检索结果-内蒙古大学图书馆

内分泌外科杂志 2007年第4期1卷 227-230页

作者：王琦黄赤兵张艮甫郑峻松李健范明齐金欢胜冯嘉瑜方针强肖亚第三军医大学新桥医院泌尿外科重庆400037 第三军医大学临床检验学教研室重庆400038

目的研究供体抗原特异性CD4^＋CD25^＋调节性T细胞对受体B细胞反应的影响。方法用尼龙毛柱法分离B细胞，用MACS磁珠分选法从Lewis大鼠脾脏淋巴细胞中分离CD4^＋CD25^＋Treg细胞，然后将分离纯化的Lewis大鼠Treg细胞负载F344大鼠抗原，... 详细信息

目的研究供体抗原特异性CD4^＋CD25^＋调节性T细胞对受体B细胞反应的影响。方法用尼龙毛柱法分离B细胞，用MACS磁珠分选法从Lewis大鼠脾脏淋巴细胞中分离CD4^＋CD25^＋Treg细胞，然后将分离纯化的Lewis大鼠Treg细胞负载F344大鼠抗原，以RT—PCR检测分选细胞中Foxp3基因表达水平。然后以MTT法证实获得对供体抗原的特异性。将受体Treg细胞与B淋巴细胞组成共培养反应体系，然后向共培养体系中加或不加入Anti-TGF—β1、Anti—CTLA4的阻断方法，培养5天后用ELISA发检测不同组上清中的IgA和IgG分泌水平。结果负载供体抗原后，CD4^＋CD25^＋调节性T细胞对供体抗原的抑制率（IR）为80.5％。Treg与B细胞共培养组与阳性对照组相比较，上清中的IgG和IgA水平明显降低（P〈0.01），分别达到了（2.4±0.7）μg／ml和（6.0±1.0）μg／ml。在体系中加入Anti—TGF—β1后上清中的IgG和IgA的分泌水平分别达到（3.3±0.5）μg／ml和（7.1±0.9）μg／ml；加入Anti—CTLA4后上清中的IgG和IgA的分泌水平分别达到（3.4±0.5）μg/ml和（7.3±0.9）μg／ml；两种阻断剂同时加入后上清中的IgG和IgA的分泌水平分别达到（3.7±0.6）μg/ml和（7.5±0.7）μg／ml，三组分泌水平都较共培养组明显升高（P〈0.05），但仍明显低于阳性对照组的水平（（P〈0.05）。结论负载供体抗原的CD4^＋CD25^＋Freg能够有效抑制供体抗原刺激下的B淋巴细胞反应，在这一过程中TGF-β1和CTLA4都发挥了一定作用。

关键词： Treg B细胞 IgA IgC TGF-β1 CTLA4

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基于微流控芯片的微型化免疫分析装置的研究

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解放军检验医学杂志 2007年第1期3卷 81-83页

作者：黄辉郑峻松蒲晓允邓均潘静李招权方立超第三军医大学临床检验学教研室重庆400038 第三军医大学新桥医院检验科重庆400037

目的建立一种可以用于军事等特殊环境进行免疫分析的微型分析装置.方法采用激光直接加工法制备微流控芯片,建立基于超顺磁珠的化学发光微流控免疫分析系统,用于免疫分析.结果芯片系统可以在20min内完成甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,A... 详细信息

目的建立一种可以用于军事等特殊环境进行免疫分析的微型分析装置.方法采用激光直接加工法制备微流控芯片,建立基于超顺磁珠的化学发光微流控免疫分析系统,用于免疫分析.结果芯片系统可以在20min内完成甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)的分析,所需要的标本量和试剂量为5μl,线性范围为1～800ng/ml,批内CV平均为6.3%,批间CV平均为7.8%,回收率为94.3%.结论该微型化免疫分析装置可分析速度快,消耗试剂小,易于便携化有望用于军事检验医学.

关键词：超顺磁珠化学发光微流控芯片免疫分析

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加强军队医疗科技干部量化考核工作的几点思考

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华北国防医药 2007年第2期19卷 32-33页

作者：徐国斌陈俊国曹建华第三军医大学新桥医院组织科重庆400037 第三军医大学医学教育研究室重庆400038

世界军事医学技术的突飞猛进，使军医大学面临的形势、任务和内部条件不断变化。培养大批新型军事人才，是中国特色军事变革的重要内容，也是推进这一变革的重要保证。军医大学就必须要把培养一大批高素质的军事医学人才作为首要任务，... 详细信息

世界军事医学技术的突飞猛进，使军医大学面临的形势、任务和内部条件不断变化。培养大批新型军事人才，是中国特色军事变革的重要内容，也是推进这一变革的重要保证。军医大学就必须要把培养一大批高素质的军事医学人才作为首要任务，以适应未来高技术战争对卫勤保障能力的更新、更高要求。动用战略思维、前瞻和把握军事医学人才成长的周期性和规律性，构建合理的科技干部考评体系、完善的量化考核标准及系统的考评办法，并通过对科技干部进行量化考评，以此作为军事医学人才综合素质和潜力的评估依据，谋划好拔尖人才队伍建设规划，具有十分重要的战略意义。

关键词：军队卫生医务人员量化考核标准

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PTZ点燃癫痫大鼠海马BMP4的表达研究

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四川医学 2007年第5期28卷 453-455页

作者：马玉新阴金波范晓棠徐海伟安宁李志方张永海杨辉第三军医大学新桥医院神经外科重庆400037 第三军医大学神经生物教研室重庆400037 第三军医大学生理学教研究重庆400037

目的观察骨形成蛋白4(BMP4)基因在戊四氮(PTZ)点燃癫痫大鼠海马中的表达,并探讨其与癫痫发病机制的关系。方法将40只成年雄性SD大鼠随机分为对照组和实验组。实验组采用PTZ点燃癫痫大鼠,按点燃进程,又随机分为Ⅰ级组、Ⅲ级组、Ⅳ级组和... 详细信息

目的观察骨形成蛋白4(BMP4)基因在戊四氮(PTZ)点燃癫痫大鼠海马中的表达,并探讨其与癫痫发病机制的关系。方法将40只成年雄性SD大鼠随机分为对照组和实验组。实验组采用PTZ点燃癫痫大鼠,按点燃进程,又随机分为Ⅰ级组、Ⅲ级组、Ⅳ级组和Ⅴ级组。用地高辛标记特异性寡核苷酸探针原位杂交组织化学技术和图像分析技术,观察海马BMP4表达的变化。结果发现应用PTZ点燃后,Ⅱ级以上大鼠海马区BMP4的表达增加。Ⅲ和Ⅳ级大鼠海马CA3及DG BMP4的表达明显高于对照组(P<0.01);Ⅴ级大鼠在发作后海马CA3及DG BMP4的表达呈逐渐下降。结论BMP4可能参与了癫痫的发生、发展过程。

关键词：癫痫 PTZ BMP4 海马大鼠原位杂交

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稳定表达人胰岛素原突变基因的HepG2细胞构建及其胰岛素分泌

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第三军医大学学报 2007年第24期29卷 2361-2363页

作者：郑宏庭邓华聪兰丽珍方芳刘金波李丙蓉蹇锐重庆医科大学附属第一医院内分泌科重庆400016 第三军医大学新桥医院内分泌科重庆400037 第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆市微生物工程实验室重庆400038

目的构建稳定表达人胰岛素原突变(mutated human proinsulin,mhPINS)基因的HepG2细胞,将HepG2细胞改建为具有胰岛素分泌能力的"胰岛代理细胞"(artificial beta cell)。方法重组逆转录病毒载体pL-mhPINS-SN转包装细胞PA317,经G... 详细信息

目的构建稳定表达人胰岛素原突变(mutated human proinsulin,mhPINS)基因的HepG2细胞,将HepG2细胞改建为具有胰岛素分泌能力的"胰岛代理细胞"(artificial beta cell)。方法重组逆转录病毒载体pL-mhPINS-SN转包装细胞PA317,经G418筛选,NIH3T3细胞测定病毒滴度,获取高滴度的稳定产毒细胞克隆,以PCR进行鉴定。以mhPINS病毒感染HepG2细胞,经G418筛选,对HepG2/mhPINS细胞进行RT-PCR、Western blot、放免法鉴定,并行葡萄糖刺激的胰岛素分泌检测。结果所获HepG2/mhPINS细胞生长良好,RT-PCR获得286bp目的条带,Western blot检测可见34×103的特异性条带,放免法在其培养上清中检测到胰岛素与C肽,而HepG2/pLXSN细胞上述各项检测均为阴性。葡萄糖刺激的胰岛素分泌检测显示,HepG2/mhPINS细胞在不同葡萄糖浓度(0.1、10、20mmol/L)条件下引起的胰岛素分泌无显著性差异(P>0.05)。结论成功构建稳定表达mhPINS基因的HepG2细胞,其内获得成熟胰岛素的表达与分泌,但其胰岛素分泌对葡萄糖刺激缺乏反应。

关键词： mhPINS基因逆转录病毒 HepG2细胞胰岛素

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HRP神经逆行示踪评价GDNF修饰的神经移植复合体对大鼠脊髓运动神经元的保护作用

HRP神经逆行示踪评价GDNF修饰的神经移植复合体对大鼠脊髓运动神...

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第八届全国脊柱脊髓损伤学术会议

作者：张文捷周跃陈菁王建忠陈建梅第三军医大学新桥医院骨科第三军医大学野战外科研究所6室

目的采用大鼠坐骨神经缺损桥接动物模型,应用霍乱毒素 B-辣根过氧化物酶（CB—HRP）神经逆行示踪技术对构建的 GDNF 修饰的神经移植复合体的运动神经元保护作用进行评价。方法 20只成年 Wistar 大鼠随机分为4组:A 组（N=5）细胞外基质凝... 详细信息

目的采用大鼠坐骨神经缺损桥接动物模型,应用霍乱毒素 B-辣根过氧化物酶（CB—HRP）神经逆行示踪技术对构建的 GDNF 修饰的神经移植复合体的运动神经元保护作用进行评价。方法 20只成年 Wistar 大鼠随机分为4组:A 组（N=5）细胞外基质凝胶-PLGA 管桥接组;B 组（N=5）雪旺细胞-细胞外基质凝胶-PLGA 管桥接组:C 组（N=5）GDNF 基因修饰的雪旺细胞-细胞外基质凝胶-PLGA 管桥接组;D 组（N=5）自体神经桥接组。损伤各组12周时应用辣根过氧化物酶神经逆行示踪技术进行脊髓前角运动神经元的再生评价。结果 12周时脊髓前角运动神经元再生评价结果提示:C 组优于 A、B 组,而与 D 组相比无明显差异。结论结果提示雪旺细胞的转基因处理可能弥补单纯细胞移植神经营养因子含量的不足,而可能达到与自体神经移植相似的效果。

关键词：胶质细胞源性神经营养因子运动神经元霍乱毒素 B—辣根过氧化物酶大鼠

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CD14抑制肽的体外生物活性

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中国急救医学 2007年第8期27卷 716-719页

作者：冯起甲徐智吴国明刘红艳徐顺贵钱桂生第三军医大学新桥医院全军呼吸内科研究所全军呼吸病研究重点实验室重庆400037 第五三四医院洛阳471003

目的研究CD14抑制肽(CD14inhibitory peptide,CD14-IP)与CD14的结合活性及对内毒素(LPS)和脂多糖结合蛋白(LBP)诱导的人单核巨噬细胞株U937表达肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响。方法采用酶联免疫吸附(ELISA)法进行CD14-IP与CD14的结合... 详细信息

目的研究CD14抑制肽(CD14inhibitory peptide,CD14-IP)与CD14的结合活性及对内毒素(LPS)和脂多糖结合蛋白(LBP)诱导的人单核巨噬细胞株U937表达肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响。方法采用酶联免疫吸附(ELISA)法进行CD14-IP与CD14的结合实验。U937细胞用佛波脂(PMA)诱导成熟后分为五组:正常对照组、LPS组(100ng/mLLPS+100ng/mLrhLBP)、高剂量多肽组、中剂量多肽组及低剂量多肽组,后三组分别给予10μg/mL、1.0μg/mL和0.1μg/mL的CD14-IP。用ELISA测定培养细胞上清TNF-α的含量,用RT-PCR测定U937细胞TNF-αmRNA的表达水平。结果CD14-IP有较强的与CD14结合的能力;CD14-IP组TNF-α和TNF-αmRNA水平均较LPS组低,较正常组高。结论CD14-IP能与CD14结合,并能降低培养细胞TNF-α和TNF-αmRNA的表达,具有抑制CD14生物活性的作用。

关键词： CD14 多肽脂多糖结合蛋白脂多糖 TNF-α

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应用供体抗原特异性CD4+CD25+ Treg细胞延长大鼠移植肾存活的研究

应用供体抗原特异性CD4+CD25+ Treg细胞延长大鼠移植肾存活的研究

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第十四届全国泌尿外科学术会议暨第九届全球华人泌尿外科学术会议

作者：李健黄赤兵张艮甫郑峻松王琦冯嘉瑜肖亚贾维胜方针强第三军医大学附属新桥医院泌尿外科第三军医大学临床检验学教研室

背景:随着对CD4+CD25+Treg细胞免疫学特性和功能特点的深入研究,及其调控同种抗原免疫反应特性的明确,运用CD4+CD25+Treg细胞作为临床器官移植治疗的新策略已成为移植免疫研究中的热点。CD4+CD25+Treg细胞可以通过分泌调节性细胞因子(如... 详细信息

背景:随着对CD4+CD25+Treg细胞免疫学特性和功能特点的深入研究,及其调控同种抗原免疫反应特性的明确,运用CD4+CD25+Treg细胞作为临床器官移植治疗的新策略已成为移植免疫研究中的热点。CD4+CD25+Treg细胞可以通过分泌调节性细胞因子(如IL-10、TGF-B1)

关键词：移植肾 CD4 抗原特异性

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pSiRNA-Shh逆转录病毒载体的构建及对恶性脑胶质瘤细胞作用的离体实验研究

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中国实验诊断学 2007年第5期11卷 598-602页

作者：尹昌林吕胜青黄轶李光辉唐莉杨辉第三军医大学新桥医院神经外科重庆400037 重庆医科大学生化与分子生物学教研室第三军医大学新桥医院肿瘤研究所第三军医大学西南医院乳腺疾病中心

目的建立逆转录病毒介导的人Shh基因RNA干扰体外表达体系并观察对恶性脑胶质瘤细胞的作用。方法将人Shh基因RNA干扰双链转录DNA片段重组到逆转录病毒质粒Psilencer 5.1-H1 Retro中,构建成携带人Shh基因RNA干扰逆转录病毒载体pSiRNA-Shh,... 详细信息

目的建立逆转录病毒介导的人Shh基因RNA干扰体外表达体系并观察对恶性脑胶质瘤细胞的作用。方法将人Shh基因RNA干扰双链转录DNA片段重组到逆转录病毒质粒Psilencer 5.1-H1 Retro中,构建成携带人Shh基因RNA干扰逆转录病毒载体pSiRNA-Shh,经PT67细胞包装后,产生的重组逆转录病毒感染恶性脑胶质瘤细胞株U251和CHG-5细胞,用WST-8、RT-PCR和Western Blotting分别检测对转染细胞活性、人Shh mRNA和蛋白表达的影响。结果重组pSiRNA-Shh质粒经测序鉴定正确。重组逆转录病毒滴度可达210×104CFU/ml,感染U251和CHG-5恶性脑胶质瘤细胞株后3 d能明显抑制细胞生长,RT-PCR和Western Blotting检测人Shh mRNA和蛋白表达水平明显低于阴性对照组和未干扰组。结论携带人Shh基因RNA干扰双链转录DNA片段的逆转录病毒体现出明显的抑制恶性脑胶质瘤细胞生长作用,为下一步开展基因治疗恶性脑胶质瘤奠定了基础。

关键词： pSiRNA-Shh逆转录病毒载体恶性脑胶质瘤基因治疗

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临床路径下病例组合方法研究

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医学研究生学报 2007年第6期20卷 641-643页

作者：陈学涛易东郭波涛李辉智第三军医大学新桥医院信息科重庆400037 第三军医大学卫生统计学教研室重庆400038 西南政法大学刑侦学院重庆400031

目的:探讨临床路径下病例组合方法和人工神经网络在病例组合中的应用。方法:利用某综合性医院的一个临床路径流程(腰椎间盘突出行椎板切除术或髓核摘除术)下的523份出院病历资料,采用K-MEANS聚类方法进行组合,用神经网络对预测病例的病... 详细信息

目的:探讨临床路径下病例组合方法和人工神经网络在病例组合中的应用。方法:利用某综合性医院的一个临床路径流程(腰椎间盘突出行椎板切除术或髓核摘除术)下的523份出院病历资料,采用K-MEANS聚类方法进行组合,用神经网络对预测病例的病例组合进行判断。结果:523份病历聚为4组,各组间费用95%可信区间互不重合;神经网络的训练误差为0.0 029,病例组合预测和判断符合率为98.91%。结论:以临床路径下产生的病例为单元样本进行病例组合,结果更科学、客观。神经网络用于病例组合判断,不用确定单个节点变量的分割值,更符合病例组合由多变量共同作用的实情。

关键词：临床路径病例组合神经网络

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