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中国组织工程研究 2025年第4期29卷 661-669页

作者：孙现娟王秋花张锦艺杨杨杨王文双张晓晴滨州医学院基础医学院人体解剖与组织胚胎学教研室生物材料与组织再生国际合作联合实验室山东省烟台市264003 烟台毓璜顶医院妇科山东省烟台市264000

背景:临床上迫切需要小口径人工血管来治疗冠状动脉和外周动脉疾病,目前,血管组织工程已成为制备小口径人工血管的主要方法,选择合适的生物材料和细胞来源是小口径组织工程血管构建成功的关键因素。目的:观察4种静电纺丝膜材料对骨髓间... 详细信息

背景:临床上迫切需要小口径人工血管来治疗冠状动脉和外周动脉疾病,目前,血管组织工程已成为制备小口径人工血管的主要方法,选择合适的生物材料和细胞来源是小口径组织工程血管构建成功的关键因素。目的:观察4种静电纺丝膜材料对骨髓间充质干细胞增殖、黏附及分化为血管平滑肌细胞的影响。方法:分离提取SD大鼠骨髓间充质干细胞。将骨髓间充质干细胞分别接种于聚己内酯(PCL)、聚己内酯-透明质酸(PCL-HA)、聚己内酯-丝素蛋白(PCL-SF)、聚己内酯-明胶(PCL-GEL)静电纺丝膜材料上,培养1,3,7 d后,扫描电镜下观察材料上的细胞排布,鬼笔环肽染色观察材料上的细胞增殖与黏附,qRT-PCR检测材料上细胞分泌的CD90、Meflin、转化生长因子βmRNA表达;向血管平滑肌细胞诱导分化7 d后,qRT-PCR检测材料上细胞ɑ-平滑肌肌动蛋白mRNA表达。结果与结论:①扫描电镜下可见骨髓间充质干细胞在4种静电纺丝膜上均沿着静电纺丝膜的纤维走向排列;②鬼笔环肽染色显示,骨髓间充质干细胞在4种静电纺丝膜上分布规律,均沿着纤维走向呈现平行分布,并且PCL-HA、PCL-SF、PCL-GEL静电纺丝膜较PCL静电纺丝膜更有利于骨髓间充质干细胞的增殖、黏附,PCL-SF静电纺丝膜相较于PCL-HA、PCL-GEL静电纺丝膜更有利于骨髓间充质干细胞的增殖、黏附;③qRT-PCR检测显示,4种静电纺丝膜材料均可维持骨髓间充质干细胞CD90和Meflin的mRNA表达,组间比较差异无显著性意义(P>0.05);PCL-HA、PCL-SF、PCL-GEL组培养1,7 d的转化生长因子βmRNA表达高于PCL组(P<0.05),PCL-SF组培养3,7 d的转化生长因子βmRNA表达高于其他3组(P<0.05),PCL-HA组培养7 d的转化生长因子βmRNA表达高于PCL-GEL组(P<0.05);④qRT-PCR检测显示,PCL-SF组ɑ-平滑肌肌动蛋白mRNA表达高于其他3组(P<0.05),PCL-HA组ɑ-平滑肌肌动蛋白mRNA表达高于PCL组(P<0.05);⑤结果表明:相较于PCL、PCL-HA、PCL-GEL静电纺丝膜,PCL-SF静电纺丝膜与骨髓间充质干细胞结合更适合制备小口径组织工程血管。

关键词：骨髓间充质干细胞小口径组织工程血管静电纺丝聚己内酯聚己内酯-透明质酸聚己内酯-丝素蛋白聚己内酯-明胶

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聚己内酯-透明质酸静电纺丝膜联合间充质干细胞修复子宫内膜损伤

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中国组织工程研究 2025年第16期29卷 3369-3379页

作者：安江茹张锦艺王秋花杨杨杨王文双张晓晴滨州医学院基础医学院人体解剖与组织胚胎学教研室生物材料与组织再生国际合作联合实验室山东省烟台市264003 烟台毓璜顶医院妇科山东省烟台市264000

背景:人子宫内膜间充质干细胞能够直接修复受损的子宫内膜,促进血管生成、恢复子宫形态结构,然而将干细胞直接注入受损子宫内膜后的细胞存活率低、滞留时间短,修复效果有限。目的:观察聚己内酯-透明质酸静电纺丝膜复合人子宫内膜间充质... 详细信息

背景:人子宫内膜间充质干细胞能够直接修复受损的子宫内膜,促进血管生成、恢复子宫形态结构,然而将干细胞直接注入受损子宫内膜后的细胞存活率低、滞留时间短,修复效果有限。目的:观察聚己内酯-透明质酸静电纺丝膜复合人子宫内膜间充质干细胞修复大鼠子宫内膜损伤的效果。方法:①细胞实验:采用胶原酶消化法提取人子宫内膜间充质干细胞,静电纺丝技术制备聚己内酯-透明质酸静电纺丝膜。将人子宫内膜间充质干细胞分别接种于聚苯乙烯培养板与聚己内酯-透明质酸静电纺丝膜上,通过DNA定量分析、WST-1细胞活性实验、鬼笔环肽染色、扫描电镜观察细胞的增殖与黏附能力,qRT-PCR检测静电纺丝膜上细胞CD90、Meflin的mRNA表达。②动物实验:取27只处于动情期的雌性SD大鼠,通过机械搔刮法建立宫腔粘连模型后随机分为3组,每组9只:空白对照组不进行任何治疗,对照组将聚己内酯-透明质酸静电纺丝膜植入宫腔损伤部位,实验组将聚己内酯-透明质酸静电纺丝膜/人子宫内膜间充质干细胞补片植入宫腔损伤部位。术后第3,7,14天取材,采用苏木精-伊红染色观察子宫形态结构及腺体数量,qRT-PCR和免疫荧光染色观察子宫组织CD31、血管内皮生长因子的表达。结果与结论:①细胞实验:与聚苯乙烯培养板相比,聚己内酯-透明质酸静电纺丝膜可促进人子宫内膜间充质干细胞的增殖与黏附,并且聚己内酯-透明质酸静电纺丝膜支持人子宫内膜间充质干细胞基因CD90和Meflin的表达;②动物实验:苏木精-伊红染色显示,聚己内酯-透明质酸静电纺丝膜/人子宫内膜间充质干细胞补片可促进子宫内膜损伤后形态结构的恢复,术后第14天的内膜厚度与腺体数量均多于空白对照组、对照组(P<0.05);qRT-PCR和免疫荧光染色检测显示,实验组术后第7,14天的CD31、血管内皮生长因子mRNA与蛋白表达均高于空白对照组、对照组(P<0.05);③结果表明:聚己内酯-透明质酸静电纺丝膜可以提高干细胞的存活率、延长干细胞与受损组织的接触时间,二者复合移植可更好地修复受损子宫内膜组织。

关键词：子宫内膜宫腔粘连人子宫内膜间充质干细胞静电纺丝膜聚己内酯透明质酸

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注射用头孢美唑钠与牛血清白蛋白相互作用的研究

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光谱实验室 2011年第1期28卷 136-139页

作者：张洪芹张怀斌滨州医学院烟台校区组织胚胎学教研室滨州医学院烟台校区化学教研室

荧光光谱法研究了注射用头孢美唑钠(Cefmetazole Sodium for Injection,CS)与牛血清白蛋白(BSA)的作用机制。结果表明,头孢美唑钠对BSA具有荧光猝灭作用,其猝灭方式为静态猝灭,求出了猝灭常数、结合常数及结合位点数。研究了Zn2+对头孢... 详细信息

荧光光谱法研究了注射用头孢美唑钠(Cefmetazole Sodium for Injection,CS)与牛血清白蛋白(BSA)的作用机制。结果表明,头孢美唑钠对BSA具有荧光猝灭作用,其猝灭方式为静态猝灭,求出了猝灭常数、结合常数及结合位点数。研究了Zn2+对头孢美唑钠与BSA作用的影响,Zn2+的加入使得头孢美唑钠与BSA的结合常数与结合位点数减小。

关键词：头孢美唑钠牛血清白蛋白荧光光谱 Zn2+

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羟基红花黄色素A通过PI3K通路抑制人肝癌细胞增殖、迁移并促进其凋亡

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肿瘤 2018年第9期38卷 830-839页

作者：宋浩然王东李京敏杨艳艳牟新博白咸勇滨州医学院基础医学院人体解剖与组织胚胎学教研室山东烟台264003

目的:探讨羟基红花黄色素A(hydroxysa or yellow A,HSYA)对人肝癌细胞增殖、凋亡及迁移的影响,并判断是否通过磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(protein kinase B,PKB,又称Akt)信号通路发挥作用。方法:HSYA和PI3K抑制剂LY294002处理人肝癌HepG2、Hep3B和SMMC7721细胞后,分别采用CCK-8法、克隆形成实验和划痕愈合实验检测细胞增殖、克隆形成和迁移能力。FCM法检测HSYA和LY294002对人肝癌HepG2细胞凋亡的影响,蛋白质印迹法检测HSYA和LY294002对人肝癌HepG2细胞中基质金属蛋白酶2(matrix metalloprotein 2,MMP2)、caspase 3、cleaved-caspase 3和磷酸化Akt(phospho-Akt,p-Akt)蛋白表达的影响。结果:50μmol/L HSYA和10μmol/L LY294002均可抑制人肝癌HepG2、Hep3B和SMMC7721细胞的增殖(P值均<0.05)。50μmol/L HSYA、10μmol/LLY294002和50μmol/LHSYA联合10μmol/LLY294002处理组HepG2、Hep3B和SMMC7721细胞克隆形成率和迁移率均低于未处理的对照组(P值均<0.05),HSYA联合LY294002处理组HepG2、Hep3B和SMMC7721细胞克隆形成率和迁移率低于HSYA和LY294002单独处理组(P值均<0.01)。HSYA、LY294002和HSYA联合LY294002处理组HepG2细胞凋亡率均高于未处理的对照组(P值均<0.05),HSYA联合LY294002处理组HepG2细胞凋亡率高于HSYA和LY294002单独处理组(P值均<0.01)。HSYA、LY294002和HSYA联合LY294002处理组HepG2细胞中p-Akt、MMP2和caspase 3蛋白表达水平均低于未处理的对照组(P值均<0.01),cleaved-caspase 3蛋白表达水平高于未处理的对照组(P <0.01),HSYA联合LY294002处理组的效果均好于HSYA和LY294002单独处理组(P值均<0.01)。结论:HSYA可以抑制肝癌HepG2、Hep3B和SMMC7721细胞的增殖和迁移,并可促进HepG2细胞凋亡。HSYA可能通过抑制PI3K/Akt信号通路诱导人肝癌HepG2细胞凋亡。

关键词：肝肿瘤细胞增殖细胞凋亡羟基红花黄色素A PI3K/Akt通路 LY294002

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《组织学与胚胎学》案例版教材对培养医学生临床思维的体会

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解剖学杂志 2009年第5期32卷 711-712页

作者：张连双张洪芹时彦李雅娜赵伟滨州医学院烟台校区组织学与胚胎学教研室烟台264003

医学院校培养的医学生不仅要掌握相关的医学知识和医学技能，还要具备一定的临床思维能力。在知识以及经验积累的过程中，个人对医学模式的理解、对医学知识体系掌握的程度，以及个人的思维能力和思维习惯都决定着临床思维的形成。临床... 详细信息

医学院校培养的医学生不仅要掌握相关的医学知识和医学技能，还要具备一定的临床思维能力。在知识以及经验积累的过程中，个人对医学模式的理解、对医学知识体系掌握的程度，以及个人的思维能力和思维习惯都决定着临床思维的形成。临床思维的重要基础，一方面是充分掌握临床实际情况；另一方面是应用基础理论知识进行分析思考。

关键词：临床思维能力培养医学生《组织学与胚胎学》医学知识体系教材案例基础理论知识医学技能

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浅谈大学生科技创新在医学院校中的实施与体会

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解剖学杂志 2014年第2期37卷 272-273页

作者：张连双赵伟王东李红星滨州医学院烟台校区组织学与胚胎学教研室烟台264003

在目前的教育形势下,越来越多的教学活动更注重对学生动手能力和综合能力的提高[1].科技创新是培养创新型人才的有效途径,开展大学生科技创新活动已成为高校人才培养的一项重要内容[2].大学生科技创新是指为了培养大学生的科技意识、科... 详细信息

在目前的教育形势下,越来越多的教学活动更注重对学生动手能力和综合能力的提高[1].科技创新是培养创新型人才的有效途径,开展大学生科技创新活动已成为高校人才培养的一项重要内容[2].大学生科技创新是指为了培养大学生的科技意识、科研精神,加强大学生创新能力与实践能力,以学生为主体,在国家和学校有关部门组织引导下,依靠教师的指导帮助,自主开展的各种科技学术活动[3].我校作为医学院校,近几年也开展了丰富多彩的大学生科技创新活动,其主要形式为3～5个学生为1个小组,推选1个学生为负责人,学生在课余时间自己主动联系有课题的教师,教师根据自己的研究方向给学生布置相关文献,学生在课余时间查阅文献,撰写标书,上报学校科研部门,专家评议,择优立项资助,学生在教师指导下,进行相关的科研实验,实验完毕后,上交实验实物或撰写一定的科研论文.通过近几年大学生科技创新活动的实施,总结了一些经验和不足,现归纳如下.

关键词：科技创新大学生医学院校人才培养以学生为主体科研精神查阅文献创新型人才

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Elf-1和survivin在非小细胞肺癌组织中的表达及其与肿瘤微血管生成的相关性研究

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癌症 2010年第4期29卷 434-441页

作者：杨东霞李乃娥马云韩艳春时彦滨州医学院病理学教研室山东烟台264003 滨州医学院诊断学教研室山东烟台264003 滨州医学院组织学与胚胎学教研室山东烟台264003

背景与目的:非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中转录因子Elf-1与凋亡抑制因子survivin的表达均与血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)有关,且二者均是和细胞周期有关的因子。因此本研究检测N... 详细信息

背景与目的:非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中转录因子Elf-1与凋亡抑制因子survivin的表达均与血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)有关,且二者均是和细胞周期有关的因子。因此本研究检测NSCLC组织中Elf-1、survivin和CD105标记的瘤内微血管密度(intra-tumor microvessel density,IMVD)的表达,探讨三者在NSCLC中表达的意义及关系。方法:采用免疫组化Power Vision TM-9000法检测60例NSCLC组织的组织芯片及9例正常肺组织中Elf-1、survivin和IMVD的表达水平;Western blot检测17例NSCLC组织及5例正常肺组织中Elf-1、survivin的蛋白表达。结果:在正常肺组织中各见1例有Elf-1和survivin弱阳性表达,余为阴性,在NSCLC组织中表达的阳性率分别为70.0%和65.0%,其表达水平与肿瘤细胞分化程度、淋巴结转移、临床分期和术后生存期有关(全部P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析表明二者的过表达均与患者的生存率有关,阳性表达的患者生存率明显低于阴性者(P<0.01)。Kendell相关分析显示,在NSCLC组织中,二者的表达呈正相关(r=0.769,P<0.01);Spearman相关分析表明,CD105标记的IMVD与Elf-1、survivin的表达均呈正相关(r=0.446,P<0.01;r=0.435,P<0.01)。结论:Elf-1、survivin在NSCLC组织中的过表达与肿瘤细胞的分化程度、转移和预后均有关,联合检测其表达水平可作为判定NSCLC恶性生物学行为的参考指标;二者的表达均与IMVD有关,阻断其作用或可成为抗肿瘤血管生成的新途径。

关键词： Elf-1 survivin CD105 IMVD 非小细胞肺癌

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Kisspeptin/kiss1 r系统在营养性肥胖雄性大鼠下丘脑弓状核的表达以及对下丘脑-垂体-睾丸轴的影响

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中华男科学杂志 2014年第9期20卷 792-797页

作者：刘冉冉张洪芹滨州医学院烟台校区组织学与胚胎学教研室山东烟台264003

目的:通过构建营养性肥胖雄性大鼠的模型,探讨下丘脑弓状核kisspeptin/kiss1r系统和促性腺激素释放激素(GnRH)的表达和作用,以及对下丘脑-垂体-睾丸轴(HPT)的影响。方法:孕14 d SD大鼠,其后代随机分为正常组和高能饲料组,构建营养性肥... 详细信息

目的:通过构建营养性肥胖雄性大鼠的模型,探讨下丘脑弓状核kisspeptin/kiss1r系统和促性腺激素释放激素(GnRH)的表达和作用,以及对下丘脑-垂体-睾丸轴(HPT)的影响。方法:孕14 d SD大鼠,其后代随机分为正常组和高能饲料组,构建营养性肥胖模型。将肥胖大鼠进一步分为对照组和实验组,实验组侧脑室注入kisspeptin。记录体重参数和内分泌激素的改变;免疫组化和Western印迹检测各组大鼠下丘脑弓状核中瘦素受体(LepR)、kisspeptin、kiss1r和GnRH的蛋白表达。qRT-PCR检测各组大鼠下丘脑弓状核GnRH mRNA的表达。结果:成功构建营养性肥胖大鼠,体重参数和内分泌激素改变明显。相比较正常组,对照组大鼠弓状核LepR、kisspeptin和GnRH表达减少,侧脑室注入kisspeptin后,实验组大鼠弓状核GnRH显著增加,血清LH和T水平显著升高,未见LepR和kiss1r的改变。结论:中枢注入kisspeptin可以显著改善由营养性肥胖引起的GnRH低表达,纠正HPT轴功能失调,进而改善生殖功能。

关键词： kisspeptin/kiss1r系统促性腺激素释放激素瘦素受体肥胖下丘脑-垂体-睾丸轴大鼠

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浅谈组织学与胚胎学实验室开放的实施和体会

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解剖学杂志 2011年第6期34卷 861-862页

作者：张连双赵伟李红星滨州医学院组织学与胚胎学教研室烟台264003

实验教学是高等医学院校教学的关键环节，它不仅培养学生动手能力，同时也培养学生科学求实的态度、严谨周密的工作作风和团结协作的精神。但是，由于受到实验内容、时间、人员、学时、教学设备等方面的限制，学生在实验过程中总觉得时... 详细信息

实验教学是高等医学院校教学的关键环节，它不仅培养学生动手能力，同时也培养学生科学求实的态度、严谨周密的工作作风和团结协作的精神。但是，由于受到实验内容、时间、人员、学时、教学设备等方面的限制，学生在实验过程中总觉得时间紧，操作机会少，忙于应付实验，学习积极性不高，是一个被动学习过程。原因在于长期形成的重理论而轻实验的弊端，不利于医学人才的培养。培养出的学生处于“高分低能”状态。因此在高等医学院校建设开放式实验室显得尤为重要。

关键词：实验室开放胚胎学组织学高等医学院校开放式实验室实验教学学习积极性动手能力

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督脉电针联合神经干细胞移植治疗脊髓全横断损伤后aggrecan的表达变化

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解剖学杂志 2011年第4期34卷 514-517页

作者：赵伟滨州医学院组织学与胚胎学教研室烟台264003

目的：观察督脉电针联合神经干细胞（NSCs）移植治疗脊髓损伤对硫酸软骨素蛋白多糖aggrecan的表达影响。方法：成年SD大鼠随机分为脊髓损伤对照组、督脉电针组、NSCs移植组以及督脉电针联合NSCs移植组。建立成年大鼠第9～10胸椎段脊髓... 详细信息

目的：观察督脉电针联合神经干细胞（NSCs）移植治疗脊髓损伤对硫酸软骨素蛋白多糖aggrecan的表达影响。方法：成年SD大鼠随机分为脊髓损伤对照组、督脉电针组、NSCs移植组以及督脉电针联合NSCs移植组。建立成年大鼠第9～10胸椎段脊髓全横断模型。其中电针组和电针联合NSCs组于术后当天进行电针治疗。用免疫组织化学ABC法和图像分析技术检测脊髓内aggrecan的表达。结果：脊髓损伤对照组aggrecan的表达较正常组增加；术后14d，督脉电针组、NSCs移植组和电针联合NSCs移植组的aggrecan表达较损伤对照组均有减少；术后28d，这3组的aggrecan表达仍保持较低水平；aggrecan的表达变化以督脉电针组和电针联合NSCs移植组最为明显。结论：督脉电针与NSCs移植联合应用能降低脊髓损伤后aggrecan的表达，从而减弱aggrecan对轴突再生的抑制作用，这可能是两者联合治疗促进脊髓损伤修复的可能机制之一。

关键词：督脉电针神经干细胞移植脊髓损伤 aggrecan 硫酸软骨素蛋白多糖大鼠

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