检索结果-内蒙古大学图书馆

基于TGF-β1/Smad3信号通路探讨新会陈皮多糖对小鼠皮肤成纤维细胞的抑制作用

西安交通大学学报(医学版) 2025年第2期46卷 333-338页

作者：梁景南卢巍廖颖怡冼文娇江门市中心医院药学部广东江门529030 广东江门中医药职业学院基础医学院广东江门529000 江门市中药成分及其作用机制重点实验室广东江门529000

目的探究新会陈皮多糖对小鼠皮肤成纤维细胞的抑制作用及机制。方法提取和纯化新会陈皮的陈皮多糖成分,原代分离并培养C57BL/6小鼠皮肤成纤维细胞;设置空白对照组(正常培养)及低、中、高剂量实验组(50、100、200μg/mL陈皮多糖),处理24 ... 详细信息

目的探究新会陈皮多糖对小鼠皮肤成纤维细胞的抑制作用及机制。方法提取和纯化新会陈皮的陈皮多糖成分,原代分离并培养C57BL/6小鼠皮肤成纤维细胞;设置空白对照组(正常培养)及低、中、高剂量实验组(50、100、200μg/mL陈皮多糖),处理24 h后,细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法观察陈皮多糖对细胞存活率影响。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blotting法分别检测陈皮多糖对小鼠皮肤成纤维细胞的瘢痕疙瘩形成相关基因Col1a1、Col3a1、TGF-β1和ACTA2的mRNA和蛋白表达水平。Western blotting检测陈皮多糖对成纤维细胞中磷酸化p-Smad3的激活水平。结果空白对照组和中、高剂量实验组的细胞存活率分别为100%、(90.54±6.75)%和(78.90±4.24)%;Col1a1蛋白相对表达水平分别为1.13±0.15、0.57±0.16和0.48±0.05;Col3a1蛋白相对表达水平分别为0.81±0.13、0.49±0.11和0.50±0.03;TGF-β1蛋白相对表达水平分别为1.11±0.15、0.60±0.13和0.33±0.11;p-Smad3/Smad3蛋白相对表达水平分别为0.96±0.05、0.75±0.06和0.71±0.03。Col1a1 mRNA表达水平分别为1.01±0.17、0.58±0.11和0.52±0.12;Col3a1 mRNA表达水平分别为1.01±0.12、0.56±0.19和0.65±0.14;ACTA2 mRNA表达水平分别为1.01±0.13、0.24±0.04和0.22±0.07;TGF-β1 mRNA表达水平分别为1.00±0.09、0.50±0.10和0.49±0.15。高剂量陈皮多糖时间处理的p-Smad3/Smad3蛋白相对表达水平分别为0.86±0.06、0.66±0.06、0.55±0.13、0.43±0.09、0.35±0.06和0.27±0.12。中、高剂量的陈皮多糖实验组的上述指标与空白对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论陈皮多糖通过抑制TGF-β1/Smad3通路激活来抑制成纤维细胞增殖及瘢痕疙瘩形成相关基因表达。

关键词：瘢痕疙瘩陈皮多糖成纤维细胞增殖 TGF-β1/Smad3信号通路

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真菌副伯克霍尔德菌Gan-35的耐药及碳源利用特性

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广东化工 2025年第4期52卷 49-51,65页

作者：洪跃辉范红弟谭琼王江海广东江门中医药职业学院江门市中药成分及其作用机制重点实验室/江门市健康产品工程技术研究中心广东江门529000 中山大学海洋科学学院广东珠海519082

目的:剖析真菌副伯克霍尔德菌(Paraburkholderia fungorum)Gan-35的耐药特性及碳源利用特性。方法:以E. coli ATCC25922作为质控菌株,利用Kirby-Bauer法药敏试验测试菌株Gan-35的药物敏感性;选定不同的唯一碳源,通过绘制生长曲线分析菌... 详细信息

目的:剖析真菌副伯克霍尔德菌(Paraburkholderia fungorum)Gan-35的耐药特性及碳源利用特性。方法:以E. coli ATCC25922作为质控菌株,利用Kirby-Bauer法药敏试验测试菌株Gan-35的药物敏感性;选定不同的唯一碳源,通过绘制生长曲线分析菌株Gan-35的碳源利用特性。基于基因组功能注释数据,分析耐药基因及与碳水化合物代谢相关的基因,从而剖析菌株Gan-35的耐药及碳源利用特性的潜在机制。结果:在测定的10种抗生素当中,菌株Gan-35仅对杆菌肽有耐药性,对其余9种抗生素均为敏感;Gan-35的基因组含有与杆菌肽耐药相关的基因。除蔗糖外,菌株Gan-35能分别利用D-半乳糖、D-果糖、D-麦芽糖、葡萄糖、乳糖、柠檬酸、D-甘露糖、甘露醇为唯一碳源进行生长;菌株Gan-35含大量与碳水化合物代谢有关的基因,但不含与蔗糖代谢相关的酶基因。结论:菌株Gan-35能利用多种碳源,对多种抗生素敏感,该细菌的遗传背景与其耐药性和碳源利用特性密切相关。

关键词：碳源药敏试验耐药氨氮基因

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赣南稀土矿山废弃地的氨氮污染和微生物多样性分析

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广东化工 2025年第7期52卷 106-108,124页

作者：洪跃辉冯爱娟王江海广东江门中医药职业学院江门市中药成分及其作用机制重点实验室/江门市健康产品工程技术研究中心广东江门529000 广东轻工职业技术大学食品与生物技术学院广东广州510300 中山大学海洋科学学院广东珠海519082

目的:揭示赣南稀土矿山废弃地的氨氮污染情况和微生物多样性。方法:在稀土矿山废弃地采集16个土壤样品,测定氨氮含量;提取基因组DNA后,采用PCR扩增16SrRNA基因和18SrRNA基因片段,然后进行变性梯度凝胶电泳(DGGE)分析。结果:土壤的氨氮... 详细信息

目的:揭示赣南稀土矿山废弃地的氨氮污染情况和微生物多样性。方法:在稀土矿山废弃地采集16个土壤样品,测定氨氮含量;提取基因组DNA后,采用PCR扩增16SrRNA基因和18SrRNA基因片段,然后进行变性梯度凝胶电泳(DGGE)分析。结果:土壤的氨氮平均浓度介于483.2 mg/kg~899.4 mg/kg,样品的细菌种群Shannon-Weaver系数(H)介于0.12~2.39,物种丰度系数(S)介于0.10~1.33。真菌种群H值介于1.09~2.59,S值介于0.26~1.46。细菌和真菌的H值和S值均偏小,DGGE电泳条带不多。结论:采样区存在严重的氨氮污染,在高浓度氨氮的影响下,微生物丰度低,群落结构简单,缺乏多样性,真菌多样性比细菌稍好,真菌群落多样性遭受破坏的程度比细菌小。

关键词：赣南变性梯度凝胶电泳微生物多样性稀土矿山废弃地

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微小RNA-199a-3p对小鼠皮肤瘢痕疙瘩成纤维细胞的抑制作用及其机制

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西安交通大学学报（医学版） 2024年第6期45卷 934-940页

作者：冼文娇梁景南卢巍洪跃辉广东江门中医药职业学院基础医学院广东江门529000 江门市中药成分及其作用机制重点实验室广东江门529000 江门市中心医院药学部广东江门529030

目的探讨微小RNA-199a-3p(miR-199a-3p)对小鼠皮肤瘢痕疙瘩成纤维细胞的调控作用及其作用靶基因。方法构建小鼠皮肤瘢痕疙瘩模型,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-199a-3p、瘢痕疙瘩相关基因和Smad1的mRNA表达。原代分离和体外... 详细信息

目的探讨微小RNA-199a-3p(miR-199a-3p)对小鼠皮肤瘢痕疙瘩成纤维细胞的调控作用及其作用靶基因。方法构建小鼠皮肤瘢痕疙瘩模型,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-199a-3p、瘢痕疙瘩相关基因和Smad1的mRNA表达。原代分离和体外培养成体C57BL/6小鼠皮肤成纤维细胞;利用脂质体将miR-199a-3p模拟物和Smad1 siRNA转染至小鼠皮肤成纤维细胞中;双荧光素酶报告实验验证miR-199a-3p的靶基因;Cell Counting Kit-8(CCK8)方法验证miR-199a-3p和沉默Smad1对皮肤成纤维细胞增殖的影响;RT-qPCR和Western blot法分别检测过表达miR-199a-3p皮肤成纤维细胞的瘢痕疙瘩相关基因和Smad1的mRNA和蛋白表达;Western blot检测小鼠皮肤成纤维细胞分别转染Smad1 siRNA和miR-199a-3p模拟物后瘢痕疙瘩相关基因、Smad1的蛋白表达。结果疤痕疙瘩组织中瘢痕疙瘩相关基因Col1a1(t=-3.334,P=0.016)、Col3a1(t=-5.927,P=0.001)和ACTA2(t=-3.673,P=0.010)mRNA表达和Smad1(t=-4.403,P=0.010)表达显著高于正常小鼠皮肤组织,而miR-199a-3p(t=7.059,P<0.001)表达显著下降。在皮肤成纤维细胞中过表达miR-199a-3p可以抑制瘢痕疙瘩的相关基因Col1a1(t=5.514,P=0.005)、Col3a1(t=5.132,P=0.014)和ACTA2(t=4.136,P=0.026)mRNA表达和相关蛋白Col1a1(t=4.643,P=0.001)、Col3a1(t=6.554,P=0.003)和α-SMA(t=4.681,P=0.008)表达。miR-199a-3p与Smad1 3′-UTR有结合作用。过表达miR-199a-3p抑制Smad1 mRNA(t=3.556,P=0.024)和蛋白(t=3.781,P=0.019)的表达。分别转染miR-199a-3p模拟物和Smad1 siRNA后均能同时抑制小鼠皮肤成纤维细胞的增殖(F=18.622,P<0.001、<0.001)和瘢痕疙瘩的相关蛋白Col1a1(F=18.804,P=0.003、0.022)、Col3a1(F=33.212,P=0.001、0.001)和α-SMA(F=10.181,P=0.020、0.028)表达。结论 miR-199a-3p通过靶向Smad1抑制瘢痕疙瘩的形成。

关键词：皮肤瘢痕疙瘩皮肤成纤维细胞微小RNA Smad1

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南方梅雨季节新会陈皮贮藏技术探究

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现代食品 2024年第14期30卷 124-126页

作者：冼文娇梁景南广东江门中医药职业学院广东江门529000 江门市中药成分及其作用机制重点实验室广东江门529000 江门市中心医院药学部广东江门529030

新会陈皮是广东新会地区的知名药食同源道地药材,在南方阴雨连绵,湿气弥漫的梅雨潮湿季节,贮藏方式会影响其药食品质。本文探讨了新会陈皮在南方梅雨潮湿季节常见的贮藏方式,以供参考。

关键词：新会陈皮南方梅雨潮湿季节贮藏

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细胞色素P460的基因表达及生物学特征分析

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生物化工 2024年第6期10卷 7-13,20页

目的:检测Paraburkholderia fungorum Gan-35的细胞色素P460在氨氮培养基中的基因表达,剖析该细胞色素P460的生物学特征。方法:采用荧光定量PCR检测基因表达,利用生物信息学方法分析生物学特征,分析内容包括系统进化树、理化参数、开放... 详细信息

目的:检测Paraburkholderia fungorum Gan-35的细胞色素P460在氨氮培养基中的基因表达,剖析该细胞色素P460的生物学特征。方法:采用荧光定量PCR检测基因表达,利用生物信息学方法分析生物学特征,分析内容包括系统进化树、理化参数、开放阅读框、亲疏水性、跨膜区、信号肽、二级结构、三级结构和功能域。结果:该细胞色素P460在氨氮培养基中的基因表达量是对照组的2.33倍,基因序列与Paraburkholderia fungorum的相应序列亲缘关系较近,含有354个氨基酸残基,属于中等分子量蛋白质,理论等电点为10.84,亲水性平均系数为0.295,含有9个开放阅读框。该P460有较多区域表现为疏水性,有4个跨膜区,缺乏信号肽,其二级结构成分包括α螺旋(49.44%)、延伸链(12.15%)、β-转角(9.04%)和无规卷曲(29.37%)。三级结构与细胞色素P450区别明显。结论:该细胞色素P460在含氨氮培养基中受到诱导表达,生物学分析结果为后续深入研究细胞色素P460的功能及其应用奠定了基础。

关键词：细胞色素P460 生物信息学跨膜区信号肽三级结构

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氨氮降解菌Paraburkholderia fungorum Gan-35的基因组分析

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微生物学杂志 2023年第3期43卷 39-51页

作者：洪跃辉冯爱娟张洪瑕吕锦慧梁建林王江海广东江门中医药职业学院江门市中药成分及其作用机制重点实验室广东江门529000 广东轻工职业技术学院食品与生物技术学院广东广州510300 广东江门中医药职业学院护理临床学院广东江门529000 中山大学海洋科学学院广东珠海519082 中山大学广东省海洋资源与近岸工程重点实验室广东珠海519082

为揭示赣南稀土矿山废弃地氨氮降解菌Gan-35的遗传背景,采用Illumina测序技术和生物信息学方法对Gan-35的基因组进行分析。获得了Gan-35的基因组草图序列。序列组装后得到49个scaffold,包含两条质粒序列,基因组大小为8.35 Mbp,GC含量为6... 详细信息

为揭示赣南稀土矿山废弃地氨氮降解菌Gan-35的遗传背景,采用Illumina测序技术和生物信息学方法对Gan-35的基因组进行分析。获得了Gan-35的基因组草图序列。序列组装后得到49个scaffold,包含两条质粒序列,基因组大小为8.35 Mbp,GC含量为62.0%。Gan-35含有7519个基因,这些基因在GO注释中主要富集于“binding”“catalytic”等。KEGG注释显示,“ABC transporters”富集的基因最多。在Gan-35基因组中预测出457条串联重复序列、8个rRNA基因和54个tRNA基因,包括与硒代半胱氨酸对应的tRNA基因。Gan-35与Paraburkholderia fungorum BAA-463具有良好的基因组共线性关系。Gan-35基因组与其他基因组比较,有少量COG分类富集的基因数目出现显著差异。基于分析结果,将Gan-35的物种名称重新确定为Paraburkholderia fungorum Gan-35。从Gan-35基因组中鉴定出反硝化脱氮途径的硝酸盐还原酶基因和亚硝酸盐还原酶基因,并进行了验证。此外,还鉴定出氨同化作用的关键酶基因,但未找到硝化途径的主要酶基因。对Gan-35基因组的全面分析有助于后续深入研究氨氮降解机制和解决水产养殖中的氨氮污染问题。

关键词：氨氮基因组稀土赣南 Paraburkholderia fungorum Gan-35 氨同化硝酸盐还原酶亚硝酸盐还原酶

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