检索结果-内蒙古大学图书馆

微生物学报 2020年第8期60卷 1709-1717页

作者：王小敏徐祥兰徐鹏王兴开惠禄露范红结何孔旺遵义医科大学微生物学教研室贵州遵义563000 江苏省农业科学院兽医研究所江苏南京210014 南京农业大学动物医学院江苏南京210095

【目的】通过高通量测序的方法获得PCV2感染3D4/21细胞的miRNAs表达谱,并探讨miRNA-98在PCV2复制中的作用。【方法】本研究以猪肺泡巨噬细胞系3D4/21细胞为细胞模型,对PCV2感染过程中的3D4/21细胞进行miRNAs差异表达分析,筛选与病毒复... 详细信息

【目的】通过高通量测序的方法获得PCV2感染3D4/21细胞的miRNAs表达谱,并探讨miRNA-98在PCV2复制中的作用。【方法】本研究以猪肺泡巨噬细胞系3D4/21细胞为细胞模型,对PCV2感染过程中的3D4/21细胞进行miRNAs差异表达分析,筛选与病毒复制相关的特异性miRNAs,并探讨其在PCV2复制中的作用。【结果】经高通量测序,获得PCV2感染3D4/21细胞的miRNAs表达谱,结合实验室前期研究筛选获得miRNA-98。实验表明,miRNA-98的表达量随PCV2感染时间的延长而持续升高,其变化趋势与Cap蛋白表达变化基本一致,由此推测miRNA-98与PCV2复制正相关。过表达miRNA-98可显著上调Cap蛋白的表达量和PCV2的复制。进一步的研究表明,miRNA-98参与调节宿主免疫相关细胞因子的表达和PCV2的复制。【结论】miRNA-98可通过调节免疫相关细胞因子的表达调控宿主免疫功能,帮助PCV2逃逸宿主免疫,促进PCV2在3D4/21细胞中的复制。这些发现不仅为深入了解PCV2与宿主之间的关系提供了新视角,还有望为猪圆环病毒相关疾病的防控提供新的抗病毒策略。

关键词：猪圆环病毒2型微小RNA-98 复制

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甘肃巴丹吉林沙漠细菌多样性及其产酶特性

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生物资源 2021年第2期43卷 143-152页

作者：阚雨李帅胡超建李文均黄劲赵亮董宇华康颖倩贵州医科大学基础医学院微生物学教研室贵州贵阳550025 贵州省微生物与人类健康关系研究人才基地暨贵州省普通高校病原生物学特色重点实验室贵州贵阳550025 中山大学生命科学学院广东广州510275 贵州医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室贵州贵阳550025

为系统地探索甘肃巴丹吉林沙漠土壤中细菌多样性并评估其潜在的应用价值,采集6个代表性样点的沙漠土壤,运用高通量测序技术评估沙漠土壤细菌的群落结构和预测功能特征,同时选用5种培养基对其中细菌进行分离培养,并对代表性的菌株进行酶... 详细信息

为系统地探索甘肃巴丹吉林沙漠土壤中细菌多样性并评估其潜在的应用价值,采集6个代表性样点的沙漠土壤,运用高通量测序技术评估沙漠土壤细菌的群落结构和预测功能特征,同时选用5种培养基对其中细菌进行分离培养,并对代表性的菌株进行酶活性筛选。免培养结果显示,甘肃巴丹吉林沙漠土壤中的细菌分属于30门70纲155目227科343属,这些微生物主要参与碳氮硫等元素循环和有机物降解,此外还检测到1.5%的未知微生物。通过纯培养方法共获得368株细菌,归类于4门20目37科64属,其中24株属于潜在新分类单元,菌株中18.3%有淀粉酶活性,51.7%产蛋白酶以及55.5%有酯酶活性。结果表明甘肃巴丹吉林沙漠土壤中蕴藏着多样性较高、功能酶丰富的微生物资源,具有重要的研究意义和应用价值。

关键词：巴丹吉林沙漠扩增子分离培养功能预测生物多样性功能酶

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寨卡病毒、登革病毒、黄热病毒、基孔肯雅病毒微流控荧光定量RT-PCR检测方法的建立及评价

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中华实验和临床病毒学杂志 2020年第2期34卷 186-190页

作者：余东阳李阿茜刘洋李乃哲朱禹李川李建东王世文李德新梁米芳柳燕安徽医科大学基础医学院微生物学教研室合肥230032 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京102206

目的结合微流控与荧光定量RT-PCR技术建立寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)、登革病毒(dengue virus,DENV)、黄热病毒(yellow fever virus,YFV)和基孔肯雅病毒(chikungunya virus,CHIKV)的快速核酸检测方法,以实现这4种病毒感染的快速诊断。... 详细信息

目的结合微流控与荧光定量RT-PCR技术建立寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)、登革病毒(dengue virus,DENV)、黄热病毒(yellow fever virus,YFV)和基孔肯雅病毒(chikungunya virus,CHIKV)的快速核酸检测方法,以实现这4种病毒感染的快速诊断。方法以ZIKV的NS1基因、DENV和YFV的NS5基因以及CHIKV的E1基因作为靶序列设计4组特异性引物探针;用体外转录RNA评价方法的灵敏性;用其他病毒核酸评价方法的特异性;ZIKV、YFV、CHIKV检测方法采用模拟阳性样本,DENV检测方法采用临床患者标本进行验证,并与传统荧光定量RT-PCR检测方法进行比较。结果ZIKV、DENV、YFV、CHIKV4种方法的最低检出限分别是14.57拷贝/μl、94.27拷贝/μl、8.25拷贝/μl、223.19拷贝/μl;4种检测方法与其他病毒核酸无交叉反应;ZIKV、YFV、CHIKV模拟阳性样本检出率为100%,各浓度检测Ct值的变异系数均在2%左右;20份DENV临床患者标本检出率为100%,与传统荧光定量RT-PCR检测方法结果一致。结论本研究建立的ZIKV、DENV、YFV、CHIKV微流控荧光定量RT-PCR检测方法具有良好的灵敏性、特异性、稳定性,25 min内即可完成1次检测,可适用于现场实验室检测与早期诊断。

关键词：微流控荧光定量RT-PCR 寨卡病毒登革病毒黄热病毒基孔肯雅病毒

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寨卡病毒RNA恒温快速扩增检测方法的建立

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病毒学报 2020年第4期36卷 610-616页

作者：朱禹李阿茜刘洋李乃哲余东阳李川李建东王世文李德新梁米芳柳燕安徽医科大学基础医学院微生物学教研室合肥230032 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京102206

2015年以来,寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)感染被报告和小头症之间存有关联,已有多个国家和地区报告ZIKV感染证据,我国持续面对ZIKV输入风险。为发展适用于现场的快速高效的ZIKV核酸检测方法,选取ZIKV NS1片段保守区设计特异性引物探针,经... 详细信息

2015年以来,寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)感染被报告和小头症之间存有关联,已有多个国家和地区报告ZIKV感染证据,我国持续面对ZIKV输入风险。为发展适用于现场的快速高效的ZIKV核酸检测方法,选取ZIKV NS1片段保守区设计特异性引物探针,经优化建立了多种功能蛋白介导的ZIKV RNA恒温快速扩增检测方法。利用所制备的ZIKV NS1片段体外转录RNA作为参考品,并与实时荧光定量RT-PCR检测结果进行比较。同时利用ZIKV细胞培养物中加入健康人血清制备的模拟临床标本进行初步验证。结果显示,建立的RNA恒温快速扩增检测方法可100%检出100拷贝/μL体外转录RNA,可在15 min以内判读,大大低于PCR的常规检测时间;用该方法检测其他相关病毒,无交叉反应。病毒滴度在(104~107 PFU/mL)之间的模拟临床病人标本可达到100%检出。本研究建立的ZIKV RNA恒温扩增快速检测方法快速、灵敏、特异,适用于ZIKV现场应急检测,为ZIKV的防控提供了重要的技术支撑。

关键词：寨卡病毒(ZIKV) RNA恒温快速扩增核酸检测

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鸡源禽流感病毒H6N6亚型在猪呼吸道组织的复制及其基因特点

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广西医科大学学报 2020年第4期37卷 581-585页

作者：庞夏凤王熹婧高灵茜朱银川林裕贵李程颐张增峰广西医科大学基础医学院微生物学教研室南宁530021

目的:探讨H6N6亚型禽流感病毒(AIV)是否跨种间屏障传播感染猪及其基因特点。方法:将3株鸡源性H6N6亚型AIV体外感染猪呼吸道组织,观察病毒在猪呼吸道组织复制及其病理变化,同时应用基因测序法,比较H6N6亚型AIV各基因片段的变化,筛选H6N6... 详细信息

目的:探讨H6N6亚型禽流感病毒(AIV)是否跨种间屏障传播感染猪及其基因特点。方法:将3株鸡源性H6N6亚型AIV体外感染猪呼吸道组织,观察病毒在猪呼吸道组织复制及其病理变化,同时应用基因测序法,比较H6N6亚型AIV各基因片段的变化,筛选H6N6亚型AIV在猪复制的基因特点。结果:病毒体外接种猪呼吸道组织后病毒分离阳性,肺局部细胞出现坏死,肺泡细胞内病毒核蛋白(NP)抗原阳性,其中A/CK/ZZ/346/2014(ZZ346)病毒株复制能力较强。基因测序和分析显示,H6N6亚型AIV的血凝素(HA)裂解位点模式属低致病性病毒,ZZ346病毒株HA出现P186T突变、HA的158位点有氨基酸缺失以及神经氨酸酶(NA)颈区出现11个氨基酸(59~69)缺失。结论:鸡源性H6N6亚型AIV可感染猪;H6N6病毒HA出现P186T突变、HA158位点出现氨基酸缺失以及NA颈区出现11个氨基酸(59~69)缺失有助于病毒在猪体内有效复制。

关键词：甲型流感病毒 H6N6亚型复制基因特点猪

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4,4'-二甲氧基查耳酮改善高脂饲养小鼠的胰岛素敏感性

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基础医学与临床 2021年第1期41卷 77-81页

作者：张伟虹赵微李春美解相宏姚红刘晓军山西医科大学基础医学院微生物学与免疫学教研室山西太原030001 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的观察黄酮类药物4,4'-二甲氧基查耳酮(DMC)在高脂饲养的小鼠中胰岛素敏感性的变化,并探讨其作用机制。方法将高脂喂养的野生型C57/BL 6小鼠分为对照组和实验组每隔1 d按3μg/kg腹腔分别注射药物DMC和溶剂DMSO。每周检测记录两组... 详细信息

目的观察黄酮类药物4,4'-二甲氧基查耳酮(DMC)在高脂饲养的小鼠中胰岛素敏感性的变化,并探讨其作用机制。方法将高脂喂养的野生型C57/BL 6小鼠分为对照组和实验组每隔1 d按3μg/kg腹腔分别注射药物DMC和溶剂DMSO。每周检测记录两组小鼠进食和体质量,在第6周检测小鼠糖耐量(GTT)、胰岛素耐量(ITT)和丙酮酸钠耐量(PTT)实验;用免疫组化和HE染色检测小鼠脂肪组织变化。结果与对照组小鼠相比,DMC实验组小鼠在给药后体质量及进食差异无统计学意义。ITT实验结果显示DMC实验组小鼠胰岛素水平得到改善(P<0.05),GTT和PTT实验结果差异无统计学意义。脂肪组织HE染色显示对照组小鼠脂肪组织内有炎性细胞渗出,F4/80免疫组化染色结果提示DMC实验组小鼠脂肪组织内巨噬细胞浸润减少。结论药物DMC可以通过减少脂肪组织内巨噬细胞浸润改善高脂饲养小鼠的胰岛素敏感性。

关键词： 4 4'-二甲氧基查耳酮(DMC) 脂肪组织炎性反应胰岛素敏感性

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铜绿假单胞菌必需基因的研究进展

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微生物学通报 2021年第6期48卷 2143-2154页

作者：张明月胡福泉黄广涛遵义医科大学第一临床学院贵州遵义563000 陆军军医大学(第三军医大学)基础医学院微生物学教研室重庆400038 遵义医科大学附属医院烧伤整形外科贵州省临床(创面修复)研究中心贵州遵义563000

铜绿假单胞菌为专性需氧非发酵革兰氏阴性杆菌,是医院感染的常见条件致病菌之一,可引起呼吸道、泌尿道、烧伤创面和菌血症等严重感染。铜绿假单胞菌耐药形势日益严峻,给临床治疗带来困难。必需基因是生长过程中必不可少的看家基因,对铜... 详细信息

铜绿假单胞菌为专性需氧非发酵革兰氏阴性杆菌,是医院感染的常见条件致病菌之一,可引起呼吸道、泌尿道、烧伤创面和菌血症等严重感染。铜绿假单胞菌耐药形势日益严峻,给临床治疗带来困难。必需基因是生长过程中必不可少的看家基因,对铜绿假单胞菌必需基因进行深入研究,不仅有助于了解细菌的生长、毒力等基本特性,也有助于筛选新的抗菌药物靶标。本文针对铜绿假单胞菌及其必需基因进行综述,首先介绍了铜绿假单胞菌的基本生理特性及目前耐药趋势,又归纳了必需基因的研究方法,最后对铜绿假单胞菌必需基因的研究进展进行总结。

关键词：铜绿假单胞菌必需基因转座子生物信息学 CRISPRi

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医教协同视角下CBL教学改革研究与实践

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教育现代化 2020年第49期 37-40页

作者：罗家明陈蓉川北医学院附属医院神经内科川北医学院微生物学与免疫学教研室

《医学微生物学》研究的微生物种类众多、内容繁杂,学习过程中易懂难记,加之各种新发的、再发的传染性疾病层出不穷,新的诊疗技术层出叠现,给医学生的学习带来一定的困扰,教学难度大。本研究将医教协同下CBL教学模式引入《医学微生物学... 详细信息

《医学微生物学》研究的微生物种类众多、内容繁杂,学习过程中易懂难记,加之各种新发的、再发的传染性疾病层出不穷,新的诊疗技术层出叠现,给医学生的学习带来一定的困扰,教学难度大。本研究将医教协同下CBL教学模式引入《医学微生物学》的教学中,发现本教学方式能激发学生自主学习兴趣,提高学生学习能力,培养学生临床思维,同时提升《医学微生物学》的教学质量。

关键词：《医学微生物学》教学改革医教协同 CBL教学

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现有显微镜镜油及其替代试剂的理化特性分析

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实验与检验医学 2022年第4期40卷 425-427页

作者：刘珍君李鹤鸣张竹艳于楠钟照华商庆龙哈尔滨医科大学基础医学院微生物学教研室黑龙江哈尔滨150081 哈尔滨医科大学病原学实验教学中心黑龙江哈尔滨150081 哈尔滨医科大学药学实验教学中心黑龙江哈尔滨150081

目的检测现有镜油及潜在的替代试剂的理化特性,为新型镜油研制提供数据。方法选取国内外采用的镜油及潜在的替代试剂共16种,测定并分析折光率、数值孔径、吸光度、透光率、粘度、酸值和光学观察等理化指标。结果植物油系列和化学试... 详细信息

目的检测现有镜油及潜在的替代试剂的理化特性,为新型镜油研制提供数据。方法选取国内外采用的镜油及潜在的替代试剂共16种,测定并分析折光率、数值孔径、吸光度、透光率、粘度、酸值和光学观察等理化指标。结果植物油系列和化学试剂类试剂的折光率约1.470,香柏油和合成镜油的折光率约1.510。香柏油类试剂酸值高,而合成镜油的酸值低,透光率高,粘度适中。结论合成镜油是显微镜用镜油的最优选择,应加强新型合成镜油的研发。

关键词：显微镜用镜油替代试剂理化特性

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NDV-HN致人肺腺癌A549细胞凋亡的实验研究

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肿瘤学杂志 2020年第3期26卷 198-203页

作者：田雯钰林宇宁梁莹黄娟娟李瑞樊晓晖广西医科大学基础医学院微生物学教研室广西南宁530021

[目的]探讨NDV-HN诱导人肺腺癌A549细胞凋亡的相关机制。[方法](1)构建包含绿色荧光素蛋白(GFP)及NDV-HN的慢病毒sfGFP-HN载体,用293V细胞包装慢病毒LvsfGFP-HN,用293V细胞进行空载质粒转染组(空载组)慢病毒包装,命名为Lv-sfGFP;(2)以... 详细信息

[目的]探讨NDV-HN诱导人肺腺癌A549细胞凋亡的相关机制。[方法](1)构建包含绿色荧光素蛋白(GFP)及NDV-HN的慢病毒sfGFP-HN载体,用293V细胞包装慢病毒LvsfGFP-HN,用293V细胞进行空载质粒转染组(空载组)慢病毒包装,命名为Lv-sfGFP;(2)以空载组A549-sfGFP细胞和空白组A549为对照,用慢病毒转染方法建立稳定表达NDV-HN蛋白的A549细胞株,即A549-sfGFP-HN细胞株,RT-PCR、Western blot检测A549细胞NDVHN蛋白的表达;(3)分别在A549-sfGFP-HN和A549两组细胞中加入顺铂,流式细胞术检测细胞凋亡;(4)在基因水平和蛋白水平上分别用RT-PCR和Western blot检测各组细胞凋亡相关蛋白Bcl-2的表达。[结果](1)Lv-sfGFP-HN和Lv-sfGFP慢病毒分别转染A549细胞后,只在转染组A549-sfGFP-HN细胞检测到NDV-HN蛋白。(2)转染组A549-sfGFP-HN细胞凋亡率明显高于空白组A549细胞(P<0.01),转染组A549-sfGFP-HN细胞加入顺铂后,其细胞凋亡率明显增加。(3)转染组A549-sfGFP-HN细胞与空载质粒转染组A549细胞和空白组A549细胞相比,凋亡相关蛋白Bcl-2表达量明显下调(P<0.01)。[结论]慢病毒转染NDV-HN到A549细胞后导致A549-sfGFP-HN细胞出现凋亡,且与Bcl-2下调有关。转染NDV-HN的肺癌细胞联合使用抗癌药物顺铂,增加了肺癌细胞凋亡率。

关键词：新城疫病毒 A549细胞血凝素神经氨酸酶 Bcl-2 细胞凋亡

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