检索结果-内蒙古大学图书馆

中国家禽 2018年第10期40卷 17-20页

作者：施少华程龙飞傅光华陈红梅万春和傅秋玲刘荣昌林建生黄瑜福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建福州350013 福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心福建福州350013 福建省禽病防治重点实验室福建福州350013

利用PCR方法从禽坦布苏病毒和肠炎沙门菌分别扩增出E基因和鞭毛基因保守片段(Flic AC和Flic DB),随后通过over-lapping PCR方法将Flic AC片段、E基因和Flic DB片段依序串联后获得Flic AC-E-Flic DB目的片段,克隆到p MD18-T载体中获得重... 详细信息

利用PCR方法从禽坦布苏病毒和肠炎沙门菌分别扩增出E基因和鞭毛基因保守片段(Flic AC和Flic DB),随后通过over-lapping PCR方法将Flic AC片段、E基因和Flic DB片段依序串联后获得Flic AC-E-Flic DB目的片段,克隆到p MD18-T载体中获得重组质粒p MD-Flic AC-E-Flic DB,经Bam HⅠ和HindⅢ双酶切后接入p ET-32a载体,构建原核表达重组质粒p ET-Flic AC-E-Flic DB。表达质粒转化入感受态细胞BL21(DE3)后,经IPTG诱导后表达出Flic AC-E-Flic DB嵌合蛋白,Western-blot鉴定证实与预期融合蛋白一致。

关键词：禽坦布苏病毒 E基因沙门菌鞭毛嵌合表达

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同时检测水禽3种常见病原菌的环介导间接PCR方法的建立

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中国兽医学报 2018年第1期38卷 96-99页

作者：程龙飞傅光华林群群刘荣昌陈翠腾傅秋玲万春和施少华陈红梅黄瑜福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建福州350013 福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心福建福州350013 福建省禽病防治重点实验室福建福州350013

为建立同时检测大肠杆菌、禽源多杀性巴氏杆菌和鸭疫里默氏菌等水禽常见病原菌的环介导间接PCR方法，根据大肠杆菌的gapA基因、禽源多杀性巴氏杆菌的KMTl基因、鸭疫里默氏菌的OmpA基因序列，分别设计引物、标记于猪线粒体基因片段的两... 详细信息

为建立同时检测大肠杆菌、禽源多杀性巴氏杆菌和鸭疫里默氏菌等水禽常见病原菌的环介导间接PCR方法，根据大肠杆菌的gapA基因、禽源多杀性巴氏杆菌的KMTl基因、鸭疫里默氏菌的OmpA基因序列，分别设计引物、标记于猪线粒体基因片段的两端，制备不同细菌的捕获探针；将捕获探针与待检测菌的基因组杂交、补平缺口、环化。采用1对引物反向扩增捕获探针，建立检测水禽3种常见病原菌的环介导间接PCR方法，扩增片段大小分别为328，422和504bp。沙门菌、金黄色葡萄球菌、小鹅瘟病毒的检测结果为阴性。该方法能检测出100Pg的细菌基因组DNA，与常规PCR的符合性为]00％。该方法可用于水禽3种常见病原菌的同时检测，是一种特异性好、灵敏度高的快速病原学诊断方法。

关键词：大肠杆菌多杀性巴氏杆菌鸭疫里默氏菌环介导间接PCR

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“短喙侏儒综合征”半番鸭病原学检测及病理组织学特征

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中国兽医学报 2018年第1期38卷 51-58页

作者：刘荣昌黄瑜卢荣辉傅秋玲万春和傅光华程龙飞施少华陈红梅福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心/福建省禽病防治重点实验室福建福州350013 福建农林大学动物科学学院福建福州350002

旨在明确福建省漳州地区3个“短喙侏儒综合征”半番鸭群的病原及病理组织学特征。对患病半番鸭体质量、喙长、喙宽进行测定及统计分析，采集患病半番鸭肝、脾、胰腺组织进行病原学检测、病毒分离鉴定和基因序列测定与分析，同时采集心... 详细信息

旨在明确福建省漳州地区3个“短喙侏儒综合征”半番鸭群的病原及病理组织学特征。对患病半番鸭体质量、喙长、喙宽进行测定及统计分析，采集患病半番鸭肝、脾、胰腺组织进行病原学检测、病毒分离鉴定和基因序列测定与分析，同时采集心、肝、脾、肺、肾等10种组织进行病毒分布及病理组织学研究。结果表明，患病半番鸭喙长，体质量与同场正常未感染半番鸭相比，发病鸭体质量减少达49．00％，喙长缩短达32．00％，喙宽缩短达22．00％；经PCR或RT—PCR检测显示，所采样品禽流感病毒、新城疫病毒、鸭瘟病毒、坦布苏病毒、鸭甲肝病毒、呼肠孤病毒、鸭圆环病毒、鸭疫里默氏菌、鸭大肠杆菌、鸭沙门菌均为阴性，均为水禽细小病毒阳性；对组织匀浆液致死的鸭胚尿囊液检测表明，分离毒株均为水禽细小病毒，经进一步基因序列分析显示所分离3株病毒与番鸭细小病毒病（MDPV）各代表株核苷酸同源性达97．7％以上，与新型MDPVSAAS—SHNH株核苷酸同源性高达98．9％。组织病毒分布检测结果显示，患病半番鸭心、肝、脾、肺、肾等10种组织均不同程度带毒，其中以胸腺、法氏囊、心、脾和胰腺病毒含量最高，肝、肺、脑、小肠次之，肾脏最低；病理组织学研究可见心肌颗粒变性，肝脏水泡变性，胸腺出血，骨骼肌出血、坏死。以上结果表明，福建省漳州地区的3个半番鸭群发生的“短喙侏儒综合征”由新型MDPV所致，且与经典的MDPV在感染宿主、临床症状、病变特征等方面存在较大差异，为新型MDPV病的诊断提供了科学依据和借鉴。

关键词：半番鸭短喙侏儒综合征新型番鸭细小病毒病毒分布病理组织学

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我国部分地区鸭1型甲肝病毒流行株遗传变异分析

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福建农业学报 2018年第2期33卷 109-113页

作者：傅光华陈翠腾温名根施少华陈红梅万春和傅秋玲程龙飞刘荣昌黄瑜福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建福州350013 福建省禽病防治重点实验室福建福州350013 福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心福建福州350013 江西省吉安县畜牧兽医局江西吉安343100

为了解鸭群中鸭1型甲肝病毒(DHAV-1)的流行及其分子变异情况,对2015-2016年福建、广东、浙江及江西鸭群采集的327份临床样品进行检测、病毒分离鉴定、序列测定与分析。结果表明,自327份临床样品中检出DHAV-1阳性样品35份,阳性率10.7%;... 详细信息

为了解鸭群中鸭1型甲肝病毒(DHAV-1)的流行及其分子变异情况,对2015-2016年福建、广东、浙江及江西鸭群采集的327份临床样品进行检测、病毒分离鉴定、序列测定与分析。结果表明,自327份临床样品中检出DHAV-1阳性样品35份,阳性率10.7%;从阳性样品中分离获得23株DHAV-1,主要来自30日龄以内的麻鸭和半番鸭。对DHAV-1的VP1基因分子特征及遗传变异分析,表明23株病毒VP1基因核苷酸序列同源性介于93.3%~99.9%,分属2个病毒亚群,两亚群间的遗传距离为0.06。23株临床分离株中有18株与引起雏鸭胰腺泛黄的毒株(MPZJ1206株)处于同一亚群,为目前流行的优势毒株,与国内外疫苗株核苷酸同源性在91.3%~96.2%,存在较大差异。由此可见,我国福建省及周边地区鸭群中不同DHAV-1流行株之间及流行毒株与疫苗株间均存在不同程度的差异。

关键词：鸭1型甲肝病毒 VP1基因变异分析

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半番鸭胚中鹅细小病毒的分离鉴定及其基因组分子特征分析

半番鸭胚中鹅细小病毒的分离鉴定及其基因组分子特征分析

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中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第五届第十三次全国学术研讨会

作者：傅秋玲程龙飞万春和傅光华施少华陈红梅刘荣昌陈翠腾陈珍朱春华黄瑜福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心福建省禽病防治重点实验室

引言鹅细小病毒(Goose parvovirus,GPV)又称小鹅瘟病毒,引起1月龄以下的雏鹅或雏番鸭出现急性肠炎、肝脏和心脏等实质脏器炎症,其发病率和死亡率高均可达100%,是严重危害养鹅(番鸭)业的重要传染病病原之一。在2015年以前,该病的易感动... 详细信息

引言鹅细小病毒(Goose parvovirus,GPV)又称小鹅瘟病毒,引起1月龄以下的雏鹅或雏番鸭出现急性肠炎、肝脏和心脏等实质脏器炎症,其发病率和死亡率高均可达100%,是严重危害养鹅(番鸭)业的重要传染病病原之一。在2015年以前,该病的易感动物为雏鹅和雏番鸭,不感染半番鸭。然而,在2015年初,我国福建等报道重组鹅细小病毒感染半番鸭、樱桃谷鸭和麻鸭,这打破了鹅

关键词：尿囊液半番鸭鹅细小病毒分子特征分析分离鉴定基因组

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鸭多杀性巴氏杆菌重组外膜蛋白H间接ELISA方法的建立与应用

鸭多杀性巴氏杆菌重组外膜蛋白H间接ELISA方法的建立与应用

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福建省科协第十八届学术年会畜牧业分会场——福建省畜牧兽医学术年会

作者：刘荣昌陈翠腾程龙飞傅光华施少华陈红梅万春和傅秋玲黄瑜福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心福建省禽病防治重点实验室福州 350013

多杀性巴氏杆菌为多种家禽和野生动物的重要病原,可引起禽霍乱在内的多种疾病.本研究建立了一种基于重组外膜蛋白H(rOmpH)的间接ELISA方法,用于检测鸭多杀性巴氏杆菌抗体,以及监测鸭群多杀性巴氏杆菌的流行情况.将多杀性巴氏杆菌OmpH基... 详细信息

多杀性巴氏杆菌为多种家禽和野生动物的重要病原,可引起禽霍乱在内的多种疾病.本研究建立了一种基于重组外膜蛋白H(rOmpH)的间接ELISA方法,用于检测鸭多杀性巴氏杆菌抗体,以及监测鸭群多杀性巴氏杆菌的流行情况.将多杀性巴氏杆菌OmpH基因克隆到pET32a,并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达.Western blotting显示,纯化的重组OmpH(rOmpH)能被鸭多杀性巴氏杆菌阳性血清识别,之后将纯化的蛋白用于间接ELISA方法的建立.所建方法与凝集试验相比较,经115份标准血清检测及分析发现,该方法的特异性为95.0％,敏感性为100％,κ系数为92.0％(95％置信区间0.844-0.997).对2015年随机采自福建省6个鸭场的165份鸭血清进行检测,发现外观健康鸭群多杀性巴氏杆菌抗体平均阳性率为22.42％,其中麻鸭阳性率为27.8％,北京鸭阳性率为16.0％,番鸭阳性率为16％.综上所述,本研究表明rOmpH可作为鸭多杀性巴氏杆菌抗体的间接ELISA方法建立的理想候选抗原;同时表明,外观健康鸭群亦可潜伏感染多杀性巴氏杆菌.

关键词：鸭多杀性巴氏杆菌感染抗体检测 rOmpH蛋白间接ELISA

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多重基因重组型H9N2亚型AIV福建分离株全基因组的分子特征

多重基因重组型H9N2亚型AIV福建分离株全基因组的分子特征

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福建省科协第十八届学术年会畜牧业分会场——福建省畜牧兽医学术年会

作者：陈翠腾万春和傅光华陈珍朱春华黄瑜福建省农业科学院畜牧兽医研究所/福建省禽病防治重点实验室/福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心福州350013

为从分子水平上了解福建省活禽市场H9N2亚型禽流感病毒的遗传演化情况及其与其他亚型禽流感病毒之间的遗传进化关系,对2015年分离自福州市某活禽市场的一株鸡源H9N2亚型禽流感病毒A/chicken/Fujian/05/2015(H9N2)进行了全基因组扩增、... 详细信息

为从分子水平上了解福建省活禽市场H9N2亚型禽流感病毒的遗传演化情况及其与其他亚型禽流感病毒之间的遗传进化关系,对2015年分离自福州市某活禽市场的一株鸡源H9N2亚型禽流感病毒A/chicken/Fujian/05/2015(H9N2)进行了全基因组扩增、克隆、测序,并对所获得的全序列与参考株进行了8个基因片段的同源性比较和遗传进化分析.结果显示,该分离株的HA基因与鸡源病毒A/chicken/Zhejiang/SIC40/2015(H9N2)的核苷酸同源性最高,裂解位点处氨基酸序列为-PSRSSR↓GLF-,符合低致病性裂解位点序列特征,其226位氨基酸为L,具有与哺乳动物唾液酸α,2-6受体结合的特性;NA基因颈部63、64和65位点氨基酸有缺失,与鸡源病毒A/chicken/Zhejiang/SIC32/2014(H9N2)的核苷酸同源性最高;M2基因的31位氨基酸为N,表明该病毒已经对金刚烷胺类药物产生了耐药性;分离株的基因组由3个亚系的基因重组产生,其中HA和NA基因来源于BJ/94亚系,PB2和M基因来源于G1亚系,PB1、PA、NP和NS基因来源于F98亚系;该分离株的6个内部基因PB2、PB1、PA、NP、M、NS与H7N9、H10N8、H5N6亚型禽流感病毒的内部基因存在复杂的交叉重组现象.因此须加强对H9N2亚型禽流感病毒的流行病学监测.

关键词： H9N2亚型禽流感病毒分离株全基因组分子特征

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半番鸭胚中鹅细小病毒的分离鉴定及其基因组分子特征分析

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畜牧兽医学报 2017年第11期48卷 2148-2156页

作者：傅秋玲程龙飞万春和傅光华施少华陈红梅刘荣昌陈翠腾陈珍朱春华黄瑜福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心福建省禽病防治重点实验室福州350013

通过胶体金试验、电镜观察及PCR扩增等方法,自半番鸭胚及孵化的雏半番鸭中分离获得了鹅细小病毒(GPV)毒株(命名为MDE株),并进行了病毒全基因组分子特征分析。结果表明,该病毒粒子为直径20~24nm的球形、无囊膜粒子。胶体金试验结果呈GPV... 详细信息

通过胶体金试验、电镜观察及PCR扩增等方法,自半番鸭胚及孵化的雏半番鸭中分离获得了鹅细小病毒(GPV)毒株(命名为MDE株),并进行了病毒全基因组分子特征分析。结果表明,该病毒粒子为直径20~24nm的球形、无囊膜粒子。胶体金试验结果呈GPV阳性。该毒株基因组全长为5 106bp,与GenBank登录的15株GPV基因组序列相似性为93.2%~98.1%,其中与SH株及疫苗株SYG61v株等的相似性较高,而与半番鸭源的GPV重组病毒M15株相似性最低。基于病毒VP1和NS1基因的遗传进化分析表明,分离毒株MDE与GPV疫苗毒株的亲缘关系最近,处于同一个独立的分支上,与番鸭细小病毒的亲缘关系较远。与疫苗毒株SYG61v株比较,MDE株VP1区的糖基化位点增加了703NRTS糖基化位点。以上结果表明,本研究揭示了GPV可通过半番鸭胚垂直传播给雏鸭,丰富了GPV的生态学内容。

关键词：半番鸭胚鹅细小病毒全基因分子特征

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同时检测鸭疫里默氏菌和大肠杆菌的环介导间接PCR方法的建立

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中国预防兽医学报 2017年第8期39卷 637-640页

作者：程龙飞傅光华林群群刘荣昌陈翠腾傅秋玲万春和施少华陈红梅黄瑜福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心/福建省禽病防治重点实验室福建福州350013

为建立同时检测鸭疫里默氏菌和大肠杆菌的环介导间接PCR方法,本研究根据鸭疫里默氏菌外膜蛋白A基因和大肠杆菌的gapA基因的保守序列设计两对特异性探针,分别标记于猪线粒体基因片段的两端形成两种不同的捕获探针,将捕获探针与待检测菌... 详细信息

为建立同时检测鸭疫里默氏菌和大肠杆菌的环介导间接PCR方法,本研究根据鸭疫里默氏菌外膜蛋白A基因和大肠杆菌的gapA基因的保守序列设计两对特异性探针,分别标记于猪线粒体基因片段的两端形成两种不同的捕获探针,将捕获探针与待检测菌的基因组杂交、补平缺口、环化后,采用1对引物反向扩增捕获探针,建立检测鸭疫里默氏菌和大肠杆菌的环介导间接PCR方法,扩增片段分别为540 bp和328 bp,本研究建立的方法对金黄色葡萄球菌、禽多杀性巴氏杆菌、沙门氏菌的检测结果为阴性;能够检测出10 pg的鸭疫里默氏菌和大肠杆菌的基因组DNA,与常规PCR的符合率为100%。本研究建立的环介导间接PCR方法是一种特异性好、灵敏度高的快速病原学诊断方法,为同时检测鸭疫里默氏菌和大肠杆菌提供了一种可行的方法。

关键词：鸭疫里默氏菌大肠杆菌环介导间接PCR

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农村畜牧养殖现状与发展建议

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现代农业科技 2018年第18期 226-226,231页

作者：刘荣昌刘旭锟刘道泉黄瑜福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建福州350013 福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心福建省禽病防治重点实验室福建省农业科学院农业经济与科技信息研究所福州市动物疫病预防控制中心

畜禽养殖是我国农村许多家庭重要的经济来源,发展畜牧业也成为当前地方政府落实精准扶贫和脱贫攻坚的有力举措。本文分析了当前农村畜牧生产存在的主要问题,提出了新形势下农村畜禽健康养殖发展建议,以期为农村畜禽养殖户提供参考。

关键词：农村畜牧养殖现状问题发展建议

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