检索结果-内蒙古大学图书馆

基础医学教育 2012年第10期14卷 721-724页

作者：郭洪许雪青王艳艳宋敏王燕白云第三军医大学基础部医学遗传学教研室重庆400038

医学遗传学第二课堂教学实践活动主要包括正确引导学生的兴趣,发挥学生的主体作用,深入临床一线,调研遗传病家系,学生主动思考、互相讨论寻找解决问题的手段。结果证实该教学法可充分调动教与学的积极性,有效解决了遗传学理论教学与临... 详细信息

医学遗传学第二课堂教学实践活动主要包括正确引导学生的兴趣,发挥学生的主体作用,深入临床一线,调研遗传病家系,学生主动思考、互相讨论寻找解决问题的手段。结果证实该教学法可充分调动教与学的积极性,有效解决了遗传学理论教学与临床实践脱节的问题,提高学生将基础知识与临床思维和临床实践结合的能力。

关键词：医学遗传学教学方法第二课堂

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NF-κB p65亚基DNA结合域相互作用多肽的筛选及功能鉴定

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免疫学杂志 2006年第2期22卷 132-136页

作者：徐祥梁华平刘昕李生茂史海水刘东擘吴强王正国第三军医大学大坪医院野战外科研究所第一研究室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042 第三军医大学基础医学部分子遗传学教研室重庆400038

目的以NF-κB p65亚基DNA结合域为诱饵蛋白,筛选能够与其发生相互作用的多肽,并鉴定这些多肽对NF-κB DNA结合活性的抑制效应。方法首先利用PCR搭桥扩增方法获取NF-κB p65亚基DNA结合域的基因片段,后将其克隆到酵母双杂交pGBKT7DNA-BD... 详细信息

目的以NF-κB p65亚基DNA结合域为诱饵蛋白,筛选能够与其发生相互作用的多肽,并鉴定这些多肽对NF-κB DNA结合活性的抑制效应。方法首先利用PCR搭桥扩增方法获取NF-κB p65亚基DNA结合域的基因片段,后将其克隆到酵母双杂交pGBKT7DNA-BD载体上,与GAL4DNA-BD融合,形成GAL4DNA-BD/p65BD融合蛋白;再以GAL4DNA-BD/p65BD融合蛋白为诱饵蛋白行酵母双杂交实验,自16肽随机肽库中筛选与NF-κB p65亚基DNA结合域相互作用的多肽;最后选择性人工合成筛选获得的多肽,并进行EMSA实验检测相互作用多肽对NF-κB DNA结合活性的抑制效应。结果扩增获得了NF-κB p65亚基DNA结合域的基因片段,并成功构建pGBKT7DNA-BD/p65BD载体。自1.28×107个酵母转化子中最终筛选获得5个阳性克隆,测序结果和同源氨基酸序列比对表明5个阳性多肽为p65BD新型相互作用多肽,其中4条多肽拥有一个共同的基序。EMSA实验结果表明合成的两条多肽对NF-κB的DNA结合活性均具有一定的抑制效应。结论经初筛、复选和假阳性鉴定,自16肽库中获得5个能与NF-κB p65亚基发生相互作用的新型多肽,并已证实其中两条多肽对NF-κB的DNA结合活性具有抑制效应。

关键词： NF-κB p65 酵母双杂交系统随机多肽库

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多媒体课件的评判研究

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西北医学教育 2009年第4期17卷 717-718页

作者：吴毅王燕白云肖文刚第三军医大学基础部重庆400038 第三军医大学基础部医学遗传学教研室重庆400038

随着现代教育技术的发展,多媒体辅助教学与多媒体课件也越来越引人注目。本文提出多媒体课件在教学中存在评判标准的问题,阐明了多媒体课件评判标准的重要性及制定评判标准的原则。

关键词：多媒体技术多媒体课件评判标准

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橄榄桥脑小脑萎缩一家系的临床和遗传学研究

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国际遗传学杂志 2010年第5期33卷 310-313页

作者：郭洪史树贵白云陈康宁傅勇胡华梅王凯第三军医大学基础部医学遗传学教研室第三军医大学西南医院神经内科

目的对一个常染色体显性遗传橄榄桥脑小脑萎缩(olivopontocerebellar atrophy,OPCA)家系进行临床诊断,探讨其临床特点并明确其基因诊断。方法完成家系调查,对包括先证者在内的家系成员进行神经科体检,行头部核磁共振(magnetic resonance... 详细信息

目的对一个常染色体显性遗传橄榄桥脑小脑萎缩(olivopontocerebellar atrophy,OPCA)家系进行临床诊断,探讨其临床特点并明确其基因诊断。方法完成家系调查,对包括先证者在内的家系成员进行神经科体检,行头部核磁共振(magnetic resonance imaging,MRI)等辅助检查,并进行基因诊断。结果该家系呈常染色体显性遗传,其中两例成员有明显异常临床表现,家族史调查显示另有9例有相似临床表现的成员已去世,头部MRI示小脑、脑干以及桥脑萎缩明显。结合家族史、临床表现以及MRI检查结果,其诊断符合橄榄桥脑小脑萎缩。对所有家系成员进行致病基因分析发现,脊髓小脑共济失调2型(spinocerebellar ataxia type 2,SCA2)、3型(SCA3)、7型(SCA7)、12型(SCAl2)以及齿状核红核苍白球丘脑下部核萎缩(dentatorubral-pallidoluy-sian atrophy,DRPLA)致病基因检测均正常。10例健康对照SCA1目的片段CAG重复数为29～37,而2例患者异常等位基因CAG重复数分别为53和67,5例无症状家系成员中,1例CAG重复数为57,确诊为症状前患者,另外4例CAG重复数在29～37之间,排除患病可能。结论该家系为CAG动态突变引起的橄榄桥脑小脑萎缩,临床特征存在异质性,基因诊断符合SCA1。

关键词：脊髓小脑共济失调橄榄桥脑小脑萎缩动态突变家系基因诊断

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中国汉族两个马凡综合征家系FBN1基因的一个新突变

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国际遗传学杂志 2011年第4期34卷 169-173页

作者：刘丹郭洪王凯杨康白云第三军医大学基础部医学遗传学教研室第三军医大学西南医院胸心外科

目的对两个常染色体显性遗传的马凡综合征家系进行基因诊断,并探讨其临床特点。方法完成家系调查和系谱分析,通过聚合酶链式反应和直接测序的方法对收集到的两个家系中的成员进行原纤维蛋白1(fibrillin 1,FBNl)基因的突变检测。结果两... 详细信息

目的对两个常染色体显性遗传的马凡综合征家系进行基因诊断,并探讨其临床特点。方法完成家系调查和系谱分析,通过聚合酶链式反应和直接测序的方法对收集到的两个家系中的成员进行原纤维蛋白1(fibrillin 1,FBNl)基因的突变检测。结果两个家系均呈常染色体显性遗传模式。对两个家系成员进行FBNl基因突变检测发现,在两个家系的患者中发现一个相同的突变位点,即FBNl第27号外显子3463位碱基由G变为A(3463G>A),导致原纤维蛋白1第1155位氨基酸由天冬氨酸变为天冬酰胺(Asp 11 55Asn),而两个家系的正常成员及选取的100名健康对照中均未发现该突变位点。结论先证者均符合Ghent标准诊断为马凡综合征,基因诊断发现两家系中相同的突变位点3463 G>A为中国汉族马凡综合征患者中首次报道。

关键词：马凡综合征原纤维蛋白基因1 基因诊断家系

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压电C肽免疫传感器的实验研究

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第三军医大学学报 2002年第12期24卷 1439-1442页

作者：张波府伟灵毛琼国汤万里俞凡第三军医大学附属西南医院检验科第三军医大学基础医学部分子遗传学教研室重庆400038 中国嘉陵集团生物工程办公室重庆400032 信息产业部第26研究所重庆400060

目的　构建一种新型压电C肽免疫传感器。方法　AT切向、基频 10MHz的石英晶体用金属夹具和乳胶套圈固定形成检测池 ,抗人C肽单克隆抗体采用巯基化方法固定在金膜电极表面制成抗体敏感膜 ,构成压电C肽免疫传感器。结果　构建的压电C肽免... 详细信息

目的　构建一种新型压电C肽免疫传感器。方法　AT切向、基频 10MHz的石英晶体用金属夹具和乳胶套圈固定形成检测池 ,抗人C肽单克隆抗体采用巯基化方法固定在金膜电极表面制成抗体敏感膜 ,构成压电C肽免疫传感器。结果　构建的压电C肽免疫传感器对C肽的响应特性良好 ,其线性检测范围为 0 3 75～ 12 0ng ml ,胰岛素、胰岛素原对C肽的检测基本无干扰 ,传感器可再生后重复使用 5次 ;5 8例临床标本检测结果与放射免疫检测法符合 (P >0 0 5 ) ,两种方法的相关系数为 0 94。结论　研制的压电C肽免疫传感器具有灵敏度高、特异性好、不需标记、操作简单、省时、能实时在线检测和重复使用等优点 ,对比实验表明其检测结果准确 ,能用于临床实验诊断 ,具有临床推广价值。

关键词：实验研究传感器免疫 C肽压电

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腺病毒介导的RNAi技术抑制Peroxiredoxin Ⅰ的表达

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现代肿瘤医学 2007年第12期15卷 1727-1730页

作者：章波杨晓亚王燕段文元白云宋敏第三军医大学医学遗传学教研室重庆400038

目的:为深入研究PeroxiredoxinⅠ(Prx-Ⅰ)基因与肿瘤细胞放射敏感性的关系,构建基于腺病毒的抑制Prx-Ⅰ基因表达的RNAi载体。方法:从质粒载体pAVU6-Prx切下包含U6启动子在内的表达盒,连接到腺病毒穿梭载体pAdTrack,然后在大肠杆菌中重... 详细信息

目的:为深入研究PeroxiredoxinⅠ(Prx-Ⅰ)基因与肿瘤细胞放射敏感性的关系,构建基于腺病毒的抑制Prx-Ⅰ基因表达的RNAi载体。方法:从质粒载体pAVU6-Prx切下包含U6启动子在内的表达盒,连接到腺病毒穿梭载体pAdTrack,然后在大肠杆菌中重组为完整腺病毒DNA,并将其转染293包装细胞制备腺病毒颗粒,再利用腺病毒感染目的肿瘤细胞,干扰其Prx-I基因的表达。结果:成功地将U6表达盒连接到穿梭载体,获得重组的腺病毒DNA,并制备出高滴度病毒。将病毒感染肿瘤细胞SW480以后可以明显抑制Prx-Ⅰ基因的表达,并使细胞受辐射后的细胞凋亡比例增大。结论:基于腺病毒的RNAi干扰是有效的,这为进一步在体内探讨肿瘤放疗增敏机制奠定了基础。

关键词： Peroxiredoxin Ⅰ 电离辐射重组腺病毒 RNAi

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鼠B7-H4基因重组腺病毒的构建及其在B16F10细胞中的表达、鉴定

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重庆医学 2006年第7期35卷 617-619页

作者：段文元白云罗娜许雪青第三军医大学医学遗传学教研室重庆400038

目的构建表达鼠B7-H4的重组腺病毒并检测其在B16F10细胞中的表达。方法采用RT-PCR技术,取小鼠肺脏,TriPure提取肺脏总RNA,反转录得到cDNA序列,PCR扩增B7-H4全长,克隆到plenti6/V5克隆载体中并经过测序证实与标准序列一致。加入适当的酶... 详细信息

目的构建表达鼠B7-H4的重组腺病毒并检测其在B16F10细胞中的表达。方法采用RT-PCR技术,取小鼠肺脏,TriPure提取肺脏总RNA,反转录得到cDNA序列,PCR扩增B7-H4全长,克隆到plenti6/V5克隆载体中并经过测序证实与标准序列一致。加入适当的酶切位点,双酶切PCR扩增产物连接入pAd track CMV中构建成腺病毒穿梭质粒pAd track CMVmB7-H4,经酶切线性化后,用CaCl2的方法转化到含有腺病毒骨架质粒pAd Easy的BJ 5183大肠杆菌中,挑选同源重组菌落提取质粒,酶切线性化重组质粒并转染293细胞,包装成重组病毒颗粒。重组病毒上清感染B16F10细胞,并用PE标记的B7-H4单克隆抗体检测B16F10细胞mB7-H4蛋白的表达。结果RT-PCR扩增得到含编码mB7-H4的860 bp基因片段,与预期大小一致,并经过测序证实与标准序列一致。成功构建了mB7-H4重组腺病毒,病毒滴度达到3×1013pfu/ml,pAd mB7-H4重组腺病毒表达载体感染B16F10细胞后,荧光显微镜观察显示PE标记的mB7-H4单克隆抗体染色B16F10细胞阳性。结论成功构建了mB7-H4重组腺病毒,转染B16F10细胞后表达出有活性的B7-H4蛋白,为进一步研究B7-H4分子在器官移植、自身免疫性疾病以及肿瘤逃逸机制中的作用奠定了基础。

关键词： B7-H4 基因工程同源重组

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中国汉族1型Marie Unna遗传性少毛症家系U2HR的1个新突变

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国际遗传学杂志 2013年第4期36卷 139-141+148页

作者：郭洪王睿恒杨东运白云第三军医大学基础部医学遗传学教研室第三军医大学西南医院整形美容科

目的对重庆地区一个常染色体显性遗传的遗传性少毛症家系进行基因诊断,并探讨其临床特点。方法对先证者进行病史和家族史询问以及详细的临床检查。提取所有家系成员的基因组DNA,扩增HR基因及其上游开放阅读框基因的所有编码序列直接进... 详细信息

目的对重庆地区一个常染色体显性遗传的遗传性少毛症家系进行基因诊断,并探讨其临床特点。方法对先证者进行病史和家族史询问以及详细的临床检查。提取所有家系成员的基因组DNA,扩增HR基因及其上游开放阅读框基因的所有编码序列直接进行序列测定,与数据库中的参考序列进行比对分析。结果包括先证者在内的所有患者自幼头发眉毛稀少,随年龄增长头发生长缓慢、易断,自青春期开始出现头发脱落。查体见弥漫性头发稀疏,发干粗糙质硬,呈现不规则扭曲样外观,睫毛、腋毛以及阴毛稀少。对先证者U2HR基因测序发现编码区第103位碱基由T变为C(c.103T>C),导致第35位终止密码子TAG丢失而编码谷氨酰胺(p.X35Q),家系内的正常成员以及家系外同地区的50名健康对照均未发现该突变位点。结论该家系的临床表现和遗传方式符合1型MUHH的诊断,基因诊断发现的U2HR突变位点103T>C为中国汉族遗传性少毛症患者人群中首次报道。

关键词： Marie Unna型遗传性少毛症 U2HR 基因诊断家系

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高血压伴胰岛素抵抗病人颈动脉血流动力学的研究

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第三军医大学学报 2004年第17期26卷 1564-1566页

作者：王旭开杜文华李陶杨成明付春江何作云王燕第三军医大学大坪医院野战外科研究所心血管内科重庆400042 第三军医大学新桥医院心血管内科全军心血管内科中心重庆400037 第三军医大学基础医学部分子遗传学教研室重庆400038

目的　探讨高血压伴胰岛素抵抗颈动脉血流动力学及血管壁顺应性变化与动脉粥样硬化形成的关系。方法　选择原发性高血压 (EH)病人 48例 ,正常对照 49人。按胰岛素抵抗指数 (HOMA)分 3组 ,原发性高血压伴胰岛素抵抗[EHIR( +) ]组 ,原发... 详细信息

目的　探讨高血压伴胰岛素抵抗颈动脉血流动力学及血管壁顺应性变化与动脉粥样硬化形成的关系。方法　选择原发性高血压 (EH)病人 48例 ,正常对照 49人。按胰岛素抵抗指数 (HOMA)分 3组 ,原发性高血压伴胰岛素抵抗[EHIR( +) ]组 ,原发性高血压无胰岛素抵抗 [EHIR( -) ]组 ,正常对照组 (NEH)。应用二维彩色超声诊断仪测定受检者颈动脉参数及临床生化指标 ,计算HOMA指数、CSDC、Vd Vs评估胰岛素抵抗颈动脉血流动力学及血管壁顺应性。结果　EHIR( +)组HOMA指数与IMT呈正相关 (r =0 3 8,P <0 0 1) ,CSDC与HOMA指数呈负相关 (r =-0 2 9,P <0 0 1) ,Vd Vs与HOMA指数呈负相关 (r =-0 3 1,P <0 0 1)。BMI、甘油三酯 (TG)水平高于EHIR( -)及NEH组 (P <0 0 5 )。高密度脂蛋白 (HDL C)水平及颈动脉斑块大小在EHIR( +)组明显低于EHIR( -)组 (P <0 .0 5 )。

关键词：胰岛素抵抗动脉粥样硬化原发性高血压

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