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尿路致病性大肠埃希菌Ⅰ型菌毛重组质粒pcDNA3.0-fimH的免疫保护作用

滨州医学院学报 2013年第4期36卷 253-255页

作者：耿丽吴玉龙柏雪莲张玉梅滨州医学院病原生物学教研室烟台264003

目的研究尿路致病性大肠埃希菌Ⅰ型菌毛重组质粒pcDNA3.0-fimH产生的免疫反应及其对小鼠的免疫保护作用。方法选取BALB/c小鼠60只,随机分为3组(PBS对照组、空质粒对照组、疫苗免疫组),3组分别用构建成功的重组质粒pcDNA3.0-fimH(为疫苗... 详细信息

目的研究尿路致病性大肠埃希菌Ⅰ型菌毛重组质粒pcDNA3.0-fimH产生的免疫反应及其对小鼠的免疫保护作用。方法选取BALB/c小鼠60只,随机分为3组(PBS对照组、空质粒对照组、疫苗免疫组),3组分别用构建成功的重组质粒pcDNA3.0-fimH(为疫苗免疫组),载体质粒(pcDNA3.0)(为空质粒对照组)和PBS液(为PBS对照组),经股四头肌注射免疫小鼠,于第21天和第35天加强免疫。于免疫第0、14、28及42天收集小鼠膀胱冲洗液,检测各组SIgA水平。于免疫第42天采血,检测各组特异性IgG、IgG1、IgG2a水平。结果免疫后,疫苗免疫组小鼠膀胱灌洗液中sIgA水平随时间延长呈上升趋势,且明显高于PBS对照组及空质粒组(F=10.08,P<0.05);疫苗免疫组小鼠血清特异性IgG、IgG1、IgG2a抗体均明显高于对照组及空质粒组(P<0.05);结论 pcDNA3.0-fimH基因疫苗可诱导BALB/c小鼠产生特异性体液免疫,对小鼠尿道具有一定的免疫保护作用。

关键词：尿路致病性大肠埃希菌 Ⅰ型菌毛 pcDNA3.0-fimH 免疫保护

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人体寄生虫学课程现状及对策

引用

基础医学教育 2013年第1期15卷 8-9页

作者：李波清周秀芝张玉梅吴玉龙郭立东滨州医学院病原生物学教研室烟台264003

结合多年的人体寄生虫学教学工作,分析了当前人体寄生虫学课程令人担忧的现状,提出应提高对人体寄生虫学的重视程度;加强师资队伍建设;适时调整授课内容,改进教学方法;以科研促进教学等对策,以提高人体寄生虫学教学质量。

关键词：人体寄生虫学课程现状教学方法

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激光加工技术

引用

物理通报 2009年第8期30卷 54-56页

作者：刘俊杰闫鹏李光仲周秀芝滨州医学院烟台校区物理学教研室山东烟台264003 滨州医学院烟台校区病原生物学教研室山东烟台264003

激光加工技术是一项集光、机电、材料及检测于一体的先进技术．激光具有的四大特性：高的单色性、方向性、相干性和亮度性．应用激光固有的四大特性，将具有高能量密度的，能被聚焦到微小空间的激光用于加工的方法叫激光加工．激光加工... 详细信息

激光加工技术是一项集光、机电、材料及检测于一体的先进技术．激光具有的四大特性：高的单色性、方向性、相干性和亮度性．应用激光固有的四大特性，将具有高能量密度的，能被聚焦到微小空间的激光用于加工的方法叫激光加工．激光加工主要涉及：激光焊接、激光切割、激光打标、激光雕刻等．

关键词：激光加工技术高能量密度应用激光激光焊接激光切割激光打标激光雕刻单色性

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幽门螺杆菌TaqMan MGB探针双重荧光定量PCR检测方法的建立

引用

中国病原生物学杂志 2018年第6期13卷 572-574,579页

作者：荣倩玉陈醒醒刘艺凝徐正丁雲飞吴玉龙季晓飞张莹李波清滨州医学院病原生物学教研室山东烟台264003 东营市胜利第一中学

目的建立用于幽门螺杆菌快速定量检测和分型的TaqMan MGB探针双重荧光定量PCR方法。方法采用Primer Premier 5软件分析设计引物和探针,采用双重荧光定量PCR扩增幽门螺杆菌CagA和VacA基因片段,建立循环数与拷贝数关系的标准曲线。检测临... 详细信息

目的建立用于幽门螺杆菌快速定量检测和分型的TaqMan MGB探针双重荧光定量PCR方法。方法采用Primer Premier 5软件分析设计引物和探针,采用双重荧光定量PCR扩增幽门螺杆菌CagA和VacA基因片段,建立循环数与拷贝数关系的标准曲线。检测临床标本中所含幽门螺杆菌的循环数,用该方法对临床胃黏膜标本进行检测并与标准曲线对比,计算所含幽门螺杆菌的拷贝数。结果建立的TaqMan MGB双重荧光定量PCR方法检测幽门螺杆菌质粒的线性范围是10~2~10~8拷贝/μl,CagA和VacA基因标准曲线的相关系数分别是0.977 8和0.990 4。29份临床胃黏膜标本的CagA和VacA基因循环数Ct值分别在29~35和30~35之间,幽门螺杆菌拷贝数分别在1.0×10^(1.39)~1.0×10^(3.87)和1.0×10^(3.06)~1.0×10^(3.91)之间,且临床标本中的幽门螺杆菌均为I型。结论建立的TaqMan MGB双重荧光定量PCR法具有敏感、精确、快速的特点,可用于幽门螺杆菌的快速定量检测与分型鉴定。

关键词：幽门螺杆菌 CagA VacA MGB双重荧光定量PCR技术

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整合素连接激酶对幽门螺杆菌所致细胞凋亡的影响

引用

中国病原生物学杂志 2018年第8期13卷 827-830页

作者：丁雲飞刘艺凝徐正荣倩玉吴玉龙季晓飞赵慧琳张莹李波清滨州医学院病原生物学教研室山东烟台264003 东营市胜利第一中学

目的探讨整合素连接激酶对幽门螺杆菌(Hp)致胃癌细胞MGC-803凋亡的影响。方法实验分为空白对照组(胃癌细胞MGC-803正常条件培养),激动剂作用组(MGC803细胞与0.4μmol/L的整合素连接激酶激动剂LPTP共培养),Hp作用组(MGC803细胞与Hp(MOI值... 详细信息

目的探讨整合素连接激酶对幽门螺杆菌(Hp)致胃癌细胞MGC-803凋亡的影响。方法实验分为空白对照组(胃癌细胞MGC-803正常条件培养),激动剂作用组(MGC803细胞与0.4μmol/L的整合素连接激酶激动剂LPTP共培养),Hp作用组(MGC803细胞与Hp(MOI值为100∶1)共培养)和激动剂加Hp作用组(MGC803细胞与0.4μmol/L的LPTP共培养1h,与Hp(MOI值为100∶1)共培养)。24h后流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot检测细胞凋亡相关蛋白PARP、Casepase-3的表达。结果激动剂作用组、Hp作用组、激动剂加Hp作用组细胞凋亡率分别为(23.45±1.484 92)%、(30.7±3.111 27)%、(16.15±1.202 08)%,与空白对照组(10.1±0.707 11)%比较,差异均有统计学意义(t值分别为-11.478,-9.131,-6.135,P<0.05);激动剂加Hp作用组与Hp作用组比较差异有统计学意义(t=6.169,P<0.05)。激动剂作用组、Hp作用组、激动剂加Hp作用组PARP蛋白相对表达量分别为0.89±0.57、1.245±0.21、0.87±0.057,与空白对照组0.6±0.06比较差异均有统计学意义(t值分别为-4.734,-13.492,-4.401,P<0.05);Casepase-3蛋白表达分别为0.78±0.35、1.32±0.04、0.87±0.45;与空白对照组0.47±0.07比较差异有统计学意义(t值分别为-5.635,-14.577,-8.037,P<0.05)。结论整合素连接激酶在Hp感染MGC-803细胞中起抗凋亡的作用。

关键词：幽门螺杆菌整合素连接激酶细胞凋亡 MGC-803细胞 LPTP

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以病例为基础学习教学方法在医学微生物学各论教学中的应用

引用

中华医学教育杂志 2008年第2期28卷 56-57页

作者：李波清刘士霞孟玮张玉梅孙旭红滨州医学院病原生物学教研室烟台264003 滨州医学院图书馆烟台264003

为了提高医学微生物学各论的教学效果，我们采用了以病例为基础学习教学方法，按照教学大纲的要求，选择典型的临床病例并精心设计和组织教学过程。结果显示，该方法不仅能够完善教师自身的知识结构，而且使学生能够更加积极、主动地进... 详细信息

为了提高医学微生物学各论的教学效果，我们采用了以病例为基础学习教学方法，按照教学大纲的要求，选择典型的临床病例并精心设计和组织教学过程。结果显示，该方法不仅能够完善教师自身的知识结构，而且使学生能够更加积极、主动地进行学习，有利于学生综合能力的培养。

关键词：以病例为基础学习医学微生物学各论教学教学方法

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鲍曼不动杆菌临床感染调查及药敏分析

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滨州医学院学报 2014年第5期37卷 347-349页

作者：于敏李波清滨州医学院生物技术实验室烟台264003 滨州医学院病原生物学教研室

目的以某院分离所得226株鲍曼不动杆菌为对象,对其感染特点及耐药性进行分析。方法通过MiCroscan Walkaway-40型全自动细菌鉴定系统进行菌种鉴定,采用K-B纸片扩散法进行药敏试验。结果该菌来源以痰液标本为主(占74.8%),科室分布主要在... 详细信息

目的以某院分离所得226株鲍曼不动杆菌为对象,对其感染特点及耐药性进行分析。方法通过MiCroscan Walkaway-40型全自动细菌鉴定系统进行菌种鉴定,采用K-B纸片扩散法进行药敏试验。结果该菌来源以痰液标本为主(占74.8%),科室分布主要在呼吸内科(占38.6%);在16种常用抗生素中,该菌对多黏菌素E、头孢哌酮/舒巴坦和米诺环素的耐药率较低,依次为6.8、17.3和21.2%;但对以往较敏感的碳青霉烯类药物出现了耐药,除了阿米卡星耐药率为67.9%以外,该菌对氨基糖苷类和氟喹诺酮类抗生素耐药率均在80%以上。结论鲍曼不动杆菌耐药严重,且耐药谱存在地区、医院之间差异,应当加强药敏检测,才能有效预防和控制感染。

关键词：鲍曼不动杆菌感染分布耐药分析

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以临床医学观念为基础的病原生物学课程整合探讨

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中国病原生物学杂志 2011年第4期6卷 I0002-I0003页

作者：李波清周秀芝李娜耿丽乔媛媛滨州医学院病原生物学教研室山东烟台264003

为了使病原生物学课程更加完善、充实,本文以临床医学观念为基础,就师资队伍建设、理论教学内容的整合、实验教学内容的整合、病原生物学纲要的编写和教学方法改革等方面提出建议和措施。

关键词：病原生物学课程整合临床医学观念

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科研促进教学形式在培养医学生创新能力方面的研究

引用

继续医学教育 2018年第12期32卷 22-23页

作者：乔媛媛张玉梅李波清季晓飞耿丽滨州医学院病原生物学教研室山东烟台264003

高质量的教学工作能够激发学生的创造思维,而高水平的科研成果能够促进学科知识更新。为推动教研相互促进,良性循环,我们以病原生物学课程教学为例,通过科研进展进课堂,科研成果进讲座,以及学生参与课题、申请并完成大学生创新基金和参... 详细信息

高质量的教学工作能够激发学生的创造思维,而高水平的科研成果能够促进学科知识更新。为推动教研相互促进,良性循环,我们以病原生物学课程教学为例,通过科研进展进课堂,科研成果进讲座,以及学生参与课题、申请并完成大学生创新基金和参加具有一定研究性的综合性、设计性实验等多个方面,来推进教学内容的改革,医学生的发现问题和解决问题能力正逐步提高,其创新能力亦得以开发和培养。以科研促教学更新课程教学内容,可在基础医学课程中推广实施。

关键词：科研教学医学生创新能力

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尿路致病性大肠埃希菌Ⅰ型菌毛fimH基因真核表达载体pcDNA3.0-fimH的构建及鉴定

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中国病原生物学杂志 2011年第6期6卷 408-410页

作者：李波清张玉梅耿丽柏雪莲郭立东滨州医学院病原生物学教研室山东烟台264003

目的构建尿路致病性大肠埃希菌Ⅰ型菌毛的fimH基因真核表达载体,为尿路致病性大肠埃希菌的核酸疫苗研制奠定基础。方法通过PCR扩增尿路致病性大肠埃希菌临床分离株的fimH全基因序列,克隆至pMD19-T载体,PCR、酶切及测序鉴定后,将fimH基... 详细信息

目的构建尿路致病性大肠埃希菌Ⅰ型菌毛的fimH基因真核表达载体,为尿路致病性大肠埃希菌的核酸疫苗研制奠定基础。方法通过PCR扩增尿路致病性大肠埃希菌临床分离株的fimH全基因序列,克隆至pMD19-T载体,PCR、酶切及测序鉴定后,将fimH基因片段克隆至真核表达载体pcDNA3.0,构建pcDNA3.0-fimH重组质粒,并进行PCR和酶切鉴定。结果 PCR扩增尿路致病性大肠埃希菌fimH基因片段为910 bp;构建的pcDNA3.0-fimH重组质粒经BamHⅠ和XhoⅠ双酶切,产生1个与fimH基因PCR产物大小一致的小片段和1个不同于pcDNA3.0-fimH重组质粒的大片段,表明fimH基因已成功插入pcDNA3.0质粒中。结论成功构建尿路致病性大肠埃希菌fimH基因真核表达载体pcDNA3.0-fimH。

关键词：尿路致病性大肠埃希菌 fimH 核酸疫苗

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