检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 1999年第5期20卷 283-285页

作者：陈世敏蔡在龙缪明永刘鹏飞毛积芳第二军医大学基础医学部生物化学教研室第二军医大学东方肝胆外科研究所

目的：克隆大鼠肝脏再生增强因子（ＡＬＲ）ｃＤＮＡ，并对其序列进行分析。方法：建立大鼠２／３肝切除模型，从再生肝组织中提取总ＲＮＡ，利用ＲＴ－ＰＣＲ技术扩增出大鼠ＡＬＲｃＤＮＡ，亚克隆于ｐＧＥＭ－Ｔ载体，并将ＤＮＡ序列... 详细信息

目的：克隆大鼠肝脏再生增强因子（ＡＬＲ）ｃＤＮＡ，并对其序列进行分析。方法：建立大鼠２／３肝切除模型，从再生肝组织中提取总ＲＮＡ，利用ＲＴ－ＰＣＲ技术扩增出大鼠ＡＬＲｃＤＮＡ，亚克隆于ｐＧＥＭ－Ｔ载体，并将ＤＮＡ序列及其推测的氨基酸序列与Ｇｅｎｅｂａｎｋ作同源性比较。结果和结论：克隆到大鼠ＡＬＲｃＤＮＡ，经核苷酸序列测定证实序列完全正确，其核苷酸序列没有任何突变，它与酵母ＥＲＶ１ｃＤＮＡ有较高的同源性，核苷酸序列同源性达５４．９９％，氨基酸序列同源性达４７．０１％，并发现氨基酸序列中含有锌指蛋白结合区域。

关键词：肝脏再生序列分析再生增强因子 ALR cDNA

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TGFβ_1基因对肝癌细胞癌基因表达的体外观察

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第二军医大学学报 1999年第5期20卷 292-294,F003页

作者：封岩曹广文张晓琴高峰孔宪涛第二军医大学长征医院临床免疫中心第二军医大学基础医学部微生物学教研室

目的：观察转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）转入对人肝癌细胞系癌基因表达的影响。方法：ｐＬ（ＴＧＦβ１）ＳＮ和相应重组病毒上清用脂质体转染包装细胞及肝癌细胞，经Ｇ４１８筛选后，进行免疫组化染色，观察癌基因蛋白表达的改变。... 详细信息

目的：观察转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）转入对人肝癌细胞系癌基因表达的影响。方法：ｐＬ（ＴＧＦβ１）ＳＮ和相应重组病毒上清用脂质体转染包装细胞及肝癌细胞，经Ｇ４１８筛选后，进行免疫组化染色，观察癌基因蛋白表达的改变。结果：提取的ＴＧＦβ１ｃＤＮＡ连接物经酶切鉴定，证明有正向插入及反向插入两类。病毒上清ＴＧＦβ１含量在１６～４１ｎｇ／ｍｌ，套式ＰＣＲ后均出现２９０ｂｐ条带。转基因后肝癌细胞癌基因蛋白免疫组化染色结果：ｃ－ｍｙｃ，ｃ－ｍｅｔ及ｒａｓ癌基因表达，反向ＴＧＦβ１转入者为（＋）～（），而正向转入均为（－）。免疫组化检测其ＴＧＦβ１表达蛋白，空白对照染色（±），正向则为（）。结论：正向插入的ＴＧＦβ１ｃＤＮＡ可使癌基因ｃ－ｍｙｃ，ｃ－ｍｅｔ及ｒａｓ表达减少，提示它在体外对肝癌细胞具有负调控作用。

关键词：肝肿瘤癌基因转化生长因子 TGFβ1

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人肾细胞癌细胞的原代培养及癌基因表达初步分析

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第二军医大学学报 1999年第5期20卷 280-282页

作者：张晓琴曹广文侯建国戚中田第二军医大学基础医学部微生物学教研室第二军医大学长海医院泌尿外科

目的：研究人肾细胞癌（ＲＣＣ）原代细胞生物学特性及其癌基因的表达情况。方法：应用改良的原代肿瘤细胞分离法分离培养７例人ＲＣＣ原代细胞。应用染色体核型分析和免疫组化方法，分析原代细胞核型以及癌基因与抑癌基因的表达。结果... 详细信息

目的：研究人肾细胞癌（ＲＣＣ）原代细胞生物学特性及其癌基因的表达情况。方法：应用改良的原代肿瘤细胞分离法分离培养７例人ＲＣＣ原代细胞。应用染色体核型分析和免疫组化方法，分析原代细胞核型以及癌基因与抑癌基因的表达。结果：用本法培养的原代细胞比其他常规方法所得细胞既多且纯。所培养的人ＲＣＣ原代细胞的癌基因表达分析发现ｂｃｌ－２，ｃ－ｅｒｂＢ－２，ｃ－ｍｅｔ，表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）有轻度至中度表达，而ｐ５３没有表达。结论：人ＲＣＣ原代培养及其癌基因表达检测，为应用原代ＲＣＣ所开展ｅｘｖｉｖｏ的ＲＣＣ基因治疗打下了初步的基础。

关键词：肾肿瘤原代培养癌基因肾细胞癌

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Ⅰ型常染色体显性遗传多囊肾病基因诊断与基因突变情况的调查

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第二军医大学学报 1999年第3期20卷 137-141页

作者：王立明闵志廉朱有华齐隽缪为民陈建鹤焦炳华第二军医大学长征医院泌尿外科第二军医大学基础医学部微生物学教研室

（１）建立Ⅰ型常染色体显性遗传多囊肾病（ＡＤＰＫＤⅠ）的基因诊断方法；（２）寻找具有普遍意义的突变方式，以优化基因诊断。方法：（１）采用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交和ＰＣＲ方法，调查ＡＤＰＫＤⅠ基因３′端单拷贝区突变情况；（... 详细信息

（１）建立Ⅰ型常染色体显性遗传多囊肾病（ＡＤＰＫＤⅠ）的基因诊断方法；（２）寻找具有普遍意义的突变方式，以优化基因诊断。方法：（１）采用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交和ＰＣＲ方法，调查ＡＤＰＫＤⅠ基因３′端单拷贝区突变情况；（２）ＰＣＲ扩增分析微卫星ＳＭ７。结果：将ＡＨ４与１６例患者的基因组ＤＮＡ进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交后，均显示有正常的１５ｋｂ的杂交片段。对２７例患者ＡＤＰＫＤⅠ基因３′端ＡＨ４和ＪＨ１４两探针间的５．７２ｋｂ基因组ＤＮＡ行ＰＣＲ扩增后，未发现５．５ｋｂ基因组ＤＮＡ缺失。１０９名正常人ＳＭ７ＰＣＲ扩增显示，其多态信息含量（ＰＩＣ）值为０．７６，３个家系的ＳＭ７等位片段与疾病基因连锁关系明确。结论：在汉族中：（１）ＡＤＰＫＤⅠ基因３′端单拷贝区无常见性大片段基因组ＤＮＡ缺失类突变；（２）ＳＭ７所含ＰＩＣ较高，用其可在７０％～８０％的ＡＤＰＫＤⅠ家系中作出基因诊断。

关键词：常染色体显性囊性肾基因诊断基因突变

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三种心肌保护方法对长时间停搏心脏功能恢复的影响

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第二军医大学学报 1999年第8期20卷 554-556页

作者：陈龙胡寿鹏张宝仁杨玲陈克明第二军医大学长海医院胸心外科上海200433 第二军医大学基础医学部生物化学教研室

目的：对比观察间断灌注冷血、持续灌注冷血及持续灌注温血心脏停搏液对长时间停搏心脏心室功能的保护作用。方法：利用猫体外循环模型，分别用间断冷血、持续冷血及持续温血停搏液保护心肌，测定其心功能、心肌酶释放及丙二醛（ＭＤ... 详细信息

目的：对比观察间断灌注冷血、持续灌注冷血及持续灌注温血心脏停搏液对长时间停搏心脏心室功能的保护作用。方法：利用猫体外循环模型，分别用间断冷血、持续冷血及持续温血停搏液保护心肌，测定其心功能、心肌酶释放及丙二醛（ＭＤＡ）含量变化。结果：心脏停搏１８０ｍｉｎ复灌６０ｍｉｎ时，间断冷血及持续冷血停搏液灌注组心室功能明显下降，心肌酶释放及ＭＤＡ含量增加，尤以前者为甚，而持续温血停搏液灌注组心室功能在复灌后其测值接近停搏前水平，心肌酶释放及ＭＤＡ含量亦出现类似变化。结论：持续灌注温血心脏停搏液在心脏长时间的停搏过程中可提供充足的血供，是一种理想的心肌保护方法，特别适用于需长时间停搏及高危心脏病患者的术中心肌保护。

关键词：心肌保护体外循环温血停搏液

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早期补液对烧伤大鼠心脏心肌细胞及血管内皮细胞的影响

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第二军医大学学报 1999年第10期20卷 780-782页

作者：沙继宏叶煦亭唐洪泰郑尊杨勇骥第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433 第二军医大学长海医院烧伤科

目的：研究烧伤后大鼠心脏心肌细胞、血管内皮细胞（ＥＣ）的变化及早期补液对它们的影响。方法：应用了常规电镜技术及过氧化氢细胞化学方法。结果：烧伤后０．５ｈ血管ＥＣ肿胀，烧伤后４ｈ血管ＥＣ可向血管腔伸出较长突起，血管... 详细信息

目的：研究烧伤后大鼠心脏心肌细胞、血管内皮细胞（ＥＣ）的变化及早期补液对它们的影响。方法：应用了常规电镜技术及过氧化氢细胞化学方法。结果：烧伤后０．５ｈ血管ＥＣ肿胀，烧伤后４ｈ血管ＥＣ可向血管腔伸出较长突起，血管腔外有明显渗出，心肌细胞线粒体明显肿胀。过氧化氢细胞化学反应为血管ＥＣ血管腔面有较多致密沉积物。烧伤后８ｈ心肌细胞及血管ＥＣ损伤进一步加重。补液组烧伤后１，４，８ｈ，心肌细胞及血管ＥＣ损伤明显减轻，过氧化氢细胞化学反应电子致密沉积物也较少。烧伤后８ｈ细胞损伤开始恢复，血管ＥＣ出现大量吞饮泡，血管外液体重吸收。结论：烧伤后心肌细胞及血管ＥＣ发生损伤，早期补液对损伤有明显减轻作用。

关键词：烧伤血管内皮细胞补液大鼠心肌细胞

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大鼠肝再生过程中线粒体氧化磷酸化的调控

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中国病理生理杂志 1999年第5期15卷 398-401页

作者：缪明永蔡在龙刘鹏飞王学敏毛积芳陈克明第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室第二军医大学东方肝胆外科医院

目的：探讨肝部分切除后肝再生过程中线粒体能量代谢的调控。方法：用雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠施行肝部分切除复制肝再生模型，肝部分切除后分别观察０５、１、２、４和７ｄ５个肝再生组以及５个相应的对照组，差速离心法分离肝线粒体并... 详细信息

目的：探讨肝部分切除后肝再生过程中线粒体能量代谢的调控。方法：用雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠施行肝部分切除复制肝再生模型，肝部分切除后分别观察０５、１、２、４和７ｄ５个肝再生组以及５个相应的对照组，差速离心法分离肝线粒体并用氧电极极谱法测定其氧化磷酸化活性。结果：肝部分切除后肝再生过程中线粒体呼吸控制率（ＲＣＲ）明显高于相应对照组，其中肝部分切除后０５ｄ和４ｄ为二个峰值，７ｄ时降至对照组水平，早期ＲＣＲ的升高主要是Ｒ３升高的所致，１ｄ后ＲＣＲ升高是Ｒ４下降所致。磷氧比值（Ｐ／Ｏ）的变化类似于ＲＣＲ。结论：肝部分切除后肝再生过程中线粒体通过氧化磷酸化偶联增强来适应肝再生的能量需求，这种增强机制很可能主要是通过降低线粒体内膜通透性实现的。

关键词：肝再生线粒体氧化磷酸化大鼠

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血透患者血清庚型肝炎病毒RNA及抗体检测

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第二军医大学学报 1999年第5期20卷 286-288页

作者：许臻缪晓辉戚中田崔晓红潘卫朱诗应第二军医大学基础医学部微生物学教研室第二军医大学长征医院肾内科第二军医大学长征医院感染科

目的：了解血透患者庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）感染率及与其他肝炎病毒重叠感染的情况。方法：收集５７份血透患者血清标本，根据ＨＧＶＲＮＡ保守片段５′非编码区序列，设计了两对引物，采用逆转录巢式ＰＣＲ扩增ＨＧＶＲＮＡ，以及ＥＩ... 详细信息

目的：了解血透患者庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）感染率及与其他肝炎病毒重叠感染的情况。方法：收集５７份血透患者血清标本，根据ＨＧＶＲＮＡ保守片段５′非编码区序列，设计了两对引物，采用逆转录巢式ＰＣＲ扩增ＨＧＶＲＮＡ，以及ＥＩＡ法检测ＨＧＶＩｇＧ抗体。同时还检测了ＨＢＶＤＮＡ及ＨＣＶＩｇＧ抗体。结果：５７份标本中，４份ＨＧＶＲＮＡ阳性（７．０％），２份ＨＧＶＩｇＧ抗体阳性（３．５％）。ＨＧＶＲＮＡ与ＨＧＶＩｇＧ抗体呈“分离”现象。４份ＨＧＶＲＮＡ阳性标本中２份为ＨＢＶＤＮＡ阳性，２份为ＨＣＶＩｇＧ抗体阳性；其中１份标本ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＩｇＧ抗体均为阳性。结论：血透患者ＨＧＶ感染率高于健康献血员和正常人群，ＨＧＶ可与ＨＢＶ和ＨＣＶ重叠感染。

关键词：血液透析庚型肝炎病毒重叠感染 RNA

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献血员中TT病毒感染的检测及序列分析

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第二军医大学学报 1999年第9期20卷 605-607,F003页

作者：任浩钱宝华朱分禄倪武戚中田第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433 第二军医大学长海医院血库第二军医大学长征医院感染科

目的：研究ＡＬＴ正常的献血员中ＴＴＶ（ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｄｖｉｒｕｓ）的感染情况，探讨ＴＴＶ感染的传播途径和致病性。方法：设计ＴＴＶ保守区域的特异性引物，聚合酶链反应（Ｐ ... 详细信息

目的：研究ＡＬＴ正常的献血员中ＴＴＶ（ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｄｖｉｒｕｓ）的感染情况，探讨ＴＴＶ感染的传播途径和致病性。方法：设计ＴＴＶ保守区域的特异性引物，聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法检测１２０例ＡＬＴ正常的献血员，对１例ＴＴＶＤＮＡ阳性标本（ＴＴＶＤ０２６）进行ＰＣＲ产物测序，并与已知ＴＴＶ核苷酸序列比较同源性。结果：１２０例ＡＬＴ正常献血员中有２０例为ＴＴＶＤＮＡ阳性，感染率为１６．７％。同源性分析表明ＴＴＶＤ０２６与ＴＡ２７８，ＧＨ１，ＴＴＶＣＨＮ１和ＴＴＶＣＨＮ２的核苷酸同源性分别为９９％，９９％，９９％和８９％。结论：ＡＬＴ正常的献血员中存在ＴＴＶ的感染；ＴＴＶＤ０２６与ＴＴＶＴＡ２７８，ＧＨ１，ＴＴＶＣＨＮ１和ＴＴＶＣＨＮ２可能属于同一个基因型；输血可能是ＴＴＶ传播的主要途径。

关键词：肝炎病毒 TT病毒序列分析献血员 DNA病毒

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血管内皮细胞生长因子在哺乳动物细胞的表达

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第二军医大学学报 1999年第10期20卷 777-779页

作者：顾洪蔡在龙陈少萍邹鲁峰宋春桥毛积芳第二军医大学基础医学部生物化学教研室上海200433 第二军医大学长海医院心血管内科

目的：本实验试图构建具有生物学活性的ＶＥＧＦ真核表达载体，为ＶＥＧＦ基因治疗提供载体。方法：将已获得的ｈＶＥＧＦ１６５ｃＤＮＡ克隆到ＧＳＴ融合表达载体，构建原核表达质粒，转染大肠杆菌ＤＨ５α，ＩＰＴＧ诱导表达，Ｗｅ... 详细信息

目的：本实验试图构建具有生物学活性的ＶＥＧＦ真核表达载体，为ＶＥＧＦ基因治疗提供载体。方法：将已获得的ｈＶＥＧＦ１６５ｃＤＮＡ克隆到ＧＳＴ融合表达载体，构建原核表达质粒，转染大肠杆菌ＤＨ５α，ＩＰＴＧ诱导表达，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ鉴定表达产物。在此基础上构建真核表达载体ｐｃＤＮＡ３／ｈＶＥＧＦ１６５，脂质体介导转染ＣＨＯ－Ｋ１细胞，Ｇ－４１８筛选，Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ，Ｗｅｓｔ－ｅｒｎｂｌｏｔ分别检测其在细胞内的转录和表达情况，３Ｈ－ＴｄＲ掺入法检测表达蛋白的活性。结果：实验组的Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ出现特异性条带，而对照组在相应部位未出现条带。实验组的大鼠心肌血管内皮细胞３Ｈ－ＴｄＲ掺入率明显高于对照组（Ｐ＜０．００１）。结论：本实验所构建的ＶＥＧＦ真核表达质粒能够在真核细胞内获得表达，其表达产物具有血管内皮细胞增殖刺激活性。

关键词：血管内皮细胞生长因子哺乳动物基因治疗

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