检索结果-内蒙古大学图书馆

国际流行病学传染病学杂志 2008年第3期35卷 171-174页

作者：吕国良李兰娟浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室浙江省传染病重点实验室杭州310003

胚胎干细胞在体外一定条件下能够分化为与原代培养肝细胞表型相似，并表达部分成熟肝细胞功能的类肝细胞。尽管目前在诱导条件的优化、分化过程的调控及临床应用的安全性等方面仍面临一系列问题，但研究胚胎干细胞向肝系的诱导分化及纯... 详细信息

胚胎干细胞在体外一定条件下能够分化为与原代培养肝细胞表型相似，并表达部分成熟肝细胞功能的类肝细胞。尽管目前在诱导条件的优化、分化过程的调控及临床应用的安全性等方面仍面临一系列问题，但研究胚胎干细胞向肝系的诱导分化及纯化，为终末期肝病的细胞移植治疗、生物人工肝及药物代谢和毒理研究提供了丰富的细胞来源。

关键词：干细胞肝细胞人工肝海藻酸钠微囊

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肝实质细胞和肝非实质细胞及非肝细胞的共培养

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国际流行病学传染病学杂志 2008年第4期35卷 249-252页

作者：陶然李兰娟浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室浙江省传染病重点实验室杭州310003

生物人工肝有望成为肝衰竭患者有效的体外肝支持治疗手段，而建立生物人工肝的前提是要获得足够数量高活性和良好功能的肝细胞。大量研究发现，肝细胞共培养能明显增强肝细胞功能，保持肝细胞的表型。此文就近年来肝细胞和非实质细胞、... 详细信息

生物人工肝有望成为肝衰竭患者有效的体外肝支持治疗手段，而建立生物人工肝的前提是要获得足够数量高活性和良好功能的肝细胞。大量研究发现，肝细胞共培养能明显增强肝细胞功能，保持肝细胞的表型。此文就近年来肝细胞和非实质细胞、非肝细胞共培养的效果、方法和可能的机制作了综述。

关键词：肝细胞非实质细胞共培养

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多重耐药铜绿假单胞菌的主动外排机制

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国际流行病学传染病学杂志 2008年第4期35卷 275-278页

作者：李红玲陈亚岗俞云松浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室浙江省传染病重点实验室杭州310003

铜绿假单胞菌（PA）对多种抗菌药物都有不同程度的耐药，其耐药机制包括酶的产生、生物被膜的形成、外排泵的高表达和外膜孔蛋白表达的降低或缺失，其中多药外排泵能排出多种结构和功能不相关的抗菌药物，包括β-内酰胺类、氟喹诺酮类... 详细信息

铜绿假单胞菌（PA）对多种抗菌药物都有不同程度的耐药，其耐药机制包括酶的产生、生物被膜的形成、外排泵的高表达和外膜孔蛋白表达的降低或缺失，其中多药外排泵能排出多种结构和功能不相关的抗菌药物，包括β-内酰胺类、氟喹诺酮类、大环内酯类、氨基糖苷类、四环素、氯霉素等，目前被认为是导致PA固有和获得性多重耐药的重要原因。

关键词：假单胞菌铜绿外排泵多重耐药

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问号钩端螺旋体属特异性外膜蛋白LipL41抗原表位预测及免疫学鉴定

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浙江大学学报（医学版） 2008年第6期37卷 585-591,621页

作者：姜久昆林旭瑷严杰薛峰浙江大学医学院病原生物学系浙江杭州310058 浙江大学附属第一医院传染病诊治国家重点实验室基础医学微生物学研究室浙江杭州310003

目的:预测及筛选问号钩端螺旋体(简称钩体)属特异性外膜蛋白LipL41有效T和B细胞(T/B)联合表位,了解不同基因型LipL41s差异T/B联合表位的免疫反应性差别。方法:采用生物信息学方法预测LipL41/1和LipL41/2分子中T/B联合表位。采用PCR扩增... 详细信息

目的:预测及筛选问号钩端螺旋体(简称钩体)属特异性外膜蛋白LipL41有效T和B细胞(T/B)联合表位,了解不同基因型LipL41s差异T/B联合表位的免疫反应性差别。方法:采用生物信息学方法预测LipL41/1和LipL41/2分子中T/B联合表位。采用PCR扩增候选T/B联合表位片段,采用噬菌体展示及SDS-PAGE等技术获得含不同T/B联合表位的重组P。分别以rLipL41/1和rLipL41/2抗血清、黄疸出血群赖型赖株全菌抗血清和钩体患者血清为一抗,采用Western Blot检测各抗血清与各重组P免疫杂交反应性。结果:根据预测结果选择了LipL41s中8个共有或差异T/B联合表位。经PCR扩增获得了上述T/B联合表位片段。各T/B联合表位片段均准确插入噬菌体P蛋白N端并有效表达。各抗血清均能识别上述8个T/B联合表位,但其WesternBlot杂交信号强度存在差异,其中共有T/B联合表位LipL41/1-30和LipL41/1-233与不同抗血清的信号较强且稳定。结论:所选择的8个T/B联合表位均为LipL41的有效抗原表位。共有T/B联合表位LipL41/1-30和LipL41/1-233可作为钩体MAP疫苗的首选抗原表位。差异T/B联合表位LipL41s-89和LipL41s-299与不同抗血清有免疫交叉现象。

关键词：钩端螺旋体,问号/免疫学细菌外膜蛋白质类/生物合成细菌外膜蛋白质类/分离外膜脂蛋白/属特异性抗原 LipL41/1/LipL41/2 抗原表位/预测噬菌体展示免疫学鉴定

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问号钩端螺旋体诱导J774A．1细胞凋亡及caspase-3、-6活化对凋亡的影响

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浙江大学学报（医学版） 2008年第6期37卷 558-563页

作者：金丹丹董海艳严杰李立伟毛亚飞浙江大学医学院病原生物学系浙江杭州310058 浙江大学附属第一医院传染病诊治国家重点实验室基础医学微生物学研究室浙江杭州310003

目的:了解问号钩端螺旋体(钩体)诱导小鼠单核-巨噬样细胞(J774A.1)凋亡的作用,以及caspase-3、-6活化对凋亡的影响。方法:建立问号钩体黄疸出血群赖型56601株J774A.1细胞感染模型。采用FITC-Annexin V/PI荧光标记流式细胞术检测细胞凋... 详细信息

目的:了解问号钩端螺旋体(钩体)诱导小鼠单核-巨噬样细胞(J774A.1)凋亡的作用,以及caspase-3、-6活化对凋亡的影响。方法:建立问号钩体黄疸出血群赖型56601株J774A.1细胞感染模型。采用FITC-Annexin V/PI荧光标记流式细胞术检测细胞凋亡或坏死情况。分别采用荧光比色法和WesternBlot,检测感染细胞caspase-3、-6活性及其底物(PARA和LaminA/C)剪切情况。结果:多种不同浓度的问号钩体赖株感染均可使J774A.1细胞发生凋亡,其中以问号钩体∶细胞=100∶1的比例感染时凋亡率最高(48.81%±5.95%)。感染细胞caspase-3和-6最大活性分别为(1453.41±36.07)FU和(618.65±39.82)FU,是未感染细胞的16.38和9.98倍。感染细胞的PARP和Lamin A/C均被剪切。Caspase-3、-6抑制剂对问号钩体赖株诱导的J774A.1细胞凋亡有明显的阻断作用。结论:问号钩体可诱导J774A.1细胞凋亡,caspase-3和-6与该细胞凋亡密切相关。

关键词：半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶酶/代谢钩端螺旋体,问号/致病力流式细胞术细胞凋亡信号传导/caspase

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不同血清群问号钩端螺旋体mce基因序列分析及表达模式的研究

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浙江大学学报（医学版） 2008年第6期37卷 564-571页

作者：张磊薛峰严杰毛亚飞李立伟浙江大学医学院病原生物学系浙江杭州310058 浙江大学附属第一医院传染病诊治国家重点实验室基础医学微生物学研究室浙江杭州310003

目的:确定问号钩端螺旋体(简称钩体)株携带侵袭相关mce基因情况,原核表达mce基因并制备其抗血清,了解问号钩体感染细胞前后mce基因转录水平的变化。方法:采用PCR扩增13株问号钩体和1株双曲钩体全长mce基因片段,T-A克隆后测序。采用基因... 详细信息

目的:确定问号钩端螺旋体(简称钩体)株携带侵袭相关mce基因情况,原核表达mce基因并制备其抗血清,了解问号钩体感染细胞前后mce基因转录水平的变化。方法:采用PCR扩增13株问号钩体和1株双曲钩体全长mce基因片段,T-A克隆后测序。采用基因工程技术构建mce基因原核表达系统,SDS-PAGE联合Bio-Rad凝胶图象分析系统检查目的重组蛋白rMce表达情况,采用Western Blot对表达的rMce进行鉴定。采用皮内免疫法制备兔抗rMce血清,免疫双扩散试验测定其效价。采用实时荧光定量RT-PCR,检测问号钩体黄疸出血群赖型56601株感染J774A.1细胞前后mce基因转录水平的变化。结果:我国13株问号钩体株均携带mce基因,双曲钩体三宝垄群patoc型Patoc株则否。与报道的序列(GenBank accession No.:NP_712236)比较,所克隆的mce基因核苷酸和氨基酸序列相似性分别为99.02%～100%和97.91%～100%。所构建的mce基因原核表达系统能表达rMce,其产量为细菌总蛋白的5%。问号钩体56601株全菌抗血清能有效识别rMce。问号钩体56601株感染细胞后mce基因转录水平明显上调。结论:mce基因仅存在于致病性的问号钩体中,且其转录水平呈细胞接触上调模式,表明该基因与问号钩体致病性密切相关。mce基因产物是序列保守的外膜蛋白。所构建的mce基因原核表达系统及所制备的rMce抗血清为深入研究该基因功能提供了有效的手段。

关键词：钩端螺旋体,问号基因表达序列分析,DNA mce基因克隆/表达实时荧光定量RT—PCR

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5种药敏方法检测产KPC酶肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素的耐药性

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浙江检验医学 2008年第4期 3-6页

作者：杨青杜小幸俞云松李兰娟传染病诊治国家重点实验室浙江大学医学院附属第一医院检验科传染病诊治国家重点实验室浙江大学医学院附属第一医院传染科

目的评价临床常用的5种药敏方法对KPC酶介导碳青霉烯类抗生素耐药性的检出率。方法36株经PCR证实产KPC酶的肠杆菌科细菌(包括32株肺炎克雷伯菌、1株大肠埃希菌、1株弗氏枸橼酸杆菌、1株产酸克雷伯菌和1株黏质沙雷菌),用琼脂稀释法、纸... 详细信息

目的评价临床常用的5种药敏方法对KPC酶介导碳青霉烯类抗生素耐药性的检出率。方法36株经PCR证实产KPC酶的肠杆菌科细菌(包括32株肺炎克雷伯菌、1株大肠埃希菌、1株弗氏枸橼酸杆菌、1株产酸克雷伯菌和1株黏质沙雷菌),用琼脂稀释法、纸片扩散法检测各菌株对亚胺培南、美罗培南和厄他培南的耐药性,ATB G-5药敏卡检测亚胺培南、美罗培南耐药性,VITEK2AST-GN13药敏卡检测亚胺培南、厄他培南的耐药性,BD Phoenix NMIC-109药敏卡检测亚胺培南的耐药性。结果BD Phoenix、ATB、VITEK2、琼脂稀释法、纸片扩散法检测亚胺培南耐药率分别为11.1%(4株)、13.9%(5株)、13.9%(5株)、22.2%(8株)、68.6%(25株);ATB、纸片扩散法、琼脂稀释法检测美罗培南耐药率分别为22.2%(8株)、47.2%(17株)、55.6%(20株);VITEK2、琼脂稀释法、纸片扩散法检测厄他培南耐药率分别为69.4%(25株)、77.8%(28株)和88.9%(32株)。VITEK2和琼脂稀释法厄他培南对所有产KPC酶菌株MIC≥2μg/ml。结论纸片扩散法和琼脂稀释法比仪器法更能检出KPC酶介导的碳青霉烯类抗生素的耐药性,厄他培南可作为筛选产KPC酶菌株的指示药物。

关键词：药敏方法 KPC酶耐药性

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人巨细胞病毒活动性感染及术前HBV感染与肝移植术后糖尿病初步研究

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浙江检验医学 2008年第2期 3-6页

作者：张旋范骏陈晓明高海女杨美芳赵宏马伟杭浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室

目的研究肝移植术后糖尿病与人巨细胞病毒(HCMV)活动性感染、术前HBV感染的关系。方法回顾性分析75例术前无糖尿病肝移植患者临床资料,观察患者移植术后糖尿病(post transplantation diabetes mellitus,PTDM)的发生、移植术后HCMV活动... 详细信息

目的研究肝移植术后糖尿病与人巨细胞病毒(HCMV)活动性感染、术前HBV感染的关系。方法回顾性分析75例术前无糖尿病肝移植患者临床资料,观察患者移植术后糖尿病(post transplantation diabetes mellitus,PTDM)的发生、移植术后HCMV活动性感染及术前HBV感染的情况。结果PTDM发生率为17.3%(13/75)。术后HCMV活动性感染组PTDM发生率(23.1%)明显高于无活动性感染组(4.3%)(P<0.05)。术前HBV感染者PTDM发病率较未感染者高(21.1%与5.6%,P>0.05);HBVDNA与术后PTDM的发病无关(P>0.05);术前HBsAg(+)、HBeAg(+)、HBcAb(+)组,HBsAg(+)、HBeAb(+)、HBcAb(+)组,HBsAg(+)、HBcAb(+)组,发生PTDM情况无统计学差异(P>0.05)。结论肝移植术后糖尿病的发生可能与术后HCMV活动性感染有关,与术前HBV感染无关。

关键词：肝移植移植术后糖尿病(PTDM) 人巨细胞病毒(HCMV) HBV

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人巨细胞病毒感染中的细胞免疫机制

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国际流行病学传染病学杂志 2008年第3期35卷 182-184,I0004页

作者：赵宏马伟杭浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所传染病诊治国家重点实验室杭州310003

人巨细胞病毒（HCMV）在人群中普遍易感，免疫力正常者多为隐性感染，可终身携带病毒。感染后，病毒激活机体免疫系统，产生病毒清除作用。在机体清除HCMV的免疫应答中，与机体其他免疫相比，固有免疫中的免疫细胞和获得性免疫中的细胞... 详细信息

人巨细胞病毒（HCMV）在人群中普遍易感，免疫力正常者多为隐性感染，可终身携带病毒。感染后，病毒激活机体免疫系统，产生病毒清除作用。在机体清除HCMV的免疫应答中，与机体其他免疫相比，固有免疫中的免疫细胞和获得性免疫中的细胞免疫起着更为重要的作用，同时巨细胞病毒也通过一系列的逃逸反应来对抗上述免疫的清除作用。

关键词：巨细胞病毒细胞免疫逃逸反应

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载脂蛋白A—Ⅰ与病毒感染的关系

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国际流行病学传染病学杂志 2008年第3期35卷 168-170,177页

作者：翁俊华陈智刘艳宁李淑萍浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所传染病诊治国家重点实验室杭州310003

载脂蛋白A-Ⅰ（apoA-Ⅰ）是高密度脂蛋白的主要结构蛋白之一。apoA-Ⅰ和动脉粥样硬化的负相关性已得到广泛的认同，对它们之间的关系已有了广泛而深入的研究。近年研究发现，apoA-Ⅰ和病毒感染之间也有很大相关性。此文综述了apoA-Ⅰ的... 详细信息

载脂蛋白A-Ⅰ（apoA-Ⅰ）是高密度脂蛋白的主要结构蛋白之一。apoA-Ⅰ和动脉粥样硬化的负相关性已得到广泛的认同，对它们之间的关系已有了广泛而深入的研究。近年研究发现，apoA-Ⅰ和病毒感染之间也有很大相关性。此文综述了apoA-Ⅰ的基本结构、功能、在病毒感染中的作用，在其基础上，展望了apoA-Ⅰ的应用前景。

关键词：载脂蛋白A-Ⅰ 高密度脂蛋白病毒感染

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