检索结果-内蒙古大学图书馆

武汉大学学报（医学版） 2009年第1期30卷 89-92,I0004页

作者：魏金亮许珍王璐谢超胜赵颖岚刘伟侯炜汪晖武汉大学医学院药理学系湖北武汉430071 武汉大学医学院病毒学研究所/病毒学国家重点实验室湖北武汉430071 武汉大学第二临床学院湖北武汉430071

目的:探讨荔枝核黄酮类提取物(FLC)体外抗单纯疱疹病毒1型(HSV-1)的作用。方法:以阿昔洛韦为阳性药物对照,以不同剂量的荔枝核黄酮类提取物分别作用于HSV-1病毒复制周期的各个环节分成3个实验组,以病毒半数感染量(TCID50)、细胞病变效应... 详细信息

目的:探讨荔枝核黄酮类提取物(FLC)体外抗单纯疱疹病毒1型(HSV-1)的作用。方法:以阿昔洛韦为阳性药物对照,以不同剂量的荔枝核黄酮类提取物分别作用于HSV-1病毒复制周期的各个环节分成3个实验组,以病毒半数感染量(TCID50)、细胞病变效应(CPE)、MTT染色细胞存活率(MTT法)作为评价指标,判断的FLC抗病毒效果。结果:FLC对HEp-2细胞的半数细胞毒浓度(TC50)为239.25 mg/L,FLC对HSV-1病毒有直接杀伤作用和抗HSV-1生物合成作用,其直接杀伤HSV-1的半数有效浓度(IC50)为32.76 mg/L,治疗指数(TI)为7.30,抗HSV-1生物合成作用的半数有效浓度(IC50)为12.72 mg/L,治疗指数(TI)为18.81。结论:荔枝核黄酮类化合物在HEp-2细胞中对单纯疱疹病毒1型有明显抑制作用。

关键词：荔枝黄酮类单纯疱疹病毒抗病毒作用

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改造病毒基因组增强病毒杀虫剂杀虫效率研究进展

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植物保护 2008年第1期34卷 5-8页

作者：蒋洪周亮张珈敏胡远扬武汉大学病毒学国家重点实验室环球生物农药武汉大学联合研发中心武汉430072 武汉大学基础医学院病原生物学系武汉430072

由于基因工程技术的发展和安全性研究的深入,以重组杆状病毒为主的重组昆虫病毒杀虫剂的应用正面临着突破。文章综述了通过修饰或删除昆虫病毒某些基因、插入控制宿主发育、代谢激素或酶的基因、删除、修饰昆虫病毒基因组中特定的基因... 详细信息

由于基因工程技术的发展和安全性研究的深入,以重组杆状病毒为主的重组昆虫病毒杀虫剂的应用正面临着突破。文章综述了通过修饰或删除昆虫病毒某些基因、插入控制宿主发育、代谢激素或酶的基因、删除、修饰昆虫病毒基因组中特定的基因以扩大宿主域、应用RNA干扰技术提高昆虫病毒杀虫效率等构建重组昆虫病毒杀虫剂的技术路线,展望重组病毒杀虫剂的发展趋势。

关键词：重组病毒杀虫剂杆状病毒生物防治杀虫效率

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同时携带人血管内皮生长因子和血管生成素基因的内皮祖细胞血管再生研究

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中华普通外科杂志 2007年第10期22卷 765-768页

作者：陈锋谭最董长垣谢友利吴云陈晓郭淑芳武汉大学中南医院血管外科 430071 武汉大学医学院病毒学国家重点实验室

目的用腺相关病毒（adeno-associated virus,AAV）载体将人血管内皮生长因子165 （vascular endothelial growth factors,VEGF165）和血管生成素-1（angiopoietin-1,Angl）基因同时转入骨髓源性内皮祖细胞（endothelial progenitor cells,EPCs）中,观察外源基因的表达并评价其促血管再生的能力。方法用同时携带人VEGF165和Angl基因的AAV载体AAV2-hAngl/VEGF165转染体外培养的兔骨髓源EPCs,用RT-PCR和细胞免疫化学法检测外源基因的表达。实验用新西兰大白兔24只,制作成右下肢缺血模型,随机分成3组：PBS、EPC和EPC/AV组。造模后第10天,向缺血肌组织中分别注射PBS、EPCs和AAV2-hAngl/VEGF165转染的EPCs,用免疫组织化学法评价其血管再生效应。结果EPCs可高效地被AAV2-hAngl/VEGF165转染而表达Angl和VEGF165。细胞移植4周后,EPC/AV组存活的EPCs密度（283±137）/mm^-2明显高于EPC组（191±88）/mm^-2;EPC/AV组的毛细血管密度（856±212）/mm^-2明显高于EPC组（564±177/mm^-2）和PBS组（308±112）/mm^-2;α-SMA阳性血管密度（6.9±3.0）/mm^-2明显高于PBS组（3.6±1.8）/mm^-2,P〈0.05。结论AAV载体可同时将人VEGF165和Angl基因转入EPCs中,转染后的EPCs具有更强的促血管再生能力。

关键词：血管内皮生长因子类血管生成素1 腺相关病毒内皮祖细胞

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应用CS-SELEX技术筛选特异性结合丙型肝炎病毒非结构蛋白NS4B适配子的研究

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中国病原生物学杂志 2015年第2期10卷 97-101页

作者：曾德钰潘勤章晓联武汉大学基础医学院免疫学系病毒学国家重点实验室湖北省过敏及免疫相关疾病重点实验室湖北武汉430071

目的应用CS-SELEX(cell surface-system evolution of ligands by exponential enrichment)技术筛选与丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)非结构蛋白4B(non protein 4B,NS4B)特异性结合的ssDNA适配子,建立检测HCV NS4B的酶联寡聚核苷酸吸附试验(enzyme-linked oligonucleotide assay,ELONA)方法。方法构建pDisplay-NS4B质粒,并转染至HepG2细胞中,在G418存在情况下连续筛选1个月,得到单克隆细胞群,经过Western blot以及流式细胞术验证,获得稳定表达NS4B的HepG2细胞。设计并合成随机序列ssDNA文库,以稳定表达NS4B的细胞为正向筛选靶细胞,以HepG2细胞为反筛细胞进行CS-SELEX技术筛选。每轮筛选获得的具有结合NS4B能力的ssDNA适配子,通过PCR扩增得到富集,随后通过不对称PCR获得下一轮筛选的ssDNA文库。经过16轮筛选,将亲和力最高的筛选产物克隆并测序,用ELONA方法检测适配子的亲和力。结果成功构建表面展示表达重组质粒pDisplay-NS4B。分别将该质粒转入HepG2细胞,通过G418筛选获得稳定表达HCV-NS4B的细胞系NS4B-HepG2。对CS-SELEX筛选的各轮适配子库进行亲和力测定,其中第14轮库适配子与NS4B的亲合力最高。分别对第14轮库中的单个适配子进行亲和力测定,以适配子ZN1和ZN5与NS4B的亲合力最高。ZN1和ZN5不仅能结合展示在细胞表面的NS4B蛋白,还能结合丙型肝炎病毒感染细胞(HCV cell culture,HCVcc)中的HCV-NS4B蛋白。结论适配子ZN1和ZN5对NS4B有高亲和力,这对研究HCV-NS4B致癌机制、HCV诊断以及治疗方面有潜在的应用价值。

关键词：丙型肝炎病毒(HCV) 非结构蛋白-NS4B CS-SELEX 适配子

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牛眼眼科新糖蛋白opticin研究

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武汉大学学报（医学版） 2008年第1期29卷 41-43,I0001页

作者：李猛邢怡桥陈长征侯炜陈静李颖武汉大学人民医院眼科湖北武汉430060 武汉大学医学院病毒学研究所/病毒学国家重点实验室湖北武汉430071

目的:制备opticin特异性抗体并探讨opticin在牛眼中的分布。方法:将合成的多肽链免疫兔以获得OPT-C抗体,运用该抗体从玻璃体提取物中检测opticin,用免疫组织化学方法检测opticin在牛眼中的分布。结果:牛眼玻璃体提取物Western blot在40-... 详细信息

目的:制备opticin特异性抗体并探讨opticin在牛眼中的分布。方法:将合成的多肽链免疫兔以获得OPT-C抗体,运用该抗体从玻璃体提取物中检测opticin,用免疫组织化学方法检测opticin在牛眼中的分布。结果:牛眼玻璃体提取物Western blot在40-50 kU可看到2个清晰可辨的分离的条带。牛眼免疫组织化学发现opticin存在于牛眼视网膜、玻璃体和睫状体无色素上皮中。结论:Opticin存在于睫状体中,支持opticin可能由睫状体无色素上皮细胞分泌这一推测。Opticin与玻璃体胶原纤维相连,可能与玻璃体结构的稳定有关。

关键词： Opticin 免疫组织化学玻璃体

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Toll样受体4与病毒感染的研究进展

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生命科学 2011年第1期23卷 63-69页

作者：汤贤英李晖武汉大学医学部病毒学研究所暨病毒学国家重点实验室武汉430071 遵义医学院免疫学教研室遵义563003

Toll样受体4(TLR4)是固有免疫系统中能够识别病原相关分子模式的受体家族成员,可识别革兰氏阴性菌的脂多糖(LPS)而在细菌感染性疾病的发生中起重要作用。近年来越来越多的研究发现,TLR4还广泛参与病毒感染性疾病的发生和病毒的免疫逃逸... 详细信息

Toll样受体4(TLR4)是固有免疫系统中能够识别病原相关分子模式的受体家族成员,可识别革兰氏阴性菌的脂多糖(LPS)而在细菌感染性疾病的发生中起重要作用。近年来越来越多的研究发现,TLR4还广泛参与病毒感染性疾病的发生和病毒的免疫逃逸,由于其信号转导通路的独特性和细胞定位的可变性,再次引起人们极大的研究兴趣。该文将介绍TLR4的生物学特性、信号转导通路及TLR4与病毒感染的最新研究进展。

关键词： TLR4 信号转导通路病毒感染

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腺相关病毒介导的人血管内皮生长因子体外转染兔骨髓内皮祖细胞

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武汉大学学报（医学版） 2007年第5期28卷 556-559,563,F0003页

作者：陈锋谭最董长垣陈晓郭淑芳武汉大学中南医院血管外科湖北武汉430071 武汉大学医学院病毒学国家重点实验室湖北武汉430071

目的:探讨腺相关病毒-2(AAV-2)介导人血管内皮生长因子-165(hVEGF165)转染兔骨髓内皮祖细胞(EPCs)及其对EPCs增殖能力的影响。方法:构建携带hVEGF165基因的重组腺相关病毒(rAAV)载体pAAV-hVEGF165;制备携带hVEGF165基因的rAAV(rAAV-2-hVEGF165)和携带β-半乳糖苷酶(-βgal)基因的rAAV(rAAV-2-LacZ);体外培养和鉴定兔骨髓EPCs;分别用rAAV-2-hVEGF165和rAAV-2-LacZ体外转染EPCs(AAV/VEGF-EPC和AAV/LacZ-EPC);用RT-PCR、免疫细胞化学、流式细胞术等法检测hVEGF165和-βgal的表达,MTT法检测AAV/VEGF-EPC的增殖能力。结果:经酶切鉴定和DNA测序,得到了序列正确的重组质粒pAAV-hVEGF165;AAV/VEGF-EPC能够表达hVEGF165蛋白,AAV/LacZ-EPC能够表达-βgal;rAAV-2-hVEGF165对于EPCs的转染率为64.4%;AAV/VEGF-EPC的增殖能力明显强于AAV/LacZ-EPC和EPCs。结论:EPCs可以被rAAV-2-hVEGF165高效转染,其增殖能力明显增强。本文为进一步探讨AAV/VEGF-EPC用于缺血性血管疾病治疗的可能性奠定了基础。

关键词：腺相关病毒内皮祖细胞血管内皮生长因子 β-半乳糖苷酶

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人肝癌细胞感染蓝舌病毒HbC_3株超微结构的动态观察

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肿瘤防治研究 2006年第12期33卷 856-858页

作者：汪艳雷森林郭淑芳易有荣董长垣武汉大学医学院病毒学国家重点实验室 430071 武汉大学医学院结构生物学研究中心 430071

目的探讨蓝舌病毒靶向抗肿瘤的细胞生物学机制。方法利用透射电镜观察蓝舌病毒HbC3株感染人肝癌细胞Hety-3B的形态发生学以及该病毒引起的细胞的病理改变。结果 BTV-HbC3以受体介导的胞饮作用穿入细胞，溶酶体水解病毒外衣壳，使之成... 详细信息

目的探讨蓝舌病毒靶向抗肿瘤的细胞生物学机制。方法利用透射电镜观察蓝舌病毒HbC3株感染人肝癌细胞Hety-3B的形态发生学以及该病毒引起的细胞的病理改变。结果 BTV-HbC3以受体介导的胞饮作用穿入细胞，溶酶体水解病毒外衣壳，使之成为亚病毒粒子，胞浆内有病毒包涵体及未装配成熟的亚病毒颗粒。随后亚病毒颗粒装配上外层蛋白结构，形成成熟的病毒粒子。病毒感染细胞12～18h时，细胞以挤出的方式释放病毒并达到高峰。18-48h时，病毒进入超感染期，大量细胞发生病变，出现细胞凋亡和溶解。结论一旦蓝舌病毒感染Hep-3B肿瘤细胞即可在细胞内增殖并诱导该肿瘤细胞进入凋亡，死亡的肿瘤细胞释放出的病毒粒子并再次感染其他肿瘤细胞，直至将全部肿瘤细胞杀灭，其溶瘤方式为链式反应。

关键词：蓝舌病毒HbG(BTV-HbC3) 人肝癌细胞(Hep-3B) 形态发生学溶癌病毒

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热疗对人胃癌细胞MKN28的细胞周期及节律基因Bmall影响的实验研究

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中华物理医学与康复杂志 2012年第1期34卷 22-25页

作者：魏柏熊枝繁侯炜华中科技大学同济医学院附属梨园医院消化内科武汉430071 武汉大学医学病毒学研究所／病毒学国家重点实验室

目的研究加热对胃癌MKN28细胞周期变化是否与节律基因Bmall表达相关，为胃癌择时热疗提供理论依据。方法体外复苏和培养胃癌细胞MKN28；对照组37℃下培养，实验组43qC分别加热0．5h、1.0h和1．5h，用显微镜观察细胞形态变化，采用四甲... 详细信息

目的研究加热对胃癌MKN28细胞周期变化是否与节律基因Bmall表达相关，为胃癌择时热疗提供理论依据。方法体外复苏和培养胃癌细胞MKN28；对照组37℃下培养，实验组43qC分别加热0．5h、1.0h和1．5h，用显微镜观察细胞形态变化，采用四甲基偶氮唑盐比色法（MTT）检测细胞增殖抑制率；采用流式细胞术检测细胞周期分布的变化；采用实时定量逆转录一聚合酶链反应（RT-PCR）检测Bmall基因表达变化。结果加热后细胞形态发生显著变化，MTT实验提示37℃加热对细胞生长无明显抑制，细胞43℃热疗0．5h、1．0h和1．5h后细胞抑制率分别为（21．76±4．36）％、（25．30±4．36）％和（27．62±3．78）％，处理后细胞的增殖均受到抑制且抑制趋势具有时间依赖性；流式细胞术显示43℃加热1h后GO^G1最短而G2／M最长，同时实时定量RT-PCR结果显示BmallmRNA表达最低，细胞周期GO-G1变化规律和BmallmRNA变化规律一致。结论热疗可改变胃癌细胞周期及钟基因Bmall表达，提示择时执疗的可行件．

关键词：热疗胃癌MKN28细胞节律基因Bmall 细胞周期

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结核分枝杆菌Rv1773c促进细菌侵入巨噬细胞的研究

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中国病原生物学杂志 2018年第4期13卷 330-335页

作者：刘伟香章晓联武汉大学基础医学院免疫学系病毒学国家重点实验室湖北省过敏及免疫相关疾病重点实验室和医学研究院湖北武汉430071

目的筛选出能促进分枝杆菌对巨噬细胞侵入的功能性结核基因并进行验证。方法将H37Rv RD10-16区的18个结核分枝杆菌(MTB)基因构建到pMV261载体上,然后将重组pMV261质粒电转至耻垢分枝杆菌***(Ms)中,并将各重组菌株命名为rMs::Rvs。运用... 详细信息

目的筛选出能促进分枝杆菌对巨噬细胞侵入的功能性结核基因并进行验证。方法将H37Rv RD10-16区的18个结核分枝杆菌(MTB)基因构建到pMV261载体上,然后将重组pMV261质粒电转至耻垢分枝杆菌***(Ms)中,并将各重组菌株命名为rMs::Rvs。运用菌落计数法筛选功能性基因;采用流式细胞术Flow cytometry(FCM),动物实验验证该基因的功能。结果菌落计数显示rMs::Rv1773c组菌落数最多,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);FCM验证Rv1773c促进Ms入侵巨噬细胞能力较强,rMs::Rv1773c组感染小鼠脾脏菌落数增多。结论筛选的RD14区功能性结核基因Rv1773c可能作为结核菌毒力因子,具备促进分枝杆菌入侵巨噬细胞的功能。

关键词：结核分枝杆菌入侵巨噬细胞 RD区菌落计数实验 Rv1773c

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