检索结果-内蒙古大学图书馆

中华消化杂志 2011年第8期31卷 523-526页

作者：何向民娄毅宋清斌李建华中国医科大学附属第一医院消化科沈阳110001 中国医科大学基础医学院医学遗传学教研室中国医科大学附属第一医院普外科沈阳110001 中国医科大学附属第一医院病理科沈阳110001

目的探讨RNA干扰沉默生长抑制因子1（ING1）基因表达对胃腺癌AGS细胞凋亡的影响。方法人胃腺癌细胞株AGS经常规培养后分为空白对照组、阴性对照组[转染阴性对照小干扰RNA（siRNA）序列]、siRNA组（转染特异性ING1 siRNA序列）。应用免... 详细信息

目的探讨RNA干扰沉默生长抑制因子1（ING1）基因表达对胃腺癌AGS细胞凋亡的影响。方法人胃腺癌细胞株AGS经常规培养后分为空白对照组、阴性对照组[转染阴性对照小干扰RNA（siRNA）序列]、siRNA组（转染特异性ING1 siRNA序列）。应用免疫荧光、定量PCR和免疫印迹方法检测转染后不同时间的ING1基因表达沉默效果。应用流式细胞技术检测ING1基因表达沉默对AGS细胞凋亡的影响。结果ING1主要在AGS细胞胞质中表达。在荧光定量PCR技术检测中将空白对照组的ING1基因表达量设为1，则转染后24和40h阴性对照组的ING1基因相对表达量分别为0．88±0．16和0．92±0．13，siRNA组ING1基因相对表达量分别为0．38±0．09和0．17±0．06。空白对照组和阴性对照组比较，P值分别=0．78和0．82。空白对照组和siRNA组比较，P值均=0．01。阴性对照组和siRNA组比较，P值分别=0．02和0．01。免疫印迹技术检测结果显示，转染后40hAGS细胞中ING1蛋白表达水平明显下调。空白对照组AGS细胞凋亡率为11．06％±0．97％，阴性对照组、siRNA组转染40h后AGS细胞凋亡率为11．82％±0．69％和6．70％±0．41％。空白对照组与siRNA组比较P=0．024。空白对照组与阴性对照组比较P=0．76。阴性对照组与siRNA组比较P=0．019。结论ING1在人胃癌细胞凋亡过程中发挥重要作用，可能成为胃癌基因治疗的新靶点。

关键词： RNA干扰胃肿瘤腺癌基因,肿瘤抑制基因表达细胞凋亡

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广东一成骨不全Ⅱ型高危胎儿的产前基因诊断

广东一成骨不全Ⅱ型高危胎儿的产前基因诊断

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2011年第11届中华医学会儿科学分会内分泌遗传代谢学组学术会议

作者：艾阳唐佳郭奕斌方群中山大学中山医学院医学遗传学教研室广州，510080 中山大学附属一院妇产科胎儿医学中心广州，510080

对广东一疑似致死性侏儒症或成骨不全Ⅱ型的高危胎儿实施产前基因诊断，以阐明胎儿骨发育异常的真实病因，防止患胎出生。介绍了诊断方法，结果显示，此高危胎儿为成骨不全Ⅱ型患胎，应及时终止妊娠。

关键词：高危胎儿成骨不全Ⅱ型产前基因诊断终止妊娠

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细粒棘球蚴重组抗原mMDH用于囊型包虫病血清学诊断的初步研究

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宁夏医科大学学报 2011年第3期33卷 216-218页

作者：李宗吉赵巍王娅娜张焱王洁王淑静宁夏医科大学科学技术研究中心银川750004 宁夏医科大学基础医学院医学遗传学与细胞生物学教研室银川750004

目的探讨细粒棘球蚴重组抗原(rEgmMDH)对囊型包虫病的血清学诊断价值。方法将已构建的原核表达菌株mMDH/pET-28a/BL21■lysS,用IPTG诱导表达,经亲和层析纯化获得高纯度rEgmMDH,以rEgmMDH为抗原,应用ELISA和Western-blotting方法对40例... 详细信息

目的探讨细粒棘球蚴重组抗原(rEgmMDH)对囊型包虫病的血清学诊断价值。方法将已构建的原核表达菌株mMDH/pET-28a/BL21■lysS,用IPTG诱导表达,经亲和层析纯化获得高纯度rEgmMDH,以rEgmMDH为抗原,应用ELISA和Western-blotting方法对40例手术确诊的囊型包虫病病人血清进行了回顾性检测与分析。结果 ELISA和Western-blotting方法检测囊型包虫病病人血清阳性率为92.5%(37/40);Western-blotting方法显示囊型包虫病病人血清可特异性识别重组抗原,泡球蚴病人汇集血清不能识别重组抗原。结论 rEgmMDH具有较好的抗原性,可作为囊型包虫病血清学检测的候选诊断抗原。

关键词：细粒棘球蚴 rEgmMDH 囊型包虫病血清学诊断

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联合干扰人端粒酶逆转录酶和端粒重复序列结合因子2基因的表达对乳腺癌MCF-7细胞生长的抑制作用

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中华肿瘤杂志 2010年第2期32卷 93-97页

作者：陈绍坤刘岚税青林余红曾永秋赵娇泸州医学院医学遗传学教研室 646000

目的探讨联合干扰人端粒酶逆转录酶（hTERT）基因和端粒重复序列结合因子2（TRF2）基因在乳腺癌基因治疗中的协同效应。方法构建表达小分子干扰RNA（siRNA）-hTERT和siRNA-TRF2的重组腺病毒载体rAd-hTERT和rAd-TRF2，单独或联合转染人... 详细信息

目的探讨联合干扰人端粒酶逆转录酶（hTERT）基因和端粒重复序列结合因子2（TRF2）基因在乳腺癌基因治疗中的协同效应。方法构建表达小分子干扰RNA（siRNA）-hTERT和siRNA-TRF2的重组腺病毒载体rAd-hTERT和rAd-TRF2，单独或联合转染人乳腺癌MCF-7细胞。采用Westernblot法检测MCF-7细胞中hTERT和TRF2蛋白的表达，采用四甲基偶氮唑蓝（MTF）法检测MCF-7细胞的增殖抑制情况，采用流式细胞仪检测MCF-7细胞的细胞周期变化，采用细胞平板克隆形成实验检测MCF-7细胞的克隆形成能力。结果转染48h后，PBS对照组、空载体对照组、阴性对照组、rAd—hTERT转染组、rAd-TRF2转染组以及rAd—hTERT和rAd-TRF2联合转染组乳腺癌MCF-7细胞中hTERT蛋白的相对表达量分别为1．00、0．94±0．02、0．95±0．04、0．18±0．04、0．95±0．01和0．18±0．04；TRF2蛋白的相对表达量分别为1．00、1．01±0．08、0．96±0．02、0．95±0．08、0．22±0．01和0．26±0．02。单独转染tad—hTERT或tad—TRF2后，乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制率仅为54．6％和48．4％，有8．9％±1．2％和9．2％±2．3％的细胞进入分裂期，66．4％±1．5％和64．6％±1．9％的细胞阻滞于G0＋G1期，细胞的克隆形成能力显著下降；联合转染rAd—hTERT和rAd—TRF2后，乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制率高达82．1％，进入分裂期的MCF-7细胞明显减少（为4．4％±1．2％），大量细胞阻滞于G0＋G1期（为81．4％±1．3％），细胞的克隆形成能力下降更加明显。结论联合干扰hTERT和TRF2基因较单基因干扰可获得更有效的乳腺癌基因治疗效果。

关键词：人端粒酶逆转录酶端粒重复序列结合因子2 肿瘤 RNA干扰乳腺癌细胞

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脑胶质瘤相关癌基因同源1基因R405Q多态与法洛四联症的相关性研究

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中国综合临床 2011年第9期27卷 897-900页

作者：邱广蓉刘培燕姜红堃刘红波孙开来中国医科大学基础医学院医学遗传学教研室沈阳110001 中国医科大学附属第一医院儿科中国医科大学公共卫生学院卫生统计学教研室

目的探讨脑胶质瘤相关的癌基因同源1（GLI1）基因R405Q多态与法洛四联症（TOF）的相关性。方法选择TOF患儿112例（病例组）和200名健康体检儿童（对照组），采用病例对照研究，应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）检测G... 详细信息

目的探讨脑胶质瘤相关的癌基因同源1（GLI1）基因R405Q多态与法洛四联症（TOF）的相关性。方法选择TOF患儿112例（病例组）和200名健康体检儿童（对照组），采用病例对照研究，应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）检测GLI1基因R405Q多态（NCBISNP1D：rs114543757），分析基因型频率和等位基因频率在病例组和对照组的分布，比较不同基因型和等位基因与TOF患病风险的关系。结果GLI1基因R405Q多态位点基因型频率在病例组和对照组中的分布差异无统计学意义（x2=5．317，P=0．07），但等位基因频率在病例组和对照组中的分布差异有统计学意义（x。=6．790，P=0．009），且A等位基因携带者患病风险高于G等位基因携带者（OR=1．561，95％CI为1．116—2．185）。结论GLI1基因R405Q多态与TOF具有明显的相关性，具有A等位基因的个体患病风险增高，GLI1基因可能是TOF的遗传易感基因。

关键词：法洛四联症 GLI1基因基因多态

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三棱、莪术抗大鼠肝纤维化的作用机理探讨

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山东医药 2010年第37期50卷 25-27页

作者：李娟单长民赵永德滨州医学院附属医院山东滨州256603 滨州医学院医学遗传学教研室

目的观察肝纤维化大鼠的肝细胞凋亡和肝组织中的bax、bcl-2蛋白表达情况,探讨其抗肝纤维化的作用机理。方法以腹腔注射猪血清制备大鼠肝纤维化模型,三棱、莪术灌胃处理大鼠。以HE染色观察大鼠肝脏组织病理变化,TUNEL法检测细胞凋亡,免... 详细信息

目的观察肝纤维化大鼠的肝细胞凋亡和肝组织中的bax、bcl-2蛋白表达情况,探讨其抗肝纤维化的作用机理。方法以腹腔注射猪血清制备大鼠肝纤维化模型,三棱、莪术灌胃处理大鼠。以HE染色观察大鼠肝脏组织病理变化,TUNEL法检测细胞凋亡,免疫组化法检测bax、bcl-2蛋白表达。结果三棱、莪术能改善肝脏组织病理学变化,降低肝纤维化大鼠的细胞凋亡、bax蛋白表达,提高bcl-2蛋白表达。结论三棱、莪术通过调节细胞凋亡相关蛋白表达,抑制细胞凋亡,起到抗肝纤维化作用。

关键词：三棱莪术肝纤维化细胞凋亡 bax bcl-2 大鼠

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亲缘系数在近亲婚配子女复发风险计算中的应用范围

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生物学教学 2010年第12期35卷 50-51页

作者：杨军厚杨玥单长民山东省滨州医学院药学院医学遗传学教研室

本文结合实例就亲缘系数在近亲婚配子女发病风险率计算中的应用范围进行讨论。

关键词：亲缘系数发病风险应用范围

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EN1调节UTIROPHIN表达机制

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遗传 2011年第4期33卷 347-352页

作者：王谦曹东华林长坤王正东崔婉婷金春莲中国医科大高职学院沈阳110001 中国人民解放军第二0二医院检验科沈阳110003 中国医科大学基础医学院医学遗传学教研室沈阳110001

为了探讨人类UTROPHIN蛋白表达上调的可能因素，文章利用P—match软件预测人类UTROPHhV基因启动子区域可能的调控元件，立用CHIP和EMSA实验加以验证，并利用RNA干扰和荧光定量PCR的方法分析人类ENl转录因子调节UTROPHIN表达的作用机制。... 详细信息

为了探讨人类UTROPHIN蛋白表达上调的可能因素，文章利用P—match软件预测人类UTROPHhV基因启动子区域可能的调控元件，立用CHIP和EMSA实验加以验证，并利用RNA干扰和荧光定量PCR的方法分析人类ENl转录因子调节UTROPHIN表达的作用机制。经P—match软件预测，UTROPHIN基因启动予区域有2个转录因子ENl的可能结合位点，经CHIP和EMSA实验证实位点2是真正结合位点。通过RNA干扰实验，发现在HeLa细胞中ENI基因沉默后，可使UTROPHIN mRNA水平上调。以UTROPHIN蛋白为靶点可能为DMD（Duchenne muscular dystrophy）基因治疗提供一种新的策略。

关键词： UTROPHIN蛋白 EN1转录因子 RNA干扰荧光定量PCR

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三磷酸腺苷结合盒转运子A1在真核细胞中的表达及对细胞抗砷性的影响

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中国地方病学杂志 2010年第3期29卷 258-261页

作者：杨丽谢菁仙玲玲张金莉徐文静新疆石河子大学医学院医学遗传学教研室 832002

目的研究含有三磷酸腺苷结合盒转运子A1（ABCA1）基因的真核表达载体pcDNA3.1/ABCA1转染真核细胞后,在细胞中的表达及对细胞抗砷性的影响.方法由脂质体介导将pcDNA3.1/ABCA1重组质粒转染入人HeLa细胞中（转染重组质粒组）,同时设转染... 详细信息

目的研究含有三磷酸腺苷结合盒转运子A1（ABCA1）基因的真核表达载体pcDNA3.1/ABCA1转染真核细胞后,在细胞中的表达及对细胞抗砷性的影响.方法由脂质体介导将pcDNA3.1/ABCA1重组质粒转染入人HeLa细胞中（转染重组质粒组）,同时设转染空质粒组及未转染组作为对照,用实时定量PCR法检测各组细胞ABCA1 mRNA表达水平,用蛋白免疫印记法（Western blot）检测ABCA1蛋白的表达.转染48 h后,以不同剂量[0（对照）、4、8、16、32、64、128 μmol/L]亚砷酸钠（NaAsO2）染毒,用四甲基偶氮噻唑蓝（MTT）法检测细胞生存率.结果转染重组质粒组、转染空质粒组及未转染组ABCA1 mRNA表达量分别为（2.09±0.08）×10^-4、（0.09±0.02）×10^-4、（0.08±0.02）×10^-4,组间比较差异有统计学意义（F=1499.23,P〈0.01）,其中转染重组质粒组ABCA1 mRNA表达量高于转染空质粒组和未转染组（P均〈0.01）.转染重组质粒组、转染空质粒组及未转染组在相对分子质量（Mr）为254 × 10^3处均有特异性蛋白条带,其大小与ABCA1蛋白大小相符,且转染重组质粒组蛋白表达量明显高于转染空质粒组及未转染组.在NaAsO2剂量为4、8、16、32、64、128μmol/L时,转染重组质粒组细胞生存率[（94.8±0.9）%、（86.5±2.6）%、（77.8±2.0）%、（56.0±2.0）%、（23.8±1.7）%、（18.6±0.6）%]均高于转染空质粒组[（85.3±1.1）%、（78.7±0.6）%、（67.8±2.4）%、（43.2±1.5）%、（14.5±1.3）%、（8.0±0.4）%],二者比较差异有统计学意义（t值分别为18.985、6.689、5.922、9.504、9.481、32.634,P均〈0.01）.结论 ABCA1基因经转染后在HeLa细胞中呈现高表达状态,并使HeLa细胞对砷的耐受性提高.

关键词：三磷酸腺苷结合盒转运子A1 质粒转染真核细胞抗砷性

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黏多糖贮积症IVA型植入前遗传学诊断的方法学研究

黏多糖贮积症IVA型植入前遗传学诊断的方法学研究

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2011年第11届中华医学会儿科学分会内分泌遗传代谢学组学术会议

作者：郭奕斌赵燕唐佳蒋玮莹艾阳吴晓昀沈晓婷杜敏联中山大学中山医学院医学遗传学教研室广州，510080 中山大学附属第一医院生殖医学中心广州，510080 中山大学附属第一医院儿科内分泌专科广州，510080

文章介绍了建立各种快速特异、行之有效的胚胎植入前遗传学诊断(Preimplantation Genetic Diagnosis，PGD)的方法，为实施黏多糖贮积症IVA型(mucopolysaccharidosis type IVA，MPSIvA)的PGD创造必要的前提条件。简要介绍了ARMS、DHPLC... 详细信息

文章介绍了建立各种快速特异、行之有效的胚胎植入前遗传学诊断(Preimplantation Genetic Diagnosis，PGD)的方法，为实施黏多糖贮积症IVA型(mucopolysaccharidosis type IVA，MPSIvA)的PGD创造必要的前提条件。简要介绍了ARMS、DHPLC、酶切鉴定、DNA序列分析在内的多种快速、特异的检测方法，并比较了这些方法的优劣。

关键词：黏多糖贮积症IVA型胚胎植入遗传学诊断检测方法学

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