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华中科技大学学报（医学版） 2017年第3期46卷 303-307页

作者：方银花李晓琴任泂唐才智冉新泽粟永萍程红缨第三军医大学护理学院重庆400038 第三军医大学预防医学院全军复合伤研究所(创伤烧伤与复合伤国家重点实验室) 重庆400038

目的探索蛋白磷酸酶2A(PP2A)抑制剂LB-100对宫颈癌细胞Ca ski辐射敏感性的影响。方法 Ca ski(宫颈癌细胞株)及CCD 841CoN(正常小肠上皮细胞株)给予不同浓度梯度(0~100μmol/L)LB-100处理24h后,以CCK-8法检测细胞活性,筛选最佳药物作用... 详细信息

目的探索蛋白磷酸酶2A(PP2A)抑制剂LB-100对宫颈癌细胞Ca ski辐射敏感性的影响。方法 Ca ski(宫颈癌细胞株)及CCD 841CoN(正常小肠上皮细胞株)给予不同浓度梯度(0~100μmol/L)LB-100处理24h后,以CCK-8法检测细胞活性,筛选最佳药物作用浓度。在此药物浓度下,以对照(PBS)、单纯LB-100、单纯辐照及LB-100联合辐照等方式处理细胞(辐照剂量为0、2、4、6Gy),通过平板克隆实验分别观察LB-100对Ca ski和CCD 841CoN辐射敏感性的影响;再以相同的方式处理(细胞辐照剂量为6Gy),通过流式细胞术检测凋亡及细胞周期,初探LB-100增强Ca ski辐射敏感性的机制。结果 LB-100对Ca ski及CCD 841CoN的抑制作用呈药物剂量依赖性;2.5μmol/L LB-100增强Ca ski细胞辐射敏感性,但对CCD 841CoN的辐射敏感性无显著影响;LB-100联合辐照处理促进Ca ski细胞凋亡,LB-100联合辐照组细胞凋亡率与单纯辐照组比较差异有统计学意义[(8.76±1.02)%vs.(4.65±0.72)%,P<0.01];LB-100可下调Ca ski细胞G0/G1期所占比例,LB-100联合辐照组与单纯辐照组比较差异有统计学意义[(19.87±2.54)%vs.(30.73±1.18)%,P<0.05]。结论 PP2A抑制剂LB-100通过促进凋亡、影响细胞周期,增强了人宫颈癌细胞株Ca ski的辐射敏感性,同时,其对正常肠上皮细胞CCD 841CoN无辐射增敏作用,有望成为临床上增强宫颈癌放射治疗疗效的辅助药物。

关键词：蛋白磷酸酶2A(PP2A) 宫颈癌辐射敏感性细胞周期

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6,7,4′-三羟基异黄酮(T2)水溶性衍生物的合成及其对宫颈癌细胞抑制作用的研究

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重庆医学 2017年第1期46卷 33-35,39页

作者：袁少隆李蓉第三军医大学军事预防医学院防原医学教研室/全军复合伤研究所/创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400030

目的合成6,7,4′-三羟基异黄酮(6,7,4′-trihydroxyisoflavone,T2)水溶性衍生物,对其结构进行表征,并对其抗肿瘤活性进行评价。方法通过磺化反应在原料B环中3'位引入磺酸基(-SO3H),进一步浓氨水氨化后得到水溶性显著提高的异黄酮衍... 详细信息

目的合成6,7,4′-三羟基异黄酮(6,7,4′-trihydroxyisoflavone,T2)水溶性衍生物,对其结构进行表征,并对其抗肿瘤活性进行评价。方法通过磺化反应在原料B环中3'位引入磺酸基(-SO3H),进一步浓氨水氨化后得到水溶性显著提高的异黄酮衍生物,通过氢谱、碳谱、质谱、元素分析等对其结构进行表征,CCK-8法及流式测定其杀伤宫颈癌细胞(Hela)的活性。结果通过上述方法得到两种水溶性异黄酮衍生物T2-SO3H·2H2O和T2-SO3(NH4)2,产率分别为:96%、75%,生物试验显示其中T2-SO3(NH4)2抗肿瘤活性显著增强。结论与T2相比,其水溶性衍生物具有更高的生物相容性及抗肿瘤活性,有广泛的生物应用前景。

关键词：异黄酮类宫颈肿瘤异黄酮衍生物水溶性磺化反应抗肿瘤

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照前给予去甲肾上腺素增强电离辐射对小鼠血小板生成能力的损伤作用

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第三军医大学学报 2017年第8期39卷 724-730页

作者：李凤菊杜长虹杨可雷鑫汤勇陈石磊许杨王军平第三军医大学军事预防医学院全军复合伤研究所、创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室、重庆市纳米医药工程技术研究中心重庆400038

目的探讨去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)对电离辐射(ionizing radiation,IR)损伤小鼠血小板水平的影响作用。方法 80只健康雄性C57BL/6小鼠按完全随机的方法分为未辐射对照组(PBS)、未辐射给药组(NE)、辐射对照组(PBS+IR)和辐射给药组... 详细信息

目的探讨去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)对电离辐射(ionizing radiation,IR)损伤小鼠血小板水平的影响作用。方法 80只健康雄性C57BL/6小鼠按完全随机的方法分为未辐射对照组(PBS)、未辐射给药组(NE)、辐射对照组(PBS+IR)和辐射给药组(NE+IR),每组20只小鼠。给药组给予腹腔注射NE(1.5 mg/kg),对照组给予腹腔注射等体积PBS,处理24 h后辐射组进行全身一次性6 Gyγ射线照射。辐射后不同时间点尾静脉采血检测小鼠血常规,并于辐射后第9天使用HE染色观察小鼠骨髓变化,流式细胞术分析小鼠骨髓造血干细胞(hematopoietic stem cells,HSCs)比例变化以及巨核细胞凋亡、周期的变化。结果未辐射时,NE组小鼠给药后3~10 d血小板数量显著高于PBS组(P<0.05);HSCs占骨髓Lineage细胞的比例:NE组为(1.44±0.08)%,PBS组为(1.05±0.10)%,两组差异具有统计学意义(P<0.05);同时,NE也具有促进离体培养小鼠HSCs的增殖,并且在药物浓度100 nmol/m L的范围内具有剂量效应依赖关系;HE染色显示,NE组的骨髓有核细胞和巨核细胞数目显著高于PBS组(P<0.05);巨核系祖细胞周期的结果显示,NE组G0/G1期细胞百分比减少约(12.10±3.12)%、S期细胞比例增加约(8.78±1.05)%,与PBS组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。辐射后,NE+IR组小鼠7~25d血小板数量低于PBS+IR组(P<0.05);HSCs占骨髓Lineage细胞的比例:NE+IR组为(0.07±0.01)%,PBS+IR组为(0.27±0.03)%,两组差异具有统计学意义(P<0.05);HE染色结果显示,NE+IR组的骨髓有核细胞和巨核细胞数目显著低于PBS+IR组(P<0.05);巨核祖细胞凋亡结果显示,NE+IR组凋亡率为(84.46±5.09)%,明显高于PBS+IR组[(54.18±3.18)%,(P<0.05)]。结论去甲肾上腺素使造血干细胞、巨核祖细胞过度活化,从而增加了小鼠对电离辐射的敏感性,使血小板生成减少。

关键词：去甲肾上腺素血小板辐射损伤

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沉默水通道蛋白4对脑创伤致大鼠学习记忆功能障碍的作用研究

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中华危重病急救医学 2018年第2期30卷 170-175页

作者：熊翱金戈熊仁平鲁宏郑州大学临床医学系河南郑州450001 郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室河南郑州450001 第三军医大学大坪医院野战外科研究所创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室分子生物学中心重庆400042 重庆市第七人民医院医学影像科 400054

目的通过观察与认知和学习记忆功能相关的蛋白表达，探讨水通道蛋白4（AQP4）沉默对创伤性脑损伤（TBI）大鼠学习和记忆功能的影响及意义。方法按随机数字表法将96只健康成年雄性Wistar大鼠分组。① 48只大鼠被分为假手术（Sham）组、TB... 详细信息

目的通过观察与认知和学习记忆功能相关的蛋白表达，探讨水通道蛋白4（AQP4）沉默对创伤性脑损伤（TBI）大鼠学习和记忆功能的影响及意义。方法按随机数字表法将96只健康成年雄性Wistar大鼠分组。① 48只大鼠被分为假手术（Sham）组、TBI组（采用改良Feeney法制模）、AQP4 RNA干扰（RNAi）阴性组〔TBI＋无意义的小干扰RNA（siRNA）-AQP4脂质体溶液10 μL〕、AQP4 RNAi组（TBI＋siRNA-AQP4脂质体溶液10 μL〕；分别于伤后1、6、12 h各取4只大鼠脑组织，采用蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）检测海马组织AQP4、一般性调控阻遏蛋白激酶2（GCN2）、环磷酸腺苷反应元件结合蛋白（CREB）及其磷酸化（p-CREB）蛋白表达。②另外48只大鼠被分为正常组（Control组）、Sham组、TBI组、AQP4 RNAi组，其中6只于伤后12 h测定脑含水量，另外6只用于Morris水迷宫实验。结果① TBI组伤后海马组织AQP4和GCN2蛋白表达较Sham组明显增高，并随时间延长呈逐渐升高趋势，12 h出现统计学差异（AQP4蛋白：5.03±0.09比1，GCN2蛋白：4.01±0.13比1，均P〈0.01）；CREB和p-CREB表达较Sham组明显降低，并随时间延长呈逐渐下降趋势，12 h出现统计学差异（CREB蛋白：0.38±0.03比1，p-CREB蛋白：0.38±0.03比1，均P〈0.01）。与TBI组比较，AQP4 RNAi组伤后各时间点AQP4蛋白表达明显下降（1 h：1.02±0.04比2.23±0.05，6 h：1.23±0.03比2.59±0.04，12 h：2.20±0.08比5.03±0.09，均P〈0.01），而GCN2、CREB和p-CREB表达则差异无统计学意义。AQP4 RNAi阴性组各蛋白表达变化与TBI组比较差异均无统计学意义。② TBI组脑含水量较Control组和Sham组明显升高〔（83.7±0.4）%比（76.2±0.2）%、（76.2±0.3）%，均P〈0.01〕；AQP4 RNAi组脑含水量〔（78.8±0.3）%〕则较TBI组明显下降（P〈0.01）。TBI组和AQP4 RNAi组伤后第11、13、15天Morris水迷宫实验潜伏期明显延长，探索时间明显缩短；与TBI组比较，AQP4 RNAi组第15天逃避潜伏期明显缩短（s：60.2±11.1比62.0±11.5，P〈0.05），探索时间明显延长（s：37.0±8.5比32.7±9.2，P〈0.05）。结论TBI后大鼠认知和学习记忆功能受损，与影响认知和学习记忆功能相关的CREB和GCN2蛋白表达变化显著相关；经AQP4 RNAi处理后，虽对大鼠认知和学习记忆功能改善不明显，但可减轻脑水肿。

关键词：脑损伤创伤性水通道蛋白4 一般性调控阻遏蛋白激酶2 环磷酸腺苷反应元件结合蛋白

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水通道蛋白亚型3在脓毒症肺血管通透性中的作用及SS-31对其的影响

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第三军医大学学报 2017年第2期39卷 111-115页

作者：王平吴惠玲朱娱李涛刘良明第三军医大学大坪医院野战外科研究所第二研究室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的探讨水通道蛋白亚型3(aquaporin 3,Aqp3)在脓毒症肺血管通透性中的作用及SS-31对其的影响。方法采用SD大鼠盲肠结扎穿孔复制脓毒症模型。在整体动物水平上分为假手术组,脓毒症6、12 h组,在离体细胞水平分为空白对照组,LPS刺激6、12 ... 详细信息

目的探讨水通道蛋白亚型3(aquaporin 3,Aqp3)在脓毒症肺血管通透性中的作用及SS-31对其的影响。方法采用SD大鼠盲肠结扎穿孔复制脓毒症模型。在整体动物水平上分为假手术组,脓毒症6、12 h组,在离体细胞水平分为空白对照组,LPS刺激6、12 h组,分别观察脓毒症和脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激6、12 h后肺静脉Aqp3的表达和血管通透性的变化,以及干扰Aqp3后内皮细胞通透性的变化。进一步观察抗氧化剂SS-31对Aqp3的表达与血管通透性的作用。结果脓毒症和LPS刺激内皮细胞后Aqp3表达和肺血管通透性均明显增加,与假手术组和空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。用RNAi抑制Aqp3的表达,可明显拮抗由LPS刺激引起的内皮细胞通透性增加,与LPS刺激组相比差异有统计学意义(P<0.05)。在整体动物和离体细胞水平应用抗氧化剂SS-31均可降低由脓毒症和LPS刺激引起的Aqp3表达和血管通透性的增加,与脓毒症和LPS刺激组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Aqp3参与了脓毒症肺血管通透性的调节,抗氧化措施可降低脓毒症肺血管通透性及下调Aqp3的表达。

关键词：脓毒症水通道蛋白亚型3 SS-31 血管通透性

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线粒体质量失衡在危重症多器官功能障碍中的作用

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肠外与肠内营养 2017年第6期24卷 321-325页

作者：李涛第三军医大学大坪医院野战外科研究所创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

随着医疗救护水平的不断提高，一些疾病得到有效控制，但许多临床重症如严重创伤、感染、脓毒症、重症胰腺炎等所导致的多脏器功能损害的发生率和死亡率却有增无减，其人群发病率高达0．3％。在ICU病人中约50％病人发展成多器官功能损... 详细信息

随着医疗救护水平的不断提高，一些疾病得到有效控制，但许多临床重症如严重创伤、感染、脓毒症、重症胰腺炎等所导致的多脏器功能损害的发生率和死亡率却有增无减，其人群发病率高达0．3％。在ICU病人中约50％病人发展成多器官功能损害，根据受损器官的数量及程度不同，死亡率可高达30-70％。

关键词：多器官功能损害线粒体质量危重症线粒体分裂线粒体自噬

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腺苷A_(2A)受体在中枢神经系统损伤中的相关研究进展

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局解手术学杂志 2018年第7期27卷 528-532页

作者：卢丁烯张开元宁亚蕾周元国陆军军医大学(第三军医大学)野战外科研究所分子生物学中心创伤烧伤及复合伤国家重点实验室重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)研究生院重庆400038

中枢神经系统损伤以其高发生率和高死残率,已经成为紧迫的世界性公众健康问题,但目前还缺乏公认安全有效的疗法。腺苷A_(2A)受体(A_(2A)R)作为神经精神活动及中枢神经系统损伤的重要调控因子,引起了普遍的关注。目前,研究发现在中枢神... 详细信息

中枢神经系统损伤以其高发生率和高死残率,已经成为紧迫的世界性公众健康问题,但目前还缺乏公认安全有效的疗法。腺苷A_(2A)受体(A_(2A)R)作为神经精神活动及中枢神经系统损伤的重要调控因子,引起了普遍的关注。目前,研究发现在中枢神经系统损伤中,激活A_(2A)R有加重神经损伤与神经保护的复杂作用。本文即对A_(2A)R在中枢神经损伤中的作用与机制进行探讨。

关键词：腺苷 A 2A受体中枢神经系统损伤

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HDAC2 sumo-E3连接酶活性在DLD1细胞迁移和增殖中的作用

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现代生物医学进展 2018年第10期18卷 1854-1859页

作者：马琳琳李玲荆昭李莹莹郭韡胡雪停邢伟徐祥青岛大学医学部基础医学院山东青岛266071 第三军医大学第三附属医院野战外科研究所创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400012

目的:探讨HDAC2 sumo-E3连接酶对DLD1细胞迁移与增殖的影响和可能机制。方法:全基因合成HDAC2 sumo-E3连接酶突变体HDAC2(325-488),并构建其重组慢病毒表达载体;感染DLD1hdac2-/-细胞(无内源性HDAC2表达),筛选稳定表HDAC2(325-488)的细... 详细信息

目的:探讨HDAC2 sumo-E3连接酶对DLD1细胞迁移与增殖的影响和可能机制。方法:全基因合成HDAC2 sumo-E3连接酶突变体HDAC2(325-488),并构建其重组慢病毒表达载体;感染DLD1hdac2-/-细胞(无内源性HDAC2表达),筛选稳定表HDAC2(325-488)的细胞克隆DLD1h325-488;RTCA实时细胞分析仪、Trans-well等检测DLD1h325-488稳定细胞的增殖和迁移能力;免疫印迹、q RT-PCR检测DLD1h325-488稳定细胞增殖和迁移相关基因的表达。结果:构建了稳定表达HDAC2 sumo-E3连接酶突变体HDAC2(325-488)的细胞株DLD1h325-488,并获得稳定表达HDAC2 sumo-E3连接酶突变体HDAC2(325-488)的DLD1h325-488细胞。与对照组细胞相比,DLD1h325-488细胞增殖活性无显著变化,但是细胞的迁移能力和迁移相关蛋白MMP14的表达显著上升。结论:HDAC2 sumo-E3连接酶可能通过上调mmp14的表达而促进DLD1细胞的迁移。

关键词： HDAC2 SUMO 迁移 MMP14

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靶向肝癌的GPC3-CAR-T细胞的构建与功能鉴定

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中国肿瘤生物治疗杂志 2017年第7期24卷 748-755页

作者：吴斯玮敖翔郭韡邢伟安天琛敖罗权胡雪停李战徐祥第三军医大学大坪医院野战外科研究所创伤烧伤与复合伤国家重点实验室第一研究室重庆400042

目的:构建靶向GPC3阳性肝癌细胞的嵌合抗原受体修饰T细胞[chimeric antigen receptor-modified T cell,CAR-T cell],并评估其对GPC3阳性肝癌细胞的杀伤效能。方法:选择偏爱密码子技术改造基因序列,以增强CAR分子表达效率,设计靶向GPC3... 详细信息

目的:构建靶向GPC3阳性肝癌细胞的嵌合抗原受体修饰T细胞[chimeric antigen receptor-modified T cell,CAR-T cell],并评估其对GPC3阳性肝癌细胞的杀伤效能。方法:选择偏爱密码子技术改造基因序列,以增强CAR分子表达效率,设计靶向GPC3抗原的CAR分子基因并构建携带GPC3-CAR基因的慢病毒表达载体p CDH-GPC3-CAR,感染T细胞;采用Western blotting、流式细胞术、实时细胞监测和ELISA技术分别检测GPC3-CAR分子在CAR-T细胞的表达、慢病毒感染T细胞效率、GPC3-CAR-T细胞对GPC3阳性肝癌细胞的杀伤活性和特异性。结果:双酶切p CDH-GPC3-CAR重组慢病毒质粒可见分子质量和GPC3-CAR分子一致的基因片段,成功构建p CDH-GPC3-CAR慢病毒质粒。约54.38%的GPC3-T细胞表达GPC3-CAR分子,称为GPC3-CAR-T细胞。GPC3-CAR-T细胞对GPC3阳性的肝癌细胞Huh-7比GPC3阴性的肝癌细胞SK-HEP-1具有更高效的杀伤能力[(78.96±4.76)%vs(6.87±3.15)%,P<0.01]。与GPC3阳性Huh-7肝癌细胞共培养的肝癌GPC3-CAR-T细胞分泌IFN-γ水平比Mock组高效[(21 371.4±1 808.3)vs(152.8±12.5)pg/ml,P<0.01],这可能是其高效杀伤肝癌细胞的机制之一。结论:靶向肝癌的GPC3-CAR-T细胞具有高效分泌IFN-γ细胞因子并特异高效杀伤GPC3阳性肝癌细胞的能力,为进一步推进GPC3-CAR-T临床前和临床研究奠定基础。

关键词：磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3 嵌合抗原受体T细胞免疫治疗肝癌

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胶原类创面材料临床应用全国专家共识(2018版)

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感染．炎症．修复 2018年第4期19卷 200-203页

作者：无吕国忠黄跃生中国老年医学学会烧创伤分会江苏省无锡市第三人民医院烧伤整形科江苏无锡214041 陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院全军烧伤研究所创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400038

胶原是人体主要的结构蛋白,在伤口愈合过程中具有重要作用。以胶原为原料的材料因其天然的止血性、良好的生物相容性、较低的免疫原性及可控的生物降解性等性能,备受人们关注。本文主要介绍了胶原类创面材料的特点、作为支架材料和创面... 详细信息

胶原是人体主要的结构蛋白,在伤口愈合过程中具有重要作用。以胶原为原料的材料因其天然的止血性、良好的生物相容性、较低的免疫原性及可控的生物降解性等性能,备受人们关注。本文主要介绍了胶原类创面材料的特点、作为支架材料和创面覆盖物应用的机制,并就其临床适应证、推荐使用方法、禁忌证以及注意事项等形成较为规范、统一的专家共识,以帮助临床医师和患者正确认识并合理使用胶原类创面材料。

关键词：胶原支架创面材料创面覆盖物专家共识

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