检索结果-内蒙古大学图书馆

卫生研究 2005年第4期34卷 400-403页

作者：高明奇孙黎光张天彪滕赞刘素媛中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室沈阳110001 中国医科大学基础医学院药理教研室

目的探讨铅对小鼠学习记忆和海马细胞内钙库Ca2+释放的影响。方法用水迷宫实验测定小鼠的空间学习记忆能力;采用低浓度胰蛋白酶消化法分离小鼠海马细胞,用IP3敏感钙库和IP3非敏感钙库的特异性拮抗剂肝素和普鲁卡因刺激海马细胞,以弗拉吐... 详细信息

目的探讨铅对小鼠学习记忆和海马细胞内钙库Ca2+释放的影响。方法用水迷宫实验测定小鼠的空间学习记忆能力;采用低浓度胰蛋白酶消化法分离小鼠海马细胞,用IP3敏感钙库和IP3非敏感钙库的特异性拮抗剂肝素和普鲁卡因刺激海马细胞,以弗拉吐(Fura2)作Ca2+荧光探针测定铅对海马细胞[Ca2+]i的影响。结果在水迷宫实验中,结果表明慢性铅暴露可明显损伤仔鼠的空间定位航行能力,损伤程度与饮用铅的浓度成正相关。与对照组比较,25μmol·L-1铅可致分离的小鼠海马细胞在胞外无钙静息状态下[Ca2+]i显著性增高(P<0.05);而30μg·ml-1的三磷酸肌醇(IP3)敏感钙库特异性拮抗剂Heparin和0.1mg·ml-1的非IP3敏感钙库的特异性拮抗剂procaine可拮抗铅引起的海马细胞[Ca2+]i增高。结论慢性铅暴露可致小鼠空间学习记忆能力下降;高水平的铅可促进小鼠海马细胞内IP3敏感和非IP3敏感的两种内质网钙库释放,致海马细胞在胞外无钙静息状态下[Ca2+]i升高。

关键词：海马细胞铅 IP3敏感钙库非IP3敏感钙库 [Ca^2+]i

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

精核蛋白对小鼠1-细胞期受精卵转录的影响

引用

中国生物化学与分子生物学报 2002年第2期18卷 217-221页

作者：于爱鸣陈菲武迪迪宗志宏于秉治中国医科大学基础医学院生物化学教研室沈阳110001

应用一种非常敏感的、新的荧光方法 ,进行了精核蛋白对小鼠 1 细胞期受精卵转录影响的观察 .hCG注射后 18h的受精卵作为精核蛋白抗体显微注射对象 .镜下观察 ,非抗体注射与抗体注射的卵细胞荧光强度有明显差异 .根据荧光分光光度计测得... 详细信息

应用一种非常敏感的、新的荧光方法 ,进行了精核蛋白对小鼠 1 细胞期受精卵转录影响的观察 .hCG注射后 18h的受精卵作为精核蛋白抗体显微注射对象 .镜下观察 ,非抗体注射与抗体注射的卵细胞荧光强度有明显差异 .根据荧光分光光度计测得的结果 ,抗体注射卵细胞的平均荧光强度值相当于抗体非注射的 2 2 8%,高 1 3倍 ,经t检验 (n =30 )得P <0 0 1,差别有显著性意义 .而非BSA注射和BSA注射卵细胞的镜下观察 ,则没有多大差异 ;测两组卵细胞的相对荧光强度值分别为 10 0 %和 115 %,t检验 (n =30 )得p >0 0 5 ,差别无统计学意义 .将α 鹅膏蕈碱与精核蛋白抗体等量混合后一起注射 ,卵细胞组间荧光的显著性差别不复存在 .实验结果表明 ,精核蛋白在小鼠 1 细胞期受精卵中起着转录抑制作用 .

关键词：精核蛋白小鼠 1-细胞期受精卵转录抑制

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

荧光原位杂交在神经母细胞瘤中的应用

引用

中国医科大学学报 2000年第S1期29卷 9-10页

作者：李新娜王世勇张锦华中国医科大学基础医学院生物化学教研室沈阳110001

目的 :检测神经母细胞瘤 ( NB) 1号染色体短臂杂合性缺失 ( 1p L OH) ,并观察 1p L OH与临床预后的关系。方法 :应用荧光原位杂交技术 ( FISH)——用非放射性物质标记核酸探针 ,根据核酸杂交原理 ,在间期核和染色体上检测特异性 DNA序... 详细信息

目的 :检测神经母细胞瘤 ( NB) 1号染色体短臂杂合性缺失 ( 1p L OH) ,并观察 1p L OH与临床预后的关系。方法 :应用荧光原位杂交技术 ( FISH)——用非放射性物质标记核酸探针 ,根据核酸杂交原理 ,在间期核和染色体上检测特异性 DNA序列。结果 :检测 2 0例神经母细胞瘤患者的 1p L OH中 6例有 1p L OH,占 30 % ,并观察到1p L OH大多发生在年龄大于 2岁的期 / 期的神经母细胞瘤患者中。结论 :神经母细胞瘤在 1p36 .2～ 36 .3区域内有杂合性缺失 ;1p L OH与 NB分期密切相关 ( P <0 .0 1) ;1p L OH与病人确诊时的年龄密切相关 ( P <0 .0 5 ) ;1p L OH与 NB的预后密切相关 ( P <0 .0 5 )。

关键词：神经母细胞瘤杂合性缺失荧光原位杂交

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

小鼠受精卵显微去核技术的研究

引用

中国医科大学学报 2000年第S1期29卷 11-12页

作者：武迪迪刘莹郑洁王雁于秉治中国医科大学基础医学院生物化学教研室沈阳110001

目的 :探索昆明系小鼠受精卵细胞的去核技术。方法 :借助显微操作系统 ,利用带有小针尖的去核针通过负压将细胞核连同少量细胞质及包裹其外的细胞膜一同吸进去核针内。结果 :通过此种方法有 6 6 .5 %的受精卵去核成功。结论 :此种方法... 详细信息

目的 :探索昆明系小鼠受精卵细胞的去核技术。方法 :借助显微操作系统 ,利用带有小针尖的去核针通过负压将细胞核连同少量细胞质及包裹其外的细胞膜一同吸进去核针内。结果 :通过此种方法有 6 6 .5 %的受精卵去核成功。结论 :此种方法为有效的去核方法。

关键词：显微操作受精卵去核

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

PKC-α和PKC-δ在不同发育阶段小鼠睾丸中的差异性表达

引用

中国生物化学与分子生物学报 2002年第6期18卷 780-782页

作者：冯晨付伟赵咏梅陈菲宗志宏于秉治中国医科大学基础医学院生物化学教研室沈阳110001

Protein kinase C (PKC) is a family of serine/threonine protein kinases, and its multiple isoforms are expressed in various mammalian tissues. The expressions of PKC α and PKC δ at protein and mRNA level in mouse testis were identified by Western blotting and RT\|PCR. The expression of both PKC isoenzymes in the developing mouse testis was also examined. In testes of mouse at various developmental stages, both the protein and the mRNA of PKC\|α were uniformity; but the PKC\|δ expression occurred in the testes of 3\|week old, perhaps even relatively late in spermatid development. The results suggest that each isoenzyme may have different roles in processing and modulating physiological cellular responses of spermatogenesis.

关键词： PKC-α PKC-δ 发育阶段小鼠睾丸差异性表达

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

重组人睾丸精子结合蛋白对蛋白激酶A活性的影响

引用

生物医学工程学杂志 2007年第6期24卷 1334-1337,1342页

作者：宿文辉张哲张杰于秉治中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室沈阳110001

为探讨人睾丸精子结合蛋白(TSBP)在精子获能及顶体反应中可能发挥的作用,检测了TSBP重组蛋白在体外转染细胞系中对蛋白激酶A活性的影响。构建真核表达载体pcDNA3.1/myc-His(-)B/tsbp,稳定转染HEK293细胞后,蛋白免疫印迹检测到培养细胞... 详细信息

为探讨人睾丸精子结合蛋白(TSBP)在精子获能及顶体反应中可能发挥的作用,检测了TSBP重组蛋白在体外转染细胞系中对蛋白激酶A活性的影响。构建真核表达载体pcDNA3.1/myc-His(-)B/tsbp,稳定转染HEK293细胞后,蛋白免疫印迹检测到培养细胞中融合蛋白的表达。选择表达量高的细胞克隆,扩增并用金属亲和层析柱(IMAC)从细胞裂解液中纯化融合蛋白His6-TSBP。用放射自显影法检测HEK293细胞中蛋白激酶A(PKA)活性,发现重组质粒转染组PKA活性高于对照组,确定了TSBP对PKA活性的促进作用。

关键词：人睾丸精子结合蛋白蛋白纯化蛋白激酶A

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

染铅鼠脑海马神经原长时程增强过程中Ca^(2+)浓度及PKC活性的研究

引用

中国医科大学学报 1997年第5期26卷 456-459页

作者：孙黎光刘素媛邢伟时利德蔡葵滕国玺蔡原郭纳新刘秋芳万伯健沈阳中国医科大学基础医学院生物化学教研室110001

为探讨中枢神经系统铅中毒的生化机制，以慢性染铅鼠为动物模型，用高频刺激诱发海马区产生长时程增强后，以Ｆｕｒａ－２为Ｃａ２＋指示剂，测定海马神经元Ｃａ２＋浓度。以放射性［ｒ－３２Ｐ］－ＡＴＰ掺入外源性底物方法测定神经元... 详细信息

为探讨中枢神经系统铅中毒的生化机制，以慢性染铅鼠为动物模型，用高频刺激诱发海马区产生长时程增强后，以Ｆｕｒａ－２为Ｃａ２＋指示剂，测定海马神经元Ｃａ２＋浓度。以放射性［ｒ－３２Ｐ］－ＡＴＰ掺入外源性底物方法测定神经元胞浆及胞膜ＰＫＣ活性。结果：染铅组长时程增强过程中Ｃａ２＋浓度明显升高（２３６．４８±６１．８３ｎｍｏｌ／Ｌ），与对照组比较有统计学意义（Ｐ＜０．００１）。ＰＫＣ活性亦升高（胞浆：１．８７±０．３５ｎｍｏｌ／ｍｇ．ｍｉｎ－１；胞膜１．５２±０．４０ｎｍｏｌ／ｍｇ．ｍｉｎ－１），与对照组比较有统计学意义（Ｐ＜０．０１；Ｐ＜０．００１）。说明海马长时程增强过程中，铅作为钙的类似物可使Ｃａ２＋浓度升高激活ＰＫＣ，进而干扰长时程增强过程。证明Ｃａ２＋－ＰＫＣ系统对铅有高度敏感性，可能是铅致神经毒性作用的关键中介物。

关键词：钙离子蛋白激酶C 铅中毒长时程增强神经毒性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

蛋白激酶C_ζ对小鼠受精卵发育早期基因组转录活化的影响

引用

中国生物化学与分子生物学报 2003年第2期19卷 240-244页

作者：付伟赵咏梅武迪迪冯晨宗志宏王亚杰刘莹刘奕于爱鸣陈菲于秉治中国医科大学基础医学院生物化学教研室沈阳110001

为研究蛋白激酶Cζ (proteinkinaseCζ ,PKCζ)在小鼠受精卵细胞早期发育过程中对胚胎基因组活化影响 ,采用免疫印迹和细胞免疫荧光的方法 ,观察PKCζ的抑制剂对小鼠受精卵 1 细胞期G1和G2 不同时期小鼠受精卵基因组活化的影响 .小鼠 1... 详细信息

为研究蛋白激酶Cζ (proteinkinaseCζ ,PKCζ)在小鼠受精卵细胞早期发育过程中对胚胎基因组活化影响 ,采用免疫印迹和细胞免疫荧光的方法 ,观察PKCζ的抑制剂对小鼠受精卵 1 细胞期G1和G2 不同时期小鼠受精卵基因组活化的影响 .小鼠 1 细胞期受精卵蛋白激酶C (PKC)的活性不断增加 ,并在G2 期达到最高 .PKC的抑制剂calphostinC可以明显抑制PKC的活性达 4 7% .同时calphostinC对受精卵 1 细胞期基因组的早期活化具有显著的抑制作用 (P <0 0 1) .在小鼠 1 细胞期受精卵的G2 期 ,具有活性的磷酸化PKCζ的含量明显多于G1期和卵母细胞MⅡ期 ,分别比它们高2 7%和 110 % .PKCζ的特异性抑制剂可以抑制受精卵 1 细胞期基因的转录和活化 (P <0 0 5 ) .实验结果表明。

关键词：蛋白激酶Cζ 受精卵早期发育基因组活化基因组转录哺乳动物胚胎基因组

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

TPA处理牛精子后蛋白激酶C(α及β)的膜向转移及活性变化

引用

中国医科大学学报 2000年第S1期29卷 4-5,8页

作者：刘莹武迪迪宗志宏张杰于秉治中国医科大学基础医学院生物化学教研室沈阳110001

目的 :研究 TPA处理牛精子后 ,蛋白激酶 C(α、β)的膜向转移及活性变化。方法 :TAP处理后采用 West-ern blotting观察 PKC的两种亚型 (α、β)的膜、浆各部分含量变化 ,并测定 PKC在浆、膜的活性变化。结果 :以 0 .1,1,10 ,10 0 ng/ m... 详细信息

目的 :研究 TPA处理牛精子后 ,蛋白激酶 C(α、β)的膜向转移及活性变化。方法 :TAP处理后采用 West-ern blotting观察 PKC的两种亚型 (α、β)的膜、浆各部分含量变化 ,并测定 PKC在浆、膜的活性变化。结果 :以 0 .1,1,10 ,10 0 ng/ ml不同浓度 TPA处理牛精子后 ,浆中 PKC(α、β)逐渐减少 ,而膜中的则逐渐增多 ;相同浓度的 TPA在处理不同时间的条件下 ,免疫印迹可见浆中的 PKC逐渐增加 ,而膜中的 PKC逐渐减少 ;10 0 ng/ ml的 TPA处理牛精子 5 min后 ,浆内 PKC比活性降低 ,膜部分 PKC比活性升高。结论 :TPA处理牛精子后 ,PKC的两种亚型 (α、β)的含量具有膜向转移 ,并有时间和浓度依赖性 ,同时也有活性的改变。

关键词：佛波酯TPA 蛋白激酶C 牛精子

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

胰岛素和佛波酯在蛋白质合成中经不同途径激活p70 S6激酶

引用

中国生物化学与分子生物学报 2003年第2期19卷 229-233页

作者：赵咏梅付伟宋宇彤王亚杰刘奕陈菲宗志宏于爱鸣韩雅玲于秉治中国医科大学基础医学院生物化学教研室沈阳110001

为研究佛波酯 (PMA)和胰岛素在蛋白质合成中的信号传递 ,应用激酶活性测定和Western印迹等方法 ,分别检测mTOR(mammaliantargetofrapamycin)特异性抑制剂rapamycin或磷脂酰肌醇 3激酶 (PI3K)的特异性抑制剂LY2 94 0 0 2预处理、PMA或... 详细信息

为研究佛波酯 (PMA)和胰岛素在蛋白质合成中的信号传递 ,应用激酶活性测定和Western印迹等方法 ,分别检测mTOR(mammaliantargetofrapamycin)特异性抑制剂rapamycin或磷脂酰肌醇 3激酶 (PI3K)的特异性抑制剂LY2 94 0 0 2预处理、PMA或胰岛素处理的血清饥饿的中国仓鼠肺成纤维细胞 (CHL)中p70S6激酶 (p70S6K)和蛋白激酶B(PKB)的活性及表达 .结果显示 ,PMA或胰岛素刺激促进p70S6K的活化和表达 .而rapamycin预处理可阻断PMA和胰岛素对p70S6K的激活作用 ,表明PMA和胰岛素可能是通过mTOR 依赖性途径激活p70S6K .结果还显示 ,胰岛素刺激促进PKB的活化和表达 ,而PMA对PKB的活性和表达无影响 .LY2 94 0 0 2预处理可阻断胰岛素对p70S6K和PKB的激活作用 ,但不能抑制PMA刺激引起的p70S6K的活化 .表明胰岛素和PMA介导p70S6K活化的信号途径有所不同 ,胰岛素介导p70S6K的活化可能依赖于PI3K途径。

关键词：胰岛素佛波酯蛋白质合成信号传递 p70S6激酶蛋白激酶B 磷脂酰肌醇-3激酶细胞生长 mTOR

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：