检索结果-内蒙古大学图书馆

细胞与分子免疫学杂志 2007年第1期23卷 39-41,45页

作者：苑天红李明远李婉宜李虹蒋忠华四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室四川成都610041

目的:探讨人α-2,6-唾液酸转移酶(ST6GalI)小分子干扰RNA(siRNA)对ST6GalI高表达的结肠癌SW480细胞株的黏附和侵袭力的影响。方法:设计并合成ST6GalI靶向的siRNA,用脂质体Lipofectamine2000包裹后转染SW480细胞。实验设空白对照组、脂... 详细信息

目的:探讨人α-2,6-唾液酸转移酶(ST6GalI)小分子干扰RNA(siRNA)对ST6GalI高表达的结肠癌SW480细胞株的黏附和侵袭力的影响。方法:设计并合成ST6GalI靶向的siRNA,用脂质体Lipofectamine2000包裹后转染SW480细胞。实验设空白对照组、脂质体对照组、非特异性siRNA组和ST6GalIsiRNA组,采用RT-PCR测定细胞中ST6GalImRNA表达水平,流式细胞术检测细胞表面α-2,6-唾液酸含量,并分别用CytoMatrixTM细胞黏附试剂盒及细胞侵袭分析试剂盒,检测细胞对细胞外基质(ECM)黏附与侵袭力。结果:与空白对照组、脂质体对照组、非特异性siRNA组相比,转染48h后,ST6GalIsiRNA组细胞中ST6GalImRNA表达明显下调;转染72h后,ST6GalIsiRNA组细胞表面α-2,6-唾液酸的含量及细胞对ECM的黏附和侵袭力均明显低于其他3个对照组(P<0.05)。结论:化学合成的靶向ST6GalI的siRNA能够下调SW480细胞中ST6GalI基因的表达,降低细胞对ECM的黏附和侵袭力。本实验为进一步研究应用RNA干扰技术抗肿瘤治疗奠定基础。

关键词： siRNA 结肠肿瘤唾液酸转移酶黏附肿瘤侵袭力

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SARS冠状病毒膜蛋白膜内区的表达、纯化及抗原性初步研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2007年第1期27卷 1-4页

作者：胡族琼龙北国张文炳晏辉钧江丽芳刘志伟刘志华赵卫南方医科大学公共卫生与热带医学学院微生物学系广州510515 中山大学中山医学院微生物学教研室

目的对SARS冠状病毒膜蛋白膜内区基因片段进行克隆表达和表达产物的纯化复性，探讨该表达蛋白的抗原特性。方法克隆SARS冠状病毒GD322株膜蛋白膜内区，在原核表达系统中表达His-融合蛋白，采用Western blot和酶联免疫吸附试验（ELISA）... 详细信息

目的对SARS冠状病毒膜蛋白膜内区基因片段进行克隆表达和表达产物的纯化复性，探讨该表达蛋白的抗原特性。方法克隆SARS冠状病毒GD322株膜蛋白膜内区，在原核表达系统中表达His-融合蛋白，采用Western blot和酶联免疫吸附试验（ELISA）分析His-融合蛋白抗原特性。结果7份SARS临床诊断患者血清中5份血清能与His-融合蛋白反应，2份不与之反应。兔抗OCA3、229E血清及20份健康人血清皆不与His-融合蛋白反应。His-融合蛋白免疫动物可产生多克隆抗体。结论本研究获得的His-融合蛋白可与SARS临床诊断患者血清特异性结合，可免疫动物获得特异性多抗；但不与健康人血清及兔抗OCA3、229E血清发生特异性结合。

关键词： SARS冠状病毒膜蛋白原核表达抗原活性

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立克次体目微生物的系统分类进展

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中国人兽共患病学报 2007年第12期23卷 1262-1264页

作者：宝福凯柳爱华昆明医学院基础医学院微生物学与免疫学教研室昆明650031 昆明医学院基础医学院生物化学与分子生物学教研室昆明650031

立克次体目(Rickettsiales)微生物是一类严格细胞内寄生的原核细胞型微生物。其生物学性状如形态结构、化学组成及代谢方式等方面与细菌类似。立克次体是引起斑疹伤寒、恙虫病、Q热等传染病的病原体,首先由美国青年医师Howard Taylor Ri... 详细信息

立克次体目(Rickettsiales)微生物是一类严格细胞内寄生的原核细胞型微生物。其生物学性状如形态结构、化学组成及代谢方式等方面与细菌类似。立克次体是引起斑疹伤寒、恙虫病、Q热等传染病的病原体,首先由美国青年医师Howard Taylor Ricketts发现,为纪念他在研究斑疹伤寒时不幸感染而献身,故以他的姓名命名。立克次体与节肢动物关系密切,寄生在吸血节肢动物体内,使其成为寄生宿主,或为储存宿主,或同时为传播媒介。立克次体大多是人兽共患病的病原体,引起的新现和再现传染病(Emergingand re-e-merging infectious diseases)呈世界性或地方性流行,日益受到医学界重视。近年来,随着立克次体分子生物学研究的迅速发展(如16SrDNA序列分析、全DNA或基因片段分析等),原有的立克次体分类已不能准确反映立克次体目、科和各种属的面貌,代之而起的是根据特定基因(如16SrRNA基因、HSP60基因等)对立克次体进行新的分类。[第一段]

关键词：立克次体系统分类微生物 DNA序列分析 16SrRNA基因 HSP60基因再现传染病胞内寄生

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丙型肝炎病毒核心蛋白基因的克隆及表达

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西安交通大学学报（医学版） 2007年第6期28卷 609-611,615页

作者：孙菊楚雍烈姜凤良景晓红柴长斌解颖馨西安医学院微生物与免疫学教研室陕西西安710068 西安交通大学医学院病原生物学教研室陕西西安710061

目的在大肠杆菌中表达丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白基因片段。方法以HCV全长cDNA质粒为模板进行PCR扩增,获得366bp的核心蛋白基因片段。将其插入连接载体pMD18-T vector中,酶切后再与表达载体pBV220连接,构建重组表达载体pBV220/HCV-C。... 详细信息

目的在大肠杆菌中表达丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白基因片段。方法以HCV全长cDNA质粒为模板进行PCR扩增,获得366bp的核心蛋白基因片段。将其插入连接载体pMD18-T vector中,酶切后再与表达载体pBV220连接,构建重组表达载体pBV220/HCV-C。经鉴定后温度诱导表达,采用SDS-PAGE电泳及Western-blot检测核心蛋白基因的蛋白表达。结果经温度诱导后获得目的基因的非融合表达,SDS-PAGE电泳显示在14000 u处有一表达条带;Western-blot结果显示其具有HCV抗原特异性。结论丙型肝炎病毒核心蛋白基因成功表达,对临床诊断试剂和HCV基因疫苗的研制有一定的意义。

关键词：丙型肝炎病毒核心蛋白 pBV220载体基因表达

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黑色素瘤抗原MAGE-3基因的原核表达

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解放军医学杂志 2008年第10期33卷 1275-1275页

作者：彭培立赵国强郭长升张立新吕颖捷解放军第155医院放射科河南开封475003 郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室解放军第155医院肿瘤科河南开封475003 解放军第155医院内科河南开封475003 河南省医药学校基础科

肿瘤抗原基因的克隆、测序和表达是研究肿瘤免疫治疗性疫苗的基础。本研究采用OligoV6.0基因分析软件,对人黑色素瘤抗原MAGE-3基因序列进行分析后设计引物,扩增和克隆MAGE3基因片段(210－623位碱基),在大肠杆菌中诱导其表达,以期为制备M... 详细信息

肿瘤抗原基因的克隆、测序和表达是研究肿瘤免疫治疗性疫苗的基础。本研究采用OligoV6.0基因分析软件,对人黑色素瘤抗原MAGE-3基因序列进行分析后设计引物,扩增和克隆MAGE3基因片段(210－623位碱基),在大肠杆菌中诱导其表达,以期为制备MAGK3抗体和肿瘤疫苗奠定基础。[第一段]

关键词：抗原,肿瘤基因,MAGB3 克隆,生物基因表达调控

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栉孔扇贝糖胺聚糖对bFGF诱导的血管平滑肌细胞增殖及原癌基因c-myc mRNA表达的影响

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中国药学杂志 2007年第22期42卷 1714-1717页

作者：丁守怡刘赛张文卿杨英孟林吕锐青岛大学医学院微生物教研室山东青岛266021 青岛大学医学院药理教研室山东青岛266021 青岛大学医学院附属医院药剂科山东青岛266003

目的观察栉孔扇贝裙边糖胺聚糖(SS-GAG)对体外培养的血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的抑制作用及原癌基因(c-myc) mRNA表达的影响,并探讨SS-GAG抗动脉粥样硬化(AS)的作用机制。方法建立碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)诱导的VSMC增殖模型,用MT... 详细信息

目的观察栉孔扇贝裙边糖胺聚糖(SS-GAG)对体外培养的血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的抑制作用及原癌基因(c-myc) mRNA表达的影响,并探讨SS-GAG抗动脉粥样硬化(AS)的作用机制。方法建立碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)诱导的VSMC增殖模型,用MTT法观察bFGF、SS-GAG对VSMC增殖活性的影响;用原位杂交方法观察SS-GAG对bFGF诱导增殖的VSMC内c-myc mRNA表达的影响。结果bFGF模型组细胞活性最高,与正常对照组比较,差异有统计学意义,不同浓度的SS-GAG组细胞增殖活性均低于模型组细胞,差别有统计学意义;bFGF诱导增殖的VSMC内c-myc mRNA基因表达强度明显高于对照组;与模型组比较,SS-GAG作用后,增殖的VSMC内c-myc mRNA表达强度和阳性细胞数量均减少,差别有统计学意义。结论bFGF对VSMC有明显的促增殖作用,SS-GAG能显著抑制VSMC增殖,且对bFGF诱导增殖的VSMC的c-myc mRNA的阳性表达有抑制作用。

关键词：栉孔扇贝裙边糖胺聚糖动脉粥样硬化碱性成纤维细胞生长因子血管平滑肌细胞原癌基因原位杂交

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儿科呼吸道致病菌氨基糖苷类抗生素耐药性

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中国公共卫生 2007年第11期23卷 1285-1286页

作者：李明成李凡北华大学医学院微生物学教研室吉林132021 吉林大学基础医学院病原生物学教研室

目的探讨儿科呼吸道感染病原菌对氨基糖苷类抗生素耐药机制,监测儿科细菌耐药性变化趋势。方法采集2005年4月-2006年5月儿科上呼吸道感染性标本,常规方法分离培养细菌,琼脂纸片（K-B）法进行抗菌药物敏感性监测,PCR检测氨基糖苷类修饰... 详细信息

目的探讨儿科呼吸道感染病原菌对氨基糖苷类抗生素耐药机制,监测儿科细菌耐药性变化趋势。方法采集2005年4月-2006年5月儿科上呼吸道感染性标本,常规方法分离培养细菌,琼脂纸片（K-B）法进行抗菌药物敏感性监测,PCR检测氨基糖苷类修饰酶基因,PCR产物克隆测序。结果242份上呼吸道感染标本共分离出革兰阴性杆菌172株（46.9%）,对链霉素耐药率超过50%以上;对庆大霉素、卡那霉素、阿米卡星和奈替米星耐药率均超过35%,对衣替米星和地贝卡米星耐药率低于15%。对链霉素耐药细菌携带ANT（3″）基因,对庆大霉素耐药携带AAC（3′）基因。结论吉林地区儿科呼吸道感染性疾病分离出的革兰阴性杆菌对链霉素耐药率最高,对衣替米星和地贝卡米星耐药率最低,携带单一类型的氨基糖苷类修饰酶基因。

关键词：儿科抗生素细菌耐药呼吸道感染

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登革1型病毒广州分离株全长E基因序列测定与分析

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中国人兽共患病学报 2007年第1期23卷 48-52页

作者：周经姣方丹云晏辉钧黄骥斌江丽芳中山大学中山医学院微生物学教研室广州510080

目的对两株登革1型病毒广州分离株(DV1-GZ01/03、DV1-GZ02/03)E基因进行序列测定及分析,了解此次分离的登革病毒流行株的可能来源及其生物学特性。方法应用RT-PCR扩增两分离株E基因,克隆到pGEM-T载体进行序列测定,应用计算机软件与国内... 详细信息

目的对两株登革1型病毒广州分离株(DV1-GZ01/03、DV1-GZ02/03)E基因进行序列测定及分析,了解此次分离的登革病毒流行株的可能来源及其生物学特性。方法应用RT-PCR扩增两分离株E基因,克隆到pGEM-T载体进行序列测定,应用计算机软件与国内外参考株及流行株进行同源性分析,绘制系统进化树。并作毒株感染细胞及乳鼠毒力试验。结果两分离株全长E基因为1 485 bp,与登革1型Austria/83株的同源性最高,核苷酸同源性均达96.6%,氨基酸同源性分别达97.4%、97.8%;与登革1型GD23/95株次之。构建的系统进化树将19株登革1型病毒分为3个基因群。两分离株与Austria/83、GD23/95同属于基因型Ⅳ型,在同一进化分支内。两分离株颅内接种乳鼠均发病,但发病时间较晚。结论DV1-GZ01/03、DV1GZ02/03属于基因型Ⅳ型,与广东1995年流行株关系密切。乳鼠的神经毒性较弱可能与其基因变异有关。

关键词：登革病毒 E基因系统进化树毒力

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不同培养条件对中国被毛孢胞内核苷类组分的影响

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菌物学报 2007年第2期26卷 234-242页

作者：葛飞李春如胡丰林桂琳周权陈安徽樊美珍安徽农业大学微生物防治省重点实验室合肥230036 皖南医学院微生物和免疫学教研室芜湖241001

采用紫外分光光度法,对冬虫夏草Cordyceps sinensis无性型——中国被毛孢Hirsutella sinensis液体摇瓶培养时胞内核苷类组分的形成积累条件进行了研究。结果表明:菌丝体中核苷类成分形成积累的最适摇瓶培养条件是碳源为葡萄糖:氮源为酵... 详细信息

采用紫外分光光度法,对冬虫夏草Cordyceps sinensis无性型——中国被毛孢Hirsutella sinensis液体摇瓶培养时胞内核苷类组分的形成积累条件进行了研究。结果表明:菌丝体中核苷类成分形成积累的最适摇瓶培养条件是碳源为葡萄糖:氮源为酵母浸出粉:微量元素为MgSO_4·7H_2O和KH_2PO_4;起始pH值6．5:摇瓶装液量100mL/500mL:摇床转数180r/min:接种量10％。正交试验结果表明最佳培养基配方为葡萄糖2％,酵母浸出粉3％,奶粉1％,MgSO_4·7H_2O 0．1％,KH_2PO_40．2％。培养条件优化后,菌丝体中总核苷的含量可达6．5748mg/g,比优化前提高了33．6％。

关键词：冬虫夏草虫生真菌活性成分培养基配方液体培养

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金黄色葡萄球菌L型对肿瘤组织和培养细胞影响的研究

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中国人兽共患病学报 2007年第4期23卷 333-335页

作者：汪万英赵芳芳唐素兰蚌埠医学院附属医院病理科蚌埠233004 蚌埠医学院微生物学教研室

目的探讨金黄色葡萄球菌(金葡菌)L型感染对C57小鼠肿瘤组织和体外培养猴肾细胞的影响。方法用金葡菌L型感染C57小鼠及猴肾细胞,再用革兰氏染色、免疫组化染色和聚合酶链反应(PCR)检测C57小鼠肝组织及诱发的小鼠肿瘤组织中金葡菌L型阳性... 详细信息

目的探讨金黄色葡萄球菌(金葡菌)L型感染对C57小鼠肿瘤组织和体外培养猴肾细胞的影响。方法用金葡菌L型感染C57小鼠及猴肾细胞,再用革兰氏染色、免疫组化染色和聚合酶链反应(PCR)检测C57小鼠肝组织及诱发的小鼠肿瘤组织中金葡菌L型阳性率,并观察感染后猴肾细胞的病理形态学变化。结果C57小鼠肝组织及肿瘤组织中金葡菌L型感染率分别为0%(0/10)和70%(7/10),L型抗原表达率分别为0%(0/10)和70%(7/10);金葡菌L型DNA阳性表达率分别为0%(0/10例)和70%(7/10例)。猴肾细胞感染L型原生小体后体外培养48h部分出现空泡样变样(类似病毒感染后的形态学变化),局部区域细胞密集(轻度增生)。结论金葡菌L型DNA已在感染的体内、外细胞内出现,且在诱发的肿瘤细胞内表达显著增高,推测其在诱发体细胞增生和癌变中起重要作用,很可能和病毒的致瘤机理相似。

关键词：免疫组化聚合酶链反应小鼠金黄色葡萄球菌L型肿瘤感染

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