检索结果-内蒙古大学图书馆

第三军医大学学报 2009年第2期31卷 93-97页

作者：胡丹王长军胡福泉王晶程功李明潘秀珍唐家琪第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆市微生物工程实验室重庆400038 南京军区军事医学研究所南京210002

目的构建猪链球菌2型(Streptococcus suisserotype 2,***2)中国强致病株05ZYH33荚膜缺陷株。方法利用同源重组基因敲除方法获得***2强毒株05ZYH33荚膜合成基因cps2B敲除突变株,通过小鼠攻毒实验证实荚膜缺陷株对细菌毒力的影响。结果PCR... 详细信息

目的构建猪链球菌2型(Streptococcus suisserotype 2,***2)中国强致病株05ZYH33荚膜缺陷株。方法利用同源重组基因敲除方法获得***2强毒株05ZYH33荚膜合成基因cps2B敲除突变株,通过小鼠攻毒实验证实荚膜缺陷株对细菌毒力的影响。结果PCR和Southern杂交结果均显示cps2B基因完全被壮观霉素抗性基因替代,表明基因敲除突变体构建成功。电镜结果证实突变体荚膜合成能力缺失,小鼠致病性实验结果显示突变体毒力基本丧失。结论成功构建05ZYH33荚膜缺陷株,提示菌体荚膜多糖成分对于猪链球菌2型侵袭和致病具有显著作用。

关键词：猪链球菌2型荚膜多糖基因敲除致病性实验

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革兰阴性菌基因敲除载体的构建及其应用

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第三军医大学学报 2009年第23期31卷 2299-2301页

作者：王景穆媛嫒黎庶陈志瑾熊坤丛延广第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆市微生物工程实验室重庆400038 遵义医学院研究生院贵州遵义563003

目的构建1个适用于革兰阴性菌的精确基因敲除载体并证明其有效性。方法构建的载体主要包括以下成分:π蛋白依赖性复制起点oriR6K;接合转移基因mob,使载体可以通过简单的接合方式实现转移;多克隆位点序列:EcoRⅠ-XbaⅠ-ApaⅠ-SfiⅠ-SacⅠ... 详细信息

目的构建1个适用于革兰阴性菌的精确基因敲除载体并证明其有效性。方法构建的载体主要包括以下成分:π蛋白依赖性复制起点oriR6K;接合转移基因mob,使载体可以通过简单的接合方式实现转移;多克隆位点序列:EcoRⅠ-XbaⅠ-ApaⅠ-SfiⅠ-SacⅠ-NotⅠ-SpeⅠ-NdeⅠ-SacⅡ-BglⅡ;反向选择标志SacB;正向选择标志卡那霉素抗性片段。载体构建完成后,采用该载体对弗氏枸橼酸杆菌的yeeZ基因进行框架内敲除,以验证其有效性。结果成功构建了敲除载体,命名为pYG4,并对yeeZ基因进行了框架内精确敲除获得突变株。结论本研究构建的载体适用于对革兰阴性菌进行目的基因的精确敲除,将在细菌基因功能研究中得到广泛的应用。

关键词：敲除载体构建突变株基因功能

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登革2型病毒NS1-NS2a基因真核表达载体的构建及鉴定

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第三军医大学学报 2009年第6期31卷 557-559页

作者：陈炜王嘉丽高娜田衍平陈宗涛徐小峰张俊磊刘丽梅江雯安静第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆市微生物工程实验室第三军医大学基础医学部组织胚胎学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038 首都医科大学基础医学院微生物学教研室北京100069

目的构建登革2型病毒NS1-NS2a基因真核表达质粒。方法RT-PCR扩增NS1-NS2a基因片段后,将其克隆入真核表达载体pReceiver-M01a;通过PCR、酶切、测序和间接免疫荧光染色鉴定重组质粒。结果经PCR扩增、酶切和测序验证,重组质粒构建正确,命名... 详细信息

目的构建登革2型病毒NS1-NS2a基因真核表达质粒。方法RT-PCR扩增NS1-NS2a基因片段后,将其克隆入真核表达载体pReceiver-M01a;通过PCR、酶切、测序和间接免疫荧光染色鉴定重组质粒。结果经PCR扩增、酶切和测序验证,重组质粒构建正确,命名为pRe-NS1-NS2a;重组质粒转染Vero细胞后,间接免疫荧光染色显示细胞质中有登革2型病毒特异性蛋白的表达。结论成功构建了真核表达质粒pRe-NS1-NS2a。

关键词：登革2型病毒 NS1-NS2a基因真核表达

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Bmi-1调节干性相关分子转录的初步分析

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第三军医大学学报 2009年第9期31卷 768-771页

作者：阮艳蹇锐程小星牛翰婕周恒宇郑宏庭胡福泉第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆市微生物工程实验室重庆400038 解放军总医院309临床部北京100091 第三军医大学新桥医院内分泌科重庆400037

目的探讨Bmi-1对肿瘤及胚胎干细胞中干性相关分子转录表达的影响。方法分别构建鼠源和人源Bmi-1过表达载体pCI-GFP-mbmi1和pCI-GFP-hbmi1;瞬时转染鼠ES细胞CCE和人神经胶质瘤细胞U87;半定量RT-PCR检测胚胎干细胞中Oct-4、Nanog、c-Myc、... 详细信息

目的探讨Bmi-1对肿瘤及胚胎干细胞中干性相关分子转录表达的影响。方法分别构建鼠源和人源Bmi-1过表达载体pCI-GFP-mbmi1和pCI-GFP-hbmi1;瞬时转染鼠ES细胞CCE和人神经胶质瘤细胞U87;半定量RT-PCR检测胚胎干细胞中Oct-4、Nanog、c-Myc、Klf4和Sox2及肿瘤细胞中CD133、Nestin等干性分子的表达;克隆形成实验检测CCE细胞自我更新克隆形成能力。结果瞬时转染Bmi-1过表达载体后,CCE细胞中Nanog的表达上调,Oct-4、Sox2和Klf4的表达无明显变化;U87细胞中Nestin和Oct-4表达上调,CD133、Nanog变化不明显;两者c-Myc的转录表达均显著降低;过表达Bmi-1促进CCE细胞自我更新克隆形成。结论Bmi-1参与了对肿瘤及胚胎干细胞中干性相关分子的转录调节。

关键词： Bmi-1 干细胞干性相关分子转录调控

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单纯疱疹病毒的复制组装机制

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微生物学免疫学进展 2009年第1期37卷 41-47页

作者：黎庶胡福泉第三军医大学微生物学教研室重庆市微生物工程重点实验室重庆400038

组装是病毒复制特有的必需环节,不同类型的病毒,其组装机制有着很大差异。如疱疹病毒等双链DNA(Double strand DNA,dsDNA)病毒,其组装过程需要以末端酶为代表的多种组装相关蛋白的共同参与和相互协作。本文即以I型单纯疱疹病毒(HSV-1)... 详细信息

组装是病毒复制特有的必需环节,不同类型的病毒,其组装机制有着很大差异。如疱疹病毒等双链DNA(Double strand DNA,dsDNA)病毒,其组装过程需要以末端酶为代表的多种组装相关蛋白的共同参与和相互协作。本文即以I型单纯疱疹病毒(HSV-1)为例就疱疹病毒(甚至是dsDNA病毒)的复制组装作一简单的综述。

关键词： dsDNA病毒单纯疱疹病毒组装末端酶组装蛋白

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双价D-J假病毒真核表达载体的构建

双价D-J假病毒真核表达载体的构建

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重庆微生物学会第九届会员代表大会暨学术年会

作者：胡珍饶贤才陈志瑾朱军民刘佳王嘉丽张俊磊王冬梅杨杰原薇薇第三军医大学微生物学教研室重庆市微生物工程重点实验室

假病毒(pseudovirus),或称病毒样颗粒(virus like particles,VLPs),是不含核酸的病毒空壳结构,许多病毒结构蛋白都具有自动组装成VLPs的能力。病毒VLPs保留了天然病毒颗粒的空间构象

关键词：假病毒 D-J 登革病毒真核表达载体

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金黄色葡萄球菌L型感染大鼠肺炎模型的建立

金黄色葡萄球菌L型感染大鼠肺炎模型的建立

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重庆微生物学会第九届会员代表大会暨学术年会

作者：王冬梅饶贤才杨永涛陈志瑾熊坤胡珍杨杰原薇薇第三军医大学微生物学教研室重庆市微生物工程重点实验室

目的:用金黄色葡萄球菌ATCC25923的稳定L型感染SD大鼠,观察L型细菌感染动物后其肺脏的病理改变,建立L型细菌感染大鼠肺炎模型。方法:SD大鼠150g 30只,雌雄并用,分3组进行实验。A组:无菌L型高渗培养基对照组(10只),各动物腹腔注射0.15 m... 详细信息

目的:用金黄色葡萄球菌ATCC25923的稳定L型感染SD大鼠,观察L型细菌感染动物后其肺脏的病理改变,建立L型细菌感染大鼠肺炎模型。方法:SD大鼠150g 30只,雌雄并用,分3组进行实验。A组:无菌L型高渗培养基对照组(10只),各动物腹腔注射0.15 ml无菌L型高渗培养

关键词：鼠肺炎金黄色葡萄球菌细菌感染

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体内诱导基因及相关研究方法简介

体内诱导基因及相关研究方法简介

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重庆微生物学会第九届会员代表大会暨学术年会

作者：黎庶宋洁胡福泉第三军医大学微生物学教研室重庆市微生物工程重点实验室

为适应宿主体内复杂多变的内部环境,病原微生物在侵入宿主体内后常常会调整自己的基因表达,启动并表达一系列在体外环境中生存所不需要的蛋白质以确保其在宿主体内的存活、定居甚至致病。这类仅在病原微生物进入宿主体内后才被诱导表达... 详细信息

为适应宿主体内复杂多变的内部环境,病原微生物在侵入宿主体内后常常会调整自己的基因表达,启动并表达一系列在体外环境中生存所不需要的蛋白质以确保其在宿主体内的存活、定居甚至致病。这类仅在病原微生物进入宿主体内后才被诱导表达而在体外生长时不表达的独特基因称为体

关键词：体内诱导基因病原微生物病原菌

来源：评论

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金葡菌L型的诱导及其对肽抗生素hPAB-β敏感性初步研究

金葡菌L型的诱导及其对肽抗生素hPAB-β敏感性初步研究

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重庆微生物学会第九届会员代表大会暨学术年会

作者：王冬梅饶贤才陈志瑾杨杰丛延广王竞朱军民胡珍原薇薇胡福泉第三军医大学微生物学教研室重庆市微生物工程重点实验室

细菌L型是细菌的细胞壁部分或完全缺失后形成的,最早于1935年在英国Lister研究所发现,故命名为L型细菌。许多细菌、真菌、螺旋体都能形成L型,且分布非常广泛,凡有微生物的地方皆可有L型存在,如土壤、溪水、动物器官及人体组织等。L型细... 详细信息

细菌L型是细菌的细胞壁部分或完全缺失后形成的,最早于1935年在英国Lister研究所发现,故命名为L型细菌。许多细菌、真菌、螺旋体都能形成L型,且分布非常广泛,凡有微生物的地方皆可有L型存在,如土壤、溪水、动物器官及人体组织等。L型细菌在临床上常引起慢性间质性炎

关键词：金葡菌初步研究肽抗生素

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结核抗原特异性CD4^＋中央型记忆T细胞的检测及分布特性研究

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第三军医大学学报 2009年第16期31卷 1549-1551页

作者：牛翰婕程小星王心静曹志红董梅佟爱华第三军医大学基础医学部微生物学教研室、重庆市微生物工程实验室重庆400038 解放军总医院第二附属医院结核病研究室北京100091 解放军总医院第二附属医院检验科北京100091

目的比较活动期肺结核患者和纯蛋白衍生物(purified protein derivative,PPD)试验阳性健康人记忆T细胞的产生和分布特性。方法取乙二胺四乙酸(ethylene diaminete traacetic acid,EDTA)抗凝静脉血,Ficoll进行密度梯度离心获取PBMCs。采... 详细信息

目的比较活动期肺结核患者和纯蛋白衍生物(purified protein derivative,PPD)试验阳性健康人记忆T细胞的产生和分布特性。方法取乙二胺四乙酸(ethylene diaminete traacetic acid,EDTA)抗凝静脉血,Ficoll进行密度梯度离心获取PBMCs。采用卡介苗刺激后,通过CD4、CD154、CCR7、CD45RA4种抗体共染色,用流式细胞仪检测结核抗原特异性CD4+记忆T细胞。结果以CD4+CD154+双阳性区设门,研究结核抗原特异性CD4+记忆T细胞,结果显示,肺结核患者CD4+CD154+CD45RA-CCR7+中央型T淋巴细胞亚群分布频率显著降低(P<0.05),CD4+CD154+CD45RA+CCR7+初始T细胞亚群的比例明显增高(P<0.05)。结论肺结核患者CD4+中央型记忆T淋巴细胞亚群的产生存在异常,可能与免疫功能低下和结核病发病密切相关。

关键词：结核免疫 CD4^+T细胞记忆T细胞

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