检索结果-内蒙古大学图书馆

中成药 2016年第1期38卷 19-24页

作者：肖润梅王俊俊李德秀陈勇湖北省中西医结合医院湖北武汉430015 湖北省中药生物技术省重点实验室湖北武汉430062

目的通过肝微粒细胞色素P4502E1(CYP2E1)观察氢溴酸槟榔碱(arecoline hydrobromide)诱导大鼠肝脏氧化应激性损伤。方法雄性Wistar大鼠连续灌胃给药氢溴酸槟榔碱7 d,测定大鼠肝组织中抗氧化活性指标,HPLC法测定探针底物在大鼠肝微粒温孵... 详细信息

目的通过肝微粒细胞色素P4502E1(CYP2E1)观察氢溴酸槟榔碱(arecoline hydrobromide)诱导大鼠肝脏氧化应激性损伤。方法雄性Wistar大鼠连续灌胃给药氢溴酸槟榔碱7 d,测定大鼠肝组织中抗氧化活性指标,HPLC法测定探针底物在大鼠肝微粒温孵体系中特征代谢物的生成量评价CYP2E1的酶活性。RT-PCR技术检测肝脏组织Cyp2e1 m RNA水平。结果与对照组相比,大鼠灌胃7 d后,肝组织中过氧化氢酶(CAT)、还原性谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性随口服氢溴酸槟榔碱剂量的加大都出现不同程度的降低,100 mg/(kg·d)氢溴酸槟榔碱时出现显著性差异(P<0.01);4 mg/(kg·d)氢溴酸槟榔碱使大鼠肝脏CYP2E1的活性提高了1.66倍(P<0.05)。结论氢溴酸槟榔碱对大鼠肝脏CYP2E1的诱导作用与肝脏氧化应激性损伤有关。

关键词：氢溴酸槟榔碱大鼠肝微粒体细胞色素P4502E1 高效液相色谱(HPLC) 氧化应激

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miR-29b2c重组腺病毒的构建及对胃癌细胞增殖和迁移的影响

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生物工程学报 2017年第7期33卷 1136-1144页

作者：骆爱玲杜春园赵雪梅梁继超陈勇湖北大学中药生物技术省重点实验室生物资源绿色转化湖北省协同创新中心湖北武汉430062

构建了miR-29b2c重组腺病毒Ad-miR-29b2c,考察了其对HGC-27、MGC-803胃癌细胞增殖及迁移的抑制作用。采用PCR从基因组扩增miR-29b2c片段,并克隆至腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV中,构建穿梭质粒pAdT-29b2c,经酶切及测序鉴定。穿梭质粒经Pm... 详细信息

构建了miR-29b2c重组腺病毒Ad-miR-29b2c,考察了其对HGC-27、MGC-803胃癌细胞增殖及迁移的抑制作用。采用PCR从基因组扩增miR-29b2c片段,并克隆至腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV中,构建穿梭质粒pAdT-29b2c,经酶切及测序鉴定。穿梭质粒经PmeⅠ线性化后与腺病毒骨架载体共转化BJ5183感受态,产生重组腺病毒质粒Ad-miR-29b2c,再经PacⅠ线性化后转染293A细胞进行包装。重组腺病毒扩增后感染HGC-27细胞,通过MTT及细胞迁移实验观察Ad-miR-29b2c对HGC-27、MGC-803细胞增殖及迁移的影响。采用Western blotting检测Ad-miR-29b2c对HGC-27、MGC-803细胞δ-catenin蛋白表达的影响。酶切、测序及荧光定量PCR结果表明重组腺病毒构建成功,miR-29b及miR-29c在HGC-27细胞过表达。MTT实验表明Ad-miR-29b2c能显著抑制HGC-27、MGC-803细胞增殖。细胞迁移实验表明Ad-miR-29b2c能显著抑制HGC-27、MGC-803细胞迁移。此外,Ad-miR-29b2c能显著降低HGC-27、MGC-803细胞δ-catenin蛋白表达水平。综上所述,构建了miR-29b2c的重组腺病毒,并发现其可以抑制胃癌细胞HGC-27和MGC-803的增殖及迁移,该作用可能与miR-29抑制HGC-27、MGC-803细胞δ-catenin蛋白表达有关。

关键词： miR-29 胃癌重组腺病毒基因治疗

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山麦冬的HPLC/ESI-MS特征指纹图谱研究

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中草药 2005年第9期36卷 1395-1397页

作者：韩凤梅李紫蔡敏张玲陈勇湖北大学中药生物技术省重点实验室湖北武汉430062

目的研究山麦冬Liriopespicata甲醇提取物中的物质组成情况,建立山麦冬HPLC/ESI-MS特征指纹图谱。方法山麦冬用甲醇超声提取,提取液经C18SPE固相萃取柱除去多糖成分后,用高效液相色谱-电喷雾离子阱质谱(HPLC/ESI-MS)分析提取物中的物质... 详细信息

目的研究山麦冬Liriopespicata甲醇提取物中的物质组成情况,建立山麦冬HPLC/ESI-MS特征指纹图谱。方法山麦冬用甲醇超声提取,提取液经C18SPE固相萃取柱除去多糖成分后,用高效液相色谱-电喷雾离子阱质谱(HPLC/ESI-MS)分析提取物中的物质组成。结果山麦冬甲醇提取物色谱图中有17个共有峰的重现性与精密度的RSD<5%,建议以此为基础制作山麦冬特征指纹图谱。结论应用HPLC/ESI-MS技术建立的山麦冬指纹图谱特征性强、重现性较好,可用于山麦冬的品质评价与品种鉴别。

关键词：湖北麦冬高效液相色谱-电喷雾离子阱质谱指纹图谱

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和厚朴酚及其代谢物在正常及2型糖尿病大鼠体内的药动学与组织分布对比研究

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药学学报 2018年第6期53卷 987-992页

作者：王俊俊汪玲余学进陈勇湖北大学中药生物技术省重点实验室生物资源绿色转化湖北省协同创新中心湖北武汉430062

本文旨在对比研究和厚朴酚在正常及2型糖尿病大鼠体内的药动学及组织分布差异。采用高脂饮食联合低剂量链脲佐菌素的方法造模,灌胃50 mg·kg^(-1)和厚朴酚后,采用HPLC法检测正常及糖尿病大鼠和厚朴酚及代谢产物在血浆及组织中的浓度... 详细信息

本文旨在对比研究和厚朴酚在正常及2型糖尿病大鼠体内的药动学及组织分布差异。采用高脂饮食联合低剂量链脲佐菌素的方法造模,灌胃50 mg·kg^(-1)和厚朴酚后,采用HPLC法检测正常及糖尿病大鼠和厚朴酚及代谢产物在血浆及组织中的浓度,计算药代动力学参数。结果表明糖尿病模型组和厚朴酚的AUC0-t(3 004.7±391.4μg·h L^(-1))、Cmax(614.7±182.4μg·L^(-1))相对于正常对照组AUC0-t(3 827.2±926.9μg·h·L^(-1))、Cmax(872.5±233.1μg·L^(-1))显著降低(P<0.05),模型组代谢产物M2的Cmax(2 785.3±756.3μg·L^(-1))和AUC0-t(6 830.6±2660.4μg·h·L^(-1))都大于正常对照组(Cmax为1 711.9±1 026.4μg·L^(-1),AUC0-t为5 472.9±2 527.2μg·h·L^(-1)),且Cmax有极显著性差异(P<0.01)。糖尿病模型组大鼠肝脏、肾脏和脑中和厚朴酚暴露量均高于正常对照组,M1在模型组肝脏中的暴露量高于正常组;M2在模型组肝脏和肾脏中的暴露量高于正常组。说明在糖尿病病理状态下,和厚朴酚及其代谢产物的药动学和组织分布发生了一定改变。

关键词：和厚朴酚糖尿病药动学组织分布

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山麦冬多糖的分离纯化及单糖组成研究

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中草药 2007年第1期38卷 30-31页

作者：韩凤梅程伶俐李路军陈勇湖北大学中药生物技术省重点实验室湖北武汉430062

山麦冬为百合科植物湖北麦冬Liriope spicata（Thunb．）*** ***的干燥块根，是湖北大宗道地药材。现代研究表明，其主要活性成分山麦冬多糖有降血糖、延缓衰老、抗疲劳、辅助抑制肿瘤、抗辐射等作用。而目前对于山麦冬多糖的分离纯化... 详细信息

山麦冬为百合科植物湖北麦冬Liriope spicata（Thunb．）*** ***的干燥块根，是湖北大宗道地药材。现代研究表明，其主要活性成分山麦冬多糖有降血糖、延缓衰老、抗疲劳、辅助抑制肿瘤、抗辐射等作用。而目前对于山麦冬多糖的分离纯化及单糖组成分析尚未见报道。本实验分离纯化得到了一种水溶性山麦冬多糖，并对其相对分子质量及单糖组成进行了研究。

关键词：山麦冬多糖单糖组成分离纯化辅助抑制肿瘤相对分子质量百合科植物湖北麦冬道地药材

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野鸦椿根抑制肝脂堆积活性部位及其化学成分研究

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中草药 2017年第8期48卷 1519-1523页

作者：田珂李燕慈龙慧张少君李路军湖北大学中药生物技术湖北省重点实验室生物资源绿色转化湖北省协同创新中心湖北武汉430062

目的研究野鸦椿Euscaphis japonica根抑制肝脂堆积活性部位及其化学成分。方法萃取法制备不同极性部位,以油酸诱导的Hep G2细胞脂堆积模型、油红O染色观察细胞内脂滴的堆积,并检测细胞内三酰甘油(TG)的量筛选抑制肝脂堆积活性部位,并采... 详细信息

目的研究野鸦椿Euscaphis japonica根抑制肝脂堆积活性部位及其化学成分。方法萃取法制备不同极性部位,以油酸诱导的Hep G2细胞脂堆积模型、油红O染色观察细胞内脂滴的堆积,并检测细胞内三酰甘油(TG)的量筛选抑制肝脂堆积活性部位,并采用硅胶、Sephadex LH-20、HPLC等多种色谱技术对活性部位进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据鉴定化合物结构。结果石油醚部位能显著抑制油酸诱导的Hep G2细胞内脂滴的堆积并降低TG的量,从中分离得到9个化合物,分别鉴定为3β,19-二羟基-24-反式-阿魏酰基-熊果烷-12-烯-28-酸(1)、β-谷甾醇(2)、7-羟基-2-辛烯-5-内酯(3)、3,3′-二甲氧基-鞣花酸(4)、香草醛(5)、5-羰基-四氢呋喃-3-甲酸乙酯(6)、没食子酸(7)、3,3′-二甲氧基-鞣花酸-4-(5″-乙酰基)-α-L-阿拉伯糖苷(8)、佛手柑内酯(9)。结论石油醚部位为野鸦椿根抑制肝脂堆积活性部位,化合物1、6、8和9为首次从该属植物中分离得到。

关键词：野鸦椿脂堆积活性部位 3β,19-二羟基-24-反式-阿魏酰基-熊果烷-12-烯-28-酸 5-羰基-四氢呋喃-3-甲酸乙酯

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普洱茶中茶多酚和茶多糖的提取工艺研究

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湖北大学学报（自然科学版） 2007年第3期29卷 277-279页

作者：王恒松吕新勇喻世涛陈勇湖北大学中药生物技术湖北省重点实验室湖北武汉430062

以普洱茶为材料、水为提取溶剂,通过正交设计考察了浸提温度、浸提时间、溶剂用量、浸提次数4个因素对其所含茶多酚和茶多糖提取得率的影响,优化茶多酚和茶多糖综合提取工艺.结果表明,最佳提取工艺条件为浸提温度80℃,浸提时间1 h,溶剂... 详细信息

以普洱茶为材料、水为提取溶剂,通过正交设计考察了浸提温度、浸提时间、溶剂用量、浸提次数4个因素对其所含茶多酚和茶多糖提取得率的影响,优化茶多酚和茶多糖综合提取工艺.结果表明,最佳提取工艺条件为浸提温度80℃,浸提时间1 h,溶剂用量(固液比)1∶10,浸提次数1次.在优化的提取工艺条件下,提取物干物质得率为20.65%,其中茶多酚含量为30.47%,茶多糖含量为57.26%,且该提取物作用于高脂饮食小鼠降脂效果显著.

关键词：普洱茶茶多酚茶多糖

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大黄蒽醌类化合物电喷雾质谱研究

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湖北大学学报（自然科学版） 2006年第4期28卷 403-406页

作者：马小红沈少林韩凤梅陈勇湖北大学中药生物技术湖北省重点实验室湖北武汉430062

采用电喷雾-离子阱质谱(ESI-ITMS)法,通过一级质谱全扫描和二级质谱碰撞诱导解离技术,研究5种大黄蒽醌衍生物(大黄素、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素甲醚、大黄酚)的质谱行为及分子结构与裂解规律间的关系,并对大黄药材中总游离蒽醌提取... 详细信息

采用电喷雾-离子阱质谱(ESI-ITMS)法,通过一级质谱全扫描和二级质谱碰撞诱导解离技术,研究5种大黄蒽醌衍生物(大黄素、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素甲醚、大黄酚)的质谱行为及分子结构与裂解规律间的关系,并对大黄药材中总游离蒽醌提取物进行了电喷雾质谱检测.实验结果显示,5种大黄蒽醌类化合物一级质谱负离子出峰较好,被测样品均为基峰或第二强峰,未发现聚合体离子及加合离子产生,二级质谱各碎片离子归属明确,特征性强.实验结果可应用于大黄蒽醌类化合物的结构分析及进一步的代谢产物研究,并为大黄药材有效成分的鉴定提供了一种快速,灵敏的检测方法.

关键词：大黄蒽醌电喷雾质谱特征图谱

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东莨菪碱大鼠肠内菌代谢研究

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湖北大学学报（自然科学版） 2006年第4期28卷 414-416页

作者：陈怀侠杜鹏韩凤梅陈勇湖北大学中药生物技术湖北省重点实验室湖北武汉430062

用液相色谱-电喷雾离子阱串联质谱(LC-ESIITMSn)联用法进行了东莨菪碱大鼠肠内菌中的代谢研究.以东莨菪碱优化色谱及质谱条件,总结其色谱及质谱行为规律.将东莨菪碱与大鼠肠内菌体外厌氧温孵培养,和空白样品及东莨菪碱标准品相比较,依... 详细信息

用液相色谱-电喷雾离子阱串联质谱(LC-ESIITMSn)联用法进行了东莨菪碱大鼠肠内菌中的代谢研究.以东莨菪碱优化色谱及质谱条件,总结其色谱及质谱行为规律.将东莨菪碱与大鼠肠内菌体外厌氧温孵培养,和空白样品及东莨菪碱标准品相比较,依据被测物的多级质谱数据,鉴定代谢物并阐述其结构.结果在温孵液中发现了东莨菪碱的水解代谢产物莨菪品.该方法灵敏度高、专属性好、样品前处理简单、快速,适合于药物代谢分析.

关键词：东莨菪碱液相色谱-串联质谱法代谢物

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原儿茶酸与拉米夫定体外联合抗HBV药效学研究

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湖北大学学报（自然科学版） 2011年第2期33卷 193-196页

作者：吴文华张晓雷韩凤梅湖北大学中药生物技术湖北省重点实验室湖北武汉430062

为观察拉米夫定(3TC)与原儿茶酸(PA)联合应用抗乙型肝炎病毒(HBV)的作用,在HepG2.2.15细胞培养液中分别加入适当浓度的3TC、PA、3TC+PA溶液,每4 d换用含相同药物浓度的新鲜培养液,第8天末取上清液,用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测上清... 详细信息

为观察拉米夫定(3TC)与原儿茶酸(PA)联合应用抗乙型肝炎病毒(HBV)的作用,在HepG2.2.15细胞培养液中分别加入适当浓度的3TC、PA、3TC+PA溶液,每4 d换用含相同药物浓度的新鲜培养液,第8天末取上清液,用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测上清液中HbsAg和HbeAg的量,用荧光定量PCR(FQ-PCR)检测培养液中HBV DNA的拷贝数,计算不同药物处理对HepG2.2.15细胞分泌HbsAg、HbeAg及HBV DNA的抑制率,并用金正均Q值法分析联合用药的抗HBV效果,确定联合用药的最佳配比及给药剂量.结果表明,与单用PA或3TC组相比,当PA∶3TC≥100时,联合用药组对HepG2.2.15细胞HbeAg和HBV DNA有相加抑制作用,对HbsAg有协同抑制作用.

关键词：原儿茶酸拉米夫定抗乙型肝炎病毒 HepG2.2.15细胞

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