高分子量片段的等位基因频率则相对下降。用该 VNTR 对14例血友病甲可疑携带者分析显示,半数呈杂合子。提示该多态性对血友病甲的基因诊断有一定的应用价值。

关键词：血友病甲基因诊断

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血小板膜糖蛋白酶联免疫测定法的建立及应用

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中华医学检验杂志 1996年第4期19卷 233-237页

作者：奚晓东赵益明吴强蒋惠源李佩霞阮长耿江苏省血液研究所苏州医学院血栓与止血研究室常州市红十字中心血站

目的用酶联免疫法对血小板膜糖蛋白（ＧＰ）进行定量和定性测定。方法应用ＳＺ系列抗人血小板单克隆抗体建立了以竞争性酶联免疫法定量测定ＧＰⅠｂ、ＧＰⅡｂ、ＧＰⅢａ及α－颗粒膜蛋白１４０（ＧＭＰ－１４０）在不同血小板表面的表... 详细信息

目的用酶联免疫法对血小板膜糖蛋白（ＧＰ）进行定量和定性测定。方法应用ＳＺ系列抗人血小板单克隆抗体建立了以竞争性酶联免疫法定量测定ＧＰⅠｂ、ＧＰⅡｂ、ＧＰⅢａ及α－颗粒膜蛋白１４０（ＧＭＰ－１４０）在不同血小板表面的表达量；又建立了固相间接酶联免疫法定性测定血小板特异性同种抗原。结果每个正常血小板表面含有ＧＰⅠｂ２１８８４±２４９１分子，ＧＰⅡｂ３９１４１±３６１８分子，ＧＰⅢａ４５２７７±５０７６分子。凝血酶活化血小板表达９００２±１０９５个ＧＭＰ－１４０分子／血小板。血小板无力症纯合子或杂合子可被明确鉴别。对１０种血小板特异性同种抗原的表达进行的人群调查结果表明，人类血小板抗原（ＨＰＡ）－１和ＨＰＡ－４同种抗原的表达频率不同于国外报道的人群频率。结论两种酶联免疫测定法有助于血小板ＧＰ以及血小板免疫学的研究，具有较大的临床推广应用价值。

关键词：血小板糖蛋白类血小板膜糖蛋白 ELISA

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变性梯度凝胶电泳在遗传性出血性疾病基因缺陷检测中的应用

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中国实验血液学杂志 1996年第4期4卷 419-421页

作者：王泳李震宇付建新顾建明万海英阮长耿江苏省血液病研究所苏州医学院血栓与止血研究室苏州215007

80年代中期发展起来的变性梯度凝胶电泳(denaturing gradient gel electrophoresis,DGGE)技术,在国外已成功地应用于遗传性出血性疾病的分子病理研究。Higuchi等运用DGGE在29例轻度和中度甲型血友病患者中检测出25例基因突变,Michel等则... 详细信息

80年代中期发展起来的变性梯度凝胶电泳(denaturing gradient gel electrophoresis,DGGE)技术,在国外已成功地应用于遗传性出血性疾病的分子病理研究。Higuchi等运用DGGE在29例轻度和中度甲型血友病患者中检测出25例基因突变,Michel等则在44例乙型血友病患者中检测出40例基因缺陷。这充分体现出该技术具有快速、敏感等特点,尤其适合大样本筛选。

关键词：变性梯度凝胶电泳血友病基因突变

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变性梯度凝胶电泳检测轻型血友病甲的基因突变(Arg1689Cys)

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血栓与止血学 1996年第2期3卷 49-51,96页

作者：阮长耿顾建明 J-MLavergn DMeyer 江苏省血液研究所苏州医学院血栓与止血研究室 215007 法国Bicetre医院

血友病甲是一种常见的遗传性出血性疾病,由因子FⅧ缺乏引起。应用聚合酶链反应和变性梯度凝胶电泳技术,在一例轻型血友病甲患者的因子Ⅷ基因第14号外显子3’端发现碱基替换;直接测序表明密码子CGC突变为TGC,导致FⅧ蛋白Arg1689Cys,使凝... 详细信息

血友病甲是一种常见的遗传性出血性疾病,由因子FⅧ缺乏引起。应用聚合酶链反应和变性梯度凝胶电泳技术,在一例轻型血友病甲患者的因子Ⅷ基因第14号外显子3’端发现碱基替换;直接测序表明密码子CGC突变为TGC,导致FⅧ蛋白Arg1689Cys,使凝血活化FⅧ发生障碍。该突变同时产生一个PstⅠ限制性酶切位点,该突变已证实与血友病相关。

关键词：血友病甲基因突变变性梯度凝胶电泳(DGGE)

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抗人活化血小板单克隆抗体SZ—51可变区基因的克隆与序列分析

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 1995年第3期27卷 319-322页

作者：顾建明张效民万海英李佩霞阮长耿江苏省血液研究所苏州医学院血栓与止血研究室

抗人活化血小板单克隆抗体ＳＺ—５１可变区基因的克隆与序列分析顾建明，张效民，万海英，李佩霞，Ｍ．Ｐ．ＬＥＦＲＡＮＣ阮长耿（江苏省血液研究所，苏州医学院血栓与止血研究室，２１５００７）法国Ｍｏｎｔｐｅｌｌｉｅｒ分子遗传... 详细信息

抗人活化血小板单克隆抗体ＳＺ—５１可变区基因的克隆与序列分析顾建明，张效民，万海英，李佩霞，Ｍ．Ｐ．ＬＥＦＲＡＮＣ阮长耿（江苏省血液研究所，苏州医学院血栓与止血研究室，２１５００７）法国Ｍｏｎｔｐｅｌｌｉｅｒ分子遗传研究所关键词单克隆抗体，免疫球蛋白...

关键词：单克隆抗体免疫球蛋白可变区基因

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