检索结果-内蒙古大学图书馆

眼科学报 2001年第4期17卷 194-197页

作者：钟秀风李永平张平林健贤郑健梁唐松冯官光黄树其中山医科大学中山眼科中心广州510060 第一军医大学分校分子生物学教研室广州510515

目的:获得抗人视网膜母细胞瘤单克隆抗体轻链可变区基因。方法:从分泌抗人视网膜母细胞瘤单克隆抗体的杂交瘤细胞中提取总RNA,逆转录形成cDNA,用扩增小鼠K轻链可变区基因的引物,通过RT-PCR方法,扩增基因,1.5％琼脂糖凝胶电泳鉴定。结果... 详细信息

目的:获得抗人视网膜母细胞瘤单克隆抗体轻链可变区基因。方法:从分泌抗人视网膜母细胞瘤单克隆抗体的杂交瘤细胞中提取总RNA,逆转录形成cDNA,用扩增小鼠K轻链可变区基因的引物,通过RT-PCR方法,扩增基因,1.5％琼脂糖凝胶电泳鉴定。结果:用轻链引物扩增获得340bp的基因片段。结论:从三株杂交瘤细胞中均获得高纯度的总RNA;用RT-PCR方法从一株杂交瘤细胞成功克隆了抗人视网膜母细胞瘤单克隆抗体轻链可变区基因,为基因工程抗体研究奠定了良好基础。眼科学报2001;17:194～197。

关键词：单克隆抗体视网膜母细胞瘤可变区基因 PCR

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抗人血管内皮生长因子发夹状核酶基因真核表达载体的构建及其对靶mRNA的切割

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癌症 2001年第5期20卷 542-543页

作者：严瑞兰钱新华金明惠宏襄辛晓燕王剑波第四军医大学西京医院妇产科陕西西安710032 第一军医大学南方医院小儿科广东广州510060 第四军医大学生物化学与分子生物学教研室陕西西安710032 第四军医大学病理教研室陕西西安710032

肿瘤的生长和转移需要血管形成，现已发现有多种生物因子参与其形成过程。而血管内皮生长因子（ vascular endothelial growth factor, VEGF）被认为是最重要的血管生成因子之一，在肿瘤的生长与转移中起重要作用 [1]。我们曾在卵巢癌... 详细信息

肿瘤的生长和转移需要血管形成，现已发现有多种生物因子参与其形成过程。而血管内皮生长因子（ vascular endothelial growth factor, VEGF）被认为是最重要的血管生成因子之一，在肿瘤的生长与转移中起重要作用 [1]。我们曾在卵巢癌中发现有 VEGF的高表达 [2]，因此，我们自行设计和构建了针对 VEGF mRNA的发夹状核酶基因的真核表达载体，试图采用核酶（ ribozyme）技术抑制 VEGF的表达，以探讨卵巢癌基因治疗的新途径。 1 材料和方法 1． 1 菌种、质粒和试剂大肠杆菌 DH5α、真核表达载体 pcDNA3由第四军医大学生化教研室提供。限制性内切酶及 T4 DNA连接酶等购自原平公司。 1． 2 抗人 VEGF核酶基因的合成针对人 VEGF mRNA第三外显子，设计并合成抗人 VEGF发夹状核酶基因的两条互补单链。为便于克隆和鉴定，该基因的 5′端及 3′端分别设有 BamH I和 EcoR I酶切位点和两个保护碱基，共 66个碱基对。核酶基因两条链的序列为： V1， 5′ -CGG GAT CCC TGA TAA GAA TCC AAC CAG AGA AAC ACA CGT TGT GGT ATA TTA CCT GGT AGA ATC CCG-3′； V2， 5′ -CGG AAT TCT ACC AGG TAA TAT ACC ACA ACG TGT GTT TCT CTG GTT GGA TGT CTA TCA GGG ATC CCG-3′

关键词：血管内皮生长因子发夹状核酶真核表达载体 mRNA 卵巢癌基因治疗

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慢性粒细胞白血病骨髓体外净化的实验研究

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华西医科大学学报 2001年第4期32卷 599-601页

作者：柳金江剑环张永顶吴登蜀杨光彩黄希魏新燕北京大学深圳医院血液科深圳518036 深圳市宝安石岩医院长沙市中南大学附属湘雅医院血液科中国人民解放军第一军医大学分子生物学教研室

目的　探讨白细胞介素、干扰素 α2 a、bcr- abl反义寡核苷酸对慢性粒细胞白血病骨髓体外净化效果。方法　采用体外克隆形成培养技术 ,分别用白细胞介素、干扰素 α2 a、bcr- abl反义寡核苷酸不同的组合方案 ,体外净化 5例慢性粒细胞白... 详细信息

目的　探讨白细胞介素、干扰素 α2 a、bcr- abl反义寡核苷酸对慢性粒细胞白血病骨髓体外净化效果。方法　采用体外克隆形成培养技术 ,分别用白细胞介素、干扰素 α2 a、bcr- abl反义寡核苷酸不同的组合方案 ,体外净化 5例慢性粒细胞白血病 (CML)骨髓。结果　联用 IL- 2、IFN- α2 a(各 80 0 u/ m l)、bcr- abl AS- ODN(30 μg/ ml)方案 ,对白血病细胞克隆形成单位 (L- CFU)抑制作用有显著差异 (P<0 .0 1) ,而相同条件下 ,GM- CFU及 L- CFU的集落存活率分别为 2 6 .91%和 3.49% (P<0 .0 1)。结论　联用 IL- 2、IFN- α2 a(各 80 0 u/ m l)、bcr- abl AS- ODN(30 μg/ml)方案 ,选择性体外净化慢性粒细胞白血病细胞的效果好 ,可用于临床净化 CML

关键词：慢性粒细胞白血病骨髓净化白细胞介素-2 bcr-abl反义寡核苷酸干扰素实验

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关于“基因诊断”多媒体教学软件虚拟化设计探讨

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中国医学教育技术 2001年第3期15卷 142-143页

作者：谭军张爱华马文丽第一军医大学生物化学和分子生物学教研室广州510515

本文描述了设计"基因诊断多媒体教学软件及虚拟分子生物学实验室”的目的、意义和要求.利用多媒体计算机技术,将分子生物学实验室虚拟化,成功地解决了基因诊断的高教学要求与教学经费紧张、教学时数相对较少等实际问题.

关键词：基因诊断虚拟分子生物学实验室 DNA芯片

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抗人血管内皮生长因子发夹状核酶基因抑制卵巢癌细胞血管内皮生长因子表达

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现代妇产科进展 2001年第5期10卷 330-332页

作者：严瑞兰钱新华辛晓燕金明惠宏襄王德堂王健第四军医大学西京医院妇产科西安710032 第一军医大学南方医院儿科第四军医大学分子生物学教研室

目的 :研究抗血管内皮生长因子发夹状核酶基因对人卵巢癌细胞血管内皮生长因子 (VEGF)表达的抑制作用 ,探讨卵巢癌基因治疗的新途径。方法 :人卵巢癌细胞SKOV3高表达VEGF ,将抗血管内皮生长因子发夹状核酶基因真核表达载体 (pcDNA3 RZ)... 详细信息

目的 :研究抗血管内皮生长因子发夹状核酶基因对人卵巢癌细胞血管内皮生长因子 (VEGF)表达的抑制作用 ,探讨卵巢癌基因治疗的新途径。方法 :人卵巢癌细胞SKOV3高表达VEGF ,将抗血管内皮生长因子发夹状核酶基因真核表达载体 (pcDNA3 RZ)转染人卵巢癌细胞SKOV3,经G4 18筛选获得阳性细胞克隆 ,RNA斑点杂交检测核酶基因是否在细胞中表达。采用免疫组化、间接免疫荧光、激光共聚焦显微镜荧光定量法及流式细胞仪结合间接免疫荧光检测转染前后细胞VEGF的表达情况。结果 :转染pcDNA3 RZ组细胞VEGF表达明显降低。结论 :抗人VEGF发夹状核酶基因真核表达载体可有效抑制卵巢癌细胞SKOV3中VEGF的表达 ,有望成为治疗卵巢癌的一种新方法。

关键词：血管内皮生长因子发夹状核酶基因卵巢肿瘤

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生物信息学的现状与发展

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世界医学杂志 2001年第9期5卷 37-38页

作者：宋艳斌郑文岭等第一军医大学生物化学与分子生物学教研室，广州510515 广州军区总医院分子肿瘤研究所

本文介绍了生物信息学的概念、研究内容及意义。提出我国应设立生物信息学专业，加速生物信息学人才的培养，在功能基因组研究中作出更大的贡献。

关键词：生物信息学概念研究内容意义

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人反义VEGF基因表达载体的构建及其对卵巢癌细胞增殖的影响

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中国癌症杂志 2001年第4期11卷 289-293页

作者：严瑞兰金明钱新华惠宏襄辛晓燕王建王德堂第四军医大学西京医院妇产科陕西西安710032 第四军医大学分子生物学教研室陕西西安710032 第一军医大学南方医院儿科广东广州510060

目的 :构建人反义VEGF基因真核表达载体 ,进行抗血管生成治疗卵巢癌实验。方法 :RT PCR法获得人VEGF基因 ,将VEGF基因反向克隆入真核表达载体pcDNA3中 ,酶切鉴定结果。用此真核表达载体转染人卵巢癌细胞HO 8910 ,G418筛选获得阳性克隆 ,... 详细信息

目的 :构建人反义VEGF基因真核表达载体 ,进行抗血管生成治疗卵巢癌实验。方法 :RT PCR法获得人VEGF基因 ,将VEGF基因反向克隆入真核表达载体pcDNA3中 ,酶切鉴定结果。用此真核表达载体转染人卵巢癌细胞HO 8910 ,G418筛选获得阳性克隆 ,RNA斑点杂交鉴定HO 8910细胞中VEGF表达。Westernblot及间接免疫荧光法检测转染前后HO 8910细胞中VEGF蛋白表达。检测转染前后瘤细胞的生物学性状及裸鼠体内致瘤性。结果 :RT PCR法得到VEGF基因 ,并获得反向构建的VEGF真核表达载体。VEGF反义RNA部分阻断了HO 8910细胞中VEGF表达 ,转染后单个细胞的克隆形成能力明显减弱 ;细胞周期中 ,G1期细胞增多 ,S期细胞减少 ,细胞增殖能力降低 ;形态学超微结构显示细胞器扩张和肿胀 ,核染色质边集 ,凝集成块 ,可见明显的凋亡改变。裸鼠体内致瘤性降低。结论 :成功构建了反义VEGF基因真核表达载体 ,该载体可明显抑制卵巢癌细胞增殖。

关键词：血管内皮生长因子真核表达载体构建卵巢癌细胞增殖 VEGF基因

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17号染色体短臂LOH(Ch17pLOH)是晚期大肠癌的诊断标记

17号染色体短臂LOH(Ch17pLOH)是晚期大肠癌的诊断标记

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中国抗癌协会临床肿瘤学协作中心第五届学术年会

作者：季晨阳季丹 DR Smith 广州第一军医大学病理教研室 510515 广州南方医院肾内科 510516 新加坡中央医院结肠外科肿瘤分子生物学实验室

晚期大肠癌的分子生物学机制是十分复杂的.109例大肠癌的RFLP分析显示，Ch17pLOH的频率在Dukes' D期(95％)高于Dukes'A、B、C各期(54-68％)，Fisher's exact test，P=0.006;Ch17pLOH频率在大肠癌远处器官转移组(95％)高于... 详细信息

晚期大肠癌的分子生物学机制是十分复杂的.109例大肠癌的RFLP分析显示，Ch17pLOH的频率在Dukes' D期(95％)高于Dukes'A、B、C各期(54-68％)，Fisher's exact test，P=0.006;Ch17pLOH频率在大肠癌远处器官转移组(95％)高于大肠癌不伴远处器官转移组，Fisher's exact test，P=0.001;在大肠癌淋巴结转移组中Ch17PLOH的频率(71％)，与无淋巴结转移组(64％)相比，Fisher's exact test P＞0.05，两者无显著差异.为此，本文认为Ch17PLOH是晚期大肠癌的重要诊断标记，与晚期大肠癌的启动、形成和发展有重要关系，并提示临床预后不佳.

关键词：晚期大肠癌诊断标记等位基因分子生物学器官转移

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培养和发展学生实验兴趣问题初探

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山西医科大学学报（基础医学教育版） 2001年第1期3卷 49-49页

作者：谭军秦清和杨光彩第一军医大学生物化学与分子生物学教研室

本文运用心理学知识,讨论了暂时兴趣与稳定兴趣的区别与转化,详细阐述了如何培养学生的实验稳定兴趣.

关键词：实验兴趣生物化学实验生物化学教育

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在大鼠皮肤切创愈合过程中TGF-β_1基因及蛋白表达变化与损伤时间关系的实验研究

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中国法医学杂志 2001年第4期16卷 193-197页

作者：王慧君李东杨木兰阮海根黄光照第一军医大学病理学教研室广东广州510515 华中科技大学分子生物学研究室湖北武汉430030 华中科技大学超微病理学研究室湖北武汉430030 武汉市公安局刑科所湖北武汉430015 华中科技大学法医学系湖北武汉430030

了解细胞因子在创伤及修复过程中的表达变化与损伤时间的关系。初步调查生前不同造创时间 ( 0 5h～16 8h)皮肤创缘组织在修复过程中TGF β1mRNA和蛋白质表达变化 ,并与死后伤 ( 0 5h～ 6h)上述变化进行比较。结果表明 ,在生前伤 ,TGF ... 详细信息

了解细胞因子在创伤及修复过程中的表达变化与损伤时间的关系。初步调查生前不同造创时间 ( 0 5h～16 8h)皮肤创缘组织在修复过程中TGF β1mRNA和蛋白质表达变化 ,并与死后伤 ( 0 5h～ 6h)上述变化进行比较。结果表明 ,在生前伤 ,TGF β1在上皮细胞的表达于损伤后 0 5h开始增强 ,以 2 4h～ 96h反应最强 ,除上皮细胞内表达外 ,还在肉芽组织的巨噬细胞和成纤维细胞表达。TGF β1的免疫印迹 (WesternBlot)分析表明 ,TGF β1蛋白表达的峰值在 16 8h ;TGF β1斑点杂交和原位杂交结果显示 ,mRNA的表达在伤后 3h开始 ,6h后明显 ,96h达峰值。死后损伤组在 0 5～ 3h内有免疫组化的弱～中度表达 ,但无mRNA的表达 ,3h后则均无任何表达。TGF β1在修复过程中的一些规律性变化及特点反映了与损伤时间的关系 ,可作为精确推断损伤时间的分子生物学标志。

关键词：法医病理学 TGF-β1 损伤时间推断动物实验细胞因子

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