检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 1996年第6期17卷 505-508页

作者：高军曹广文戚中田吴宗娣杜平仇小芳崔龙杨文国第二军医大学基础医学部微生物学教研室第二军医大学长海医院普通外科

目的：建立肝癌特异性前药转换基因治疗的方法。方法和结果：构建携带单纯疮疹病毒胸苷激酶基因（ＨＳＶ－ｔｋ）的人肝癌特异性逆转录病毒载体，经过ＰＡ３１７细胞包装及病毒滴度测定后，感染肝癌ＨｅｐＧ２和ＳＭＭＣ７７２１细胞，... 详细信息

目的：建立肝癌特异性前药转换基因治疗的方法。方法和结果：构建携带单纯疮疹病毒胸苷激酶基因（ＨＳＶ－ｔｋ）的人肝癌特异性逆转录病毒载体，经过ＰＡ３１７细胞包装及病毒滴度测定后，感染肝癌ＨｅｐＧ２和ＳＭＭＣ７７２１细胞，用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交方法证明ＨＳＶ－ｔｋ基因在ＡＦＰ高分泌的ＨｅｐＧ２细胞中得到特异转录，以阿昔洛韦（ＡＣＶ）为前药攻击转基因的肝癌细胞显示对ＨｅｐＧ２有相对选择性杀伤作用。结论：该ＡＦＰｅ／ＨＳＶ－ｔｋ／前药转换疗法为肝癌特异性基因治疗提供了有价值的资料。

关键词：肝肿瘤胸苷激酶甲胎蛋白增强子基因治疗

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大肠癌组织CEA基因启动子序列克隆及与正常组织相应序列的比较

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第二军医大学学报 1997年第4期18卷 301-305页

作者：曹广文杜平崔龙高军潘欣戚中田第二军医大学基础医学部微生物学教研室第二军医大学长海医院普通外科

目的：研究人类不同组织细胞中癌胚抗原（ＣＥＡ）产生与其基因顺式作用序列改变的关系，评价该顺式作用序列在大肠癌组织特异性基因治疗中的应用价值。方法：采用套式ＰＣＲ方法分别从人新鲜大肠癌、相应癌旁粘膜组织、正常血细胞、正... 详细信息

目的：研究人类不同组织细胞中癌胚抗原（ＣＥＡ）产生与其基因顺式作用序列改变的关系，评价该顺式作用序列在大肠癌组织特异性基因治疗中的应用价值。方法：采用套式ＰＣＲ方法分别从人新鲜大肠癌、相应癌旁粘膜组织、正常血细胞、正常胎盘组织及建株癌基因组中扩增ＣＥＡ基因启动子核心序列，ＰＣＲ－Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交法确定扩增序列可靠性。用ＰＣＲ－单链构象多态性（ＳＳＣＰ）和ＤＮＡ序列分析方法确定扩增序列突变情况。用Ｂａｎｄ－Ｓｈｉｆｔ分析法检验扩增序列的启动子功能。结果：不同组织细胞基因组中的ＣＥＡ基因转录起始位点上游－１３０ｂｐ～＋６９ｂｐ的ＣＥＡ基因启动子核心序列区段未发现明显序列差异。大肠癌组织中ＣＥＡ基因的转录与大肠癌基因组中ＣＥＡ基因启动子核心序列无明显的对应关系。从大肠癌组织和正常组织ＤＮＡ中扩增出来的ＣＥＡ启动子序列与ＣＥＡ阳性的ＬｏＶｏ大肠癌细胞核蛋白提取物的结合能力一致，但不能与ＣＥＡ阴性的ＲＣ９４０６人肾癌细胞结合。结论：ＣＥＡ基因在大肠癌细胞中的特异转录不是由于ＣＥＡ基因启动子序列的突变。来源于正常细胞或者大肠癌细胞基因组的ＣＥＡ基因启动子均适合大肠癌组织特异性基因治疗。

关键词：大肠肿瘤癌胚抗原基因启动子基因治疗

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裸鼠体内组织特异性胞嘧啶脱氨酶抗人类肿瘤的基因治疗

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第二军医大学学报 1998年第4期19卷 319-322页

作者：曹广文崔龙高军戚中田第二军医大学基础医学部微生物学教研室第二军医大学长海医院普通外科

目的：研究组织特异性表达的胞嘧啶脱氨酶（ＣＤ）基因在裸鼠体内对人类大肠癌和肝细胞癌的治疗作用。方法：将ＣＤ基因修饰的大肠癌ＬｏＶｏ细胞移植到裸鼠体内，观察对全身给予５－氟胞嘧啶（５－ＦＣ）的反应，用含ＣＤ基因的重组病... 详细信息

目的：研究组织特异性表达的胞嘧啶脱氨酶（ＣＤ）基因在裸鼠体内对人类大肠癌和肝细胞癌的治疗作用。方法：将ＣＤ基因修饰的大肠癌ＬｏＶｏ细胞移植到裸鼠体内，观察对全身给予５－氟胞嘧啶（５－ＦＣ）的反应，用含ＣＤ基因的重组病毒产生细胞和５－ＦＣ治疗人肝癌裸鼠模型，并用ＰＣＲ法确定体内基因转移效果，骨髓涂片检查体内基因治疗对造血细胞的影响。结果：转ＣＤ基因对ＬｏＶｏ细胞的致瘤性无影响，全身给予５－ＦＣ治疗６０ｄ，转ＣＤ基因的大肠癌肿瘤明显缩小；ＣＥＡ启动子调控的ＣＤ（ＣＥＡ／ＣＤ）基因修饰的ＬｏＶｏ细胞形成的肿瘤在５－ＦＣ作用下消退。重组病毒在体内可以感染肿瘤、骨髓细胞，给予５－ＦＣ后取得了一定的抗肝细胞癌效果。ＣＥＡ／ＣＤ治疗组未发现明显的骨髓抑制，而ＬＴＲ调控ＣＤ的治疗组出现了明显的骨髓抑制。结论：组织特异性转录调控序列调控的ＣＤ基因体内基因治疗，较普通启动子调控的ＣＤ基因具有明显的安全性和有效性。

关键词：大肠肿瘤肝肿瘤胞嘧啶脱氨酶基因治疗裸鼠

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Ⅰ型常染色体显性遗传多囊肾病基因诊断与基因突变情况的调查

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第二军医大学学报 1999年第3期20卷 137-141页

作者：王立明闵志廉朱有华齐隽缪为民陈建鹤焦炳华第二军医大学长征医院泌尿外科第二军医大学基础医学部微生物学教研室

（１）建立Ⅰ型常染色体显性遗传多囊肾病（ＡＤＰＫＤⅠ）的基因诊断方法；（２）寻找具有普遍意义的突变方式，以优化基因诊断。方法：（１）采用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交和ＰＣＲ方法，调查ＡＤＰＫＤⅠ基因３′端单拷贝区突变情况；（... 详细信息

（１）建立Ⅰ型常染色体显性遗传多囊肾病（ＡＤＰＫＤⅠ）的基因诊断方法；（２）寻找具有普遍意义的突变方式，以优化基因诊断。方法：（１）采用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交和ＰＣＲ方法，调查ＡＤＰＫＤⅠ基因３′端单拷贝区突变情况；（２）ＰＣＲ扩增分析微卫星ＳＭ７。结果：将ＡＨ４与１６例患者的基因组ＤＮＡ进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交后，均显示有正常的１５ｋｂ的杂交片段。对２７例患者ＡＤＰＫＤⅠ基因３′端ＡＨ４和ＪＨ１４两探针间的５．７２ｋｂ基因组ＤＮＡ行ＰＣＲ扩增后，未发现５．５ｋｂ基因组ＤＮＡ缺失。１０９名正常人ＳＭ７ＰＣＲ扩增显示，其多态信息含量（ＰＩＣ）值为０．７６，３个家系的ＳＭ７等位片段与疾病基因连锁关系明确。结论：在汉族中：（１）ＡＤＰＫＤⅠ基因３′端单拷贝区无常见性大片段基因组ＤＮＡ缺失类突变；（２）ＳＭ７所含ＰＩＣ较高，用其可在７０％～８０％的ＡＤＰＫＤⅠ家系中作出基因诊断。

关键词：常染色体显性囊性肾基因诊断基因突变

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胃癌患者外周血单个核细胞白细胞介素2的诱生能力

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第二军医大学学报 1995年第2期16卷 149-151页

作者：李淑德许国铭郑杭民张洪富第二军医大学长海医院消化内科第二军医大学基础医学部微生物学教研室

应用［３Ｈ］－ＴｄＲ掺入法，测定３０例胃癌患者外周血单个核细胞白细胞介素２（ＩＬ－２）诱生能力。结果表明，胃癌患者ＩＬ－２诱生能力显著低于正常对照（Ｐ＜０．０１）及胃慢性良性病者（Ｐ＜０．０１）；随肿瘤进展，ＩＬ－２... 详细信息

应用［３Ｈ］－ＴｄＲ掺入法，测定３０例胃癌患者外周血单个核细胞白细胞介素２（ＩＬ－２）诱生能力。结果表明，胃癌患者ＩＬ－２诱生能力显著低于正常对照（Ｐ＜０．０１）及胃慢性良性病者（Ｐ＜０．０１）；随肿瘤进展，ＩＬ－２诱生能力逐渐降低（Ｐ＜０．０１）；肿瘤分化越差，ＩＬ－２诱生能力则越低（Ｐ＜０．０１）；血清可溶性ＩＬ－２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）与ＩＬ－２诱生能力呈负相关（γ＝－０．７６３１，Ｐ＜０．０１）；去除肿瘤负荷，可降低血清ｓＩＬ－２Ｒ和升高ＩＬ－２诱生水平。

关键词：白细胞介素白细胞胃肿瘤单个核细胞

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吗啡依赖大鼠模型的建立

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第二军医大学学报 1997年第1期18卷 81-82页

作者：纪家涛王新华由振东韩同钦第二军医大学长征医院麻醉科上海200003 第二军医大学基础医学部神经生物学教研室青岛市立医院医务科

吗啡依赖已成为人们所关注的社会问题，解决吗啡类药物依赖，不仅是社会的当务之急，也对神经生物学的发展有着重要意义。吗啡依赖的特点是强迫性寻求用药［‘：，它贯穿整个成病过程，其他特点是戒断综合征、复发性和耐受性。吗啡依赖... 详细信息

吗啡依赖已成为人们所关注的社会问题，解决吗啡类药物依赖，不仅是社会的当务之急，也对神经生物学的发展有着重要意义。吗啡依赖的特点是强迫性寻求用药［‘：，它贯穿整个成病过程，其他特点是戒断综合征、复发性和耐受性。吗啡依赖动物模型的建立为研究吗啡依赖提供了便利。1材料和方法1．l动物分组雄性SD大鼠（中国科学院上海动物繁育场），体重180～220g，随机分为实验组和对照组，自由饮水、摄食。1．2方法实验组大鼠按逐日递增原则，腹腔内注射盐酸吗啡（沈阳第一制药厂），连续给药至第12天（表l）。于第12天以5mg／kg纳络酮诱发戒断症状，给予评分。表回吗啡给药剂量对照组大鼠以同样的时间程序，给予等体积生理

关键词：吗啡依赖动物模型

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N-硝基-L-精氨酸对阿片类物质耐受及依赖形成的影响

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中华麻醉学杂志 2003年第6期23卷 451-453页

作者：万兴旺黄矛何雅琴万莉李万亥由振东路长林第二军医大学东方肝胆外科医院国际合作信号转导研究中心上海市200438 第二军医大学基础医学部新药评价中心第二军医大学长海医院药学部第二军医大学药学院药理学教研室第二军医大学基础医学部神经生物学教研室

目的研究N-硝基-L-精氨酸(NO2Arg)对阿片类物质耐受及依赖形成的影响。方法采用剂量递增法建立大鼠吗啡身体依赖模型;用热辐射甩尾法测定大鼠痛阈值的方法监测吗啡耐药程度。身体依赖程度采用皮下注射纳洛酮4 mg·kg-1激发后,测定... 详细信息

目的研究N-硝基-L-精氨酸(NO2Arg)对阿片类物质耐受及依赖形成的影响。方法采用剂量递增法建立大鼠吗啡身体依赖模型;用热辐射甩尾法测定大鼠痛阈值的方法监测吗啡耐药程度。身体依赖程度采用皮下注射纳洛酮4 mg·kg-1激发后,测定大鼠60 min内可数和不可数戒断症状评分的方法进行;小鼠精神依赖采用条件性位置偏爱模型进行评价。结果 NO2Arg可剂量依赖性抑制吗啡耐受的形成。NO2Arg 5 mg·kg-1可显著抑制吗啡依赖大鼠大多数戒断症状。NO2Arg 4 mg·kg-1可使吗啡、二氢埃托啡精神依赖小鼠在偏爱侧停留时间分别由(6.1±2.0)min、(8.0±0.7)min显著增加到(9.3±1.1)min、(9.5±1.2)min 。结论NO2Arg可显著抑制吗啡耐受及依赖的形成,并可逆转已形成的精神依赖性。

关键词：阿片类物质依赖 N-硝基-L-精氨酸吗啡精神依赖戒断症状

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中央灰质注射升压素和催产素受体拮抗剂对刺激视上核镇痛和加强电针镇痛效应的影响

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第二军医大学学报 1996年第2期17卷 121-124页

作者：徐慰慈由振东宋朝佑王成海林葆城第二军医大学基础医学部神经生物学教研室上海市杨浦区卫生学校生理组

观察中央灰质（ＰＡＧ）在化学刺激视上核（ＳＯＮ）镇痛和加强电针（ＥＡ）镇痛中的作用。方法：ＰＡＧ内微量注射精氨酸升压素（ＡＶＰ）受体拮抗剂和催产素（ＯＴ）受体拮抗剂后，观察对ＳＯＮ内注射Ｌ－谷氨酸（Ｌ－Ｇｌｕ）引起的... 详细信息

观察中央灰质（ＰＡＧ）在化学刺激视上核（ＳＯＮ）镇痛和加强电针（ＥＡ）镇痛中的作用。方法：ＰＡＧ内微量注射精氨酸升压素（ＡＶＰ）受体拮抗剂和催产素（ＯＴ）受体拮抗剂后，观察对ＳＯＮ内注射Ｌ－谷氨酸（Ｌ－Ｇｌｕ）引起的镇痛和加强电针镇痛的影响。结果：ＰＡＧ内注射Ｖ１拮抗剂ｄ（ＣＨ２）５Ｔｙｒ（Ｍｅ）ＡＶＰ对化学刺激ＳＯＮ引起的镇痛和加强电针镇痛无影响；Ｖ１Ｖ２受体拮抗剂ｄ（ＣＨ２）５Ｔｙｒ（Ｅｔ）ＤＡＶＰ可部分抑制这种效应；ＰＡＧ内注射２００ｐｇＯＴ受体拮抗剂ｄ（ＣＨ２）５Ｔｙｒ（Ｍｅ）２，Ｏｒｎ８－ｖａｓｏｔｏｃｉｎ（ＯＶＴ）则可完全阻断这种效应。结论：ＰＡＧ参与刺激ＳＯＮ镇痛和加强电针镇痛的过程，ＳＯＮ释放的ＯＴ通过作用于ＰＡＧ内的ＯＴ和Ｖ２受体而发挥镇痛和加强电针镇痛作用。

关键词：视上核中央灰质催产素升压素镇痛

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乙型肝炎病毒x基因转基因小鼠模型的建立及培育

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第二军医大学学报 2002年第11期23卷 1184-1187页

作者：熊俊訾晓渊姚玉成金艳花李建秀朱海英王新民胡以平余宏宇第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433 长征医院病理科

目的:建立可表达乙型肝炎病毒X蛋白的HBx基因(adr亚型)转基因小鼠模型,以研究x基因的功能。方法:采用基因重组技术构建含有CMV启动子和HBx基因(adr亚型)开放阅读框(ORF)的真核表达载体pcDNA3-HBx。该载体经Sal I限制性内切酶线性化后,... 详细信息

目的:建立可表达乙型肝炎病毒X蛋白的HBx基因(adr亚型)转基因小鼠模型,以研究x基因的功能。方法:采用基因重组技术构建含有CMV启动子和HBx基因(adr亚型)开放阅读框(ORF)的真核表达载体pcDNA3-HBx。该载体经Sal I限制性内切酶线性化后,琼脂糖电泳回收目的片段,用原核显微注射法将其注射入雄原核,制备转基因小鼠。复合PCR法在基因组水平筛选HBx基因转基因小鼠founder;免疫组织化学法在蛋白水平检测X蛋白在这些小鼠中的表达情况。结果:成功构建了HBx基因真核表达载体pcDNA3-HBx。经原核显微注射法将目的片段注射入受精卵雄原核后,出生并存活了11只新生鼠,经PCR检测后获得5只founder转基因小鼠,命名为C57-TgN(HBx)SMMU。免疫组织化学检测发现5只PCR阳性小鼠的肝细胞质中均有X蛋白的表达。将这5只转基因小鼠与正常同系异性小鼠交配,进行传代培育,复合PCR法筛选阳性转基因小鼠,目前已传至F4代。结论:本研究成功地产生了稳定遗传HBx基因并表达X蛋白的转基因小鼠C57-TgN(HBx)SMMU,它将有利于体内研究HBx基因在肝细胞癌发生中的作用。

关键词：乙型肝炎病毒 X蛋白转基因小鼠 HBx基因

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成体小鼠肝干细胞的长期体外培养和体内分化研究

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第二军医大学学报 2002年第11期23卷 1166-1168页

作者：苏娟朱海英李文林姚玉成刘红王新民胡以平余宏宇第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433 长征医院病理科

目的:从成体小鼠肝脏中分离培养肝干细胞,并分析其分化潜能。方法:利用门静脉灌流消化法从成体小鼠肝脏中分离细胞并进行体外长期培养,通过脾结节形成实验对其增殖和分化潜能作进一步分析。结果:从成体小鼠肝脏中分离的细胞呈集落样生长... 详细信息

目的:从成体小鼠肝脏中分离培养肝干细胞,并分析其分化潜能。方法:利用门静脉灌流消化法从成体小鼠肝脏中分离细胞并进行体外长期培养,通过脾结节形成实验对其增殖和分化潜能作进一步分析。结果:从成体小鼠肝脏中分离的细胞呈集落样生长,不仅可稳定传代,而且移植至经致死剂量照射的小鼠体内能够形成脾结节,结节中含有肝细胞和胆管上皮细胞特异性标志的细胞。结论:成体小鼠肝脏中存在具有多潜能性的肝干细胞,该细胞的体外成功培养为肝干细胞生物学特性的研究及肝干细胞的应用奠定了基础。

关键词：肝干细胞体外培养体内分化

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