检索结果-内蒙古大学图书馆

第三军医大学学报 2002年第4期24卷 442-443页

作者：李蓉芬何凤田高会广陈姗江渝叶治家彭家和陈敏第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室重庆400038

目的　克隆人可溶性TRAIL (sTRAIL)cDNA并构建其原核表达载体 ,为制备新型抗癌分子创造条件。方法　提取HL 60细胞总RNA ,经RT PCR扩增编码人TRAIL 114～ 2 81氨基酸残基的cDNA序列 ,将其克隆至载体pUC19进行序列测定 ,然后构建于新型... 详细信息

目的　克隆人可溶性TRAIL (sTRAIL)cDNA并构建其原核表达载体 ,为制备新型抗癌分子创造条件。方法　提取HL 60细胞总RNA ,经RT PCR扩增编码人TRAIL 114～ 2 81氨基酸残基的cDNA序列 ,将其克隆至载体pUC19进行序列测定 ,然后构建于新型原核表达载体pQE 80L中。结果　RT PCR扩增得到了 5 0 4bp的DNA片段 ,序列分析表明与GeneBank中报道的编码人TRAIL 114～ 2 81氨基酸残基的cDNA序列完全一致。结论　sTRAILcDNA的克隆及其原核表达载体的构建 ,为进一步制备具有抗肿瘤活性的sTRAIL奠定了基础。

关键词： sTRAIL RT-PCR 克隆序列分析 cDNA 原核表达载体

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一种快速鉴定RNA质量的方法

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第三军医大学学报 2002年第8期24卷 992-993页

作者：曹廷兵叶治家巩燕彭家和第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室重庆400038

目的　建立一种快速鉴定RNA完整性的方法。方法　在常规琼脂糖凝胶电泳的基础上 ,结合甲醛变性琼脂糖凝胶电泳加以改进而成。结果　提取的总RNA用此方法电泳后可得到 2 8S、18S、5 .8S(5S)三条清晰的rRNA条带。结论　此方法可以达到对RN... 详细信息

目的　建立一种快速鉴定RNA完整性的方法。方法　在常规琼脂糖凝胶电泳的基础上 ,结合甲醛变性琼脂糖凝胶电泳加以改进而成。结果　提取的总RNA用此方法电泳后可得到 2 8S、18S、5 .8S(5S)三条清晰的rRNA条带。结论　此方法可以达到对RNA完整性进行快速鉴定的目的。

关键词：琼脂糖凝胶电泳法 RNA 质量鉴定分子生物学

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人IL-16在大肠杆菌中的融和表达

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第三军医大学学报 2002年第4期24卷 428-430页

作者：曹廷兵叶治家甘立霞钟小林巩燕彭家和第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室重庆400038

目的　将人IL 16cDNA克隆至原核融合表达载体PinpointTMXa 3上 ,并进行表达研究。方法　含IL 16cDNA的质粒IL 16/PGEM 3ZF(+ )和PinpointTMXa 3原核融合表达载体经酶切消化、目的DNA片段的分离、重组连接、筛选、序列分析等系列操作 ,... 详细信息

目的　将人IL 16cDNA克隆至原核融合表达载体PinpointTMXa 3上 ,并进行表达研究。方法　含IL 16cDNA的质粒IL 16/PGEM 3ZF(+ )和PinpointTMXa 3原核融合表达载体经酶切消化、目的DNA片段的分离、重组连接、筛选、序列分析等系列操作 ,获得重组质粒PinpointTMXa IL 16,将质粒PinpointTMXa IL 16转化至大肠杆菌JM10 9,用IPTG诱导表达JM10 9工程菌 ,Westernblotting检测表达产物。结果　IL 16cDNA成功克隆至融合表达载体PinpointTMXa 3 ,Westernblotting检测经诱导含有PinpointTMXa IL 16质粒的JM10 9细菌 ,有IL 16融合蛋白的表达 .结论　成功地表达了IL 16融合蛋白。

关键词： IL-16 克隆融合表达大肠杆菌

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铜绿假单胞菌噬菌体PaP3的密码使用偏嗜性与tRNA基因

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第三军医大学学报 2002年第4期24卷 385-388页

作者：张克斌金晓琳陈志瑾朱军民饶贤才胡福泉第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆微生物工程重点实验室重庆400038

目的　检索分析铜绿假单胞菌噬菌体PaP3的遗传密码使用偏嗜性及其tRNA基因的关系。方法　利用生物信息学软件和网上生物信息学工具 ,检索分析PaP3的遗传密码使用偏嗜性 ;并与铜绿假单胞菌PAO1的遗传密码使用偏嗜性进行对比分析 ;检索PaP... 详细信息

目的　检索分析铜绿假单胞菌噬菌体PaP3的遗传密码使用偏嗜性及其tRNA基因的关系。方法　利用生物信息学软件和网上生物信息学工具 ,检索分析PaP3的遗传密码使用偏嗜性 ;并与铜绿假单胞菌PAO1的遗传密码使用偏嗜性进行对比分析 ;检索PaP3基因组中tRNA基因并分析其与遗传密码使用偏嗜性的关系。结果　遗传密码偏嗜性分析发现噬菌体PaP3和铜绿假单胞菌优势码一致的氨基酸有F uuc ,I auc ,V guc ,A gcc ,Y uac ,H cac ,N aac ,K aag和T acc ;PaP3单独具有偏嗜性密码的氨基酸有A gcu ,G ggu ,T acu和V gua ;铜绿假单胞菌PAO1单独具有偏嗜性密码的氨基酸有L cug ,V gug ,P ccg ,V gcg ,Q cag ,D gac ,E gag ,C ugc ,R cgc ,S agc和G ggc。tRNA基因查询发现了PaP3基因组中存在三段tRNA编码序列 ,分别编码tRNAAsn,tRNAAsp,tRNAPro;它们的反密码子分别为“gtt” ,“gtc”和“tgg” ,分析结果没有表明这三个tRNA基因与优势转运氨基酸有关。结论　铜绿假单胞菌PAO1的遗传密码偏嗜性更为明显 ,而PaP3的遗传密码偏嗜性相对较弱 ,两者在遗传密码偏嗜性方面并未表现出一致性 ;

关键词：噬菌体 PaP3 基因组密码偏嗜性 tRNA基因铜绿假单胞菌

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贝氏柯克斯体中国分离株com1基因的序列分析

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第三军医大学学报 2002年第4期24卷 404-406页

作者：余全张国全 FUKUSHI Hideto YAMAGUCHI Tsuyoshi Hirai Katsuya 第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆400038 日本歧阜大学联合兽医学部微生物学教研室歧阜501-1193

目的　通过com1基因序列比较 ,了解贝氏柯克斯体中国分离株的一些遗传特征。方法　对贝氏柯克斯体中国分离株的com1基因进行扩增、测序和分析 ,将我们的结果与国外研究结果进行比较。结果　在 7个中国分离株中 ,可检测到 3种不同的com1... 详细信息

目的　通过com1基因序列比较 ,了解贝氏柯克斯体中国分离株的一些遗传特征。方法　对贝氏柯克斯体中国分离株的com1基因进行扩增、测序和分析 ,将我们的结果与国外研究结果进行比较。结果　在 7个中国分离株中 ,可检测到 3种不同的com1基因序列。除质粒型相同的分离株表现出类似的com1基因序列外 ,质粒型为QpRS的中国分离株可被单独划分成一个新的基因组。结论　本研究结果显示 ,根据com1基因序列进行的贝氏柯克斯体株基因分组与分离株所含质粒型有很大的相关性 ,而与以前报道的疾病形式和分离株的地理分布无关。

关键词：贝氏柯克斯体 com1基因 DNA序列序列分析 Q热

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兔中央角膜碱烧伤后修复的扫描电镜观察

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电子显微学报 2002年第5期21卷 545-546页

作者：严军杨恬黄文琪肖桃元邹卫东可金星第三军医大学基础医学部细胞生物学教研室四川重庆400038 第三军医大学电镜室四川重庆400038 西南政法大学电镜室四川重庆400031

在角膜的离体和在体研究中，上皮细胞和胶原纤维在创伤修复过程中的作用始终存在着争议。目前在角膜碱烧伤方面尤其是碱烧伤后超微结构的形态学研究尚未见报道。本文利用扫描电镜，对新西兰大白兔中央角膜碱烧伤后不同时相修复过程的超... 详细信息

在角膜的离体和在体研究中，上皮细胞和胶原纤维在创伤修复过程中的作用始终存在着争议。目前在角膜碱烧伤方面尤其是碱烧伤后超微结构的形态学研究尚未见报道。本文利用扫描电镜，对新西兰大白兔中央角膜碱烧伤后不同时相修复过程的超微结构进行了观察。

关键词：兔中央角膜碱烧伤创伤修复扫描电子显微镜眼科学

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培养人动脉平滑肌细胞诱发高密度脂蛋白的氧化修饰

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第三军医大学学报 2002年第3期24卷 303-304页

作者：江渝刘红彭家和叶治家何凤田董燕麟刘秉文第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室重庆400038 第三军医大学附属新桥医院血液内科重庆400037 华西医科大学基础医学院生物化学教研室成都610041

目的　观察高密度脂蛋白 (Highdensitylipoprotein ,HDL)经与培养人动脉平滑肌细胞 (Smoothmusclecell ,SMC)保温后发生氧化修饰。方法　HDL组分琼脂糖凝胶脂蛋白电泳 ,及其共轭二烯 (ConjugateddieneCD)、硫代巴比妥酸反应物质 (Thioba... 详细信息

目的　观察高密度脂蛋白 (Highdensitylipoprotein ,HDL)经与培养人动脉平滑肌细胞 (Smoothmusclecell ,SMC)保温后发生氧化修饰。方法　HDL组分琼脂糖凝胶脂蛋白电泳 ,及其共轭二烯 (ConjugateddieneCD)、硫代巴比妥酸反应物质 (ThiobarbituricacidreactionsubstanceTBARS)及脂氢过氧化物 (LipidhydroperoxideLOOH )的测定。结果　HDL经过与人动脉SMC共培养后 ,与天然HDL(NativeHDLN HDL)比较 ,其电泳迁移率明显增加 ,其CD、TBARS及LOOH的含量均显著增加 (P <0 .0 1)。结论　HDL经过与培养人动脉SMC 3 7℃保温

关键词：高密度脂蛋白人动脉平滑肌细胞氧化修饰 HDL SMC

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铜绿假单胞菌噬菌体PaP3基因组测序

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第三军医大学学报 2002年第4期24卷 378-380页

作者：张克斌金晓琳朱军民胡晓梅饶贤才胡福泉第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆市微生物工程重点实验室重庆400038

目的　对新分离的铜绿假单胞菌dsDNA溶原性噬菌体PaP3进行基因组测序。方法　用CsCl梯度离心纯化噬菌体PaP3颗粒 ,提取噬菌体基因组DNA ,建立shot-gun随机文库 ,从文库中随机挑取克隆进行测序并完成序列组装 ,同时通过限制性内切酶图谱... 详细信息

目的　对新分离的铜绿假单胞菌dsDNA溶原性噬菌体PaP3进行基因组测序。方法　用CsCl梯度离心纯化噬菌体PaP3颗粒 ,提取噬菌体基因组DNA ,建立shot-gun随机文库 ,从文库中随机挑取克隆进行测序并完成序列组装 ,同时通过限制性内切酶图谱结合酶切片段的变性、复性实验分析基因组末端。结果　共进行了 778条序列的测定与拼接 ,测序量达到 1 3 5倍覆盖率 ,得到一条长为 4 42 4 9bp的重叠群 ,此重叠群错误率为 9 4 6ERR 1 0KB ,测序结果和酶切图谱分析表明该PaP3基因组是一 4 42 4 9bp长的线性平端dsDNA分子。其碱基组成为A =2 4 2 4 % ,G =2 6 1 8% ,T =2 3 6 3% ,C =2 5 94 % ;稀有碱基 =0 ;A +T =4 7 87% ,C +G=52 1 3%。结论　噬菌体PaP3基因组是由 4 42 4 9bp组成的线性平端双链DNA分子。测序完成为生物信息学分析和功能基因研究奠定了基础。

关键词：铜绿假单胞菌噬菌体基因组测序 PaP3

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肽抗生素hPAB-β的化学合成及其杀菌活性的初步证实

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第三军医大学学报 2002年第4期24卷 393-395页

作者：饶贤才金晓琳胡晓梅朱军民陈自瑾胡福泉第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆市微生物工程重点实验室重庆400038

目的　化学合成、纯化并初步测定肽抗生素hPAB β的活性 ,为后续研究奠定基础。方法　采用固相合成法合成肽抗生素hPAB β ,经RP HPLC纯化 ,用质谱进行分子量鉴定 ,谷胱甘肽氧化还原法复性合成产物 ,进一步用阳离子交换柱纯化复性产... 详细信息

目的　化学合成、纯化并初步测定肽抗生素hPAB β的活性 ,为后续研究奠定基础。方法　采用固相合成法合成肽抗生素hPAB β ,经RP HPLC纯化 ,用质谱进行分子量鉴定 ,谷胱甘肽氧化还原法复性合成产物 ,进一步用阳离子交换柱纯化复性产物 ,收集主峰 ,药敏法初步测定合成肽的抗菌活性。结果　合成肽抗生素hPAB β的纯度为 86 5 2 % ,经质谱分析 ,合成肽的分子量测定值与理论值相符。用谷胱甘肽氧化还原法复性合成肽取得了较好的效果。复性产物对大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌具有杀灭作用。结论　化学合成的肽抗生素hPAB β具有良好的杀菌活性。

关键词：肽抗生素化学合成蛋白纯化杀菌活性 hPAB-β

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高温变性对双链DNA分子的损害

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第三军医大学学报 2002年第4期24卷 491-492页

作者：朱军民饶贤才胡福泉第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆市微生物工程重点实验室重庆400038

高温变性是实验室常用的方法 ,如用煮沸法提取质粒ＤＮＡ ,用煮沸法变性ＤＮＡ检测样品或ＤＮＡ双链探针 ,以及在ＰＣＲ中使用 94℃变性模板等[1～ 3] 。这给我们留下一个强烈印象 :即核苷酸链是耐高温以至可以接受煮沸处理的。基于这... 详细信息

高温变性是实验室常用的方法 ,如用煮沸法提取质粒ＤＮＡ ,用煮沸法变性ＤＮＡ检测样品或ＤＮＡ双链探针 ,以及在ＰＣＲ中使用 94℃变性模板等[1～ 3] 。这给我们留下一个强烈印象 :即核苷酸链是耐高温以至可以接受煮沸处理的。基于这一事实 ,最近我们使用煮沸法来灭菌欲无菌保存的ＤＮＡ样品 ,结果意外发现 10 0℃加温处理可以不同程度地损害ＤＮＡ分子 ,引起了我们对高温变性处理双链ＤＮＡ分子的高度重视 ,特设计实验观察高温对ＤＮＡ损害的程度以及高温对不同来源ＤＮＡ的损害是否有差异。现将结果报告如下。1　材料与方法1 1　实验材料　　铜绿假单胞菌ＰＡ6(本研究室从临床分离株 )基因组ＤＮＡ ,约

关键词：高温变性双链DNA DNA损害

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