检索结果-内蒙古大学图书馆

第三军医大学学报 2009年第23期31卷 2299-2301页

作者：王景穆媛嫒黎庶陈志瑾熊坤丛延广第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆市微生物工程实验室重庆400038 遵义医学院研究生院贵州遵义563003

目的构建1个适用于革兰阴性菌的精确基因敲除载体并证明其有效性。方法构建的载体主要包括以下成分:π蛋白依赖性复制起点oriR6K;接合转移基因mob,使载体可以通过简单的接合方式实现转移;多克隆位点序列:EcoRⅠ-XbaⅠ-ApaⅠ-SfiⅠ-SacⅠ... 详细信息

目的构建1个适用于革兰阴性菌的精确基因敲除载体并证明其有效性。方法构建的载体主要包括以下成分:π蛋白依赖性复制起点oriR6K;接合转移基因mob,使载体可以通过简单的接合方式实现转移;多克隆位点序列:EcoRⅠ-XbaⅠ-ApaⅠ-SfiⅠ-SacⅠ-NotⅠ-SpeⅠ-NdeⅠ-SacⅡ-BglⅡ;反向选择标志SacB;正向选择标志卡那霉素抗性片段。载体构建完成后,采用该载体对弗氏枸橼酸杆菌的yeeZ基因进行框架内敲除,以验证其有效性。结果成功构建了敲除载体,命名为pYG4,并对yeeZ基因进行了框架内精确敲除获得突变株。结论本研究构建的载体适用于对革兰阴性菌进行目的基因的精确敲除,将在细菌基因功能研究中得到广泛的应用。

关键词：敲除载体构建突变株基因功能

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Bmi-1调节干性相关分子转录的初步分析

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第三军医大学学报 2009年第9期31卷 768-771页

作者：阮艳蹇锐程小星牛翰婕周恒宇郑宏庭胡福泉第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆市微生物工程实验室重庆400038 解放军总医院309临床部北京100091 第三军医大学新桥医院内分泌科重庆400037

目的探讨Bmi-1对肿瘤及胚胎干细胞中干性相关分子转录表达的影响。方法分别构建鼠源和人源Bmi-1过表达载体pCI-GFP-mbmi1和pCI-GFP-hbmi1;瞬时转染鼠ES细胞CCE和人神经胶质瘤细胞U87;半定量RT-PCR检测胚胎干细胞中Oct-4、Nanog、c-Myc、... 详细信息

目的探讨Bmi-1对肿瘤及胚胎干细胞中干性相关分子转录表达的影响。方法分别构建鼠源和人源Bmi-1过表达载体pCI-GFP-mbmi1和pCI-GFP-hbmi1;瞬时转染鼠ES细胞CCE和人神经胶质瘤细胞U87;半定量RT-PCR检测胚胎干细胞中Oct-4、Nanog、c-Myc、Klf4和Sox2及肿瘤细胞中CD133、Nestin等干性分子的表达;克隆形成实验检测CCE细胞自我更新克隆形成能力。结果瞬时转染Bmi-1过表达载体后,CCE细胞中Nanog的表达上调,Oct-4、Sox2和Klf4的表达无明显变化;U87细胞中Nestin和Oct-4表达上调,CD133、Nanog变化不明显;两者c-Myc的转录表达均显著降低;过表达Bmi-1促进CCE细胞自我更新克隆形成。结论Bmi-1参与了对肿瘤及胚胎干细胞中干性相关分子的转录调节。

关键词： Bmi-1 干细胞干性相关分子转录调控

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冷冻微创剥脱术治疗下肢静脉曲张的临床观察

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局解手术学杂志 2009年第1期18卷 20-21页

作者：肖卫东陈炜陈祖林杨桦第三军医大学附属新桥医院普通外科重庆400037 第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆400038

目的探讨冷冻微创剥脱术治疗下肢静脉曲张的临床疗效。方法采用冷冻微创剥脱术对55例下肢静脉曲张患者进行手术治疗，观察患者术后的恢复情况。结果使用冷冻微创剥脱术治疗的55例患者经随访6—23个月，均无局部复发。结论冷冻微创剥脱... 详细信息

目的探讨冷冻微创剥脱术治疗下肢静脉曲张的临床疗效。方法采用冷冻微创剥脱术对55例下肢静脉曲张患者进行手术治疗，观察患者术后的恢复情况。结果使用冷冻微创剥脱术治疗的55例患者经随访6—23个月，均无局部复发。结论冷冻微创剥脱术具有微创、安全、术后无复发等优点，是治疗下肢静脉曲张的理想方法。

关键词：冷冻微创下肢静脉曲张

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稳定过表达p50基因细胞株的构建及鉴定

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局解手术学杂志 2009年第2期18卷 78-80页

作者：陈炜高娜王嘉丽张俊磊田衍平安静第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆市微生物工程实验室重庆400038 第三军医大学基础医学部组织胚胎学教研室重庆400038 首都医科大学基础医学院微生物学教研室北京100069

目的筛选出稳定过表达p50基因的细胞克隆株ECV-p50,为研究dynei-n-dynactin复合体在登革病毒逆行性运输中的作用奠定基础。方法将构建的pRe-p50质粒稳定转染至ECV304细胞,通过间接免疫荧光染色和免疫印迹实验进行鉴定。结果经间接免疫... 详细信息

目的筛选出稳定过表达p50基因的细胞克隆株ECV-p50,为研究dynei-n-dynactin复合体在登革病毒逆行性运输中的作用奠定基础。方法将构建的pRe-p50质粒稳定转染至ECV304细胞,通过间接免疫荧光染色和免疫印迹实验进行鉴定。结果经间接免疫荧光染色和免疫印迹实验验证,稳定过表达p50基因的细胞克隆株命名为ECV-p50。结论成功建立了稳定过表达p50基因的细胞克隆株ECV-p50,为后续研究积累了有价值的实验资料。

关键词：病毒微管骨架逆行性运输过表达 p50

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结核抗原特异性CD4^＋中央型记忆T细胞的检测及分布特性研究

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第三军医大学学报 2009年第16期31卷 1549-1551页

作者：牛翰婕程小星王心静曹志红董梅佟爱华第三军医大学基础医学部微生物学教研室、重庆市微生物工程实验室重庆400038 解放军总医院第二附属医院结核病研究室北京100091 解放军总医院第二附属医院检验科北京100091

目的比较活动期肺结核患者和纯蛋白衍生物(purified protein derivative,PPD)试验阳性健康人记忆T细胞的产生和分布特性。方法取乙二胺四乙酸(ethylene diaminete traacetic acid,EDTA)抗凝静脉血,Ficoll进行密度梯度离心获取PBMCs。采... 详细信息

目的比较活动期肺结核患者和纯蛋白衍生物(purified protein derivative,PPD)试验阳性健康人记忆T细胞的产生和分布特性。方法取乙二胺四乙酸(ethylene diaminete traacetic acid,EDTA)抗凝静脉血,Ficoll进行密度梯度离心获取PBMCs。采用卡介苗刺激后,通过CD4、CD154、CCR7、CD45RA4种抗体共染色,用流式细胞仪检测结核抗原特异性CD4+记忆T细胞。结果以CD4+CD154+双阳性区设门,研究结核抗原特异性CD4+记忆T细胞,结果显示,肺结核患者CD4+CD154+CD45RA-CCR7+中央型T淋巴细胞亚群分布频率显著降低(P<0.05),CD4+CD154+CD45RA+CCR7+初始T细胞亚群的比例明显增高(P<0.05)。结论肺结核患者CD4+中央型记忆T淋巴细胞亚群的产生存在异常,可能与免疫功能低下和结核病发病密切相关。

关键词：结核免疫 CD4^+T细胞记忆T细胞

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2007-2008年北京地区CA16VP1区系统进化分析

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第三军医大学学报 2009年第23期31卷 2342-2346页

作者：王娟罗珍范东瀛高娜朱俊萍安静首都医科大学基础医学院微生物学教研室北京100069 首都医科大学附属北京儿童医院皮肤科北京100045 第三军医大学基础医学部组织胚胎学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的了解2007-2008年北京地区柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus A16,CA16)流行情况及其种系进化规律和基因分型。方法收集北京地区2007-2008年133例手足口病病例临床标本,从中筛选CA16毒株,扩增部分毒株VP1区并进行序列测定和分析。结... 详细信息

目的了解2007-2008年北京地区柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus A16,CA16)流行情况及其种系进化规律和基因分型。方法收集北京地区2007-2008年133例手足口病病例临床标本,从中筛选CA16毒株,扩增部分毒株VP1区并进行序列测定和分析。结果共筛选得到39例45份CA16阳性标本,测定其中16株病毒的VP1区核苷酸序列,其同源性为91.43%～98.65%,氨基酸同源性为97.98%～100%。该16株病毒与GenBank中选取的24株CA16参考株的核苷酸同源性为78.13%～98.65%,氨基酸同源性为89.9%～100%。16株北京分离株中的9株与近年多数中国大陆分离株形成进化树上亲缘关系较近的一群,其余7株与我国台湾及周边国家的一系列分离株亲缘关系较近。结论CA16为北京地区手足口病的主要致病原之一,本地区毒株同源性较高,同GenBank中24株CA16参比毒株序列进行系统进化分析显示其属于B基因群,16株北京分离株在系统进化树上有分别归属于两支的趋势。

关键词：柯萨奇病毒A组16型手足口病系统进化分析

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革兰阴性菌基因敲除载体的构建及其应用

革兰阴性菌基因敲除载体的构建及其应用

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重庆微生物学会第九届会员代表大会暨学术年会

作者：王景穆媛媛黎庶陈志瑾熊坤丛延广第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆市微生物工程实验室遵义医学院研究生院

目的构建1个适用于革兰阴性菌的精确基因敲除载体并证明其有效性。方法构建的载体主要包括以下成分:π蛋白依赖性复制起点ori R6K;接合转移基因mob,使载体可以通过简单的接合方式实现转移;多克隆位点序列:EcoRⅠ-XbaⅠ-ApaⅠ-SfiⅠ-Sac... 详细信息

目的构建1个适用于革兰阴性菌的精确基因敲除载体并证明其有效性。方法构建的载体主要包括以下成分:π蛋白依赖性复制起点ori R6K;接合转移基因mob,使载体可以通过简单的接合方式实现转移;多克隆位点序列:EcoRⅠ-XbaⅠ-ApaⅠ-SfiⅠ-SacⅠ-NotⅠ-SpeⅠ-NdeⅠ-SacⅡ-BglⅡ;反向选择标志SacB;正向选择标志卡那霉素抗性片段。载体构建完成后,采用该载体对弗氏枸橼酸杆菌的yeeZ基因进行框架内敲除,以验证其有效性。结果成功构建了敲除载体,命名为pYG4,并对yeeZ基因进行了框架内精确敲除获得突变株。结论本研究构建的载体适用于对革兰阴性菌进行目的基因的精确敲除,将在细菌基因功能研究中得到广泛的应用。

关键词：敲除载体构建突变株基因功能

来源：评论

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医学微生物学多媒体教学的几点体会