检索结果-内蒙古大学图书馆

生物化学与生物物理进展 2014年第12期41卷 1214-1221页

作者：张云龙瞿少刚南方医科大学基础医学院免疫学教研室广州510515

真核生物高亲和力谷氨酸转运体(excitatory amino acid transporters,EAATs)分为GLAST(EAAT1)、GLT-1(EAAT2)、EAAC1(EAAT3)、EAAT4和EAAT5等5个亚型.高亲和力谷氨酸转运体结构学的研究,揭示了谷氨酸转运体的跨膜拓扑结构、真核和原核生物EAATs结构的差异,以及在底物转运过程中的一些底物和协同转运离子的结合位点.其功能学的研究发现,EAATs在参与突触的传递,避免兴奋性氨基酸的毒性效应中发挥重要作用,同时也参与了对学习、记忆以及运动行为的调控.结合我们既往的工作,就近几年EAATs的结构和功能研究做一综述.

关键词：高亲和力谷氨酸转运体结构功能

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HD的病因、胚胎及分子生物学

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山东医药 1997年第7期37卷 41-42页

作者：傅廷亮王运平滨州医学院附属医院滨州医学院免疫学教研室

ＨＤ的病因、胚胎及分子生物学滨州医学院附属医院（２５６６０３）滨州医学院免疫学教研室傅廷亮王运平先天性巨结肠（ＨＤ）的特征是结肠远段神经丛中神经节细胞先天性缺如。尽管ＨＤ的病因尚未完全阐明，但随着免疫组化和重组ＤＮＡ... 详细信息

ＨＤ的病因、胚胎及分子生物学滨州医学院附属医院（２５６６０３）滨州医学院免疫学教研室傅廷亮王运平先天性巨结肠（ＨＤ）的特征是结肠远段神经丛中神经节细胞先天性缺如。尽管ＨＤ的病因尚未完全阐明，但随着免疫组化和重组ＤＮＡ技术的应用，近年来有关ＨＤ病因的研...

关键词：儿童先天性巨结肠症病因胚胎分子生物学

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葡萄球菌肠毒素B突变体的纯化及其活性

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复旦学报（医学版） 2001年第3期28卷 187-190页

作者：俞红钱利生熊思东复旦大学基础医学院微生物学教研室上海200032 复旦大学基础医学院免疫学教研室上海200032

目的　从基因重组菌中纯化葡萄球菌肠毒素B(SEB)突变体及其野生型蛋白 ,研究其毒力及抗原性。方法　表达野生型SEB蛋白 (SEB N)和SEB突变体 (SEB M2 3、SEB 1 50 )的 3株重组菌经IPTG诱导 ,反复冻融后 ,制备细菌裂解液。将初步纯化的... 详细信息

目的　从基因重组菌中纯化葡萄球菌肠毒素B(SEB)突变体及其野生型蛋白 ,研究其毒力及抗原性。方法　表达野生型SEB蛋白 (SEB N)和SEB突变体 (SEB M2 3、SEB 1 50 )的 3株重组菌经IPTG诱导 ,反复冻融后 ,制备细菌裂解液。将初步纯化的抗SEB抗血清与CNBr活化的Sepharose 4B作共价偶联 ,制成亲和层析柱。分柱纯化SEB N、SEB M2 3和SEB M1 50蛋白。用SDS PAGE和酚试剂改良法对纯化蛋白作纯度鉴定和定量 ;用双向免疫扩散试验和ELISA法作抗原性鉴定 ;用小鼠致死性试验作毒力鉴定。结果　SDS PAGE和双向免疫扩散试验表明 ,3种纯化蛋白均为单一条带 ,且都能与抗SEB抗体形成明显的沉淀线。ELISA表明SEB N、SEB M2 3、SEB M 1 50与抗SEB抗体有相似的结合力 ,提示 2 3位突变和 1 50位突变并未改变SEB的抗原表位。小鼠致死性试验表明 ,LPS激发的 3组小鼠 ( 6只 /组 ) ,分别用上述纯化蛋白攻击 ( 1 0 μg/只 ) ,SEB N组死亡率为 5/6;SEB M1 50组死亡率为 4 /6;SEB M2 3组死亡率为 0 /6;即使SEB M 2 3剂量增至 2 0 0 μg ,小鼠仍无死亡。结论　获得了SEB N、SEB M2 3和SEB M1 50 3种纯化蛋白 ,其中SEB突变体都保留了抗原性 ;SEB M 2 3与野生型SEB相比 ,毒力明显下降。为进一步研究其作为新型淋巴细胞激?

关键词：葡萄球菌肠毒素B 突变性纯化毒力抗原性

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LAIR-1对人急性髓系白血病细胞HEL增殖、凋亡和迁移的影响

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现代免疫学 2017年第5期37卷 385-389页

作者：吴肖婕周嘉迪曹奇志薛江楠滨州医学院免疫学教研室烟台264003

研究人白细胞相关免疫球蛋白样受体1(leukocyte-associated immunoglobulin-like receptor 1,LAIR-1)对人红白血病细胞HEL增殖、凋亡和迁移的影响,探讨LAIR-1在急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)中的作用。采用LAIR-1慢病毒表达载体(LV-LAIR-1)转染HEL细胞,建立稳定高表达LAIR-1的HEL细胞株,分别采用流式细胞术、激光扫描共聚焦显微技术、western blotting和RT-PCR鉴定LAIR-1分子的表达效率。采用CCK-8试剂盒、FITC Annexin V凋亡试剂盒和Transwell迁移实验分别检测LAIR-1对HEL细胞增殖、凋亡和迁移能力的影响。实验结果显示,经LVLAIR-1转染的HEL细胞高表达LAIR-1分子,阳性率达到85%以上;功能实验结果显示,与对照组细胞相比,LAIR-1能够显著抑制HEL细胞的增殖(P<0.001),并且促进其凋亡(P<0.01),但是对细胞迁移能力无明显影响(P>0.05)。上述研究结果显示,LAIR-1分子的表达能够影响人AML细胞的生物学功能。

关键词： LAIR-1 白血病增殖凋亡迁移

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降低T细胞DAPK1表达以促进BCG疫苗诱导的抗结核菌感染反应的机制

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解剖学研究 2025年第2期47卷 105-114页

作者：刘子炫刘敏潘勤武汉大学泰康医学院(基础医学院)人体解剖学教研室武汉大学泰康医学院(基础医学院)免疫学系

目的探讨死亡相关蛋白激酶1（DAPK1）促进CD4+T细胞死亡的机制;并在小鼠结核病疫苗BCG免疫过程中下调CD4+T细胞DAPK1水平,评估以上干预提升疫苗效能以对抗结核菌（***）感染的效果。方法体外实验:利用慢病毒载体系统对CD4+T细胞系MOL... 详细信息

目的探讨死亡相关蛋白激酶1（DAPK1）促进CD4+T细胞死亡的机制;并在小鼠结核病疫苗BCG免疫过程中下调CD4+T细胞DAPK1水平,评估以上干预提升疫苗效能以对抗结核菌（***）感染的效果。方法体外实验:利用慢病毒载体系统对CD4+T细胞系MOLT-4进行DAPK1过表达、敲低或敲低后回补,同时使用CD3、CD28抗体活化细胞后行流式细胞术检测细胞死亡,免疫印迹验证凋亡蛋白Caspase-3的表达水平;利用腺相关病毒载体（AAV）-shDapk1系统敲低小鼠脾脏CD4+T细胞DAPK1,RT-qPCR以及WB检测敲低效果。动物实验:利用AAV-shDapk1敲低小鼠脾脏CD4+T细胞DAPK1,BCG免疫小鼠后,FCM检测小鼠体内记忆性CD4+T细胞水平和细胞因子水平;进行*** H37Ra感染实验,通过病理切片和肺组织菌落计数,验证下调DAPK1对BCG疫苗效能的提升作用。结果 DAPK1敲低后MOLT-4细胞死亡率由（2.36±0.38）%降至（0.94±0.11）%（P<0.01）,并且Caspase-3蛋白水平也因DAPK1的敲低而减少;同样地,过表达DAPK1后细胞死亡率由（2.00±0.10）%增加至（5.54±0.23）%（P<0.01）;在敲低DAPK1细胞中回补DAPK1后死亡率由（0.90±0.35）%增加至（3.04±0.14）%（P<0.01）。AAV-shDapk1体外转染小鼠脾淋巴细胞后WB以及RT-qPCR结果显示DAPK1表达水平降低。动物实验,AAV-shDapk1处理组小鼠体内CD4+中央记忆性T细胞（TCM）死亡率由（23.74±2.22）%降至（18.46±2.89）%（P<0.001）,AAV-shDapk1处理小鼠相比空载对照组CD4+T细胞中TCM百分率由（8.93±0.52）%升至（10.94±0.71）%（P<0.01）;AAV-shDapk1处理小鼠TNF-α、IFN-α、IL-2的上升水平较为明显,相比于AAV空载对照组,shDapk1处理组CD4+T细胞中TNF-α百分率由(0.21±0.04%升至(1.99±0.20%（P<0.01）;IFN-α百分率由(0.33±0.06%升至(0.77±0.15%（P<0.01）;IL-2百分率由(0.71±0.10%升至(2.48±0.08%（P<0.01）;*** H37Ra攻毒后,菌落计数显示AAV-shDapk1处理小鼠体内感染细菌数量显著减少,病理组织切片显示该组肺脏坏死程度较轻,脾脏中淋巴样白髓和红髓更加明显,AAV-shDapk1处理小鼠的肺脏和肝脏病理组织评分相比空载对照组也有所改善。结论 DAPK1可在T细胞中提高凋亡蛋白Caspase-3表达水平并抑制T细胞存活,将小鼠体内CD4+T细胞的DAPK1敲低有利于CD4+T细胞存活以及CD4+TCM的增多,这有助于提升BCG疫苗效能以帮助宿主对抗***感染。

关键词：死亡相关蛋白激酶1 CD4+T细胞腺相关病毒载体中央记忆性T细胞

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B7H4在人骨髓源间充质干细胞对PHA活化T细胞增殖抑制中的作用

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中华血液学杂志 2009年第10期30卷 689-693页

作者：栾希英于文征曹奇志付强张海霞滨州医学院免疫学教研室山东省烟台市264003 滨州医学院附属医院血液科

目的研究B7H4在人骨髓源间充质干细胞（HBMSC）介导的免疫抑制中的作用。方法应用RT-PCR和流式细胞术分别检测B7H4在HBMSC上的表达；应用抗体阻断实验分析B7H4在HBMSC对PHA活化下T细胞活化、增殖及周期影响中的作用；Transwell细胞培养... 详细信息

目的研究B7H4在人骨髓源间充质干细胞（HBMSC）介导的免疫抑制中的作用。方法应用RT-PCR和流式细胞术分别检测B7H4在HBMSC上的表达；应用抗体阻断实验分析B7H4在HBMSC对PHA活化下T细胞活化、增殖及周期影响中的作用；Transwell细胞培养系统分析HBMSC对T细胞增殖抑制的作用方式。结果HBMSC上高表达免疫负性调控分子B7H4。应用B7H4单克隆抗体（单抗）阻断HBMSC上B7H4的表达，T细胞增殖刺激指数（SI）在抗体阻断组为27±17，与未阻断组（15±8）相比差异有统计学意义（P〈0．01）；T细胞周期中G0／G1期和S期细胞数量分别为（85．6±9．9）％和（5．8±3．2）％，与未阻断组[（95．8±9．9）％，（2．3±2．2）％]相比差异有统计学意义（P值均〈0．05），B7H4单抗明显减弱HBMSC对T细胞增殖的影响。将HBMSC与T细胞进行物理分隔后，T细胞增殖SI为53±5，与直接接触组（15±3）相比差异有统计学意义（P〈0．01）。结论HBMSC高表达B7H4分子，并在HBMSC介导的T细胞增殖抑制中发挥重要作用。

关键词：骨髓细胞间充质干细胞 T淋巴细胞 B7H4 细胞增殖

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胸腺素α1串联体的表达、纯化及生物学活性检测

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中国生物制品学杂志 2005年第2期18卷 111-113,122页

作者：宫照龙徐义辉展瑞高昱蒋作君滨州医学院免疫学教研室滨州256603

目的　表达胸腺素α1 (Thymosinalpha1,Tα1 )三串体 ,并进行纯化及生物学活性鉴定。方法　使用大肠杆菌偏爱密码子 ,人工合成Tα1 三串体 (Tα1 ③ )基因 ,在表达载体pET -2 2b(+)中克隆 ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,IPTG诱导表达 ,经DEA... 详细信息

目的　表达胸腺素α1 (Thymosinalpha1,Tα1 )三串体 ,并进行纯化及生物学活性鉴定。方法　使用大肠杆菌偏爱密码子 ,人工合成Tα1 三串体 (Tα1 ③ )基因 ,在表达载体pET -2 2b(+)中克隆 ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,IPTG诱导表达 ,经DEAE SepharoseFF阴离子柱纯化Tα1 ③蛋白 ,采用Westernblot鉴定表达产物 ,MTT法检测其生物学活性。结果　获得了纯化的Tα1 ③蛋白 ,相对分子质量约为 10 0 0 0 ,并具有Tα1 ③的生物学活性。结论　利用基因串联表达小分子多肽是一种可行的方法。

关键词：生物学活性串联表达纯化胸腺素α1 蛋白基因 ET 偏爱密码子 IPTG 诱导表达

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肿瘤浸润T淋巴细胞与卵巢癌预后

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现代妇产科进展 2010年第7期19卷 546-548页

作者：曹奇志滨州医学院免疫学教研室烟台264003

卵巢癌死亡率居妇科恶性肿瘤首位,预后差。免疫因素与卵巢癌发生发展及预后的相关性已成为国内外免疫学家关注的热点。研究发现,肿瘤浸润T淋巴细胞与卵巢癌的预后密切相关。深入研究肿瘤浸润T淋巴细胞与卵巢癌预后,将指导卵巢癌患者的... 详细信息

卵巢癌死亡率居妇科恶性肿瘤首位,预后差。免疫因素与卵巢癌发生发展及预后的相关性已成为国内外免疫学家关注的热点。研究发现,肿瘤浸润T淋巴细胞与卵巢癌的预后密切相关。深入研究肿瘤浸润T淋巴细胞与卵巢癌预后,将指导卵巢癌患者的个性化手术治疗、化疗及免疫治疗,改善预后。本文总结了肿瘤浸润T淋巴细胞与卵巢癌预后相关性的研究进展。

关键词：肿瘤浸润T淋巴细胞卵巢肿瘤预后

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抑制性受体LAIR-1在巨核细胞系Dami上的表达及PMA对其表达的影响

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现代免疫学 2010年第6期30卷 453-457页

作者：赵海亚张晓姝郭玉洁薛江楠滨州医学院免疫学教研室烟台264003

研究LAIR-1在巨核细胞系上的表达,探讨其表达与巨核细胞分化发育的关系,为深入研究LAIR-1在巨核细胞造血中的作用奠定基础。分别通过RT-PCR技术和流式细胞术在核酸和蛋白质水平上检测LAIR-1在巨核细胞系HEL、Dami、Mo7e中的表达。应用PM... 详细信息

研究LAIR-1在巨核细胞系上的表达,探讨其表达与巨核细胞分化发育的关系,为深入研究LAIR-1在巨核细胞造血中的作用奠定基础。分别通过RT-PCR技术和流式细胞术在核酸和蛋白质水平上检测LAIR-1在巨核细胞系HEL、Dami、Mo7e中的表达。应用PMA和TPO刺激Dami细胞分化,流式细胞术和激光共聚焦显微镜技术检测Dami细胞分化过程中CD41a、CD42b和LAIR-1分子的表达。结果显示:Dami细胞中LAIR-1分子在核酸水平上呈现高表达,但膜蛋白表达水平很低。在PMA诱导Dami细胞分化过程中LAIR-1分子膜表达水平显著上调,PMA未刺激的Dami细胞中LAIR-1分子的阳性表达率为2.78%±0.50%,PMA刺激6 d后,Dami细胞中LAIR-1分子的阳性表达率为49.52%±1.86%。PMA可显著诱导Dami细胞中LAIR-1分子的表达;Dami细胞的分化与LAIR-1分子的表达水平之间存在因果关系;由于PMA是PKC的激活剂,LAIR-1分子表达水平可能受PKC信号通路的调节。

关键词：巨核细胞抑制性受体 LAIR-1 PMA TPO

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胶原及其受体的研究进展

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国际免疫学杂志 2010年第6期33卷 420-422页

作者：赵海亚张晓姝滨州医学院免疫学教研室菏泽200032

细胞外基质蛋白中的胶原在多细胞动物的进化中扮演重要的角色。在组织中，细胞锚定在含有胶原的结构上，通常细胞间通过基质蛋白连接的方式相互作用，但是细胞也表达受体，受体具有直接结合胶原中三股螺旋主链的能力。越来越多的证据表... 详细信息

细胞外基质蛋白中的胶原在多细胞动物的进化中扮演重要的角色。在组织中，细胞锚定在含有胶原的结构上，通常细胞间通过基质蛋白连接的方式相互作用，但是细胞也表达受体，受体具有直接结合胶原中三股螺旋主链的能力。越来越多的证据表明，这些受体通过与胶原中特定基序结合发挥作用。

关键词：胶原三股螺旋受体

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