检索结果-内蒙古大学图书馆

分子植物育种 2024年

作者：朱琴李丞晖卢迎春和四梅张广辉杨生超沙本才云南农业大学西南中药材种质创新与利用国家地方联合工程研究中心云南农业大学云南省药用植物生物学重点试验室

利用灯盏花锌指转录因子(Eb C2H2)进行拟南芥遗传转化，验证基因功能。为揭示灯盏花叶片数目和开花时间分子机理奠定一定的基础。首先从灯盏花叶片克隆并获得全长Eb C2H2，构建植物表达载体。其次蘸花法侵染拟南芥进行异源表达，通过筛... 详细信息

利用灯盏花锌指转录因子(Eb C2H2)进行拟南芥遗传转化，验证基因功能。为揭示灯盏花叶片数目和开花时间分子机理奠定一定的基础。首先从灯盏花叶片克隆并获得全长Eb C2H2，构建植物表达载体。其次蘸花法侵染拟南芥进行异源表达，通过筛选获得T1、T2、T3代若干阳性植株。最后统计T3代阳性植株叶片数目、开花时间，RT-qPCR检测Eb C2H2表达量，测定植物激素含量。结果T3代阳性植株比野生型叶数增多，开花时间延迟；Eb C2H2在转基因拟南芥植株叶片中具有较高的表达量；转基因拟南芥植株中TRP、TZOG、GA1激素含量显著高于野生拟南芥植株，特别是转基因植株中的L-色氨酸是野生型的2倍。Eb C2H2可能参与调控灯盏花叶片数目和开花时间。

关键词：灯盏花 C H 锌指转录因子拟南芥遗传转化植物激素

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当归肉桂醇脱氢酶AsCAD功能鉴定及表达分析

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生物技术通报 2025年第2期41卷 295-308页

作者：向春繁李勒松王娟梁艳丽杨生超栗孟飞赵艳云南农业大学西南中药材种质创新与利用国家地方联合工程研究中心云南省药用植物生物学重点实验室农学与生物技术学院昆明650201 云南特色植物提取实验室昆明650106 甘肃农业大学农学院兰州730070

【目的】探究当归中木质素合成关键肉桂醇脱氢酶的催化活性及表达特性,为解决当归抽薹后根部木质化问题提供新的研究思路和理论基础。【方法】以非木质化根(UBP)和木质化根(BP)为实验材料,基于转录组数据挖掘候选肉桂醇脱氢酶基因;克隆A... 详细信息

【目的】探究当归中木质素合成关键肉桂醇脱氢酶的催化活性及表达特性,为解决当归抽薹后根部木质化问题提供新的研究思路和理论基础。【方法】以非木质化根(UBP)和木质化根(BP)为实验材料,基于转录组数据挖掘候选肉桂醇脱氢酶基因;克隆AsCADs基因的全长CDS,构建pET-28a-AsCADs原核表达载体,转入大肠杆菌(***)BL21(DE3),并诱导重组蛋白表达及体外酶活测定;生物信息学分析具有活性的CAD蛋白序列;利用实时荧光定量PCR对木质化和非木质化根部进行基因表达模式分析。【结果】共鉴定出30个AsCADs基因,其中挖掘并克隆到3个肉桂醇脱氢酶基因AsCAD1、AsCAD4和AsCAD24,均包含2个Zn^(2+)结合位点和1个NAD(H)辅酶结合位点。体外酶活测定发现AsCAD1能催化松柏醛和咖啡醛还原为相应的醇,AsCAD4和AsCAD24能催化对羟基肉桂醛、松柏醛、咖啡醛和芥子醛还原为相应的醇。AsCAD1、AsCAD4和AsCAD24开放阅读框为1083 bp,编码360个氨基酸,理论等电点(p I)为6.1和5.52,AsCAD1为疏水性蛋白,AsCAD4和AsCAD24为亲水性蛋白,均不含跨膜结构和信号肽,亚细胞定位均定位在细胞质中。RT-q PCR结果显示AsCAD1在非木质化根(UBP)中的表达量高,而AsCAD4和AsCAD24在木质化根(BP)中的表达量高。【结论】成功克隆了AsCAD1、AsCAD4和AsCAD24基因,原核表达后蛋白均具有催化活性,其相对表达水平在木质化与非木质化根中存在差异。

关键词：当归木质化肉桂醇脱氢酶原核表达体外酶活表达分析

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药用植物金平人参种子休眠与萌发特性

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应用与环境生物学报 2025年第1期31卷 109-120页

作者：陈翠李朝林黄敏周平孟珍贵李龙根陈军文云南农业大学西南中药材种质创新与利用国家地方联合工程研究中心昆明650201 云南农业大学云南省药用植物生物学重点实验室昆明650201 云南农业大学农学与生物技术学院昆明650201

为探究人参属药用植物金平人参(Panax vietnamensis Ha et Grushv.)种子的休眠类型和激素促进其种子萌发的机理,为种苗高效生产提供理论依据,以自然成熟的金平人参种子为材料,进行不同浓度赤霉素GA_(3)(50、250、500 mg/L)和乙烯利(ET)... 详细信息

为探究人参属药用植物金平人参(Panax vietnamensis Ha et Grushv.)种子的休眠类型和激素促进其种子萌发的机理,为种苗高效生产提供理论依据,以自然成熟的金平人参种子为材料,进行不同浓度赤霉素GA_(3)(50、250、500 mg/L)和乙烯利(ET)(50、250、500mg/L)处理,测定不同处理组种子后熟过程的胚率、萌发率及内源激素含量.结果表明,金平人参果实成熟时种胚尚未分化完全,需经过135 d左右才能完成后熟休眠过程.在金平人参种子自然后熟过程中,赤霉素(gibberellins 3,GA_(3))、反式玉米素(trans-zeatin,tZ)、二氢茉莉酸(dihydrojasmonic acid,H2JA)和乙烯利(ethylene,ET)的含量随后熟时间延长而增加,而脱落酸(abscisic acid,ABA)、吲哚-3-乙酸(3-indoleacetic acid,IAA)和水杨酸(salicylic acid,SA)的含量则逐渐降低.500 mg/L GA_(3)处理后,种子内源GA_(3)含量显著提高,ABA含量降低;IAA、ET含量随后熟时间延长逐渐升高,H2JA逐渐降低.500 mg/L GA_(3)处理可缩短金平人参种子后熟时间,并显著促进种子萌发.乙烯利(ET)处理后,种子内源激素含量无显著性差异,且种子后熟时间和种子萌发率未发生明显变化.本研究表明金平人参种子收获时种胚未发育完全,休眠期大约135 d,属于形态休眠类型;500 mg/L GA_(3)可有效缩短种子的后熟休眠时间、促进萌发;ET处理对金平人参种子的萌发及休眠解除无促进作用.(图8表1参50)

关键词：金平人参种子休眠种胚发育植物激素

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减量施肥对三年生三七生长特性及皂苷含量的影响

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应用与环境生物学报 2025年第2期31卷 247-260页

作者：洪杰寸竹张金燕双升普杨靖高丽琳张巨强陈军文无云南农业大学农学与生物技术学院昆明650201 云南农业大学西南中药材种质创新与利用国家地方联合工程研究中心昆明650201 云南农业大学云南省药用植物生物学重点实验室昆明650201

为探究减量施肥对药用植物三七[Panax notoginseng (Burk.) ***]生长、产量及品质的影响,为生产上三七的合理施肥提供理论指导,通过大田实验,设置未施肥(CK)、减量施肥75%(F_(1))、减量施肥50%(F_(2))、减量施肥25%(F_(3))、常规施肥(F_... 详细信息

为探究减量施肥对药用植物三七[Panax notoginseng (Burk.) ***]生长、产量及品质的影响,为生产上三七的合理施肥提供理论指导,通过大田实验,设置未施肥(CK)、减量施肥75%(F_(1))、减量施肥50%(F_(2))、减量施肥25%(F_(3))、常规施肥(F_(4))5个处理(复合肥成分为N:P_(2)O_(5):K_(2)O=22:7:11),对采收期三年生三七农艺性状、氮磷钾含量、皂苷含量、产量等指标进行分析.结果显示:减量施肥对株高、叶宽、叶面积和主根干重没有显著影响.叶长、叶干重、茎干重、根干重和单株干重随施肥量减少而下降,在F_(1)处理下最高.随施肥量减少主根中R_(1)+Rg_(1)+Rb_(1)和总皂苷呈现先降后增再降的趋势,在F_(3)处理下最高.F_(1)降低主根中Rg_(1)、Rb_(1)、Rd、R_(1)+Rg_(1)+Rb_(1)和总皂苷的百分含量,但主根Re和芦头Rb_(1)含量受到抑制.F_(2)显著降低芦头中Re、Rg_(1)、Rb_(1)的百分含量.F_(2)、F_(3)和F_(4)显著提高须根中Rb_(1)和Rd百分含量;F_(4)显著降低须根中皂苷R_(1)、Rg_(1)、R_(1)+Rg_(1)+Rb_(1)和总皂苷的百分含量.因此,在氮磷钾营养元素相对丰富的土壤背景下,适当减少施肥量能促进三七地上部分的生长,增强根系对养分的吸收,提高三七根系生物量的积累和产量,还有利于皂苷的积累,提高三七的品质.适宜减量施肥即按168.75 kg/hm^(2)施用复合肥能平衡三年生三七的产量和品质,提高经济产量.(图4表6参67)

关键词：施肥次数农艺性状生物量皂苷三七

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雪胆SDR型差向异构酶基因鉴定及蛋白表达

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分子植物育种 2025年

作者：冯孝林舒彦宇陈庚李志远马迪娜向贵生张广辉云南农业大学农学与生物技术学院西南中药材种质创新与利用国家地方联合工程研究中心云南省药用植物生物学重点实验室云南特色植物提取实验室有限公司

葫芦素F类化合物雪胆素(CuIIa和CuIIb)是雪胆属植物的主要活性成分，可抑制肿瘤细胞增殖，因此成为一类新型抗癌药。葫芦素F类的C3位是葫芦烷结构中特殊的α羟基，存在C3位的氧化还原修饰过程，短链脱氢酶(shortchain dehydrogenase， S... 详细信息

葫芦素F类化合物雪胆素(CuIIa和CuIIb)是雪胆属植物的主要活性成分，可抑制肿瘤细胞增殖，因此成为一类新型抗癌药。葫芦素F类的C3位是葫芦烷结构中特殊的α羟基，存在C3位的氧化还原修饰过程，短链脱氢酶(shortchain dehydrogenase， SDR)基因差向异构酶(Epimerase)其最后形成过程中起到关键作用。此研究基于雪胆的转录组数据，主要以雪胆的块茎为材料，通过PCR扩增得到雪胆中的六个差向异构酶基因，HcEPI3、HcEPI5、HcEPI7、HcEPI19、HcEPI20、HcEPI22，开放阅读框(ORF)长度分别为990 bp、1 047 bp、1 044 bp、1 032 bp、990 bp和1 170 bp；编码329、342、348、343、328和389个氨基酸，蛋白相对分子质量分别为36 397.65、38 073.68、38 041.50、37 662.29、35 832.07和43 724.87；预测等电点在5.50～8.40，亲水性在-0.314～0.021，是亲水蛋白，无跨膜结构域，位于高尔基体和细胞核；蛋白质二级结构主要为无规则卷曲和α-螺旋，将六个EPI基因构建在表达载体PET-28a上，利用大肠杆菌BL21中进行原核表达，成功获得六个基因的重组蛋白。本研究的结果为进一步验证雪胆差向异构酶基因的功能和分析葫芦素F的生物合成途径提供了基础。通过研究葫芦烷的C3位α羟基的形成机理，最终的结果也可以为大多数葫芦素的途径解析提供参考。

关键词：雪胆葫芦素生物合成差向异构酶基因克隆原核表达

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三七PnSTOP1转录因子基因的克隆与表达分析

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分子植物育种 2024年

作者：刘春兰品初次尔李奇施辉能宋占华杨红磊范伟云南农业大学西南中药材种质创新与利用国家地方联合工程研究中心云南省药用植物生物学重点实验室云南农业大学资源与环境学院

克隆三七锌指转录因子基因PnSTOP1，分析其编码蛋白特征、亚细胞定位和在铝(Al)胁迫下的表达特征，为探索PnSTOP1基因在三七抗Al胁迫中的作用机制奠定基础。本研究从三七基因组中挖掘并克隆获得PnSTOP1基因，其CDS序列长度为1 521 bp，... 详细信息

克隆三七锌指转录因子基因PnSTOP1，分析其编码蛋白特征、亚细胞定位和在铝(Al)胁迫下的表达特征，为探索PnSTOP1基因在三七抗Al胁迫中的作用机制奠定基础。本研究从三七基因组中挖掘并克隆获得PnSTOP1基因，其CDS序列长度为1 521 bp，编码506个氨基酸残基，相对分子量56.61 kD，理论等电点(pI) 5.72，属于亲水性不稳定蛋白，亚细胞定位于细胞核，符合转录因子特征。PnSTOP1蛋白拥有四个Cys2His2锌指保守结构域，其二级结构主要包括22.92%的α-螺旋、4.35%的β-折叠、63.44%的无规则卷曲和9.29%延伸链，PnSTOP1蛋白与茶树(Camellia sinensis) STOP1蛋白的亲缘关系最近。对三七PnSTOP1基因的启动子顺式元件进行预测，显示该序列包含激素响应元件、光响应元件和参与防御和应激的顺式元件等。PnSTOP1基因在须根中的表达量显著高于其他部位，在Al胁迫条件下，PnSTOP1基因在三七须根中的相对表达量与对照相比没有显著差异，呈组成型表达，推测PnSTOP1可能参与调控三七对Al胁迫的抗性，为进一步降低三七Al毒害提供新的可能。

关键词：三七铝胁迫基因克隆亚细胞定位表达分析

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西洋参鼠李糖糖基转移酶的原核表达及功能验证

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分子植物育种 2024年

作者：陈碧环刘祥宇李翠霞王益娜彭素芳和四梅张广辉杨生超字淑慧云南农业大学农学与生物技术学院西南中药材种质创新与利用国家地方联合工程研究中心云南省药用植物生物学重点实验室云南特色植物提取实验室

人参皂苷Re是人参属植物的主要活性成分，对其生物合成最后一步的鼠李糖糖基转移酶已有研究，但是西洋参的鼠李糖糖基转移酶仍然不清楚，糖基转移酶(UGT)的功能验证对于丰富人参皂苷的多样化具有重要意义。本研究基于转录组分析，克隆... 详细信息

人参皂苷Re是人参属植物的主要活性成分，对其生物合成最后一步的鼠李糖糖基转移酶已有研究，但是西洋参的鼠李糖糖基转移酶仍然不清楚，糖基转移酶(UGT)的功能验证对于丰富人参皂苷的多样化具有重要意义。本研究基于转录组分析，克隆得到一个西洋参的UGT基因(PqUGT1)，将其构建pET28a载体并在大肠杆菌中异源表达获得可溶性蛋白，通过体外酶促的方式验证其功能。结果表明，PqUGT1全长1 401 bp，编码467个氨基酸，PqUGT1蛋白质相对分子量为52.10 kDa，理论等电点为5.51，预测为亲水性蛋白。能够催化PPT型人参皂苷Rg1鼠李糖基化生成人参皂苷Re，本试验首次鉴定了西洋参中的鼠李糖基转移酶PgUGT1的功能，为进一步阐明西洋参其它类型人参皂苷如拟人参皂苷F11等合成的UGT基因奠定了基础。

关键词：西洋参人参皂苷鼠李糖糖基转移酶原核表达

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三七茎叶-滇黄精速溶粉提取工艺及抗氧化活性分析

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食品与发酵工业 2023年第2期49卷 91-98页

作者：梁正维王晓漫刘小苏张双艳马燕陈军文张广辉姜薇薇赵银河赵明云南农业大学农学与生物技术学院、龙润普洱茶学院云南昆明650201 西南中药材种质创新与利用国家地方联合工程研究中心、云南省药用植物生物学重点实验室云南昆明650201

为探索三七茎叶-滇黄精复合产品的开发工艺,该研究分析了三七茎叶-滇黄精速溶粉中可溶性总糖、皂苷、多酚化合物的组成及含量,并测定其抗氧化活性。以单因素-响应面实验考察三七茎叶-滇黄精在乙醇添加量、料液比(g∶mL)、浸提时间3种变... 详细信息

为探索三七茎叶-滇黄精复合产品的开发工艺,该研究分析了三七茎叶-滇黄精速溶粉中可溶性总糖、皂苷、多酚化合物的组成及含量,并测定其抗氧化活性。以单因素-响应面实验考察三七茎叶-滇黄精在乙醇添加量、料液比(g∶mL)、浸提时间3种变量条件下的最佳浸提条件,进一步以喷雾干燥的方法获取三七茎叶-滇黄精速溶粉,以蒽酮比色法测定速溶粉中可溶性总糖的含量,高效液相色谱法测定速溶粉中皂苷、多酚含量,进一步测定其抗氧化活性,并进行感官审评。喷雾干燥优化出三七茎叶与滇黄精的最佳质量比为6∶4,最佳浸提工艺为三七茎叶-滇黄精的料液比(g∶mL)为1∶21,29%(体积分数)乙醇,浸提37 h,重复浸提2次,每1 kg复合物可得到速溶粉374.23 g,得粉率37.42%,该速溶粉溶解性好,香甜回甘。速溶粉中可溶性总糖含量为(55.44±3.21)mg/g,活性成分以三七皂苷Fa、Fd、Fc、人参皂苷Rb1等7种皂苷及咖啡酸(caffeic acid,CA)、表儿茶素没食子酸酯(epicatechin-3-gallate,ECG)、表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocahechin-3-gallate,EGCG)等5种酚类化合物为主。抗氧化活性结果表明,三七茎叶-滇黄精速溶粉对ABTS阳离子自由基、DPPH自由基、超氧阴离子自由基、羟自由基具有较好的清除能力,其IC 50值分别为0.30、0.63、0.49、1.67 mg/mL。该研究优化了三七茎叶-滇黄精浸提工艺,所得速溶粉富含皂苷、多酚、可溶性糖等成分,为三七茎叶和滇黄精在食品开发领域提供基础研究数据,为云南特色食品及药食同源产品的开发利用提供科学支撑。

关键词：三七茎叶滇黄精浸提工艺皂苷多酚

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接种汉逊德巴利酵母对普洱茶发酵微生物群落与品质的影响

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食品科学 2025年第5期46卷 124-133页

作者：王藤伯年国沙艮卢万洋马燕赵明云南农业大学食品科学技术学院云南昆明650201 云南农业大学西南中药材种质创新与利用国家地方联合工程研究中心云南省药用植物生物学重点实验室云南昆明650201 云南特色植物提取实验室云南昆明650106 云南农业大学茶学院云南昆明650201

本研究利用从普洱茶中分离的汉逊德巴利酵母(Debaryomyces hansenii)PETY002接种强化发酵普洱茶(EF组)。结果表明,EF组的酵母菌落总数显著高于传统发酵(NF组)。感官审评发现,EF组茶汤颜色更深、滋味更醇厚、香气带有菌香。特征成分测定... 详细信息

本研究利用从普洱茶中分离的汉逊德巴利酵母(Debaryomyces hansenii)PETY002接种强化发酵普洱茶(EF组)。结果表明,EF组的酵母菌落总数显著高于传统发酵(NF组)。感官审评发现,EF组茶汤颜色更深、滋味更醇厚、香气带有菌香。特征成分测定结果表明,与NF组相比,EF组的茶褐素和水浸出物的含量增加,而茶多酚、儿茶素类(儿茶素、表没食子儿茶素、没食子儿茶素、表没食子儿茶素没食子酸酯)以及咖啡碱的含量降低,黄酮组分和氨基酸组分差异较小。微生物群落分析表明,汉逊德巴利酵母是EF组中的优势真菌,德巴利酵母属(Debaryomyces)与嗜热真菌属(Thermomyces)存在相互竞争的关系。相关性分析表明,德巴利酵母属与茶褐素呈显著正相关,与可溶性糖和茶黄素呈显著负相关。综上,接种汉逊德巴利酵母强化发酵改变了发酵微生物群落的多样性和组成,通过与其他优势微生物相互作用提高了普洱茶的品质。

关键词：汉逊德巴利酵母普洱茶强化发酵特征成分微生物群落

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人参属药用植物种子脱水耐性及PLD基因家族的鉴定和表达分析

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中国中药杂志 2025年

作者：李朝林黄敏葛娜王清艳贾金山罗婷张金燕周平陈军文云南农业大学农学与生物技术学院云南农业大学西南中药材种质创新与利用国家地方联合工程研究中心云南农业大学云南省药用植物生物学重点实验室

人参属植物多为珍贵的药用植物，已知部分种类的种子对脱水具有敏感性，而一些人参属植物种子的脱水耐性尚不明确。PLD基因在植物响应脱水胁迫中发挥重要作用，但针对不同脱水耐性的人参属植物种子，其PLD基因家族特征及其对脱水胁迫的... 详细信息

人参属植物多为珍贵的药用植物，已知部分种类的种子对脱水具有敏感性，而一些人参属植物种子的脱水耐性尚不明确。PLD基因在植物响应脱水胁迫中发挥重要作用，但针对不同脱水耐性的人参属植物种子，其PLD基因家族特征及其对脱水胁迫的响应机制尚不清楚。该研究以8种人参属植物种子为材料，测定脱水后种子发芽率及磷脂酶D（phospholipase D，PLD）活性，并分析脱水耐性与种子性状间的相关性。同时，通过生物信息学分析PnPLD和PvPLD家族特征及其在种子脱水胁迫下的表达模式。结果表明，人参属植物种子的脱水耐性由高到低依次为：人参Panax ginseng、姜状三七P. zingiberensis、西洋参P. quinquefolius、金平人参P. vienamensis var. fuscidiscus、狭叶竹节参P. japonicus var. angustifolius、竹节参P. japonicus、三七P. notoginseng、屏边三七P. stipuleanatus。人参属植物种子的脱水耐性与种子形状（三维方差）显著负相关（r = -0.792），即种子越扁平脱水耐性越强。三七和金平人参中分别鉴定出18、19个PLD成员，可分为α、β、γ、δ、ζ 5个亚型。PnPLD和PvPLD的基因结构、亚细胞定位、理化性质等特征相似，启动子均包含与植物生长发育、激素响应以及非生物和生物胁迫相关的调控元件。脱水过程中，随含水量的降低，三七种子中PLD酶活性逐渐升高，金平人参种子中PLD酶活性先降低后升高；三七种子中PLDα和PLDδ的表达先升高后降低，金平人参种子中PLDα和PLDδ的表达逐渐降低。总之，人参属种子脱水耐性与种子形状显著负相关，金平人参种子耐脱水性和三七种子脱水敏感性可能与PLD酶活性及PLDα和PLDδ基因表达差异有关。该研究首次系统比较研究了人参属植物种子的脱水耐性，并解析脱水耐性差异形成原因及超低温长期保存的最佳含水量，为不同脱水耐性药用植物种子的短期及超低温长期储存提供理论基础。

关键词：人参属种子脱水耐性磷脂酶D(PLD) PLD基因家族

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