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Akkermansia muciniphila对大鼠高温运动后器官损伤的影响

中国微生态学杂志 2024年第2期36卷 125-134,146页

作者：杨展孙学伟秦明珂崔茜张昕蕊张若男路寒张明燕朱进郑峰唐成亮东部战区疾病预防控制中心江苏南京210002 滨州医学院基础医学院陆军军医大学军事预防医学系军队劳动卫生学教研室东部战区空军医院南京中医药大学医学院整合医学学院南京医科大学病原生物学系南京医科大学第二附属医院南京中医药大学金陵临床医学院

目的探讨嗜黏蛋白阿克曼菌(Akkermansia muciniphila,***)通过干预肠道微生态,对大鼠高温运动后的器官损伤的影响。方法采用6~8周龄的Sprague Dawley大鼠,随机分成对照组(n=5)、常温运动组(RT组,n=8)、高温运动组(HT组,n=8)、***干预组(... 详细信息

目的探讨嗜黏蛋白阿克曼菌(Akkermansia muciniphila,***)通过干预肠道微生态,对大鼠高温运动后的器官损伤的影响。方法采用6~8周龄的Sprague Dawley大鼠,随机分成对照组(n=5)、常温运动组(RT组,n=8)、高温运动组(HT组,n=8)、***干预组(AKK干预组,n=8)、高温粪菌移植组(HT.R组,n=4)和***粪菌移植组(AKK.R组,n=4),在力竭运动后采集大鼠的血液、组织及粪便样本,检测谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)的变化。通过16S rRNA基因测序和GC-MS方法分析粪便中菌群和代谢产物的改变,对结肠组织和肝脏组织进行病理检测,采用免疫组化方法评估肠道屏障功能。结果HT组和AKK干预组大鼠在(35±2)℃、湿度(55±5)%的环境下平均运动时间分别为(13.76±3.454)和(19.55±1.997)min,差异有统计学意义(t=4.104,P=0.0011)。***干预后,大鼠血清的AST(U/mL)、ALT(U/mL)、BUN(mmol/L)和Cr(μmol/L)平均水平(3.953±1.877、2.622±1.086、10.040±1.088、65.800±12.010)均低于HT组(6.358±1.436、4.335±1.304、15.010±1.913、93.980±39.110),其中AST、ALT、BUN水平检测差异均有统计学意义(t=2.878、2.856、6.381,P=0.0122、0.0127、<0.0001)。肠道菌群组成结构在属水平上发生变化,粪便中代谢产物水平有不同程度的改变。病理结果显示,AKK干预组大鼠的肝脏损伤较HT组有显著缓解。AKK干预组大鼠的肠道屏障相关连接蛋白ZO-1和Occludin表达量的累积光密度值(6330±481.8、6140±281.7)较HT组(3425±257.0、3943±242.1)上调(t=9.216、10.250,P=0.0008、0.0005)。结论***能够在一定程度上通过维持肠道屏障功能,改善肠道微生态,减轻高温运动带来的肠道及肝脏损伤。

关键词：运动高温嗜黏蛋白阿克曼菌肠道菌群器官损伤

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以学生为中心的医学微生物学课程思政教学设计与探索

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农垦医学 2023年第4期45卷 381-384页

作者：董丹王竞州王小芳许军英侯隽王仙陈雪玲石河子大学医学院基础医学系病原生物学与免疫学教研室新疆石河子832002

以学生为中心的医学微生物学课程思政是以学生全程参与教学过程,通过“演、做、辩、学、评”教学方式,发挥“00后”学生“虚拟化、个性化、独特化、开放化”的优势,使学生在学习医学微生物学知识的同时培养“科学家精神、核心价值观、... 详细信息

以学生为中心的医学微生物学课程思政是以学生全程参与教学过程,通过“演、做、辩、学、评”教学方式,发挥“00后”学生“虚拟化、个性化、独特化、开放化”的优势,使学生在学习医学微生物学知识的同时培养“科学家精神、核心价值观、批判性思维、创新思维”,达到课堂教学润物无声的育人效果。

关键词：以学生为中心医学微生物学课程思政教学设计

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神经外科合并肺部感染患者多重耐药菌感染的危险因素分析

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检验医学与临床 2022年第20期19卷 2737-2741,2746页

作者：刘海萍韩蕾王洪亮万毅徐焰西安交通大学医学部基础医学院病原生物学与免疫学系陕西西安710061 西安大兴医院检验科陕西西安710014 空军军医大学军事预防医学系流行病与卫生统计学教研室陕西西安710032

目的探讨神经外科合并肺部感染患者多重耐药(MDR)菌感染的危险因素,为神经外科MDR菌医院感染防控及临床治疗提供依据。方法回顾性分析2020年5月至2021年6月西安大兴医院神经外科合并肺部感染的263例患者的临床资料,依据是否从下呼吸道... 详细信息

目的探讨神经外科合并肺部感染患者多重耐药(MDR)菌感染的危险因素,为神经外科MDR菌医院感染防控及临床治疗提供依据。方法回顾性分析2020年5月至2021年6月西安大兴医院神经外科合并肺部感染的263例患者的临床资料,依据是否从下呼吸道标本检出MDR菌将患者分为MDR组(141例)和非MDR组(122例)。分析两组的病原学特点,比较从两组患者标本中检出的鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌的耐药性差异。通过单因素分析和二元Logistic回归分析确定神经外科合并肺部感染患者MDR菌感染的危险因素。结果MDR组分离得到的鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌对大多数临床常见抗菌药物的耐药率高于非MDR组(P<0.05)。二元Logistic回归分析显示:年龄≥65岁、住院时间≥30 d、卧床、合并营养不良、合并贫血、气管切开、非限制类抗菌药物使用时间≥7 d、限制类抗菌药物使用时间≥7 d为神经外科合并肺部感染患者MDR菌感染的独立危险因素(P<0.05)。结论高龄、住院时间≥30 d、卧床、合并营养不良或贫血、气管切开、非限制类抗菌药物或限制类抗菌药物使用超过7 d是神经外科合并肺部感染患者MDR菌感染的独立危险因素。临床应对有高危因素的患者进行MDR菌的定期筛查,通过多种举措加强对此类患者的管理,预防MDR菌感染的发生及院内传播。

关键词：神经外科肺部感染多重耐药菌易感因素

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Pannexin1特异性阻断剂丙磺舒对大鼠心肌缺血再灌注损伤的作用

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徐州医科大学学报 2017年第11期37卷 743-746页

作者：崔洁石玥闫长栋夏强孔德龙徐州医科大学基础医学院生理教研室江苏徐州221004 浙江大学医学部浙江杭州310058 徐州医科大学基础医学院病原生物学与免疫学教研室江苏徐州221004

目的探讨丙磺舒特异性阻断泛连接蛋白1（Pannexin1）通道对大鼠心肌缺血再灌损伤的作用。方法免疫组化法确定Pannexin1在大鼠心脏中的表达情况，采用大鼠离体及在体心脏缺血再灌注模型，测定血流动力学指标及离体实验灌注各时间点冠脉... 详细信息

目的探讨丙磺舒特异性阻断泛连接蛋白1（Pannexin1）通道对大鼠心肌缺血再灌损伤的作用。方法免疫组化法确定Pannexin1在大鼠心脏中的表达情况，采用大鼠离体及在体心脏缺血再灌注模型，测定血流动力学指标及离体实验灌注各时间点冠脉流出液和在体实验动物血清中乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase, LDH）含量。实验结束后采用TTC染色测定在体心肌细胞中的梗死面积。结果在心脏组织水平上，Pannexin1主要于心室肌表达。与对照组比较，Pannexin1的阻断剂丙磺舒明显改善左心室发展压，减少在体心肌梗死面积，同时降低心肌细胞LDH的释放。结论Pannexin1在心室肌上表达并在心肌缺血再灌注中起作用，特异性阻断Pannexin1减轻缺血再灌注引起的心肌损伤，起到心肌保护作用。

关键词：泛连接蛋白1 丙磺舒缺血再灌注损伤心肌保护

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BAMBI基因过表达人结肠癌细胞移植斑马鱼致肝转移模型的构建

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中华临床医师杂志（电子版） 2015年第21期9卷 88-92页

作者：崔戈谢珊珊张婷李芳张晓涓桂建芳周天华冯文明湖州师范学院附属第一医院中心实验室浙江省313000 浙江大学医学院基础医学系细胞生物学教研室杭州310058 湖州师范学院医学院病理学教研室浙江省313000 中国科学院水生生物研究所鱼类生物学及渔业生物技术研究中心鱼类发育遗传学与细胞工程学学科组武汉430072

目的构建BAMBI基因过表达人结肠癌细胞移植斑马鱼肝转移模型,分析斑马鱼肝内转移性结肠癌细胞BAMBI基因表达水平与肝转移发生率的关联性。方法分别构建BAMBI过表达稳转结肠癌细胞株SW620(BAMBI+组)、空载体红色荧光蛋白基因转染结肠癌... 详细信息

目的构建BAMBI基因过表达人结肠癌细胞移植斑马鱼肝转移模型,分析斑马鱼肝内转移性结肠癌细胞BAMBI基因表达水平与肝转移发生率的关联性。方法分别构建BAMBI过表达稳转结肠癌细胞株SW620(BAMBI+组)、空载体红色荧光蛋白基因转染结肠癌细胞株SW620(EV组),分别显微注射到受精后第2天转基因斑马鱼Tg(Apo14∶GFP)胚胎卵黄囊(每组各680条),激光共聚焦荧光显微镜观察、拍摄,采用Image J软件测量转移至斑马鱼肝脏内结肠癌细胞红色荧光表达强度,计算肝转移发生率;采用t检验比较BAMBI+组及EV组斑马鱼肝脏内结肠癌细胞红色荧光表达强度及肝转移发生率的差异。结果与EV组相比,激光共聚焦荧光显微观察显示BAMBI+组斑马鱼肝内结肠癌细胞红色荧光表达量显著增加(t=6.247,P=0.003 3);BAMBI+组斑马鱼肝转移发生率与EV组相比显著增加(t=4.276,P=0.012 9)。结论构建了基因修饰人结肠癌细胞移植斑马鱼致肝转移模型,可较好地模拟活体状态的结肠癌肝转移;BAMBI基因可促进异种移植入斑马鱼的结肠癌细胞发生肝转移。

关键词：结肠肿瘤肝转移斑马鱼模型 BAMBI

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特异性免疫在呼吸道合胞病毒疫苗增强疾病过程中的作用

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国际免疫学杂志 2011年第2期34卷 94-97页

作者：胡勇钱景浙江大学医学院基础医学系病原生物学教研室杭州310058

呼吸道合胞病毒（RSV）疫苗可诱发疫苗增强疾病，以肺组织广泛的炎细胞浸润和嗜酸性粒细胞增多为典型特征。探索RSV疫苗增强疾病的免疫机制，尤其是宿主体液和细胞免疫反应不平衡在疫苗增强疾病过程中的作用，有助于安全有效的RSV疫苗... 详细信息

呼吸道合胞病毒（RSV）疫苗可诱发疫苗增强疾病，以肺组织广泛的炎细胞浸润和嗜酸性粒细胞增多为典型特征。探索RSV疫苗增强疾病的免疫机制，尤其是宿主体液和细胞免疫反应不平衡在疫苗增强疾病过程中的作用，有助于安全有效的RSV疫苗的研究。

关键词：呼吸道合胞病毒疫苗增强疾病体液免疫细胞免疫

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福尔马林灭活RSV疫苗增强性疾病模型建立及特征研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2009年第4期29卷 326-327页

作者：余蓓蓓彭慧琴顾晓萌刘怡严杰钱景浙江大学医学院基础医学系病原生物学教研室杭州310058 浙江大学医学院医学系

以福尔马林灭活呼吸道合胞病毒（RSV）疫苗（FI-RSV）预防接种的婴儿或学龄前儿童，自然感染RSV后较之未接种疫苗感染者表现出更为严重的支气管痉挛性肺炎。此类因疫苗免疫接种使相应病原微生物感染时致病作用增强的疾病或现象，称为“... 详细信息

以福尔马林灭活呼吸道合胞病毒（RSV）疫苗（FI-RSV）预防接种的婴儿或学龄前儿童，自然感染RSV后较之未接种疫苗感染者表现出更为严重的支气管痉挛性肺炎。此类因疫苗免疫接种使相应病原微生物感染时致病作用增强的疾病或现象，称为“疫苗增强性疾病”（vaccine enhanced disease，VED）。目前关于VED免疫病理调控机制的研究多建立在动物模型基础上。本研究通过制备FI—RSV疫苗，建立BALB／c小鼠FI—RSV相关VED模型，定义其病毒滴度、抗体水平以及病理诊断特征，为进一步研究RSV相关VED的分子机制提供实验资料。

关键词： RSV疫苗疾病模型福尔马林强性灭活 BALB/c小鼠呼吸道合胞病毒病原微生物感染

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梅毒螺旋体TpN17与TpN47表位肽融合抗原的重组表达及其酶联免疫吸附试验的建立和应用

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生物工程学报 2009年第8期25卷 1187-1194页

作者：孙爱华范兴丽沈香娣汤仁仙严杰浙江医学高等专科学校基础医学部杭州310053 徐州医学院病原生物学教研室徐州221002 浙江大学医学院病原生物学系杭州310058

以重组TpNs为抗原的ELISAs已被证明是具有较高敏感性和特异性的梅毒血清学检测方法,若ELISAs使用多种TpNs抗原,可进一步提高检测敏感性和特异性。根据抗原表位分析结果,本研究首先采用连接引物PCR获得了TpN17和TpN47抗原表位序列融合成... 详细信息

以重组TpNs为抗原的ELISAs已被证明是具有较高敏感性和特异性的梅毒血清学检测方法,若ELISAs使用多种TpNs抗原,可进一步提高检测敏感性和特异性。根据抗原表位分析结果,本研究首先采用连接引物PCR获得了TpN17和TpN47抗原表位序列融合成的人工基因片段tpE17-47,然后构建了全长tpN17、tpN47基因以及tpE17-47融合基因的原核表达系统。SDS-PAGE和BioRad凝胶图象分析系统检查结果显示,所构建的原核表达系统能稳定表达目的重组蛋白rTpN17、rTpN47和rTpE17-47,其产量分别约占细菌总蛋白的36%、20%和28%。采用Ni-NTA亲和层析法提纯的rTpN17、rTpN47和rTpE17-47蛋白经SDS-PAGE分析,均显示为单一的蛋白条带。Western blotting结果表明,rTpN17、rTpN47和rTpE17-47蛋白均可被梅毒抗体阳性的病人血清所识别。以rTpE17-47为包被抗原的rTpE17-47-ELISA检测630例临床确诊梅毒患者血清标本的阳性率为98.6%,仅略高于TPPA(97.9%)(P>0.05),但明显高于rTpN17-ELISA(83.8%)、rTpN47-ELISA(83.3%)和RPR(72.1%)(P<0.01)。上述ELISAs和TPPA对25例SLE、36例RA患者和250例健康体检者的血清标本检测结果均为阴性,但RPR分别有1、2和2例标本检测结果为阳性。本试验成功地构建了rTpE17-47抗原表位融合基因及其高效原核表达系统,所建立的rTpE17-47-ELISA可作为一种快速、简便、安全、敏感和特异的梅毒血清学筛查或诊断新方法。

关键词：梅毒螺旋体抗原表位融合基因重组表达酶联免疫吸附试验

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感染细胞内问号钩端螺旋体吞噬泡形成及其与溶酶体的融合

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中华微生物学和免疫学杂志 2007年第9期27卷 792-796页

作者：刘云英罗冬娇郑伟李立伟严杰浙江大学医学院病原生物学系杭州310058 杭州师范学院基础医学部病原生物学教研室

目的了解问号钩端螺旋体(简称钩体)感染宿主细胞后吞噬泡形成、吞噬泡与溶酶体融合及感染细胞超微结构改变。方法用问号钩体黄疸出血群赖型56601株感染小鼠单核巨噬样细胞J774A.1和猴肾成纤维细胞Cos-7。采用透射电镜观察J774A.1细胞和C... 详细信息

目的了解问号钩端螺旋体(简称钩体)感染宿主细胞后吞噬泡形成、吞噬泡与溶酶体融合及感染细胞超微结构改变。方法用问号钩体黄疸出血群赖型56601株感染小鼠单核巨噬样细胞J774A.1和猴肾成纤维细胞Cos-7。采用透射电镜观察J774A.1细胞和Cos-7细胞胞内钩体吞噬泡的形成及感染细胞超微结构的改变。采用免疫双荧光染色法和激光共聚焦显微镜,观察含钩体吞噬泡与溶酶体融合情况。结果问号钩体56601株感染J774A.1细胞30 min、感染Cos-7细胞15 min即可在胞浆中发现膜包绕的含钩体吞噬泡,吞噬泡内钩体均保持原有生理弯曲。56601株问号钩体感染Cos-7细胞2h后,钩体吞噬泡膜开始消失,但未发现J774A.1细胞内钩体吞噬泡膜消失的现象。J774A.1细胞内钩体吞噬泡与溶酶体发生共区域化,表明吞噬泡与溶酶体发生融合。J774A.1细胞感染钩体后出现染色质浓缩形成的凋亡小体样结构、细胞空泡变性、线粒体肿胀等超微结构病变,但Cos-7细胞感染钩体后其超微结构基本正常。结论问号钩体感染J774A.1细胞和Cos-7细胞后可迅速形成吞噬泡并可能与钩体Ⅲ型分泌系统产物有关。J774A.1细胞内钩体吞噬泡可与溶酶体发生融合。不同细胞的钩体吞噬泡膜消失及超微结构改变有明显差异。

关键词：问号钩端螺旋体 J774A.1细胞/Cos-7细胞吞噬泡/溶酶体融合超微结构改变

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问号钩体lipL32/1-lipL41/2融合基因的构建及其表达产物免疫性的鉴定(英文)

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中国人兽共患病学报 2007年第5期23卷 427-432页

作者：周金成罗冬娇严杰杭州师范学院基础医学院杭州310018 浙江大学医学院病原生物学教研室

目的构建问号钩端螺旋体(简称钩体)lipL32/1-lipL41/2融合基因及其原核表达系统并鉴定其表达产物的免疫性。方法采用连接引物PCR构建lipL32/1-lipL41/2融合基因,常规方法构建其原核表达系统。采用SDS-PAGE和BioRad凝胶图象分析系统检测... 详细信息

目的构建问号钩端螺旋体(简称钩体)lipL32/1-lipL41/2融合基因及其原核表达系统并鉴定其表达产物的免疫性。方法采用连接引物PCR构建lipL32/1-lipL41/2融合基因,常规方法构建其原核表达系统。采用SDS-PAGE和BioRad凝胶图象分析系统检测目的重组蛋白rLipL32/1-LipL41/2表达情况。采用Western blot鉴定rLipL32/1-LipL41/2的免疫反应性。采用ELISA检测228例钩体病人血清中lipL32/1、lipL41/2基因和lipL32/1-lipL41/2融合基因表达产物的抗体。结果 lipL32/1-lipL41/2融合基因核苷酸和氨基酸序列与报道的相关序列相似性分别为99 .9 %和99 .8 %。rLi-pL32/1-LipL41/2表达量约为细菌总蛋白的10 %。rLipL32/1和rLipL41/2兔抗血清均能识别并与rLipL32/1-LipL41/2结合。97 .4 %、78 .5 %和99 .1 %病人血清rLipL32/1、rLipL41/2和rLipL32/1-LipL41/2抗体阳性。结论本研究成功地构建了问号钩体lipL32/1-lipL41/2融合基因及其原核表达系统,rLipL32/1-LipL41/2不仅同时具有两个单一重组抗原的免疫反应性,且能提高钩体病人血清中抗体检测阳性率,可作为研制钩体属特异性基因工程疫苗或检测试剂盒的候选抗原。

关键词：问号钩端螺旋体 lipL32基因 lipL41基因融合基因构建/表达免疫性

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