检索结果-内蒙古大学图书馆

中国毒理学会第六届全国毒理学大会

作者：郑刚张洁琼宋晗沈学锋陈景元第四军医大学军事预防医学院劳动与环境卫生学教研室

目的研究铅暴露对血-脑脊液屏障（BCB）铜离子转运的影响,以及CTR1和ATP7A等铜转运体蛋白在该过程中的作用。方法大鼠脉络丛上皮细胞系Z310体外培养,铅暴露剂量分别为1,2.5,5,10μmol·L。Cu吸收实验检测铅暴露对细胞铜吸收的影响;R... 详细信息

目的研究铅暴露对血-脑脊液屏障（BCB）铜离子转运的影响,以及CTR1和ATP7A等铜转运体蛋白在该过程中的作用。方法大鼠脉络丛上皮细胞系Z310体外培养,铅暴露剂量分别为1,2.5,5,10μmol·L。Cu吸收实验检测铅暴露对细胞铜吸收的影响;Real-time PCR、Western blot法检测铅对铜离子转运体1（CTR1）、二价金属转运体1（DMT1）、ATOX1和ATP7A表达水平的影响;siRNA干涉技术观察CTR1和ATP7A在铅诱导的细胞铜过载中的作用;进一步采用tetracycline（Tet）可诱导CTR1高表达细胞系iZCTR1,在加入Tet作用4 h后,使细胞吸收过量铜离子造成细胞内铜过载,研究细胞铜水平的增加对CTR1和ATP7A表达水平的影响。结果不同剂量铅暴露引起脉络丛Z310细胞内铜过载;铅暴露后细胞CTR1表达水平显著增加,ATP7A表达水平下降,而ATOX1和DMT1的水平无显著变化。采用siRNA阻断CTR1的表达可以抑制细胞铜吸收,并抑制铅诱导的细胞铜过载;ATP7A siRNA可抑制细胞铜的外排,造成细胞内铜的蓄积,且阻断ATP7A后,铅暴露未能诱导细胞内铜水平的进一步增加。上述结果提示CTR1表达的增加和ATP7A表达的降低可能是铅诱导BCB细胞铜转运紊乱的重要原因。另外,细胞外铜浓度的增高引起CTR1蛋白水平的反馈性下调,而对ATP7A蛋白的水平无显著影响。我们采用基于Z310细胞建立的Tet可诱导CTR1高表达细胞系iZCTR1,用Tet诱导CTR1高表达而造成细胞铜过载,进一步研究了细胞内铜水平增高对ATP7A表达水平的影响。结果显示:铜过载24 h后,细胞内铜含量为对照组的6.5倍,而铜过载后铅暴露24 h可对细胞铜的排出产生更显著的抑制作用。Real-time PCR和Westernblot结果显示:细胞内铜过载对ATP7A的表达水平无显著影响,而铜过载后铅暴露引起ATP7A水平显著降低。结论铅可以引起脉络丛上皮细胞铜吸收的增加和铜排出的抑制。其中铜吸收的增加可能与铅引起的CTR1水平增高密切相关,而细胞铜水平的增加可以负向调控CTR1的水平;铅暴露后细胞ATP7A表达的降低可能是细胞铜排出受到抑制的主要原因,而且ATP7A的表达水平并未受细胞内铜水平的影响,而是铅暴露的直接作用结果。

关键词：血-脑脊液屏障铅铜铜转运体1 ATP7A

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

环境铅暴露致脑发育损伤的机制

环境铅暴露致脑发育损伤的机制

引用

中国毒理学会第六届全国毒理学大会

作者：陈景元第四军医大学军事预防医学院劳动与环境卫生学教研室

随着我国工业化的快速进展,环境铅污染及其带来的健康威胁成为日益严重的公共卫生问题,近年来全国各地多次发生较大规模儿童铅中毒事件,造成了严重的健康危害和恶劣的社会影响。大量研究证实:即使在较低的暴露剂量下,铅也可产生显著的... 详细信息

随着我国工业化的快速进展,环境铅污染及其带来的健康威胁成为日益严重的公共卫生问题,近年来全国各地多次发生较大规模儿童铅中毒事件,造成了严重的健康危害和恶劣的社会影响。大量研究证实:即使在较低的暴露剂量下,铅也可产生显著的中枢神经系统毒性,导致智力损伤、注意力缺陷、攻击性行为、神经退行性病变等一系列神经系统损害。铅神经毒性的机制目前尚不完全清楚。血脑屏障(BBB)是铅进入大脑的第一道防线,但是,BBB同时也是铅神经毒性的重要靶点。铅暴露可以造成BBB紧密连接(TJ)的结构破坏、屏障通透性增加、以及紧密连接蛋白(TJP)表达水平的下降,其机制可能与诱导多种蛋白激酶(如MAPK,AKT和PKC等)的磷酸化有关。我们最近的研究发现:铅可以通过诱导BBB血管内皮细胞葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的高表达,进而引起Src通路的磷酸化,特异性地引起紧密连接蛋白occludin的表达水平降低。铅诱导神经胶质细胞基质金属蛋白酶(MMP)表达水平的增高和分泌增多,也参与了铅暴露后BBB TJPs降解的机制。同时,BBB上也存在与铅离子转运相关的转运体蛋白,其中二价金属转运体(DMT1)对于铅通过BBB的转运具有重要作用;铅可以通过诱导蛋白激酶磷酸化而调控铁调节蛋白1(IRP1)的水平,从而可能影响DMT1的表达。铅通过BBB进入大脑后,主要蓄积在海马等部位,除了直接损伤神经元,造成海马神经元凋亡、数量和突触数量减少外,还可引起海马小胶质细胞的显著活化,这种异常的活化现象受到TLR4-MyD88-NFkB信号通路的调控,且伴随有大量炎性因子(如IL-1和TNF-α等)的释放。通过药物抑制小胶质细胞的活化,可以显著减轻铅所诱导的LTP诱导障碍、海马神经元凋亡、以及LDH的释放,表明小胶质细胞的异常活化在铅诱导的神经毒性中起到重要的作用。另外,补充某些元素可以抑制铅的神经毒性。适量补充铁剂可以抑制铅在BBB的转运,降低大脑组织铅含量,减少铅诱导的神经元凋亡;而补硒可能通过抑制铅所引起的氧化应激损伤,而对学习记忆功能起到一定的保护作用。上述研究一方面发现了铅破坏大脑屏障系统、在大脑中转运的新机制,为进一步揭示铅在中枢神经系统的分布规律与其神经毒性之间的关系提供了重要的研究基础;另一方面,发现了小胶质细胞在铅损伤学习记忆机制中的重要作用和分子机制,为从神经胶质细胞角度进行铅神经毒性机制的研究提供了理论依据;同时,通过补充某些微量元素减轻铅神经毒性的探索也为铅毒性防治措施的研究提供了新的思路。

关键词：铅学习记忆血脑屏障紧密连接小胶质细胞

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

辛伐他汀对大鼠减压病的预防效果及机制研究

辛伐他汀对大鼠减压病的预防效果及机制研究

引用

亚太潜水与高气压医学学术会议暨第二届海峡两岸高压氧医学学术会议、中华医学会第二十二次全国高压氧医学学术会议

作者：王冬刘文武徐伟刚陶恒沂上海第二军医大学海军医学系潜水医学教研室

辛伐他汀是一种羟-甲基-戊二酰辅酶A(HMG-CoA)还原酶抑制剂,在临床上通常作为一种有效的降脂药物。近年来研究显示,辛伐他汀还具有多种独立于降脂功能之外的生物学效应,例如:保护内皮细胞的完整性、减少缺血再灌注损伤、抑制炎症反应和... 详细信息

辛伐他汀是一种羟-甲基-戊二酰辅酶A(HMG-CoA)还原酶抑制剂,在临床上通常作为一种有效的降脂药物。近年来研究显示,辛伐他汀还具有多种独立于降脂功能之外的生物学效应,例如:保护内皮细胞的完整性、减少缺血再灌注损伤、抑制炎症反应和凝血因子的活化。由于在减压病(DCS)的发病过程中,血管内气泡常常会导致内皮细胞的损伤、炎症反应、组织水肿以及血小板的活化,因此我们推测辛

关键词：减压病预防效果

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

小鼠对重组口蹄疫病毒VP1-VP4蛋白免疫应答的研究

小鼠对重组口蹄疫病毒VP1-VP4蛋白免疫应答的研究

引用

中国畜牧兽医学会2014年学术年会

作者：董昌海王燕高云欢李丽敏王家鑫河北农业大学动物医学院免疫学实验室

口蹄疫（Foot-and-Mouth Disease,FMD）是由口蹄疫病毒（FMD virus,FMDV）感染偶蹄兽所引起的一种急性、发热性、高度接触性传染病。目前本病尚无有效的预防控制措施。清除病毒感染需要活化的CD8T细胞、Th1应答与高水平的中和抗体,但对... 详细信息

口蹄疫（Foot-and-Mouth Disease,FMD）是由口蹄疫病毒（FMD virus,FMDV）感染偶蹄兽所引起的一种急性、发热性、高度接触性传染病。目前本病尚无有效的预防控制措施。清除病毒感染需要活化的CD8T细胞、Th1应答与高水平的中和抗体,但对于外源性抗原,则需要CD8αDCs以抗原交叉提呈的方式激活CD8T细胞。体外实验发现,被A型清道夫受体（SR-A）抑制剂处理的树突状细胞（DCs）提呈重组FMDV结构蛋白VP1-VP4的能力非但没有被抑制,反而还显著增强,这表明SR-A

关键词：口蹄疫病毒 VP1-VP4 小鼠血清免疫应答

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

脊髓背角P2Y13受体参与CCI大鼠病理性疼痛的机制探讨

脊髓背角P2Y13受体参与CCI大鼠病理性疼痛的机制探讨

引用

作者：王高霞遵义医学院

学位级别：硕士

神经病理性疼痛是由中枢或外周神经系统病变等引起的慢性疼痛，其特征性的临床表现有疼痛过敏、异常疼痛和自发痛等。这种慢性疼痛往往影响了患者的生活质量，并带来沉重的精神、心理及经济负担。目前临床上总体疗效不佳。阐明疼痛的产... 详细信息

神经病理性疼痛是由中枢或外周神经系统病变等引起的慢性疼痛，其特征性的临床表现有疼痛过敏、异常疼痛和自发痛等。这种慢性疼痛往往影响了患者的生活质量，并带来沉重的精神、心理及经济负担。目前临床上总体疗效不佳。阐明疼痛的产生机理对于发展新的镇痛药物和治疗方法是必不可缺的。近年研究报道，背角小胶质细胞在神经病理性疼痛的发生和维持中起着重要作用。激活的脊髓背角小胶质细胞可以通过释放一些细胞因子和趋化因子促进伤害性信息的传递。P2Y13受体表达于背角小胶质细胞，但P2Y13受体是否可以通过调节脊髓背角小胶质细胞的活性，参与脊髓水平痛觉信息的整合尚有待研究。本课题拟在以往本实验室对嘌呤 P2受体研究的基础上，制作大鼠坐骨神经痛模型，分别采用在体和离体两方面研究，综合应用行为学、形态学、分子生物学方法，观察记录：1）P2Y13受体阻断前后，坐骨神经缩窄性损伤后大鼠的行为学变化;2）P2Y13受体阻断前后，脊髓背角小胶质细胞功能变化;3） P2Y13受体阻断对于ADP诱发背角小胶质细胞Ca2+变化的影响。本课题从不同角度探讨P2Y13受体对小胶质细胞功能的影响，这将有助于为病理性疼痛的机理研究提供新的思路，为以小胶质细胞为靶点开发新型镇痛药提供理论基础。　　目的：1．明确脊髓背角P2Y13受体是否参与CCI大鼠神经病理性疼痛。　　2．明确P2Y13受体是否可以促进脊髓背角小胶质细胞胞浆内Ca2+浓度上调。　　方法：实验所用动物均购置于第三军医大学实验动物中心。　　（1）健康成年雄性SD大鼠随机分为3组(n=8): sham组、CCI模型组(鞘内注射生理盐水)、MRS2211(P2Y13受体拮抗剂)处理组（CCI+鞘内注射100pmol/L MRS2211）。CCI模型组及MRS2211处理组大鼠均于鞘内置管7d之后建立坐骨神经缩窄性损伤模型（CCI），连续14d鞘内注射生理盐水或MRS2211（100pmol/L），2次/d，分别在术前1d、术后第1，3，5，7，10，14d测定给药1h后热缩足潜伏期（TWL）;分别在第7，14d处死大鼠，取脊髓背角做免疫印迹，观察背角P2X4受体和P38MAPK表达变化。　　（2）培养纯化新生SD大鼠脊髓背角小胶质细胞，免疫组化观察P2Y13受体表达，激光共聚焦显微镜检测ADP作用下，小胶质细胞[Ca2+]i的变化;随后观察MRS2211、MRS2179、MRS2395预处理对于ADP诱发小胶质细胞Ca2+动员的影响。　　结果：（1）CCI术后1d大鼠即可形成稳定的热痛敏，与sham组相比，CCI组大鼠术后第1，3，5，7，10，14d TWL明显缩短（P＜0.01）;与CCI组相比，MRS2211处理组术后第1，3，5，7，10，14d TWL明显延长（P＜0.05）。免疫印迹观察到，与sham组相比，CCI组术后第7d P2X4受体表达上调（P＜0.05），在第14d P2X4受体表达上调更为明显（P＜0.05）;与sham组相比，CCI组术后第7d P38MAPK表达明显上调（P＜0.05)，在第14d P38MAPK表达有所下降，但与sham组相比仍具有统计学意义（P＜0.05);与CCI组相比，MRS2211处理组大鼠术后第7d背角P38MAPK表达上调明显减弱（P＜0.05)，但在第14d P38MAPK表达有所上升，但与 CCI组相比仍具有统计学意义（P＜0.05);此外，鞘内注射 MRS2211并不影响CCI大鼠脊髓背角P2X4受体表达变化。　　（2）免疫组化实验观察到，在离体培养的大鼠脊髓背角小胶质细胞表达P2Y13受体，ADP可引起培养的脊髓背角小胶质细胞[Ca2+]i快速增高，且呈现剂量依赖性;P2Y13受体拮抗剂 MRS2211(100μmol/L)可以阻断 ADP的作用，而P2Y1受体拮抗剂MRS2179(100μmol/L)、P2Y12受体拮抗剂MRS2395(100μmol/L)均不影响ADP引起的小胶质细胞[Ca2+] i升高的效应。　　结论：　　1.鞘内注射P2Y13受体拮抗剂MRS2211可以明显抑制CCI大鼠热痛敏症状，脊髓背角P38MAPK表达下调，但并不影响CCI大鼠P2X4受体表达变化。这提示MRS2211可以抑制小胶质细胞P38MAPK活化但不影响小胶质细胞P2X4受体表达，这可能是其在脊髓水平发挥镇痛作用的机制之一。　　2. ADP可能通过P2Y13受体途径，快速增高培养的脊髓背角小胶质细胞[Ca2+]i，并促进小胶质细胞激活。

关键词：神经病理性疼痛小胶质细胞脊髓背角 P2Y13受体镇痛作用动物模型

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

输尿管部分梗阻不同时段肾小管上皮细胞Laminin、MMP-3表达及肾单位变化的研究

输尿管部分梗阻不同时段肾小管上皮细胞Laminin、MMP-3表达及肾单...

引用

作者：胡洺瑀遵义医学院

学位级别：硕士

目的:梗阻性肾病(obstructive nephropathy)是泌尿系最常见的一类疾病,以肾间质纤维化为特征,病理改变主要体现在肾小管上皮细胞损伤、上皮-间充质细胞转分化以及大量细胞外基质沉积,其程度与梗阻性质、持续时间及并发症有关,建立大鼠... 详细信息

目的:梗阻性肾病(obstructive nephropathy)是泌尿系最常见的一类疾病,以肾间质纤维化为特征,病理改变主要体现在肾小管上皮细胞损伤、上皮-间充质细胞转分化以及大量细胞外基质沉积,其程度与梗阻性质、持续时间及并发症有关,建立大鼠单侧输尿管部分梗阻模型,选择层粘连蛋白(LN)和基质金属蛋白酶-3(MMP-3)作为监测指标,探讨梗阻不同时段肾盂扩张、肾小管损伤变化以及肾单位萎缩趋势,为临床上处理梗阻性肾病所采取的措施、随诊观察时限及解除梗阻后可能的预后提供一定的理论参考。方法:实验采用第三军医大学动物研究室提供的 SD 大鼠 80 只,随机分为实验组与对照组,实验组再分为单侧输尿管部分梗阻 3 天组,5 天组,7 天组,每组 20 只。对照组仅行单侧输尿管显露,实验组均行输尿管腰大肌包埋法建立单侧输尿管部分梗阻模型,实验组分别于术后第 3、5、7 天处死,对照组术后第 7 天处死,完整取出双侧肾脏、输尿管,予以肉眼观察肾脏形态学变化,HE 染色观察肾脏病理学改变并计数萎缩肾单位,免疫组化检测 LN 及 MMP-3 在肾组织的表达。结果:实验用 80 只 SD 大鼠均无意外死亡。(1)大体观察:对照组双侧肾脏大小与手术前无差异,包膜及外形完整,组织红润有光泽;梗阻 3 天组肾脏体积无明显变化,但表面色泽呈紫红色;梗阻 5 天组肾脏体积明显增大,表面血管增粗,色泽灰暗,质地变韧,肾盂扩张;梗阻 7 天组患肾体积进一步增大,呈半透明样改变,包膜张力明显增高,肾盂扩大,肾皮质如纸样薄。(2)HE 染色:正常对照组肾小球、肾小管清晰可见,排列有序,大小形态规则,结构完整,间质无炎性细胞浸润。实验组肾实质均有不同程度的改变,梗阻 3 天组肾小球无明显变化,集合管及远端肾小管轻度扩张,部分肾小管上皮细胞空泡样变性,间质内见局部炎细胞浸润;梗阻 5 天组可见肾小球、肾小管萎陷,结构紊乱,小管普遍扩张,上皮细胞萎缩,部分肾小球玻璃样变性,肾间质内大量单核、淋巴细胞弥漫浸润;梗阻 7 天组肾单位形态结构模糊,多数肾小球呈萎缩或玻璃样变性,小管结构不清,间质内肌成纤维细胞弥漫增生,并见少量成纤维细胞,残留部分肾小球周围见小管扩张呈球囊状。(3)免疫组化:?对照组及实验组大鼠肾小管上皮细胞中均见 LN、MMP-3 蛋白表达,阴性对照肾组织中均未见阳性表达。?梗阻 3 天、5 天、7 天组与对照组比较,LN 的表达随梗阻时间延长强度增加,MMP-3 的表达则相反,二者比较差异有统计学意义(P<0.05)。?梗阻 3、5、7 天组与对照组比较,肾单位的萎缩随时间延长逐渐明显,二者比较差异有显著性(P<0.05);通过相关分析发现:LN 的表达与健存肾单位数呈负相关,与萎缩肾单位数呈正相关;MMP-3 的表达与健存肾单位数呈正相关,与萎缩肾单位数呈负相关,相关系数 r 检验存在显著性差异(P<0.05)。结论:输尿管部分梗阻及健康的肾小管上皮细胞中均有 LN、MMP-3 表达;在梗阻性病变的肾小管上皮细胞中表达强度与梗阻持续时间有关,其中 LN 的表达强度逐渐增强,MMP-3 则逐渐减弱,二者在肾间质纤维化的过程中发挥了一定作用;LN、MMP-3的表达与肾单位的数目减少相关,可能参与了梗阻性肾病中肾单位萎缩的调节,并反应在蛋白表达水平上。

关键词：输尿管部分梗阻肾单位层粘连蛋白基质金属蛋白酶-3 肾间质纤维化

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

Wnt3a诱导小鼠肝前体细胞上皮-间质转化

引用

第三军医大学学报 2013年第20期35卷 2208-2211页

作者：胡代曦张锡峰芦永良冯涛黄佳祎重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心重庆400016 重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室重庆400016 重庆医科大学病理生理学教研室重庆400016

目的探讨Wnt3a对小鼠肝前体细胞发生上皮-间质转化的影响。方法将表达Wnt3a的腺病毒Ad-GFPWnt3a转入小鼠肝前体细胞中,与空白对照组相比,观察其形态变化。细胞划痕实验和细胞迁移实验观察其对小鼠肝前体细胞迁移能力的影响。实时荧光定... 详细信息

目的探讨Wnt3a对小鼠肝前体细胞发生上皮-间质转化的影响。方法将表达Wnt3a的腺病毒Ad-GFPWnt3a转入小鼠肝前体细胞中,与空白对照组相比,观察其形态变化。细胞划痕实验和细胞迁移实验观察其对小鼠肝前体细胞迁移能力的影响。实时荧光定量Real-time PCR和Western blot分别检测小鼠肝前体细胞中上皮标志物和间质标志物的表达改变。结果镜下观察,高表达Wnt3a的小鼠肝前体细胞由不规则多边形变为长梭形。细胞划痕实验结果显示,Ad-Wnt3a组细胞48h迁移距离为(0.53±0.05)mm,Ad-GFP组细胞48 h迁移距离为(0.33±0.02)mm,相对对照组,其迁移距离增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。细胞迁移实验结果显示,Ad-GFP组24 h穿过小孔的细胞为(10.33±2.08)个,而Ad-Wnt3a组穿过的细胞为(62.00±3.60)个,相对对照组,其穿过小孔的细胞数量增加,差异具有统计学意义(P<0.01)。RT-PCR和Western blot结果显示,间质标志物N-cadherin、vimentin和snail的mRNA和蛋白水平表达上调,相反上皮标志物E-cadherin和CK-18的mRNA水平和蛋白水平表达下调,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 Wnt3a能够促使小鼠肝前体细胞发生上皮-间质转化,提示其可能参与了肝纤维化的发展进程。

关键词： Wnt3a 小鼠肝前体细胞上皮-间质转化

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

Wnt3a对小鼠破骨细胞分化调控的影响

引用

第三军医大学学报 2013年第5期35卷 412-415页

作者：李红丽申利红芦永良冯涛黄佳祎重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心重庆400016 重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室重庆400016 重庆医科大学病理生理学教研室重庆400016

目的探讨Wnt3a对小鼠破骨细胞分化调控的影响。方法将细胞分为4组:阴性对照组(即空白组)、实验对照组(感染Ad-GFP组)、阳性对照组(50 ng/ml RANKL诱导组)、实验组(感染Ad-Wnt3a组)。分别给予处理因素后常规细胞培养6 d,通过酒石酸抗酸... 详细信息

目的探讨Wnt3a对小鼠破骨细胞分化调控的影响。方法将细胞分为4组:阴性对照组(即空白组)、实验对照组(感染Ad-GFP组)、阳性对照组(50 ng/ml RANKL诱导组)、实验组(感染Ad-Wnt3a组)。分别给予处理因素后常规细胞培养6 d,通过酒石酸抗酸性磷酸酶(TRAP)染色观察破骨细胞的分化成熟情况;Western blot检测TRAP、Cathep-sin K蛋白的表达;分别于处理因素后3、6、9 d提取细胞总RNA,荧光定量Real time(RT-PCR)检测核因子κB受体(RANK)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)、组织蛋白酶K(Cathepsin K)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)基因的表达。结果TRAP染色显示50 ng/mL RANKL诱导组能成功诱导RAW 264.7成多核(核≥10),空白组和Ad-GFP组有少量多核细胞(3≤核≤5),Ad-Wnt3a组为单核有个别双核;Western blot检测显示Ad-Wnt3a组TRAP、Cathepsin K蛋白表达降低,差异具有统计学意义(P<0.05);RT-PCR检测Ad-Wnt3a组能下调RANK、TRAP、Cathepsin K、MMP-9基因的表达。结论Wnt3a能抑制RAW264.7分化成成熟的破骨细胞。

关键词： Wnt3a RAW264 7 RANKL TRAP

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

γ分泌酶抑制剂对肝血窦内皮细胞的影响

引用

现代生物医学进展 2013年第16期13卷 3019-3023页

作者：金超任凯夕晏贤春马鹏飞郭丰成窦科峰第四军医大学西京医院肝胆外科陕西西安710032 第四军医大学基础部遗传发育教研室陕西西安710032

目的:在建立高纯度小鼠肝血窦内皮细胞的体外培养的基础上研究γ分泌酶抑制剂(DAPT)对肝血窦内皮细胞活性的影响。方法:首先通过胶原酶灌注消化、percoll梯度离心和选择性贴壁分离得到高纯度、可在体外条件下培养的肝血窦内皮细胞,其次... 详细信息

目的:在建立高纯度小鼠肝血窦内皮细胞的体外培养的基础上研究γ分泌酶抑制剂(DAPT)对肝血窦内皮细胞活性的影响。方法:首先通过胶原酶灌注消化、percoll梯度离心和选择性贴壁分离得到高纯度、可在体外条件下培养的肝血窦内皮细胞,其次用不同浓度的DAPT(15μmol/L、45μmol/L、75μmol/L)处理细胞,然后通过MTT检测细胞增殖情况、Real time PCR检测相关分子改变。结果:在体外条件下DAPT对肝血窦内皮细胞的增殖起到促进作用,这种促进作用随着DAPT浓度的增加相应的增加;DAPT能够导致肝血窦内皮细胞Notch信号下游分子Hes1表达下调,VEGF信号中VEGFR1表达下调,VEGFR2表达上调。结论:γ分泌酶抑制剂(DAPT)通过抑制肝血窦内皮细胞Notch信号,引起肝血窦内皮细胞表面VEGFR1表达下调,VEGFR2表达上调显著增加肝血窦内皮细胞的活性。

关键词： DAPT 肝血窦内皮细胞 Notch信号

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

巴马香猪类固醇激素急性调节蛋白(StAR)基因真核表达载体的构建及鉴定

引用

中国兽医杂志 2013年第5期49卷 19-22页

作者：吴群魏泓肖榕卿利娟葛亮李婧商海涛郑小波刘宇西南大学荣昌校区动物医学系重庆荣昌402460 中国人民解放军第三军医大学基础部实验动物学教研室重庆沙坪坝400038

本试验通过RT-PCR扩增巴马香猪StAR基因,分析其序列的结构特点并构建真核表达载体,为StAR基因在猪睾丸间质细胞中的超量表达研究奠定基础。根据NCBI中猪StAR基因序列设计并合成引物,以巴马香猪睾丸组织总RNA为模板进行RT-PCR,将所得目... 详细信息

本试验通过RT-PCR扩增巴马香猪StAR基因,分析其序列的结构特点并构建真核表达载体,为StAR基因在猪睾丸间质细胞中的超量表达研究奠定基础。根据NCBI中猪StAR基因序列设计并合成引物,以巴马香猪睾丸组织总RNA为模板进行RT-PCR,将所得目的基因与pEGFP-C1进行双酶切后连接构建真核表达载体pEGFP-C1-StAR。结果显示,连接到pSURE-T克隆载体上的目的片段测序结果为858碱基组成,编码含有285个氨基酸残基的蛋白质,与NCBI报道的StAR基因比对,核酸同源性在99.3%以上,并成功构建了重组载体pEGFP-C1-StAR。

关键词：巴马香猪类固醇激素急性调节蛋白真核表达载体表达鉴定

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：