检索结果-内蒙古大学图书馆

应用与环境生物学报 2004年第2期10卷 223-225页

作者：卢忠燕高松江渝第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室重庆400038 中国农业科学院生物防治研究所北京100081

测定了不同温度和pH及碳氮源、微量元素对金龟子绿僵菌菌丝生长及产孢的影响.结果表明:pH 7、温度25℃最适合绿僵菌生长,固体培养中蔗糖为碳源、酵母为氮源、加入微量元素Mn,金龟子绿僵菌生长最好、产孢量最高.用正交方法探索了金龟子... 详细信息

测定了不同温度和pH及碳氮源、微量元素对金龟子绿僵菌菌丝生长及产孢的影响.结果表明:pH 7、温度25℃最适合绿僵菌生长,固体培养中蔗糖为碳源、酵母为氮源、加入微量元素Mn,金龟子绿僵菌生长最好、产孢量最高.用正交方法探索了金龟子绿僵菌的最适固体培养条件.

关键词：金龟子绿僵菌菌丝生长产孢量温度 pH 微量元素固体培养生物农药

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hOP-1全长基因克隆及真核表达载体的构建

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第三军医大学学报 2004年第2期26卷 118-121页

作者：岳玲史俊南柴玉波孙叶方荫俊文玲英第三军医大学大坪医院野战外科研究所口腔科重庆400042 第四军医大学口腔医学院牙体病科西安710032 第四军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室西安710032 军事医学科学院微生物流行病学研究所北京100071

目的　证实人牙乳头细胞中OP 1的表达 ,获得hOP 1全长基因及其高效真核表达载体。方法　提取人牙乳头细胞总RNA ,反转录合成cDNA ,以特异性引物扩增hOP 1全长基因并克隆入T载体 ,筛选阳性克隆进行序列测定后。构建高效真核表达载体pCI O... 详细信息

目的　证实人牙乳头细胞中OP 1的表达 ,获得hOP 1全长基因及其高效真核表达载体。方法　提取人牙乳头细胞总RNA ,反转录合成cDNA ,以特异性引物扩增hOP 1全长基因并克隆入T载体 ,筛选阳性克隆进行序列测定后。构建高效真核表达载体pCI OP 1并筛选鉴定。结果　PCR扩增得到一特异性的约 13 0 0bp的片段 ,序列测定结果表明与国外已发表的序列完全一致。构建的pCI OP 1质粒 ,用于基因转染纯度较好。结论　人牙乳头细胞中首次克隆到hOP 1全长基因。

关键词： hOP-1 全长基因克隆人牙乳头细胞真核表达载体

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承载分子PaP3.30在小分子活性肽融合表达中的应用

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医学研究生学报 2004年第7期17卷 577-580页

作者：张椿胡福泉胡金川黎庶胡晓梅黄建军陈志瑾饶贤才第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆市微生物工程重点实验室重庆400038

目的 :筛选并克隆一个承载分子 ,研究其在肽抗生素及其他小分子活性肽融合表达中的应用。　方法 :根据肽抗生素为小分子活性肽 ,通常带正电荷的特性 ,从绿脓杆菌噬菌体 (PaP3)基因组中筛选一承载分子 ,构建其与肽抗生素hPAB β的融合蛋... 详细信息

目的 :筛选并克隆一个承载分子 ,研究其在肽抗生素及其他小分子活性肽融合表达中的应用。　方法 :根据肽抗生素为小分子活性肽 ,通常带正电荷的特性 ,从绿脓杆菌噬菌体 (PaP3)基因组中筛选一承载分子 ,构建其与肽抗生素hPAB β的融合蛋白表达载体 ,确认该承载分子能在大肠杆菌中融合表达肽抗生素后 ,再选择一组不同来源、不同大小、不同等电点的小肽分子作为研究对象 ,分别构建它们与承载分子的融合蛋白表达载体 ,转化大肠杆菌进行表达。根据表达情况 ,分析所选择的承载分子融合表达生物活性小肽的能力。　结果 :从PaP3基因组中成功地筛选到ORF 30编码的 1 6 2个氨基酸组成的蛋白作为承载分子 (PaP3.30 ) ;构建该承载分子与肽抗生素hPAB β的融合蛋白表达质粒pQE PaP30 hPAB β,在大肠杆菌中表达的融合蛋白占细菌总蛋白的 30 %以上 ;对所选择的不同来源 (人、蜜蜂、爪蟾、大肠杆菌 )、不同大小(相对分子质量为 70 0～5 30 0 )、不同等电点 (pⅠ 2 .9～ 1 2 )的六种小肽分子PaP3.30 ,均能实现其在大肠杆菌中高效融合表达 ,表达量为细菌总蛋白的 35 %～4 4 %。　结论 :所筛选的承载分子PaP3.30具有很强的融合表达小分子活性肽的能力。

关键词：承载分子肽抗生素活性小肽融合表达

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大鼠离体海马脑片NO变化与LTP产生的关系

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第三军医大学学报 2003年第20期25卷 1837-1839页

作者：胡志安罗峻黎海蒂阮怀珍李希成第三军医大学基础医学部生理学教研室神经生物学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆400038

目的　观察离体脑片突触传递长时程增强 (LTP)中一氧化氮 (NO)变化的特点。方法　采用胞外记录方法检测LTP产生和维持。原位杂交技术检测NOSmRNA表达变化。生化反应方法检测NO含量和NO合酶 (NOS)活性变化。结果　条件刺激 10min后 ,LTP... 详细信息

目的　观察离体脑片突触传递长时程增强 (LTP)中一氧化氮 (NO)变化的特点。方法　采用胞外记录方法检测LTP产生和维持。原位杂交技术检测NOSmRNA表达变化。生化反应方法检测NO含量和NO合酶 (NOS)活性变化。结果　条件刺激 10min后 ,LTP产生 ,NO含量和NOS活性均显著升高。NOSmRNA表达也明显增加。条件刺激 60min后 ,LTP稳定维持 ,但NO含量和NOS活性却恢复到条件刺激前水平。结论　NO的显著升高过程主要发生在LTP形成的早期阶段。

关键词：长时程增强一氧化氮原位杂交海马大鼠

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谷氨酸和GABA对额叶皮质锥体细胞自发性电活动的影响

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第三军医大学学报 2003年第10期25卷 858-861页

作者：宋承辉胡志安阮怀珍蔡文琴吴喜贵张金海第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆400038

目的　应用膜片钳全细胞记录技术 ,观察急性分离大鼠额叶皮质Ⅴ、Ⅵ层锥体细胞自发性电活动的特点及其影响因素。方法　采用酶加机械分离法分离 8～ 12d鼠龄的Wistar大鼠额叶皮质Ⅴ、Ⅵ层锥体细胞 ,用膜片钳全细胞记录技术测定电生理学... 详细信息

目的　应用膜片钳全细胞记录技术 ,观察急性分离大鼠额叶皮质Ⅴ、Ⅵ层锥体细胞自发性电活动的特点及其影响因素。方法　采用酶加机械分离法分离 8～ 12d鼠龄的Wistar大鼠额叶皮质Ⅴ、Ⅵ层锥体细胞 ,用膜片钳全细胞记录技术测定电生理学特性 ,观察不同膜电位水平时自发性电活动的特点及谷氨酸和GABA对其影响。结果　 73 44 %的分离神经元具有自发性电活动 (n =64 ) ,膜电位在 -4 0～ -60mV时较易出现。 1mmol/L的谷氨酸显著增加放电活动的频率 ,10 0 μmol/LGABA则明显抑制放电活动的产生。结论　急性分离的大鼠额叶皮质锥体细胞有自发性电活动。

关键词：额叶皮质锥体细胞膜片钳自发性电活动急性分离

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Orexin:觉醒通路中一种重要的下丘脑神经肽

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第三军医大学学报 2003年第13期25卷 1207-1209页

作者：宋承辉胡志安第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆400038

1998年有两组研究人员[1 ,2 ] 各自发现了一种由大鼠下丘脑外侧区 (Lateralhypothalamicarea ,LHA)合成和分泌的具有促进动物摄食作用的小分子肽 ,并分别命名为Hypocretin和Orexin。因为已知LHA是重要的摄食调节区 ,起初对orexin(为方... 详细信息

1998年有两组研究人员[1 ,2 ] 各自发现了一种由大鼠下丘脑外侧区 (Lateralhypothalamicarea ,LHA)合成和分泌的具有促进动物摄食作用的小分子肽 ,并分别命名为Hypocretin和Orexin。因为已知LHA是重要的摄食调节区 ,起初对orexin(为方便阐述 ,文中主要采用“orexin”的命名 )生理活性的研究集中于对摄食行为的调节。对orexin能纤维的投射及其受体分布的研究结果也提示orexin信号区包括食欲、饱腹感和能量平衡[3,4 ] 。脑室内注射证实orexin确有促进动物摄食的作用[5] 。然而 ,后来的神经解剖和分子生物学证据表明orexin

关键词： orexin 觉醒睡眠下丘脑

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斯氏按蚊血淋巴蛋白浓度的检测及其意义

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2003年第5期21卷 293-295页

作者：杨松黄复生况明书段建华张敬如第三军医大学基础医学部病原生物学教研室重庆400038

目的　了解斯氏按蚊成蚊在不同食源条件下血淋巴蛋白浓度的变化。　方法　挤压法分别收集 4组 (吸蔗糖水组、吸正常血组、吸感染血组和吸硝喹组 )斯氏按蚊成蚊血淋巴 ,采用Bradford法测定血淋巴蛋白浓度 ,并进行Ex cel自动分析。　结果... 详细信息

目的　了解斯氏按蚊成蚊在不同食源条件下血淋巴蛋白浓度的变化。　方法　挤压法分别收集 4组 (吸蔗糖水组、吸正常血组、吸感染血组和吸硝喹组 )斯氏按蚊成蚊血淋巴 ,采用Bradford法测定血淋巴蛋白浓度 ,并进行Ex cel自动分析。　结果　吸血感染约氏疟原虫 8d后 ,吸感染血组血淋巴蛋白浓度高于吸蔗糖水组和吸正常血组 ,平均分别为 4.43 6、3 .0 80和 3 .0 92 μg/μl ,通常硝喹组浓度 ( 2 .2 64 μg/μl)低于吸感染血组。　结论　吸硝喹组蚊体内血淋巴蛋白浓度下降 ,提示蚊血淋巴蛋白可能参与疟原虫卵囊的黑化包裹反应。

关键词：斯氏按蚊血淋巴蛋白浓度检测约氏疟原虫

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ACTH和吗啡对创伤痛大鼠海马锥体神经元NMDA受体通道的抑制

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第三军医大学学报 2003年第3期25卷 226-229页

作者：庞勇李希成黎海蒂阮怀珍熊鹰陈鹏辉第三军医大学基础医学部生理学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆400038

目的　探讨创伤痛大鼠海马锥体神经元NMDA受体通道动力学特性的变化及ACTH和吗啡的作用。方法　实验以双侧踝关节离断大鼠为创伤痛模型 ,应用细胞贴附式膜片钳技术。结果　在正常 7～ 10d大鼠急性分离的海马CA1区锥体神经元上 ,记录到... 详细信息

目的　探讨创伤痛大鼠海马锥体神经元NMDA受体通道动力学特性的变化及ACTH和吗啡的作用。方法　实验以双侧踝关节离断大鼠为创伤痛模型 ,应用细胞贴附式膜片钳技术。结果　在正常 7～ 10d大鼠急性分离的海马CA1区锥体神经元上 ,记录到多数膜片的NMDA受体通道有两个电导水平 ,分别为 5 0pS及 3 8pS ,以 5 0pS占多数 ,且以短开放为主 ,但也有长开放通道。 3 8pS电导仅有短开放通道。大鼠双侧踝关节完全离断后 2h ,5 0pS及 3 8pS短开放通道、5 0pS长开放通道的开放概率和开放时间均比正常对照组显著增加 ,还出现了 3 8pS长开放通道。在 5 0pS短开放通道的记录中 ,ACTH1 2 4 和吗啡可显著抑制创伤大鼠海马CA1区锥体神经元NMDA受体通道的开放概率和开放时间 ;预先加入阿片受体拮抗剂纳络酮能阻断上述的抑制效应。结论　ACTH和吗啡对伤害性信息传递的调制作用可能与其通过阿片受体抑制创伤大鼠海马NMDA受体通道动力学特性的变化有关。

关键词：创伤痛膜片钳技术 NMDA受体通道海马锥体神经元 ACTH 吗啡

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长期注射叠氮钠对大鼠学习记忆和海马内褪黑素受体表达的作用

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第三军医大学学报 2003年第3期25卷 193-196页

作者：徐海伟黎海蒂范晓棠吴旋曹娟唐军第三军医大学基础医学部生理学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆400038

目的　观察长期皮下注射叠氮钠所致的AD大鼠氧化应激模型学习记忆和海马内褪黑素受体表达的变化。方法　采用Morris水迷宫检测大鼠的学习记忆。原位杂交技术检测大鼠海马内褪黑素受体Mel 1a和Mel 1b的表达。结果　皮下间断注射NaN3后 1... 详细信息

目的　观察长期皮下注射叠氮钠所致的AD大鼠氧化应激模型学习记忆和海马内褪黑素受体表达的变化。方法　采用Morris水迷宫检测大鼠的学习记忆。原位杂交技术检测大鼠海马内褪黑素受体Mel 1a和Mel 1b的表达。结果　皮下间断注射NaN3后 1～ 4周 ,大鼠Morris水迷宫测试潜伏期延长 ,以注射叠氮钠 4周组大鼠的潜伏期升高最为明显。大鼠海马Mel 1a受体表达在注射叠氮钠后 1周上调 ,在 2周和 3周组仍过度表达 ,在 4周组达峰值。而Mel 1b受体表达无明显变化。结论　大鼠长期皮下注射叠氮钠导致学习记忆障碍 ,可作为AD模型。AD大鼠海马内褪黑素受体Mel 1a的过表达可能是对MT水平下降和氧化应激的代偿反应。

关键词：褪黑素学习记忆海马阿尔茨海默病原位杂交

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褪黑素在叠氮钠所致的海马锥体细胞钙超载中的神经保护作用

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第三军医大学学报 2003年第3期25卷 201-204页

作者：徐海伟黎海蒂范晓棠吴旋曹娟唐军第三军医大学基础医学部生理学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆400038

目的　观察叠氮钠对急性分离的大鼠海马锥体神经元胞内游离钙的作用以及不同浓度的褪黑素 (Melatonin ,MT)的影响。方法　海马锥体细胞的急性分离、新型游离钙荧光探针Fluo 4AM负载海马锥体细胞 ,激光共聚焦动态检测胞内游离钙的变化及... 详细信息

目的　观察叠氮钠对急性分离的大鼠海马锥体神经元胞内游离钙的作用以及不同浓度的褪黑素 (Melatonin ,MT)的影响。方法　海马锥体细胞的急性分离、新型游离钙荧光探针Fluo 4AM负载海马锥体细胞 ,激光共聚焦动态检测胞内游离钙的变化及叠氮钠、褪黑素和荷包牡丹碱的作用。结果　在孵育液中加入叠氮钠 (0 8mg ml)能使急性分离的海马锥体细胞胞内游离钙在 2 0 0s内急剧升高并维持在高水平 ,处于钙超载状态。褪黑素能使NaN3所致的海马锥体细胞内处于超载状态的游离钙显著下降 ,并有量效关系。结论　叠氮钠导致海马神经细胞损伤的早期原因可能是钙超载。

关键词：褪黑素钙超载海马激光共聚焦大鼠

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