检索结果-内蒙古大学图书馆

第三军医大学学报 2002年第10期24卷 1253-1254页

作者：潘文东周红郑江秦孝建罗平肖光夏第三军医大学附属西南医院全军烧伤研究所重庆400038 第三军医大学基础医学部药理学教研室重庆400038 第三军医大学附属西南医院综合实验研究中心重庆400038

由于内毒素（Lipopolysacchrade，LPS）具有引起机体一系列炎症反应的作用，消除内毒素一直是制药和科研中广泛关注的问题。本研究采用~(60)Co辐射灭活内毒素的方法，观察内毒素干粉和溶液中内毒素在辐射前后其生物活性的变化，以达到... 详细信息

由于内毒素（Lipopolysacchrade，LPS）具有引起机体一系列炎症反应的作用，消除内毒素一直是制药和科研中广泛关注的问题。本研究采用~(60)Co辐射灭活内毒素的方法，观察内毒素干粉和溶液中内毒素在辐射前后其生物活性的变化，以达到明确何种物理状态的内毒素采用~(60)Co辐射灭活效果最佳的目的。

关键词： ^60Co辐照物理状态内毒素生物活性干粉溶液

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大鼠睁眼前后视皮层神经元突触后电流变化

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第三军医大学学报 2002年第11期24卷 1325-1327页

作者：涂娅莉刘应兵阴正勤胡志安赵妍君张莉第三军医大学附属西南医院眼科重庆400038 四川大学华西医学院生理学教研室成都610041 第三军医大学基础医学部生理学教研室重庆400038

目的　研究大鼠发育过程中视皮层神经元的突触后电流变化 ,探讨视皮层视觉依赖性突触的形成和重新分布的细胞内机制。方法　应用脑片膜片钳全细胞记录技术 ,获得 4～ 2 8dSprague Dawleg (SD)大鼠视皮层神经元的细胞内微电极记录 ,记录... 详细信息

目的　研究大鼠发育过程中视皮层神经元的突触后电流变化 ,探讨视皮层视觉依赖性突触的形成和重新分布的细胞内机制。方法　应用脑片膜片钳全细胞记录技术 ,获得 4～ 2 8dSprague Dawleg (SD)大鼠视皮层神经元的细胞内微电极记录 ,记录突触后电流 (Postsynapticcurrents ,PSCs)的变化。结果　 (1)共记 15 6个大鼠视皮层神经元 ,根据其电生理学特性可将神经元分为 3种类型 :无反应型、单突触反应型和多突触反应型。睁眼后无反应型细胞数量显著减少 ,而多突触反应型细胞数量明显增多。 (2 )在同一刺激强度和钳制电压下 ,对视皮层神经元的输入阻抗和PSCs的各项指标进行组间比较 :①输入阻抗IR :睁眼前与睁眼后组之间有显著性差异 ,3周龄与 4周龄组之间有显著性差异。②PSCs的峰值、到达峰值所需的时间、10 %～ 90 %上升时间、10 %～ 90 %下降时间、半波宽和潜伏期 :1周龄组与 2周龄、3周龄、4周龄组之间有显著性或非常显著性差异。结论　视皮层神经元在出生后发育过程中 ,其功能的成熟表现为在形觉刺激以及局部神经元网络的整合作用下。

关键词：大鼠视皮层神经元突触后电流全细胞记录膜片钳

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培养人动脉平滑肌细胞诱发高密度脂蛋白的氧化修饰

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第三军医大学学报 2002年第3期24卷 303-304页

作者：江渝刘红彭家和叶治家何凤田董燕麟刘秉文第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室重庆400038 第三军医大学附属新桥医院血液内科重庆400037 华西医科大学基础医学院生物化学教研室成都610041

目的　观察高密度脂蛋白 (Highdensitylipoprotein ,HDL)经与培养人动脉平滑肌细胞 (Smoothmusclecell ,SMC)保温后发生氧化修饰。方法　HDL组分琼脂糖凝胶脂蛋白电泳 ,及其共轭二烯 (ConjugateddieneCD)、硫代巴比妥酸反应物质 (Thioba... 详细信息

目的　观察高密度脂蛋白 (Highdensitylipoprotein ,HDL)经与培养人动脉平滑肌细胞 (Smoothmusclecell ,SMC)保温后发生氧化修饰。方法　HDL组分琼脂糖凝胶脂蛋白电泳 ,及其共轭二烯 (ConjugateddieneCD)、硫代巴比妥酸反应物质 (ThiobarbituricacidreactionsubstanceTBARS)及脂氢过氧化物 (LipidhydroperoxideLOOH )的测定。结果　HDL经过与人动脉SMC共培养后 ,与天然HDL(NativeHDLN HDL)比较 ,其电泳迁移率明显增加 ,其CD、TBARS及LOOH的含量均显著增加 (P <0 .0 1)。结论　HDL经过与培养人动脉SMC 3 7℃保温

关键词：高密度脂蛋白人动脉平滑肌细胞氧化修饰 HDL SMC

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兔中央角膜碱烧伤后修复的扫描电镜观察

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电子显微学报 2002年第5期21卷 545-546页

作者：严军杨恬黄文琪肖桃元邹卫东可金星第三军医大学基础医学部细胞生物学教研室四川重庆400038 第三军医大学电镜室四川重庆400038 西南政法大学电镜室四川重庆400031

在角膜的离体和在体研究中，上皮细胞和胶原纤维在创伤修复过程中的作用始终存在着争议。目前在角膜碱烧伤方面尤其是碱烧伤后超微结构的形态学研究尚未见报道。本文利用扫描电镜，对新西兰大白兔中央角膜碱烧伤后不同时相修复过程的超... 详细信息

在角膜的离体和在体研究中，上皮细胞和胶原纤维在创伤修复过程中的作用始终存在着争议。目前在角膜碱烧伤方面尤其是碱烧伤后超微结构的形态学研究尚未见报道。本文利用扫描电镜，对新西兰大白兔中央角膜碱烧伤后不同时相修复过程的超微结构进行了观察。

关键词：兔中央角膜碱烧伤创伤修复扫描电子显微镜眼科学

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铜绿假单胞菌噬菌体PaP3的密码使用偏嗜性与tRNA基因

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第三军医大学学报 2002年第4期24卷 385-388页

作者：张克斌金晓琳陈志瑾朱军民饶贤才胡福泉第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆微生物工程重点实验室重庆400038

目的　检索分析铜绿假单胞菌噬菌体PaP3的遗传密码使用偏嗜性及其tRNA基因的关系。方法　利用生物信息学软件和网上生物信息学工具 ,检索分析PaP3的遗传密码使用偏嗜性 ;并与铜绿假单胞菌PAO1的遗传密码使用偏嗜性进行对比分析 ;检索PaP... 详细信息

目的　检索分析铜绿假单胞菌噬菌体PaP3的遗传密码使用偏嗜性及其tRNA基因的关系。方法　利用生物信息学软件和网上生物信息学工具 ,检索分析PaP3的遗传密码使用偏嗜性 ;并与铜绿假单胞菌PAO1的遗传密码使用偏嗜性进行对比分析 ;检索PaP3基因组中tRNA基因并分析其与遗传密码使用偏嗜性的关系。结果　遗传密码偏嗜性分析发现噬菌体PaP3和铜绿假单胞菌优势码一致的氨基酸有F uuc ,I auc ,V guc ,A gcc ,Y uac ,H cac ,N aac ,K aag和T acc ;PaP3单独具有偏嗜性密码的氨基酸有A gcu ,G ggu ,T acu和V gua ;铜绿假单胞菌PAO1单独具有偏嗜性密码的氨基酸有L cug ,V gug ,P ccg ,V gcg ,Q cag ,D gac ,E gag ,C ugc ,R cgc ,S agc和G ggc。tRNA基因查询发现了PaP3基因组中存在三段tRNA编码序列 ,分别编码tRNAAsn,tRNAAsp,tRNAPro;它们的反密码子分别为“gtt” ,“gtc”和“tgg” ,分析结果没有表明这三个tRNA基因与优势转运氨基酸有关。结论　铜绿假单胞菌PAO1的遗传密码偏嗜性更为明显 ,而PaP3的遗传密码偏嗜性相对较弱 ,两者在遗传密码偏嗜性方面并未表现出一致性 ;

关键词：噬菌体 PaP3 基因组密码偏嗜性 tRNA基因铜绿假单胞菌

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PPARα、γ配体对单核细胞来源的巨噬细胞的作用观察

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第三军医大学学报 2002年第8期24卷 924-927页

作者：舒茂琴何作云王国超方玉强李晓霞第三军医大学附属西南医院心血管内科重庆400038 第三军医大学附属新桥医院心血管内科重庆400037 第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆40038 第三军医大学解放军总医院临床检验中心北京100853

目的　探讨PPARα和γ配体在动脉粥样硬化病变局部的作用。方法　观察PPARα和γ配体对氧化低密度脂蛋白 (ox LDL)介导的巨噬细胞清道夫受体A(SRA)基因表达、肿瘤坏死因子 (TNF α)和基质金属蛋白酶 9(MMP 9)释放、细胞增殖与凋亡的影... 详细信息

目的　探讨PPARα和γ配体在动脉粥样硬化病变局部的作用。方法　观察PPARα和γ配体对氧化低密度脂蛋白 (ox LDL)介导的巨噬细胞清道夫受体A(SRA)基因表达、肿瘤坏死因子 (TNF α)和基质金属蛋白酶 9(MMP 9)释放、细胞增殖与凋亡的影响。结果　中低浓度的PPARα和γ配体不但增强ox LDL介导的巨噬细胞TNF α、MMP 9表达 ,而且有促细胞凋亡和抗细胞增殖的作用 ;PPARγ配体不但能显著增加巨噬细胞PPARγmRNA表达 ,而且还能抑制ox LDL介导的巨噬细胞SRA。结论　PPARα和γ基因激活可能有抗炎和抗细胞增生的作用 ,后者可能还有助于减少粥样斑块脂质内容。

关键词：核受体泡沫细胞细胞凋亡单核巨噬细胞过氧化酶体增殖激活受体 γ基因动脉粥样硬化

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铜绿假单胞菌噬菌体PaP3基因组测序

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第三军医大学学报 2002年第4期24卷 378-380页

作者：张克斌金晓琳朱军民胡晓梅饶贤才胡福泉第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆市微生物工程重点实验室重庆400038

目的　对新分离的铜绿假单胞菌dsDNA溶原性噬菌体PaP3进行基因组测序。方法　用CsCl梯度离心纯化噬菌体PaP3颗粒 ,提取噬菌体基因组DNA ,建立shot-gun随机文库 ,从文库中随机挑取克隆进行测序并完成序列组装 ,同时通过限制性内切酶图谱... 详细信息

目的　对新分离的铜绿假单胞菌dsDNA溶原性噬菌体PaP3进行基因组测序。方法　用CsCl梯度离心纯化噬菌体PaP3颗粒 ,提取噬菌体基因组DNA ,建立shot-gun随机文库 ,从文库中随机挑取克隆进行测序并完成序列组装 ,同时通过限制性内切酶图谱结合酶切片段的变性、复性实验分析基因组末端。结果　共进行了 778条序列的测定与拼接 ,测序量达到 1 3 5倍覆盖率 ,得到一条长为 4 42 4 9bp的重叠群 ,此重叠群错误率为 9 4 6ERR 1 0KB ,测序结果和酶切图谱分析表明该PaP3基因组是一 4 42 4 9bp长的线性平端dsDNA分子。其碱基组成为A =2 4 2 4 % ,G =2 6 1 8% ,T =2 3 6 3% ,C =2 5 94 % ;稀有碱基 =0 ;A +T =4 7 87% ,C +G=52 1 3%。结论　噬菌体PaP3基因组是由 4 42 4 9bp组成的线性平端双链DNA分子。测序完成为生物信息学分析和功能基因研究奠定了基础。

关键词：铜绿假单胞菌噬菌体基因组测序 PaP3

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肽抗生素hPAB-β的化学合成及其杀菌活性的初步证实

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第三军医大学学报 2002年第4期24卷 393-395页

作者：饶贤才金晓琳胡晓梅朱军民陈自瑾胡福泉第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆市微生物工程重点实验室重庆400038

目的　化学合成、纯化并初步测定肽抗生素hPAB β的活性 ,为后续研究奠定基础。方法　采用固相合成法合成肽抗生素hPAB β ,经RP HPLC纯化 ,用质谱进行分子量鉴定 ,谷胱甘肽氧化还原法复性合成产物 ,进一步用阳离子交换柱纯化复性产... 详细信息

目的　化学合成、纯化并初步测定肽抗生素hPAB β的活性 ,为后续研究奠定基础。方法　采用固相合成法合成肽抗生素hPAB β ,经RP HPLC纯化 ,用质谱进行分子量鉴定 ,谷胱甘肽氧化还原法复性合成产物 ,进一步用阳离子交换柱纯化复性产物 ,收集主峰 ,药敏法初步测定合成肽的抗菌活性。结果　合成肽抗生素hPAB β的纯度为 86 5 2 % ,经质谱分析 ,合成肽的分子量测定值与理论值相符。用谷胱甘肽氧化还原法复性合成肽取得了较好的效果。复性产物对大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌具有杀灭作用。结论　化学合成的肽抗生素hPAB β具有良好的杀菌活性。

关键词：肽抗生素化学合成蛋白纯化杀菌活性 hPAB-β

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高温变性对双链DNA分子的损害

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第三军医大学学报 2002年第4期24卷 491-492页

作者：朱军民饶贤才胡福泉第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆市微生物工程重点实验室重庆400038

高温变性是实验室常用的方法 ,如用煮沸法提取质粒ＤＮＡ ,用煮沸法变性ＤＮＡ检测样品或ＤＮＡ双链探针 ,以及在ＰＣＲ中使用 94℃变性模板等[1～ 3] 。这给我们留下一个强烈印象 :即核苷酸链是耐高温以至可以接受煮沸处理的。基于这... 详细信息

高温变性是实验室常用的方法 ,如用煮沸法提取质粒ＤＮＡ ,用煮沸法变性ＤＮＡ检测样品或ＤＮＡ双链探针 ,以及在ＰＣＲ中使用 94℃变性模板等[1～ 3] 。这给我们留下一个强烈印象 :即核苷酸链是耐高温以至可以接受煮沸处理的。基于这一事实 ,最近我们使用煮沸法来灭菌欲无菌保存的ＤＮＡ样品 ,结果意外发现 10 0℃加温处理可以不同程度地损害ＤＮＡ分子 ,引起了我们对高温变性处理双链ＤＮＡ分子的高度重视 ,特设计实验观察高温对ＤＮＡ损害的程度以及高温对不同来源ＤＮＡ的损害是否有差异。现将结果报告如下。1　材料与方法1 1　实验材料　　铜绿假单胞菌ＰＡ6(本研究室从临床分离株 )基因组ＤＮＡ ,约

关键词：高温变性双链DNA DNA损害

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一个承载分子的设计与肽抗生素hPAB-β的高效表达

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第三军医大学学报 2002年第4期24卷 389-392页

作者：饶贤才金晓琳胡晓梅朱军民陈自瑾胡福泉第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆市微生物工程重点实验室重庆400038

目的　通过设计一个承载蛋白分子高效表达肽抗生素hPAB β ,为大量制备hPAB β奠定基础。方法　根据肽抗生素的特性 ,确立 4条设计原则 ,并据此设计一 489bp的承载蛋白编码序列 ,用化学合成法获得该序列并将之克隆到pQE 3 2中构建成表... 详细信息

目的　通过设计一个承载蛋白分子高效表达肽抗生素hPAB β ,为大量制备hPAB β奠定基础。方法　根据肽抗生素的特性 ,确立 4条设计原则 ,并据此设计一 489bp的承载蛋白编码序列 ,用化学合成法获得该序列并将之克隆到pQE 3 2中构建成表达载体 ,进一步将肽抗生素hPAB β基因插入上述表达载体 ,肽抗生素基因位于承载蛋白编码序列 3’ 端 ,两者构成融合基因。将含融合基因的表达载体转化大肠杆菌JM10 9,筛选阳性重组子 ,并用阳性重组子表达融合蛋白。结果　设计的承载蛋白为 163个氨基酸 ,分子量 17668.80 ,等电点 5 .62 1。用承载分子与肽抗生素hPAB β构建的融合蛋白表达载体转化细菌后 ,筛选到 4个阳性重组子 ,均能高效表达肽抗生素融合蛋白 ,融合蛋白的产量占细菌总蛋白的 40 %～ 45 %。结论　设计的承载蛋白分子能够实现肽抗生素的高效表达。

关键词：承载蛋白肽抗生素高效表达 hPAB-β

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