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临床与实验病理学杂志 2018年第12期34卷 1302-1307页

作者：王照岩杨志一林祥博陈智凯李洪利尹崇高牟青杰刘雨清山东省潍坊医学院病理学教研室潍坊261053 山东省潍坊医学院生物科学与技术学院潍坊261053 山东省潍坊医学院医学研究实验中心潍坊261053 山东省潍坊医学院护理学院潍坊261053 山东省潍坊医学院临床学院潍坊261053

目的探讨miR-504靶向染色质解旋酶DNA结合蛋白(chromodomain helicase/ATPase DNA binding protein 1-like gene,CHD1L)抑制乳腺癌细胞侵袭的分子机制。方法 qRT-PCR检测人正常乳腺上皮细胞(MCF-10A)与乳腺癌细胞(MDA-MB-231、MCF-7)中miR-504的表达量,同时检测miR-504在MDA-MB-231细胞中的转染效率;双荧光素酶实验检测miR-504与CHD1L是否存在结合靶点;qRT-PCR及Western blot法检测CHD1L mRNA和蛋白的表达水平;Transwell侵袭实验检测MDAMB-231细胞的侵袭能力;Western blot法检测p-Akt、MMP-2和MMP-9的表达情况。结果乳腺癌细胞中miR-504的表达量明显低于人正常乳腺上皮细胞(P <0. 05);miR-504在MDA-MB-231/miR-504组中的表达水平明显增高(P <0. 05);双荧光素酶实验检测显示miR-504能与CHD1L mRNA的3'-UTR结合;此外,过表达miR-504后CHD1L mRNA的表达水平无显著变化,但CHD1L蛋白表达水平显著降低(P <0. 05);与MDA-MB-231/NC组相比,MDA-MB-231/miR-504组侵袭能力明显降低,而MDA-MB-231/miR-504+CHD1L组侵袭能力比MDA-MB-231/miR-504+Con组明显增加;用表皮生长因子分别刺激转染不同质粒的MDA-MB-231细胞,与MDA-MB-231/NC组相比,MDA-MB-231/miR-504组中p-Akt、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平明显降低(P <0. 05),而MDA-MB-231/miR-504+CHD1L组中p-Akt、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平与MDA-MB-231/miR-504+Con组相比明显增加(P <0. 05)。结论 miR-504靶向CHD1L通过PI3K/Akt/MMP信号通路抑制乳腺癌细胞的侵袭。

关键词：乳腺肿瘤 miR-504 CHD1L PI3K/Akt/MMP 侵袭

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“翻转课堂+对分课堂”教学模式运用于人体解剖学教学的可行性分析

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中国组织化学与细胞化学杂志 2018年第1期27卷 92-95页

作者：刘清华李磊高香红王巧真蒋吉英刘雨清潍坊医学院人体解剖学教研室潍坊261053 潍坊医学院病理学教研室潍坊261053

本研究以提升医学专业学生的自主学习能力为目标,将"翻转课堂和对分课堂"两种教学模式相结合,并运用于人体解剖学教学中,可以使学生在课后,通过教学视频、音频、电子教材等数字电子资料补充学习,来提高自主选择学习的能力,增... 详细信息

本研究以提升医学专业学生的自主学习能力为目标,将"翻转课堂和对分课堂"两种教学模式相结合,并运用于人体解剖学教学中,可以使学生在课后,通过教学视频、音频、电子教材等数字电子资料补充学习,来提高自主选择学习的能力,增加课堂中生生及师生互动时间,以解决学生学习基础层次不齐、讨论时间不够等问题,最终提高课堂讨论的实效性,实现学生的个性化发展。

关键词：对分课堂翻转课堂人体解剖学教学

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Wnt7a抑制胃癌细胞的增殖、侵袭和迁移

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中国组织化学与细胞化学杂志 2018年第5期27卷 446-452页

作者：王淑坤丁康孙丹卢强刘美逸张妍苗玉娟周风华潍坊医学院病理学教研室潍坊261053 潍坊医学院生物科学与技术学院潍坊261053

目的探讨Wnt7a在胃癌发生发展中的作用及机制,为胃癌的临床治疗提供潜在靶点。方法实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)及Western blot技术检测胃癌组织中Wnt7a mRNA及蛋白水平的表达变化,通过免疫组织化学法检测癌胃癌组织中Wnt7a的表达和分... 详细信息

目的探讨Wnt7a在胃癌发生发展中的作用及机制,为胃癌的临床治疗提供潜在靶点。方法实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)及Western blot技术检测胃癌组织中Wnt7a mRNA及蛋白水平的表达变化,通过免疫组织化学法检测癌胃癌组织中Wnt7a的表达和分布情况,以癌旁正常组织作为对照;观察Wnt7a的差异表达与胃癌临床病理参数及预后的关系;Wnt7a过表达质粒转染胃癌细胞系SGC7901,通过MTS实验和EDU实验检测细胞的活性和增殖状态,流式细胞仪检测细胞的凋亡状态,Transwell实验检测细胞的侵袭和迁移状态。结果 qRT-PCR及Western blot结果显示,与癌旁正常组织相比,Wnt7a在m RNA及蛋白水平表达下调,免疫组织化学结果显示Wnt7a阳性表达呈棕黄色颗粒状,主要分布于细胞胞质,在胃癌组织的阳性率明显低于正常胃组织;与高表达Wnt7a患者相比,Wnt7a低表达患者胃癌的肿瘤体积相对较大,TNM分期较高,淋巴结转移率较高,预后较差;在SGC7901细胞中过表达Wnt7a能够显著抑制肿瘤细胞的增殖、侵袭和迁移,对细胞的凋亡能力无明显影响。结论在胃癌的发生发展中,Wnt7a发挥了抑癌基因的作用,抑制细胞增殖、侵袭和迁移。

关键词： Wnt7a 胃癌增殖侵袭迁移

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miR-31通过结合Dock180抑制乳腺癌细胞侵袭

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临床与实验病理学杂志 2017年第3期33卷 241-244页

作者：郑书贤孙雪梅王瑞鸽史立宏张宝刚潍坊医学院病理学教研室潍坊261053 潍坊医学院药理学教研室潍坊261053

目的探讨miR-31表达与Dock180表达的相关性,以及miR-31通过结合Dock180对乳腺癌细胞侵袭能力的影响。方法通过脂质体转染技术,将miR-31转染乳腺癌细胞系过表达miR-31;采用荧光酶报告基因检测miR-31与Dock180的结合方式;应用Western blo... 详细信息

目的探讨miR-31表达与Dock180表达的相关性,以及miR-31通过结合Dock180对乳腺癌细胞侵袭能力的影响。方法通过脂质体转染技术,将miR-31转染乳腺癌细胞系过表达miR-31;采用荧光酶报告基因检测miR-31与Dock180的结合方式;应用Western blot法检测miR-31表达不同的乳腺癌细胞中Dock180和其他相关蛋白的表达;RT-PCR检测miR-31与Dock180 mRNA的关系;基质胶侵袭实验检测miR-31过表达时,乳腺癌细胞的侵袭能力。结果在乳腺癌细胞中,miR-31靶向结合Dock180,且Dock180蛋白表达与miR-31表达呈负相关,Dock180下调和miR-31上调削弱了乳腺癌的侵袭能力。结论miR-31可通过结合Dock180抑制乳腺癌细胞的侵袭。

关键词：乳腺肿瘤 miR-31 Dock180 侵袭

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阿霉素通过Stat3-cMyc途径诱导三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞耐药性

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肿瘤防治研究 2018年第12期45卷 949-953页

作者：徐金媛成丛丛钟瑾怡崔镓钰张宝刚王丽华孙秀宁史立宏潍坊医学院药学院潍坊261053 潍坊医学院附属医院分子肿瘤学实验室潍坊261053 潍坊医学院临床医学院潍坊261053 潍坊医学院病理学教研室潍坊261053 潍坊医学院病原微生物学教研室潍坊261053

目的观察阿霉素(Adriamycin,ADM)对人三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞耐药性的诱导作用并探讨其机制。方法培养人三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞,用不同浓度阿霉素处理细胞24 h后,MTT法检测细胞生长抑制率及细胞对阿霉素的敏感度。免疫荧光染... 详细信息

目的观察阿霉素(Adriamycin,ADM)对人三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞耐药性的诱导作用并探讨其机制。方法培养人三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞,用不同浓度阿霉素处理细胞24 h后,MTT法检测细胞生长抑制率及细胞对阿霉素的敏感度。免疫荧光染色法检测耐药蛋白ABCG2的表达;免疫印迹法检测Stat3、p-Stat3、转录因子cMyc及耐药蛋白ABCG2的表达水平。结果阿霉素持续刺激4周后,获得的MDA-MB-468/ADM细胞对阿霉素的敏感度明显降低,且耐药蛋白ABCG2的表达明显增加;MDA-MB-468/ADM细胞p-Stat3、cMyc及ABCG2的表达量显著增加;MDAMB-468/ADM细胞培养液中加入WP1066后Stat3磷酸化明显抑制,cMyc及ABCG2的表达水平下调,并且MDA-MB-468/ADM细胞对阿霉素的敏感度明显增强(P<0.05)。结论阿霉素可以通过Stat3-cMyc途径诱导三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞产生耐药性。

关键词：三阴性乳腺癌阿霉素耐药性 Stat3 cMyc ABCG2

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Raptor通过上皮-间质转化促进乳腺癌的侵袭与转移

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中国药理学通报 2017年第8期33卷 1091-1095页

作者：徐新伟王照岩王瑞鸽李洪利尹崇高刘雨清潍坊医学院病理学教研室山东潍坊261053 潍坊医学院医学研究实验中心山东潍坊261053 潍坊医学院护理学院山东潍坊261053

目的探讨Raptor在乳腺癌侵袭与转移过程中的作用。方法采用Western blot检测乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231(MDA231)中Raptor蛋白的表达情况。应用小干扰RNA技术下调乳腺癌细胞MDA231中Raptor的表达量,同时将过表达质粒转入乳腺癌细胞MCF-... 详细信息

目的探讨Raptor在乳腺癌侵袭与转移过程中的作用。方法采用Western blot检测乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231(MDA231)中Raptor蛋白的表达情况。应用小干扰RNA技术下调乳腺癌细胞MDA231中Raptor的表达量,同时将过表达质粒转入乳腺癌细胞MCF-7中,应用Western blot法检测转染后各组细胞中上皮性钙黏着蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的表达;应用Transwell体外侵袭实验检测转染后各组细胞的侵袭能力;应用细胞核质分离实验检测转染后各组细胞中Snail蛋白的转核情况。结果MCF-7细胞中Raptor蛋白的表达量明显低于MDA231细胞中的表达量;转染后,与对照组Scr/MDA231相比,siRaptor/MDA231组中Raptor蛋白的表达量明显降低,Vimentin蛋白表达量降低,而E-cadherin蛋白表达量升高;与对照组MCF-7/Con相比,MCF-7/Raptor组中Raptor蛋白的表达量明显升高,并伴有Vimentin蛋白表达量升高,而Ecadherin蛋白表达量降低。siRaptor/MDA231细胞组中穿过Matrigel小室的细胞数量明显减少(P<0.05);MCF-7/Raptor细胞组中穿过Matrigel小室的细胞数量明显升高(P<0.05)。细胞核质分离实验结果显示,siRaptor/MDA231组中Snail蛋白表达量较Scr/MDA231组中明显降低;MCF-7/Raptor组中Snail蛋白表达量较MCF-7/Con组中明显升高。结论 Raptor能够促进乳腺癌EMT的发生,对乳腺癌的侵袭与转移有重要作用。

关键词： Raptor 上皮-间质转化乳腺癌侵袭转移核质分离

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Notch1在肌萎缩侧索硬化症转基因鼠动物模型和细胞模型中的表达变化

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解剖学杂志 2017年第1期40卷 21-25页

作者：杜红梅管英俊于丽陈燕春周风华张皓云接琳琳刘永新潍坊医学院组织学与胚胎学教研室潍坊261053 潍坊医学院病理学教研室潍坊261053 潍坊医学院基础医学概论教研室潍坊261053

目的:观察Notch1在肌萎缩侧索硬化症(ALS)转基因鼠动物模型和细胞模型中的表达情况。方法:应用免疫荧光、免疫印迹、RT-PCR,检测Notch1在95、108、122 d ALS转基因鼠脊髓中的表达变化;检测转染pEGFP-wt-SOD1和pEGFPG93A-SOD1的NSC34细... 详细信息

目的:观察Notch1在肌萎缩侧索硬化症(ALS)转基因鼠动物模型和细胞模型中的表达情况。方法:应用免疫荧光、免疫印迹、RT-PCR,检测Notch1在95、108、122 d ALS转基因鼠脊髓中的表达变化;检测转染pEGFP-wt-SOD1和pEGFPG93A-SOD1的NSC34细胞模型中Notch1的表达变化。结果:Notch1可与β-tubulinⅢ共表达,与GFAP无明显共表达。较同窝野生型鼠,Notch1于蛋白水平和mRNA水平上的表达在95 d ALS转基因鼠脊髓中无明显变化,在108 d和122 d ALS转基因鼠脊髓中明显升高;与转染pEGFP-wt-SOD的NSC34细胞相比,转染pEGFP-G93A-SOD1的NSC34细胞中Notch1蛋白和mRNA表达增多。结论:Notch1在ALS转基因鼠动物模型和细胞模型中表达增多,提示Notch1信号通路可能与ALS相关。

关键词：肌萎缩侧索硬化症转基因鼠 Notch1 NSC34

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钙反应性反式激活因子在肌萎缩侧索硬化症转基因鼠中的表达及意义

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中国老年学杂志 2017年第17期37卷 4177-4179页

作者：卢强陈燕春刘永新接琳琳王巧真杜红梅宋妍侯琛周风华潍坊医学院病理学教研室山东潍坊261053 潍坊医学院组织学与胚胎学教研室潍坊医学院人体解剖学教研室

目的探讨钙反应性反式激活因子(CREST)在肌萎缩侧索硬化症(ALS)转基因鼠脊髓及脑干组织中的表达变化及相关性作用。方法分别取出生后95 d、108 d、122 d(早、中、晚期)野生型与SOD1-G93A转基因鼠,通过RT-PCR、蛋白免疫印迹技术检测脊髓... 详细信息

目的探讨钙反应性反式激活因子(CREST)在肌萎缩侧索硬化症(ALS)转基因鼠脊髓及脑干组织中的表达变化及相关性作用。方法分别取出生后95 d、108 d、122 d(早、中、晚期)野生型与SOD1-G93A转基因鼠,通过RT-PCR、蛋白免疫印迹技术检测脊髓组织中CREST mRNA及蛋白水平表达变化,通过免疫荧光双标记技术检测脊髓及脑干组织中CREST的表达变化及与神经元及星形胶质细胞的共表达情况。结果 (1)与野生型鼠相比较,SOD1-G93A转基因鼠脊髓组织中CREST蛋白水平下调(P<0.05),在mRNA水平变化并不明显。(2)免疫荧光双标检测显示,CREST主要表达于细胞核,与神经元有共表达,与星形胶质细胞不存在共表达;与野生型鼠比较,SOD1-G93A转基因鼠脊髓和脑干组织中CREST表达下调(P<0.05)。结论 CREST的差异表达可能与ALS运动神经元的功能障碍有关。

关键词：钙反应性反式激活因子肌萎缩侧索硬化症

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miR-125a-5p通过靶向调控GAB2抑制乳腺癌细胞的迁移能力

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中国生物化学与分子生物学报 2017年第9期33卷 925-930页

作者：徐新伟李佩瑞张增山王学文李洪利尹崇高潍坊医学院病理学教研室山东潍坊261053 潍坊医学院附属医院山东潍坊261053 潍坊医学院医学研究实验中心山东潍坊261053 潍坊医学院护理学院山东潍坊261053

miR-125a-5p可负性调节GAB2表达,抑制胶质瘤细胞的侵袭和转移。本研究旨在证明miR-125a-5p抑癌作用的普遍性,即miR-125a-5p是否可通过靶向抑制GAB2抑制乳腺癌细胞的迁移。荧光素酶实验结果显示,miR-125a-5p可特异识别GAB2的3'-UTR,... 详细信息

miR-125a-5p可负性调节GAB2表达,抑制胶质瘤细胞的侵袭和转移。本研究旨在证明miR-125a-5p抑癌作用的普遍性,即miR-125a-5p是否可通过靶向抑制GAB2抑制乳腺癌细胞的迁移。荧光素酶实验结果显示,miR-125a-5p可特异识别GAB2的3'-UTR,抑制报告酶的表达。荧光定量PCR结果揭示,与正常乳腺上皮细胞MCF-10A比较,miR-125a-5p在乳腺癌细胞MDA231和MCF-7中的表达明显降低;与迁移能力相对较低的MCF-7细胞比较,miR-125a-5p在迁移能力较高的MDA231细胞中的表达量更低。Western印迹结果证明,与空载体(对照)和anti-miR125a-5p转染细胞比较,转染miR-125a-5p明显抑制GAB2蛋白在乳腺癌细胞中的表达。Transwell结果显示,与空载体转染的对照细胞比较,转染miR-125a-5p的乳腺癌细胞穿过基质胶的细胞数明显减少;相反,转染anti-miR125a-5p的细胞穿过基质胶的细胞数却明显增多。上述结果提示,miR-125a-5p在正常的乳腺细胞中高表达,而在乳腺癌细胞中低表达,其表达水平与癌细胞的迁移能力和GAB2表达呈反向关系。本研究结果还提示,miR-125a-5p通过靶向负调控GAB2抑制乳腺癌细胞的迁移能力。总之,本研究证明,miR-125a-5p在肿瘤中发挥抑癌作用。

关键词：乳腺癌 miR-125a-5p GRB相关结合蛋白2 迁移

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海藻提取物对病毒感染的大鼠1型糖尿病Vβ13基因表达及Treg细胞的影响(英文)

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中国海洋药物 2017年第3期36卷 34-40页

作者：管福来尤敏孙延龙李文通王金冬吴晓燕姜子童刘志军潍坊医学院病原生物学教研室山东潍坊261053 潍坊医学院药物化学教研室山东潍坊261053 潍坊医学院病理学教研室山东潍坊261053 潍坊医学院临床医学院山东潍坊261053

目的观察Vβ13mRNA和Treg细胞在大鼠细小病毒(KRV)联合巨细胞病毒(CMV)感染大鼠的脾淋巴细胞中的表达以及海藻提取物对1型糖尿病的治疗效果。方法 LEW.1WR1大鼠40只,随机分成2组,应用CMV联合KRV建立大鼠1型糖尿病模型。治疗组大鼠每日... 详细信息

目的观察Vβ13mRNA和Treg细胞在大鼠细小病毒(KRV)联合巨细胞病毒(CMV)感染大鼠的脾淋巴细胞中的表达以及海藻提取物对1型糖尿病的治疗效果。方法 LEW.1WR1大鼠40只,随机分成2组,应用CMV联合KRV建立大鼠1型糖尿病模型。治疗组大鼠每日口服海藻提取物共40d;成模组用等量无菌生理盐水替代同步进行。RT-PCR检测脾脏Vβ13mRNA的表达,流式细胞术检测脾细胞Vβ13^+CD4^+CD25^+Treg细胞亚群比例;HE染色观察糖尿病胰岛的病变情况。结果实验组成模率为90%(18/20),成模血糖平均水平在3.15g/L;实验组Vβ13的表达高于治疗组。实验组中CD4^+CD25^+Treg细胞的比例为6.2%,治疗组为13.5%(P<0.05)。结论感染巨细胞病毒的大鼠Vβ13 mRNA的表达在糖尿病初期显著增高。Vβ13^+CD4^+CD25^+Treg细胞亚群比例较低。海藻提取物提高了LEW.1WR1大鼠Treg细胞的表达,可用于治疗糖尿病。

关键词：巨细胞病毒 1型糖尿病海藻提取物 Vβ13 Treg细胞

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