检索结果-内蒙古大学图书馆

养禽与禽病防治 2025年第2期 12-19页

作者：周琦璐巨星李诗如赵阿勇王芷筠浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室、动物健康互联网检测技术浙江省工程研究中心、浙江农林大学动物科技学院动物医学院杭州311300 华南农业大学动物科学学院广州510642

本研究以372只60周龄麻黄鸡的DNA为模版,通过设计引物,Sanger测序,以及位点分析,发现ALKBH5基因的第五外显子中存在6个SNPs位点,且均表现出不同程度的多态性。其中g.1112T>N发生四等位基因突变,g.984A>g、g.1033A>g、g.1112T&g... 详细信息

本研究以372只60周龄麻黄鸡的DNA为模版,通过设计引物,Sanger测序,以及位点分析,发现ALKBH5基因的第五外显子中存在6个SNPs位点,且均表现出不同程度的多态性。其中g.1112T>N发生四等位基因突变,g.984A>g、g.1033A>g、g.1112T>N、g.1194T>C位点与300日龄母本产蛋性能显著相关,g.1112T>N和g.1194T>C与390日龄母本产蛋性能显著相关。因此ALKBH5基因的6个SNP位点,可作为辅助选择优质繁殖性能蛋鸡的标记,为提高家禽产蛋性能和品种改良提供理论依据。

关键词： ALKBH5 SNP 麻黄鸡产蛋关联分析

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组氨酸激酶EnvZ调节副溶血弧菌群集性爬动和生物被膜形成的作用机制

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微生物学报 2025年第5期65卷 2049-2060页

作者：袁艺萱吴文婷陆倩姚宁周秀娟钟孝俊杨梦华浙江农林大学动物科技学院·动物医学院浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室动物健康互联网检测技术浙江省工程实验室

【目的】探究组氨酸激酶EnvZ调控副溶血弧菌群集性爬动和生物被膜形成的作用机制。【方法】利用含有诱导型启动子的pBAD24与pMal质粒，构建相应基因的过表达质粒，并将其导入野生株和envZ基因缺失株中，通过运动性培养基比较各菌株的群... 详细信息

【目的】探究组氨酸激酶EnvZ调控副溶血弧菌群集性爬动和生物被膜形成的作用机制。【方法】利用含有诱导型启动子的pBAD24与pMal质粒，构建相应基因的过表达质粒，并将其导入野生株和envZ基因缺失株中，通过运动性培养基比较各菌株的群集性爬动能力，采用结晶紫染色法检测各菌株的生物被膜形成能力，并结合RT-qPCR与荧光报告系统检测下游基因的表达水平，以探究EnvZ调节副溶血弧菌群集性爬动和生物被膜形成的分子机制。【结果】ΔenvZ菌株的群集性爬动能力显著低于野生株，而导入pBAD24-envZ回补质粒的ΔenvZ菌株能够恢复其群集性爬动能力。这些菌株的群集性爬动能力与侧生鞭毛相关基因的表达水平呈正相关。在envZ基因缺失的菌株中，Scr系统启动子的转录活性显著低于野生株和ΔompR菌株。在envZ基因缺失的菌株中过表达Scr系统，可以显著恢复其群集性爬动；然而，在scrABC基因缺失的菌株中过表达EnvZ，并不能改变其群集性爬动能力。ΔenvZ菌株的生物被膜形成能力显著低于野生株，而pMal-envZ质粒能够使ΔenvZ菌株的生物被膜厚度恢复至野生株水平，但pMal-scrABC重组质粒则无此功能。在ΔenvZ菌株中，胞外多糖操纵子(epsA-J)的启动子活性与关键基因的转录水平均显著低于野生株。【结论】组氨酸激酶EnvZ可通过调控Scr系统的表达来增强副溶血弧菌的群集性爬动能力，同时也可通过调控胞外多糖的表达来促进该菌的生物被膜形成。

关键词：副溶血弧菌组氨酸激酶 EnvZ/OmpR 群集性爬动生物被膜

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基于猪流行性腹泻病毒基因Ⅱ型毒株S蛋白中和表位的间接ELISA和病毒中和试验的相关性分析

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农业生物技术学报 2022年第12期30卷 2464-2472页

作者：周一媚董婉玉王馨雨郑谋凤王志鹏祝徐航周莹珊杨永春宋厚辉王晓杜浙江农林大学动物科技学院·动物医学院/浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室/动物健康互联网检测技术浙江省工程研究中心/浙江省动物医学与健康管理国际科技合作基地/中澳动物健康大数据分析联合实验室浙江省瑞安市农业农村局

猪流行性腹泻（Porcine epidemic diarrhea, PED）是一种由猪流行性腹泻病毒（Porcine epidemic diarrhea virus, PEDV）引起的高度传染性、高致死率疾病，导致3～10日龄仔猪（Sus scrofa）严重腹泻，该病的防控主要依赖于母猪疫苗免疫... 详细信息

猪流行性腹泻（Porcine epidemic diarrhea, PED）是一种由猪流行性腹泻病毒（Porcine epidemic diarrhea virus, PEDV）引起的高度传染性、高致死率疾病，导致3～10日龄仔猪（Sus scrofa）严重腹泻，该病的防控主要依赖于母猪疫苗免疫后乳汁中和抗体的保护作用，而快速地、高通量检测中和抗体方法有利于该病的防控。本研究通过方阵滴定、ELISA反应条件筛选、敏感性试验、特异性试验、符合性试验和中和试验等，确定基于PEDV基因Ⅱ型S蛋白中和表位的间接ELISA反应条件：抗原最佳包被浓度为0.2μg/孔，血清的最佳稀释度为1∶100，血清最佳作用时间30 min，二抗最佳稀释度为1∶6 000，二抗最佳作用时间为60 min，底物最佳作用时间为10 min。该ELISA方法与临床常见病原（猪瘟病毒,伪狂犬病毒,猪繁殖与呼吸综合征病毒）的特异性抗体无交叉反应，组间和组内试验具有较好重复性。该ELISA方法与中和试验的结果关联分析表明，其直接正相关公式为：Y=0.370 8X+1.377 2(X为S/P值, Y为lg（1/中和效价-32）, R2=0.963)，相比中和试验的结果，本研究建立的ELISA方法敏感性为94.74%，特异性为91.67%,Kappa值为0.93。本研究建立的间接ELISA方法为临床PEDV中和抗体高通量检测和疫苗免疫效果评估提供了候选工具。

关键词：猪流行性腹泻病毒(PEDV) 间接ELISA 中和抗体相关性

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1株朱鹮源红斑丹毒丝菌的分离鉴定及生物学特征分析

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中国预防兽医学报 2023年第12期45卷 1245-1252页

作者：邵乐乐杨永春马武林白洪青李颖徐浩瑜吴燕芬宋厚辉邱国强浙江农林大学动物科技学院动物医学院/浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室浙江杭州311300 德清县生态林业综合服务中心浙江德清313200 德清县自然资源和规划局浙江德清313200 湖州市生态林业保护研究中心浙江德清313000

为确定浙江省德清县朱鹮抢救保护基地一只死亡朱鹮的发病原因及病原特征,本研究采集其肝脏、心脏等组织样品,通过TSA平板划线培养,观察菌落、革兰氏染色、生化鉴定和16S rRNA基因的PCR扩增与序列分析。结果显示,从朱鹮体内分离的细菌为... 详细信息

为确定浙江省德清县朱鹮抢救保护基地一只死亡朱鹮的发病原因及病原特征,本研究采集其肝脏、心脏等组织样品,通过TSA平板划线培养,观察菌落、革兰氏染色、生化鉴定和16S rRNA基因的PCR扩增与序列分析。结果显示,从朱鹮体内分离的细菌为红斑丹毒丝菌(***),并命名为***-716株。采用纸片扩散(K-B)法检测该菌对8类10种药物的敏感性;采用微量结晶紫染色法鉴定分离菌的生物被膜(BF)形成能力,结果显示该菌对青霉素类的氨苄西林和青霉素、喹诺酮类的诺氟沙星等5类6种抗生素敏感,对四环素类的四环素、大环内酯类的红霉素、氨基糖苷类的庆大霉素和阿米卡星等3类4种抗生素耐药,且其BF形成能力适中。采用Illumina二代测序平台对分离菌的全基因组测序,并采用SPAdes拼接序列;利用Prokka和PATRIC 3.6.9分析该菌基因组的分子特征。利用CARD数据库预测分离菌的耐药基因;采用VFDB数据库预测分离菌的毒力基因。采用ParSNP软件绘制该分离菌与GenBank中不同国家不同宿主来源的红斑丹毒丝菌全基因组的系统发育树。全基因组的分子特征分析结果显示,该分离菌基因组全长1.78×10^(3)kb,GC含量36.5%,含1694个蛋白编码基因、55个tRNA、6个rRNA、1个tmRNA,无质粒、无前噬菌体。经软件预测结果显示,该分离菌携带3个耐药基因,分别是耐四环素类药物的tetM、耐大环内酯类药物的mefA及兼具大环内酯类、林可酰胺类以及原霉素B类的msrD基因,这与其对四环素、红霉素的耐药表型相符,但未携带庆大霉素和阿米卡星耐药相关基因;其携带76个与菌毛、荚膜、铁摄取、溶胞素、分泌、转运等毒力相关基因;系统发育树结果显示分离株***-716与韩国海豚源红斑丹毒丝菌分离株KC-Sb-R1处于同一分支,进一步表明分离菌为红斑丹毒丝菌。将不同剂量的***-716株分别经腹腔感染雏鸭及小鼠后在7 d观察期内评估其致病性。结果显示,中高剂量组(1×10^(5)cfu/mL~1×10^(8)cfu/mL)雏鸭和小鼠均出现厌食,被毛杂乱现象,部分雏鸭久卧不起,低剂量(1×10^(4)cfu/mL)组及阴性对照组雏鸭和小鼠均无明显异常。经计算,该分离菌对雏鸭和小鼠的LD50分别为1×10^(4.94)cfu/mL和1×10^(5.86)cfu/mL;病死鸭及小鼠剖检后观察到二者消化道有出血点,雏鸭气囊浑浊等剖检病变,并再次从这两种动物的肝脏中分离到该菌。上述结果表明该菌株对禽类和哺乳动物均具有潜在致病性。本研究首次分离鉴定到一株朱鹮源致病性红斑丹毒丝菌,并证实该菌为朱鹮的致病菌,该结果为进一步研究红斑丹毒丝菌的致病机制及朱鹮相关疾病的防治提供了用药参考。

关键词：红斑丹毒丝菌朱鹮全基因组测序生物学特性

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女贞子活性成分抗肝纤维化作用机制研究进展

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中草药 2024年第4期55卷 1389-1396页

作者：叶子雨何学东郑永军李婉婧曾晴勤李瑞刘梦琪张璟郑亚东杨永春赵金国宋厚辉浙江农林大学动物科技学院动物医学院浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室/动物健康互联网检测技术浙江省工程研究中心浙江省动物医学与健康管理国际科技合作基地中澳动物健康大数据分析联合实验室浙江杭州311300 福建农林大学动物科学学院(蜂学学院)/福建-台湾动物病原生物学重点实验室福建福州350002 中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所(国家热带病研究中心) 国家卫生健康委员会寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织热带病合作中心国家级热带病国际联合研究中心上海200025 甘肃省天水市动物疫病预防控制中心甘肃天水741000

肝纤维化为“肝病-肝纤维化-肝硬化/肝癌”的中间环节,存在于大部分肝病的发展过程中。有效逆转肝纤维化是防止其进一步发展的重要手段,但是目前还没有治疗肝纤维化的特效药,而女贞子Ligustri Lucidi Fructus作为一种天然药用植物,其活... 详细信息

肝纤维化为“肝病-肝纤维化-肝硬化/肝癌”的中间环节,存在于大部分肝病的发展过程中。有效逆转肝纤维化是防止其进一步发展的重要手段,但是目前还没有治疗肝纤维化的特效药,而女贞子Ligustri Lucidi Fructus作为一种天然药用植物,其活性成分具有抗肝纤维化功能。通过归纳梳理女贞子活性成分通过调控相关信号通路抗肝纤维化作用机制进行综述,为进一步对女贞子靶向治疗肝纤维化的研究提供理论参考。

关键词：女贞子肝纤维化肝脏星状细胞细胞信号通路红景天苷齐墩果酸芹菜素熊果酸委陵菜酸

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右美托咪定抑制Ca^(2+)超载保护大鼠脊髓缺血再灌注损伤

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中国兽医学报 2022年第8期42卷 1660-1668页

作者：姜胜杨少青王雨欣宋泉江周彬邵春艳王晓杜宋厚辉浙江农林大学动物科技学院/动物医学院浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室/动物健康互联网检测技术浙江省工程实验室/动物医学与健康管理浙江省国际科技合作基地/中澳动物健康大数据分析联合实验室浙江杭州311300

为了探讨右美托咪定(dexmedetomidine,Dex)对大鼠脊髓缺血再灌注(ischemia-reperfusion,I/R)损伤的保护作用及机制,通过改良Zivin法夹闭肠系膜上动脉及右肾动脉之间的腹主动脉50 min建立大鼠脊髓I/R模型。I/R前通过尾静脉进行Dex预处理... 详细信息

为了探讨右美托咪定(dexmedetomidine,Dex)对大鼠脊髓缺血再灌注(ischemia-reperfusion,I/R)损伤的保护作用及机制,通过改良Zivin法夹闭肠系膜上动脉及右肾动脉之间的腹主动脉50 min建立大鼠脊髓I/R模型。I/R前通过尾静脉进行Dex预处理,通过腹腔注射进行NPS2143和KN93预处理。采用BBB评分和HE染色评估脊髓损伤,微板法检测钙离子浓度,Western blot和荧光定量PCR分别分析CaSR和CaMKⅡ蛋白表达和mRNA转录水平分析。结果显示,与假手术组(Sham)比较,I/R 24 h、Dex 24 h、NPS2143+I/R 24 h及KN93+I/R 24 h组大鼠BBB评分均显著降低(P<0.01),I/R 48 h和KN93+I/R 48 h组BBB评分显著降低(P<0.01);与I/R组比较,Dex组大鼠BBB评分显著升高(P<0.01)。I/R 24 h与I/R 48 h组HE染色结果显示,脊髓神经元胞体固缩,胞核结构不清,染色加深,甚至消失,胶质细胞增生,提示脊髓损伤严重,而Sham组神经元未见明显异常,与I/R组比较,HE结果提示Dex组脊髓组织损伤程度轻微。与Sham组比较,I/R 24 h和I/R 48 h组脊髓钙离子浓度显著升高(P<0.01);与I/R 24 h组比较,Dex 24 h组脊髓钙离子浓度显著降低(P<0.01)。与Sham 24 h组比较,I/R 24 h组大鼠脊髓CaSR和CAMKⅡ的蛋白与mRNA表达水平显著升高(P<0.01);Dex 24 h组大鼠脊髓组织CaSR与CAMKⅡ的mRNA和蛋白的表达水平显著降低(P<0.01)。结果表明Dex可下调CaSR和CAMKII的mRNA与蛋白表达水平,减轻钙超载,从而保护脊髓缺血再灌注损伤。该研究为Dexm减轻脊髓I/R损伤的临床应用提供了理论依据。

关键词：右美托咪定脊髓缺血再灌注 CaSR CAMKⅡ

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减毒单增李斯特菌为载体的肿瘤免疫治疗研究进展

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农业生物技术学报 2021年第8期29卷 1622-1629页

作者：陈璐汪枫婷孙静陈中炜卫芳芳宋厚辉程昌勇浙江农林大学动物科技学院·动物医学院浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室动物健康互联网检测技术浙江省工程实验室

单增李斯特菌(Listeria monocytogenes)是重要的人兽共患食源性胞内寄生菌,孕妇、儿童、老年人等免疫力低下者为易感人群,严重时可导致死亡。单增李斯特菌由于其独特的胞内感染特性可作为载体携带肿瘤相关抗原,感染机体后能刺激免疫系... 详细信息

单增李斯特菌(Listeria monocytogenes)是重要的人兽共患食源性胞内寄生菌,孕妇、儿童、老年人等免疫力低下者为易感人群,严重时可导致死亡。单增李斯特菌由于其独特的胞内感染特性可作为载体携带肿瘤相关抗原,感染机体后能刺激免疫系统产生强烈的细胞免疫反应,从而识别并清除肿瘤,越来越多研究证实李斯特菌有望成为肿瘤免疫治疗的理想工具。目前已经利用减毒单增李斯特菌作为载体开发了针对多种恶性肿瘤的疫苗,如宫颈癌疫苗、犬骨肉瘤疫苗,在临床试验中也表明了李斯特菌疫苗的有效性。本文对李斯特菌在肿瘤免疫治疗中的研究及临床试验进展进行了系统综述,有助于读者了解目前肿瘤治疗疫苗研究领域的最新技术和发展前景,为有效开发针对肿瘤防治的新策略和新技术提供了参考。

关键词：减毒单增李斯特菌细胞免疫疫苗载体肿瘤免疫治疗

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日粮不同钙磷比对湖羊生长性能及血清生化指标的影响

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饲料工业 2024年第13期45卷 43-46页

作者：蒋晓莉马智聪费中华褚玲娜洪巍杨金勇费明锋胡志宏王翀浙江农林大学动物科技学院·动物医学院浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室集贤学院浙江杭州311300 长兴县畜牧兽医站浙江湖州313100 浙江赛诺生态农业有限公司浙江临安311311 浙江省畜牧技术推广与种畜禽监测总站浙江杭州310021 湖州紫丰生态农业有限公司浙江湖州313000 长兴永盛牧业有限公司浙江长兴313105

试验旨在探究日粮钙磷比对湖羊生长性能和血清生化指标的影响。采用单因素试验设计,选择生长状况良好,体重、日龄相近的湖羊断奶公羔羊48只,随机分为3组,每组4个重复,每个重复4只湖羊。各组日粮的钙磷比分别为2.13、1.63和1.28,日粮精... 详细信息

试验旨在探究日粮钙磷比对湖羊生长性能和血清生化指标的影响。采用单因素试验设计,选择生长状况良好,体重、日龄相近的湖羊断奶公羔羊48只,随机分为3组,每组4个重复,每个重复4只湖羊。各组日粮的钙磷比分别为2.13、1.63和1.28,日粮精粗比均为33∶67。结果表明:(1)饲粮钙磷比对湖羊采食量和料重比的影响不显著(P>0.05);低钙磷比组湖羊日增重显著高于高钙磷比组和中钙磷比组(P<0.05)。(2)血清钙含量随日粮钙磷比的下降而显著上升(P<0.05);低钙磷比组湖羊的尿素氮含量显著高于高钙磷比组(P<0.05);日粮钙磷比对血清总蛋白、白蛋白、碱性磷酸酶和血清无机磷水平无显著影响(P>0.05)。综合生长性能和血清生化指标,认为湖羊断奶公羔羊的适宜日粮钙磷比为1.28~1.63。

关键词：日粮钙磷比湖羊生长性能血清生化指标精准饲喂

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BVDV感染对小鼠巨噬细胞IFN-β相关信号分子的影响

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中国兽医学报 2023年第9期43卷 1828-1836页

作者：段明媚曹唱唱赵心怡陈斐周彬姜胜邵春艳周莹珊董婉玉杨杨王晓杜宋厚辉宋泉江浙江农林大学动物科技学院/动物医学学院、浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室/动物健康互联网检测技术浙江省工程实验室/动物医学与健康管理浙江省国际科技合作基地/中澳动物健康大数据分析联合实验室浙江杭州311300 山东省烟台市招远市辛庄畜牧兽医站山东烟台265400

为了探究致细胞病变型牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhealvirus,BVDV)对小鼠巨噬细胞IFN-β相关信号分子的影响,以0.1和3 MOI感染小鼠巨噬细胞RAW264.7,通过RT-qPCR、Western blot、ELISA等方法检测小鼠巨噬细胞中TLR37/TLR7、IRF3/IRF7、STAT1、IFN-β、ISG15/OAS1和USP18/SOCS1等因子的转录和表达水平差异,并对巨噬细胞中BVDV拷贝数进行检测。结果显示BVDV可以进入巨噬细胞细胞内,但病毒拷贝数不能随时间而增长。BVDV进入小鼠巨噬细胞先后上调TLR3和下调TLR7的转录水平,继而显著上调IRF3和IRF7转录水平,并呈现一定的剂量依赖性。STAT1和IFN-β的转录和表达也随BVDV感染而显著升高,而且IFN-β表达量随BVDV的病毒量和感染时间而增加。发挥抗病毒活性的ISG15和OAS1转录水平在BVDV感染前期出现显著升高,感染后期恢复正常,同时在感染后期干扰素负性调节因子USP18和SOCS1转录水平显著升高。所以致细胞病变型BVDV可以感染小鼠巨噬细胞,但不能复制,但可以通过TLR3/7-IRF3/7激活IFN相关信号通路,并接受负性调节因子的调控。

关键词：牛病毒性腹泻病毒小鼠巨噬细胞复制干扰素

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多重连接探针扩增技术(MLPA)在病原微生物检测与疾病诊断中的应用

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农业生物技术学报 2021年第10期29卷 2031-2042页

作者：王雨萌周柯邵春艳杨永春周莹珊宋厚辉浙江农林大学动物科技学院/动物医学院浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室/动物健康互联网检测技术浙江省工程实验室

多重连接探针扩增技术(multiplex ligation-dependent probe amplification, MLPA)是一种可以在单个反应中同时对50个靶基因进行定性和半定量分析的检测方法。其主要步骤包括靶序列DNA变性、探针和靶序列DNA杂交、连接酶连接探针、PCR... 详细信息

多重连接探针扩增技术(multiplex ligation-dependent probe amplification, MLPA)是一种可以在单个反应中同时对50个靶基因进行定性和半定量分析的检测方法。其主要步骤包括靶序列DNA变性、探针和靶序列DNA杂交、连接酶连接探针、PCR扩增、毛细管电泳及数据分析。多重连接探针扩增技术已广泛应用于肿瘤的诊断与预后、遗传性疾病的基因检测、产前检测等领域。鉴于混合感染现象增加,敏感、特异和高通量检测方法是当前动物疾病检测中的急需,多重连接探针扩增技术在病原微生物的高通量检测领域显示出良好的应用前景。本文从多重连接探针扩增技术的原理和步骤、在病原微生物检测、肿瘤诊断和遗传性疾病诊断中的应用、优势和不足以及应用前景展望等方面进行综述,以期为MLPA技术在动物病原检测和疾病诊断中的应用和改良提供参考。

关键词：多重连接探针扩增技术(MLPA) 甲基化特异性MLPA(MS-MLPA) 病原体检测肿瘤诊断遗传疾病诊断

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