检索结果-内蒙古大学图书馆

四川大学学报（医学版） 2008年第1期39卷 48-51页

作者：丁艳章为黄倩彭谨赵秀军徐爱丽周雪四川大学华西基础医学与法医学院组织胚胎学与神经生物学教研室成都610041 河北医科大学组织胚胎学教研室滨州医学院生理学教研室

目的研究部分去背根对神经生长抑制因子Sema3A在脊髓及其受体NP-1在备用背根节内表达的影响。方法建立猫的单侧备用背根模型,分别在术后7d、14d取L3、L5、L6脊髓节段及手术侧L6背根节进行免疫组织化学ABC法染色,同时设置正常对照组。脊... 详细信息

目的研究部分去背根对神经生长抑制因子Sema3A在脊髓及其受体NP-1在备用背根节内表达的影响。方法建立猫的单侧备用背根模型,分别在术后7d、14d取L3、L5、L6脊髓节段及手术侧L6背根节进行免疫组织化学ABC法染色,同时设置正常对照组。脊髓背角内检测Sema3A免疫阳性产物的平均光密度值(OD值),背根节内计数NP-1阳性中小神经元数。结果在L3脊髓节段,Sema3A的表达术后7d(0.25±0.14)、14d(0.27±0.09)较正常对照组(0.37±0.87)减弱(P<0.05);在L5脊髓节段,Sema3A的表达术后7d(0.26±0.11)较正常组减弱(P<0.05),术后14d(0.33±0.09)时有所恢复;L6脊髓节段各组Sema3A的表达无明显变化。背根节内,术后7dNP-1阳性中小神经元数(30.85±10.26)较正常组(45.06±12.47)减少(P<0.05),14d时阳性中小神经元数(40.73±12.25)较7d时有所增加(P<0.05)。结论脊髓部分去背根后,Sema3A及其受体NP-1表达的时空变化可能与脊髓损伤后可塑性有关。

关键词： Sema3A NP-1 部分去背根猫

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溶原性噬菌体对铜绿假单胞菌生物被膜形成的影响

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四川大学学报（医学版） 2008年第6期39卷 886-889页

作者：杜宝中曾蔚陶传敏康梅刘梅张再蓉贾文祥西藏大学医学院病原生物学教研室拉萨850000 四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室四川大学华西医院实验医学科

目的研究铜绿假单胞菌(PA3094)溶原性噬菌体Ppa3094对该菌生物被膜形成的影响。方法采用平板培养法建立PA3094及PA3094-L(带前噬菌体Ppa3094的溶原性菌株)两株菌的体外生物被膜模型;MTT法测定生物被膜形成过程中两株菌的生物被膜活菌量... 详细信息

目的研究铜绿假单胞菌(PA3094)溶原性噬菌体Ppa3094对该菌生物被膜形成的影响。方法采用平板培养法建立PA3094及PA3094-L(带前噬菌体Ppa3094的溶原性菌株)两株菌的体外生物被膜模型;MTT法测定生物被膜形成过程中两株菌的生物被膜活菌量;实时荧光定量PCR测定两株菌在培养不同时间点藻酸盐合成基因algC、algD的表达量。结果两株菌均在培养5～7 d时形成成熟的生物被膜,呈薄膜状。在生物被膜形成过程中,两株菌的生物被膜菌量存在明显差异,在整个生物被膜形成过程中,PA3094生物被膜菌量均比PA3094-L高;PA3094-L在培养第5 d时生物被膜菌量达最高,第7 d有所下降。随着培养时间的延长,藻酸盐合成基因algD、algC表达量均上调,但PA3094-L表达量均比PA3094低,且algC表达量差异更大。结论铜绿假单胞菌溶原性噬菌体Ppa3094可降低藻酸盐合成基因algD、algC的表达,从而影响生物被膜的形成。

关键词：溶原性噬菌体铜绿假单胞菌生物被膜藻酸盐基因表达

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小鼠β-防御素2与甲型流感病毒HA1融合基因真核载体的构建与表达

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中国免疫学杂志 2008年第1期24卷 8-10,15页

作者：朱元军张卫东李虹王丰平钟利蒋忠华李明远四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室成都610041

目的:构建小鼠β-防御素2(mBD2)与甲型流感病毒A/PR/8/34(H1N1)血凝素(HA1)基因融合表达的真核载体,并检测其在HEK293细胞中的表达。方法:用PCR技术分别从质粒pcDNA3.1(+)/mBD2和pcDNA3.1(+)/HA1中扩增mBD2与HA1基因片段,再用重叠延伸PC... 详细信息

目的:构建小鼠β-防御素2(mBD2)与甲型流感病毒A/PR/8/34(H1N1)血凝素(HA1)基因融合表达的真核载体,并检测其在HEK293细胞中的表达。方法:用PCR技术分别从质粒pcDNA3.1(+)/mBD2和pcDNA3.1(+)/HA1中扩增mBD2与HA1基因片段,再用重叠延伸PCR法(overlap-PCR)将HA1与mBD2通过一段多肽接头Gly4Ser融合为mBD2-HA1。将mBD2-HA1融合基因插入真核表达载体pcDNA3.1(+),经酶切、PCR和测序鉴定正确后,用脂质体转入HEK293细胞,通过免疫荧光检测其瞬时表达。结果:融合基因mBD2-HA1的真核表达载体pcDNA3.1(+)/mBD2-HA1构建成功,并在HEK293细胞中成功表达融和蛋白。结论:融合基因mBD2-HA1真核表达载体的成功构建,为研究防御素在流感病毒核酸疫苗中的佐剂作用奠定了基础。

关键词： β-防御素流感病毒融合基因重叠延伸PCR 免疫荧光

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大鼠对旋毛虫再感染的抵抗力实验观察(英文)

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2008年第2期26卷 119-123页

作者：全福实李幸淑郑明淑赵成元朱炅焕李俊商林汉锺 Emory大学医学院微生物学与免疫学教研室美国乔治亚州亚特兰大30322 高丽大学医学院寄生虫学教研室韩国首尔136-705

目的研究实验感染旋毛虫(韩国分离株)的大鼠对成虫和肌期幼虫阶段感染的保护性免疫和IgG,IgG1,IgG2a抗体反应。方法46只大鼠随机分为7组,其中2组(A1、A2组,共10只)用于观察成虫阶段引起的保护性免疫,B组(B1、B2组,共14只)用于观察肌期... 详细信息

目的研究实验感染旋毛虫(韩国分离株)的大鼠对成虫和肌期幼虫阶段感染的保护性免疫和IgG,IgG1,IgG2a抗体反应。方法46只大鼠随机分为7组,其中2组(A1、A2组,共10只)用于观察成虫阶段引起的保护性免疫,B组(B1、B2组,共14只)用于观察肌期幼虫阶段引起的保护性免疫,C组(C1、C2组,共17只)为感染对照组,D组(5只)为正常对照组。A、B和C组分别每鼠感染1000条旋毛虫肌幼虫,分别于感染后第7天(A1、A2组)和第30天(B1、B2组),用氟苯咪唑治疗(20mg/kg,10d)。治疗后第10天,A和B组每鼠再次感染500条旋毛虫肌幼虫,于感染后第7天剖杀A1和B1组大鼠,检测肠道内成虫数,于感染后第30天剖杀A2和B2组大鼠,检测横膈膜内肌期幼虫数,同时分别剖杀感染对照组和正常对照组大鼠。每组同期取血,ELISA检测特异性IgG、IgG1和IgG2a抗体水平。结果旋毛虫成虫阶段对成虫和肌幼虫的保护性免疫分别为100%和99.96%,肌幼虫阶段对成虫和肌幼虫的保护性免疫分别为99.92%和99.89%。肌幼虫感染阶段抗肌幼虫分泌排泄抗原的特异性IgG、IgG1和IgG2a抗体与正常对照组(分别为0.5、0.1和0.1)和成虫感染阶段(分别为0.5、0.09和0.09)比较,抗体反应均显著增高(分别为3.0、2.2和0.8)(P<0.01)。且幼虫期抗肌幼虫分泌排泄抗原特异性IgG1抗体(2.2)显著高于特异性IgG2a抗体(0.8)(P<0.01)。结论旋毛虫的成虫和肌幼虫阶段的感染均对成虫和幼虫的再感染产生保护性免疫。

关键词：旋毛虫保护性免疫抗原 ELISA IgG

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巢氏PCR-RFLP和多重PCR检测HBV基因型、基因亚型方法的比较

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军医进修学院学报 2008年第4期29卷 280-282页

作者：张烜榕李威申元英任来峰李强沈茹赵海平大理学院基础医学院微生物学与免疫学教研室云南大理671000 山西大学汾阳医学院微生物学与免疫学教研室山西汾阳032200

目的:建立HBV基因型和亚型的分型方法,并分析相关的两种方法特异性和敏感性。方法:采用型特异性引物的巢氏PCR-RFLP和六种主要的HBV型特异性引物和亚型特异性引物的多重PCR方法,分别检测了100例患者标本。结果:两法不一致率为50%(27/54... 详细信息

目的:建立HBV基因型和亚型的分型方法,并分析相关的两种方法特异性和敏感性。方法:采用型特异性引物的巢氏PCR-RFLP和六种主要的HBV型特异性引物和亚型特异性引物的多重PCR方法,分别检测了100例患者标本。结果:两法不一致率为50%(27/54)。型特异性引物巢氏PCR-RFLP法检测出B基因型41例(41%),C基因型25例(25%),B+C基因型34例(34%),B j亚型3例(7.3%),Ba亚型为38例(92.7%),Cs亚型为21例(84%),Ce亚型为3例(12%),1例C型未分出亚型(4%)。多重PCR法检出B型18例(33.3%),C型7例(13%),B+C混和型5例(9.3%),B2亚型2例(11%),C1亚型2例(28.5%)。巢氏PCR-RFLP法型检出率100%亚型检出率98.5%,多重PCR法型检出率55.6%,亚型检出率仅为16%,前者高于后者(P<0.05)。结论:巢氏PCR-RFLP鉴定HBV基因型、基因亚型较多重PCR敏感性高,重复性好,但耗时长,费用高。

关键词：聚合酶链反应多态性限制性片段长度肝炎病毒乙型基因型

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靶向Bcl-xl低结合自由能区域的反义核酸抑瘤效果的研究

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中华肿瘤防治杂志 2008年第22期15卷 1714-1716页

作者：罗益民胡文洁杨林西吴福国济宁医学院生物化学教研室山东济宁272013 济宁医学院微生物学教研室山东济宁272013 兰州大学生物化学教研室甘肃兰州730000

目的:观察结合于Bcl-xl mRNA上低结合自由能区域的反义寡核苷酸对Bcl-xl基因的抑制效应。方法:利用软件分析Bcl-xl mRNA上的低结合自由能区域,并针对这一区域合成反义寡核苷酸As587;转染高表达Bcl-xl的人乳腺癌细胞系MCF-7;实验分空白... 详细信息

目的:观察结合于Bcl-xl mRNA上低结合自由能区域的反义寡核苷酸对Bcl-xl基因的抑制效应。方法:利用软件分析Bcl-xl mRNA上的低结合自由能区域,并针对这一区域合成反义寡核苷酸As587;转染高表达Bcl-xl的人乳腺癌细胞系MCF-7;实验分空白对照组、反义组(As587组)和错义组(Sc587组),转染后检测各组细胞的增殖、Bcl-xl基因及蛋白表达有无变化。结果:As587组与Sc587组相比,转染72h后细胞抑制率差异有统计学意义,P<0.01;凝胶电泳分析Bcl-xl/β-actin比值分别为0.39和0.79,P<0.05;Bcl-xl蛋白水平亦明显下降,P<0.01。结论:计算机软件辅助设计反义寡核苷酸是一种可靠的方法,以此方法设计的反义核酸As587在体外能抑制Bcl-xl基因的表达。

关键词：自由能反义寡核苷酸 Bcl-xl MCF-7

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3T3-F442A细胞培养弓形虫最佳条件的探索

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中国生物工程杂志 2008年第S1期28卷 76-81页

作者：朱沙李付广李三强王娜唐悦黄玉敏郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室郑州450001 河南科技大学医学院生化与分子生物学教研室洛阳471003

目的:研究不同浓度的胰岛素及D-葡萄糖对弓形虫在3T3-F442A细胞内分裂增殖的影响,并确定不同条件下弓形虫的生长活力,探索弓形虫生长最佳条件。方法:采用细胞培养及细胞计数单因素方差分析方法研究不同时间内胰岛素及D-葡萄糖对弓形虫在... 详细信息

目的:研究不同浓度的胰岛素及D-葡萄糖对弓形虫在3T3-F442A细胞内分裂增殖的影响,并确定不同条件下弓形虫的生长活力,探索弓形虫生长最佳条件。方法:采用细胞培养及细胞计数单因素方差分析方法研究不同时间内胰岛素及D-葡萄糖对弓形虫在3T3-F442A细胞内分裂增殖的影响,并采用MTIT方法确定不同条件下弓形虫的生长活力。结果:浓度为10^(-2)μg/ml^10^(-1)μg/ml胰岛素和浓度为4.5 g/L葡萄糖相结合共同作用时,弓形虫3T3-F442A增殖率达到最大,其生长活力为最高。当DMEM中不合D-葡萄糖时,胰岛素则对弓形虫的生长所起的作用较差。结论:胰岛素对弓形虫在细胞中生长具有剂量促进效应,表现在低浓度的胰岛素对弓形虫的生长发育具有促进作用,而高浓度的胰岛素则对弓形虫的生长起抑制作用。D-葡萄糖作为一种能源,也是细胞内弓形虫生长不可缺乏的。

关键词： 3T3-F442A细胞弓形虫 D-葡萄糖胰岛素

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血清学诊断中结核杆菌磷酸烯醇型丙酮酸羧激酶的应用

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微生物学报 2008年第10期48卷 1383-1386页

作者：柏雪莲魏庆宽李瑾李桂萍山东省滨州医学院病原生物学教研室滨州256603 山东省寄生虫病防治研究所济宁272033

【目的】在原核系统中表达结核杆菌磷酸烯醇型丙酮酸羧激酶(phosphoenolpyruvate car-boxykinase PEPCK),并研究该蛋白在诊断结核病人血清抗体中的应用价值。【方法】应用基因重组技术表达重组蛋白结核杆菌磷酸烯醇型丙酮酸羧激酶,经亲... 详细信息

【目的】在原核系统中表达结核杆菌磷酸烯醇型丙酮酸羧激酶(phosphoenolpyruvate car-boxykinase PEPCK),并研究该蛋白在诊断结核病人血清抗体中的应用价值。【方法】应用基因重组技术表达重组蛋白结核杆菌磷酸烯醇型丙酮酸羧激酶,经亲和层析法纯化表达产物。用表达的重组蛋白免疫小鼠,研究其免疫学特性。间接酶联免疫吸附试验(Enzyme link immunosorbent assay,ELISA)检测结核病人血清中特异性IgG抗体,并与结核杆菌抗体胶体金法诊断试剂盒检测结果对比。【结果】试验表明转化入大肠杆菌中的重组质粒能够表达并纯化出相对分子量为72kDa的重组蛋白;Western blot证实重组蛋白能够与小鼠抗BCG血清发生特异性反应;重组蛋白免疫小鼠后,小鼠血清中的抗体滴度可达1:1280以上;重组蛋白用作ELISA包被抗原检测病人血清阳性率为17.3%(30/173),其中排菌病人的阳性率为32.5%(13/42),不排菌病人的阳性率为12.9%。该方法结果与结核杆菌抗体胶体金法诊断试剂盒的检测结果相比,敏感性为51.0%,特异性为96.7%。【结论】结核杆菌PEPCK具有较好的免疫原性和抗原性,有可能作为结核病血清学诊断的一组抗原之一。

关键词：结核杆菌磷酸烯醇型丙酮酸羧激酶(PEPCK) 血清学诊断酶联免疫吸附试验

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人类免疫缺陷病毒相关性口腔念珠菌的药物敏感性分析

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中国新药与临床杂志 2008年第9期27卷 687-690页

作者：武有聪白丽袁有华刘奇大理学院基础医学院医学微生物学及免疫学教研室云南大理671000

目的探讨HIV/AIDS病人口腔念珠菌对常用抗真菌药物的敏感性。方法采用微量液基稀释法,测定念珠菌对氟康唑、酮康唑、氟胞嘧啶和两性霉素B共4种常用抗真菌药物的敏感性(MIC值)。结果60株HIV相关性念珠菌对上述4种药物敏感性的几何均数分... 详细信息

目的探讨HIV/AIDS病人口腔念珠菌对常用抗真菌药物的敏感性。方法采用微量液基稀释法,测定念珠菌对氟康唑、酮康唑、氟胞嘧啶和两性霉素B共4种常用抗真菌药物的敏感性(MIC值)。结果60株HIV相关性念珠菌对上述4种药物敏感性的几何均数分别为0.871、0.050、0.179和0.329 mg·L^(-1);耐药率分别为2%、5%、3%和5%;白色念珠菌和非白色念珠菌对氟康唑和两性霉素B的耐药率差异均具有显著性;有1株光滑念株菌对氟康唑、酮康唑和两性霉素B同时耐药。结论上述4种临床常用抗真菌药物可选作HIV/AIDS病人口腔念珠菌病的治疗,但应注意某些菌株的耐药和交叉耐药现象,尤其是非白色念珠菌。

关键词：微生物敏感性试验念珠菌属 HIV

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青岛地区医院内感染耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分子分型研究

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中华流行病学杂志 2008年第12期29卷 1230-1234页

作者：杨富国闫志勇毕春霞青岛大学医学院护理学院 266021 青岛大学医学院微生物学教研室青岛市市立医院检验科

目的探讨青岛地区医院内感染的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）分子流行病学特征及脉冲场凝胶电泳（PFGE）型别与菌株表型、一般临床资料间的关系。方法收集2003—2007年间青岛地区主要医院内感染MRSA360株，SmaⅠ酶切菌株染色体DNA... 详细信息

目的探讨青岛地区医院内感染的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）分子流行病学特征及脉冲场凝胶电泳（PFGE）型别与菌株表型、一般临床资料间的关系。方法收集2003—2007年间青岛地区主要医院内感染MRSA360株，SmaⅠ酶切菌株染色体DNA后，进行PFGE电泳，用Bionumericus2．0软件对电泳图谱进行比较和聚类分析，绘制进化树。同时对患者的性别、年龄、菌株来源等进行多变量统计分析。应用纸片扩散法测定分离菌株的药物敏感谱，并与PFGE型别进行比较分析。PCR扩增不同PFGE型别MRSA代表株25株分离株的7个管家基因进行序列测定和多位点测序分型分析（MLST）。结果所有菌株经PFGE电泳后共分为5型（M0～M4型），其中M1型为优势菌型，M2型次之，M4型相对少见，M0为独特型，明显不同于其他已知PFGE型别。统计学分析发现5种PFGE型别在患者性别、年龄分布上的差异无统计学意义，但在菌株分离部位、来源有统计学的差异：M2型多分离自伤口感染，而M3型菌株多来自ICU病房，5种PFGE型在不同医院间及医院内的分布存在差异。M1与M2两型构成各医院分离菌株的主要型别。抗生素敏感性测定中未发现万古霉素耐药菌株，亦未发现某种PFGE型别与某种特定抗生素抗性之间的直接相关性。MLST分型发现优势型M1与M3共属于国内常见ST239型，M2型则归类于ST5，M4型属于ST240，独特型中的2种PFGE谱型则分属于ST45及ST398。结论ST239菌株为青岛地区医院内感染MRSA优势菌株；医院内MRSA的PFGE分型与菌株来源明显相关，与患者年龄、性别无关，MRSA感染普遍存在于各年龄人群中。

关键词：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分子分型医院感染

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