检索结果-内蒙古大学图书馆

NKG2A-HLA-E轴介导NK细胞应答在病毒感染性疾病中的作用及机制研究进展

细胞与分子免疫学杂志 2024年第3期40卷 273-278页

作者：薛鳗玲许晓悦张希越唐康张宇丝张春梅庄然金伯泉张赟岳昌武马樱延安大学医学院陕西延安716000 空军军医大学基础医学院免疫学教研室陕西西安710032

自然杀伤(NK)细胞主要通过迅速释放细胞毒性介质以及细胞因子直接杀伤病毒感染的靶细胞。NK细胞表面抑制性和活化性受体的平衡以及靶细胞上相应配体的表达均参与调控NK细胞的杀伤功能。其中NK细胞2组成员A(NKG2A)是NK细胞上备受关注的... 详细信息

自然杀伤(NK)细胞主要通过迅速释放细胞毒性介质以及细胞因子直接杀伤病毒感染的靶细胞。NK细胞表面抑制性和活化性受体的平衡以及靶细胞上相应配体的表达均参与调控NK细胞的杀伤功能。其中NK细胞2组成员A(NKG2A)是NK细胞上备受关注的抑制性受体之一,通过与其配体人类白细胞抗原E(HLA-E)的相互作用,可抑制NK细胞对自身正常组织细胞的杀伤活性。研究发现病毒感染细胞表面HLA-E表达上调,并且可与病毒蛋白来源的多肽结合形成复合物,通过与NKG2A的相互作用调控NK细胞功能,从而参与病毒感染性疾病发病过程。本文总结了NKG2A与HLA-E分子互作特点,以及NKG2A-HLA-E轴参与调控NK细胞的功能机制,有助于了解NK细胞在病毒感染性疾病中的重要作用。

关键词：自然杀伤细胞2组成员A(NKG2A) 人类白细胞抗原E(HLA-E) 自然杀伤(NK)细胞病毒感染性疾病综述

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嵌合抗原受体T淋巴细胞免疫疗法在原发性肝癌中的应用

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临床肝胆病杂志 2022年第10期38卷 2387-2390页

作者：李康伟尉丁张若涵李霄陶开山第四军医大学研究生院西安710032 第四军医大学基础医学院细胞生物学教研室西安710032 第四军医大学西京医院肝胆胰脾外科西安710032

原发性肝癌具有恶性程度高、进展快、易复发转移和病死率高等特点,因此大多数患者就诊时已发生肝内或肝外转移,失去手术治疗机会。嵌合抗原受体T淋巴细胞(CAR-T)免疫疗法已在B细胞急性淋巴性白血病治疗中取得了较好的效果,其在原发性肝... 详细信息

原发性肝癌具有恶性程度高、进展快、易复发转移和病死率高等特点,因此大多数患者就诊时已发生肝内或肝外转移,失去手术治疗机会。嵌合抗原受体T淋巴细胞(CAR-T)免疫疗法已在B细胞急性淋巴性白血病治疗中取得了较好的效果,其在原发性肝癌、胰腺癌、胃癌以及前列腺癌等实体瘤中的应用也陆续开展了临床试验。本文综述了CAR-T免疫疗法在原发性肝癌临床试验中的疗效,并讨论了其在临床应用中需攻克的难题,如缺乏适宜的肿瘤靶点、肿瘤微环境对CAR-T的抑制作用以及CAR-T对肿瘤组织的浸润性差等,以期为临床研究提供参考。

关键词：肝肿瘤免疫疗法嵌合抗原受体T淋巴细胞

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正常人外周血中性粒细胞表型和功能鉴定

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细胞与分子免疫学杂志 2024年第10期40卷 865-871页

作者：王时佳张宇丝马樱张春梅张圆左佳佳许晓悦庄然张赟空军军医大学基础医学院免疫学教研室陕西西安710032 延安大学医学院陕西延安716000

目的正常人外周血中性粒细胞的表型和功能鉴定。方法采用密度梯度离心法和红细胞裂解方法分离正常人外周血中性粒细胞,利用多重免疫荧光染色和流式细胞术分析中性粒细胞表面标记,及其在中性粒细胞亚群中的分布特征。通过pHrodo^(TM) Gre... 详细信息

目的正常人外周血中性粒细胞的表型和功能鉴定。方法采用密度梯度离心法和红细胞裂解方法分离正常人外周血中性粒细胞,利用多重免疫荧光染色和流式细胞术分析中性粒细胞表面标记,及其在中性粒细胞亚群中的分布特征。通过pHrodo^(TM) Green *** BioParticles^(TM)吞噬实验检测中性粒细胞吞噬功能。利用Wright-Giemsa染色和免疫荧光染色,分别在光学显微镜和激光共聚焦显微镜下,观察体外刺激中性粒细胞产生中性粒细胞胞外陷阱(NET)的形态学特征。结果正常人外周血中性粒细胞高表达表面标记CD66b、CD11b和CD16,且CD16分子表达百分率高于CD11b。中性粒细胞可根据CD16分子表达密度不同分为CD16 hi、CD16 int和CD16 lo三个亚群,其中CD16 hi细胞亚群的百分率远高于CD16 int细胞亚群和CD16 lo细胞亚群。中性粒细胞亚群均表达抑制性分子程序性死亡配体1(PD-L1),但在三个亚群的表达无明显差异;抑制性分子CD300LD在CD16 hi细胞亚群的表达明显高于其在CD16 int细胞亚群和CD16 lo细胞亚群中的表达。中性粒细胞亚群均高表达黏附分子CD62L,且三个亚群无明显差异。pHrodo^(TM) Green *** BioParticles^(TM)在CD16 int亚群上的平均荧光强度(MFI)值高于其在CD16 hi和CD16 lo亚群上的MFI值,且其在CD16 hi亚群的MFI值高于CD16 lo亚群。Wright-Giemsa染色结果显示,正常人外周血中性粒细胞多呈现分叶核形态;经佛波酯(PMA)刺激后,细胞核不再呈现分叶状态,并产生网状结构。激光共聚焦结果显示,中性粒细胞经PMA刺激后,中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)释放增加,并呈现网状结构。结论正常人外周血中性粒细胞存在异质性,不同中性粒细胞亚群表面标记分子的表达存在差异,可能发挥不同的免疫功能;PMA可刺激中性粒细胞产生NET,不同中性粒细胞亚群产生NET能力的差异则有待进一步研究。

关键词：中性粒细胞免疫表型吞噬作用中性粒细胞胞外陷阱

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间充质干细胞在骨免疫中的研究进展

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细胞与分子免疫学杂志 2024年第10期40卷 924-929页

作者：李怡周文静陈丽华殷松娜方亮延安大学医学院陕西延安716000 空军军医大学基础医学院免疫学教研室陕西西安710032

间充质干细胞(MSC)具有增殖、多向分化潜能和免疫调节功能。目前已经在多种组织中发现并分离出MSC,并可通过体外培养、诱导得到具有生物活性的细胞及其产物。更重要的是,MSC还具有免疫调节功能,在干细胞移植治疗骨损伤相关疾病中具有重... 详细信息

间充质干细胞(MSC)具有增殖、多向分化潜能和免疫调节功能。目前已经在多种组织中发现并分离出MSC,并可通过体外培养、诱导得到具有生物活性的细胞及其产物。更重要的是,MSC还具有免疫调节功能,在干细胞移植治疗骨损伤相关疾病中具有重要作用。因此,本文从MSC本身生物学特性和相关功能的角度,讨论了其在骨免疫中的作用及其治疗骨损伤疾病的机制,这将有助于全面了解MSC在生理病理状态下的功能。

关键词：间充质干细胞(MSC) 骨免疫免疫调节治疗机制综述

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构建治疗非酒精性脂肪性肝病的TREM2慢病毒载体

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空军军医大学学报 2024年第6期45卷 609-616页

作者：魏莉邵思佳芶恺琳高春辰秦鸿雁空军军医大学基础医学院医学遗传与发育生物学教研室陕西西安710032

目的构建TREM2不同截断体的慢病毒治疗载体,观察其在体外非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)条件下对AML12肝细胞的影响,为后续靶向巨噬细胞的治疗奠定理论基础。方法通过慢病毒包装的方式建立TREM2或可溶性TREM2(sTREM2)稳定转染AML12肝细胞系... 详细信息

目的构建TREM2不同截断体的慢病毒治疗载体,观察其在体外非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)条件下对AML12肝细胞的影响,为后续靶向巨噬细胞的治疗奠定理论基础。方法通过慢病毒包装的方式建立TREM2或可溶性TREM2(sTREM2)稳定转染AML12肝细胞系,利用qRT-PCR技术、Western blotting技术、流式细胞术检测转染效率,利用免疫荧光染色技术检测TREM2或sTREM2的表达和细胞定位;利用流式细胞术检测TREM2或sTREM2对体外NAFLD条件下细胞凋亡的影响和对静息态下细胞周期的影响;利用油红O染色观察脂质沉积变化情况。结果与对照组相比,稳定转染细胞系中TREM2和sTREM2 mRNA水平明显升高,蛋白表达量明显升高,提示成功建立稳定转染细胞系。在体外NAFLD条件下,过表达TREM2可减轻AML12肝细胞的凋亡和脂质沉积(P<0.05)。静息态下,过表达TREM2或sTREM2均使得G1期细胞数目比例减少(P<0.05),S期细胞数目比例增多(P<0.01),而体外NAFLD条件均使得S期细胞数目比例减少(P<0.01),G2期细胞数目比例增多(P<0.01)。结论肝细胞中TREM2的过表达可减少肝细胞凋亡和脂质沉积,进而保护肝细胞在NAFLD条件下免受损伤。

关键词：非酒精性脂肪性肝病 AML12肝细胞 TREM2 细胞凋亡

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缺氧特异性诱导肺血管内皮细胞黏附分子3表达以促进单核细胞黏附

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陆军军医大学学报 2025年第1期47卷 51-59页

作者：孟祥琼陈婷谢宏晨杨诚忠范旭谭小玲陆军军医大学(第三军医大学)高原军事医学系寒区医学教研室重庆陆军军医大学(第三军医大学)高原军事医学系极端环境医学教育部重点实验室重庆陆军军医大学(第三军医大学)高原军事医学系高原生理学与病理学教研室重庆重庆市妇幼保健院(重庆医科大学附属妇女儿童医院)生殖医学中心重庆湖北民族大学医学部湖北恩施

目的探究细胞黏附分子3(cell adhesion molecular 3,CADM3)在肺血管内皮细胞上的表达特异性,分析其介导单核细胞特异性黏附的作用,探讨缺氧诱导肺血管外周单核细胞浸润的新机制。方法以人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endotheli... 详细信息

目的探究细胞黏附分子3(cell adhesion molecular 3,CADM3)在肺血管内皮细胞上的表达特异性,分析其介导单核细胞特异性黏附的作用,探讨缺氧诱导肺血管外周单核细胞浸润的新机制。方法以人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)、大鼠肺血管内皮细胞(rat pulmonary vascular endothelial cell,rPEC)和大鼠主动脉内皮细胞(rat aortic endothelial cell,rAEC)为细胞模型,分为常氧(21%O2)对照组和缺氧(1%O2或5%O2)处理组。通过分析缺氧8 h HUVEC的转录组数据,筛选差异表达的CADM3。通过细胞黏附实验、siRNA干扰、免疫细胞化学技术、Western blot技术和流式细胞术,分析CADM3在缺氧HUVEC与单核细胞特异性高黏附中的作用;通过铁螯合剂-去铁胺(deferoxamine,DFX)和shRNA干扰调节HIF-1α表达,分析HIF-1转录活性对CADM3表达的影响。结果缺氧HUVEC中CADM3表达增加,在缺氧6~8 h达到最高,随后下降;靶向CADM3的siRNA转染后,与阴性对照组比较,CADM3的表达降低,缺氧HUVEC和U937细胞的黏附率显著下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。与常氧(21%O2)溶剂对照组比较,DFX(100μmol/L)处理的HUVEC中HIF-1α及其靶蛋白STC2蛋白水平增加;靶向HIF-1α的shRNA转染后,与阴性对照组比较,HIF-1α及其靶蛋白STC2蛋白水平下降,但CADM3蛋白表达均无变化。缺氧rPEC中CADM3的蛋白水平及其在细胞膜上的分布均增加,与rPEC细胞比较,rAEC细胞中未检测到CADM3的蛋白表达;脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)(5μg/mL)处理后,常氧或缺氧培养的rPEC细胞中HIF-1α和CADM3表达均无明显变化。缺氧rPEC与外周血白细胞中CD11b+细胞的黏附比率最高,差异具有统计学意义(P<0.01)。抗CADM3抗体孵育后,与Blank组比较,缺氧rPEC与U937细胞的黏附显著下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论缺氧以特异地非HIF-1依赖的方式诱导肺血管内皮细胞中CADM3的表达,促进缺氧诱导的肺血管内皮细胞与单核细胞的特异性黏附。

关键词：缺氧细胞黏附肺血管内皮细胞单核细胞细胞黏附分子3

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炎症应答中去泛素化酶圆柱瘤蛋白相互作用分子筛选和验证

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空军军医大学学报 2024年第6期45卷 617-624页

作者：杨羽淇安冬洁何飞秦鸿雁空军军医大学基础医学院医学遗传与发育生物学教研室陕西西安710032

目的筛选炎症应答中与去泛素化酶圆柱瘤蛋白(CYLD)相互作用分子,探究并验证CYLD和参与NF-κB信号通路调节的桥梁蛋白14-3-3家族分子之间是否在细胞内存在相互作用。方法通过免疫共沉淀(Co-IP)飞行质谱筛选可能与CYLD相互作用分子,在不... 详细信息

目的筛选炎症应答中与去泛素化酶圆柱瘤蛋白(CYLD)相互作用分子,探究并验证CYLD和参与NF-κB信号通路调节的桥梁蛋白14-3-3家族分子之间是否在细胞内存在相互作用。方法通过免疫共沉淀(Co-IP)飞行质谱筛选可能与CYLD相互作用分子,在不同的刺激条件下诱导骨髓原代巨噬细胞向M1和M2极化,利用qRT-PCR、Western blotting技术检测CYLD及可能相互作用的候选分子14-3-3在巨噬细胞内的表达水平。结果CYLD抗体可以捕获14-3-3蛋白全部的7种亚型(β、γ、ε、η、ζ、δ、θ),提示CYLD很可能与14-3-3蛋白存在相互作用,选取质谱结果中得到特异性肽段最多的3种14-3-3亚型γ、ε、η(14-3-3γ/ε/η),检测结果显示在M0、M1、M2型巨噬细胞中CYLD和14-3-3γ/ε/η均有表达。构建了Myc-CYLD和Flag-14-3-3γ/ε/η真核过表达载体,用Flag抗体成功沉淀出CYLD蛋白,Co-IP结果提示CYLD和14-3-3γ/ε/η三种亚型均存在相互作用。免疫荧光实验显示CYLD和14-3-3在巨噬细胞内存在共定位现象。结论巨噬细胞炎症应答中CYLD和14-3-3γ/ε/η三种亚型可能存在物理上的相互作用。

关键词：巨噬细胞圆柱瘤蛋白 14-3-3亚型炎症应答

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丹皮酚抑制脂多糖诱导的小鼠BV2小胶质细胞NF-κB p65磷酸化及炎症因子表达

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细胞与分子免疫学杂志 2022年第4期38卷 289-294页

作者：贺广祥裴建明王林一史睿高小川李军杨彦玲延安大学医学院神经生物学教研室延安716000 空军军医大学基础医学院生理与病理生理学教研室细胞生物学国家重点学科陕西西安710032

目的研究丹皮酚对脂多糖(LPS)诱导的小鼠BV2小胶质细胞炎症反应的影响及其可能机制。方法体外培养小鼠BV2小胶质细胞,先给予不同浓度丹皮酚处理24 h,然后采用LPS刺激12 h激活BV2小胶质细胞。采用CCK-8法检测细胞活力,显微镜观察细胞形... 详细信息

目的研究丹皮酚对脂多糖(LPS)诱导的小鼠BV2小胶质细胞炎症反应的影响及其可能机制。方法体外培养小鼠BV2小胶质细胞,先给予不同浓度丹皮酚处理24 h,然后采用LPS刺激12 h激活BV2小胶质细胞。采用CCK-8法检测细胞活力,显微镜观察细胞形态变化,实时定量PCR检测BV2小胶质细胞肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-12和IL-6 mRNA表达,Western blot法检测BV2小胶质细胞核因子κB p65(NF-κB p65)蛋白表达及其磷酸化水平。结果丹皮酚处理可提高LPS刺激后BV2小胶质细胞活力,抑制LPS诱导的BV2小胶质细胞变大变圆的过度活化状态。丹皮酚可浓度依赖性地降低LPS诱导的小胶质细胞TNF-α、IL-1β、IL-12和IL-6 mRNA表达水平;丹皮酚不影响NF-κB p65蛋白表达,但可浓度依赖性地降低LPS诱导的NF-κB p65磷酸化水平。结论丹皮酚可抑制LPS诱导的BV2小胶质细胞NF-κB p65磷酸化及其下游炎性细胞因子的转录表达。

关键词：丹皮酚脂多糖(LPS) BV2小胶质细胞炎症反应核因子κB(NF-κB)

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Fgl2在小鼠横纹肌溶解诱导急性肾损伤中的作用及其机制

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陆军军医大学学报 2023年第12期45卷 1272-1280页

作者：邓秋苗潘鑫许桂莲钟渝彭侃夫陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院肾科重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)基础医学院免疫学教研室重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)陆军第九五八医院肾内科重庆400038

目的探讨纤维蛋白原样蛋白2(fibrinogen-like protein 2,Fgl2)在横纹肌溶解诱导急性肾损伤(rhabdomyolysis induced acute kidney injury,RM-AKI)中的作用及其机制。方法将C57BL/6背景的野生型(wild-type,WT)小鼠和同背景Fgl2基因敲除(Fgl2 knock out,Fgl2 KO)小鼠分为4组:WT小鼠生理盐水组(WT+saline)、WT小鼠RM-AKI组(WT+Gly)、Fgl2 KO小鼠生理盐水组(Fgl2 KO+saline)、Fgl2 KO小鼠RM-AKI组(Fgl2 KO+Gly),每组5只。其中,RM-AKI组予以后腿肌肉注射50%甘油(10μL/g)建模,生理盐水组以等量生理盐水替代。48 h后检测小鼠肾功能(Scr、BUN)及其肾组织病理改变;qRT-PCR检测小鼠肾组织中Fgl2、IL-6、MCP-1、TNF-α、IL-1β及IL-10的表达;免疫组化检测Fgl2、F4/80的表达;TUNEL染色观察肾组织细胞凋亡,Western blot检测Fgl2、Bcl2、Bax、cleaved Caspase-3、cleaved Caspase-9的表达。结果与WT+saline组相比,WT+Gly组小鼠肾组织Fgl2的表达显著升高。与WT+Gly组相比,Fgl2 KO+Gly组小鼠肾功能障碍程度减轻,肾组织病理损伤评分降低(P<0.05);且促炎因子IL-6、MCP-1、TNF-α、IL-1β表达降低,抑炎因子IL-10表达增加(P<0.05);巨噬细胞浸润、肾组织细胞凋亡减少,凋亡相关蛋白Bax、cleaved Caspase-3、cleaved Caspase-9表达下降,而Bcl2蛋白表达无明显差异。结论Fgl2基因敲除可抑制炎症反应、降低细胞凋亡,对小鼠横纹肌溶解诱导急性肾损伤具有保护作用。

关键词：纤维蛋白原样蛋白2 横纹肌溶解症急性肾损伤炎症反应细胞凋亡

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M1巨噬细胞回输治疗小鼠肝癌的研究

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空军军医大学学报 2024年第7期45卷 749-755页

作者：卢羿同杨嘉蒙魏调霞赵俊龙秦鸿雁空军军医大学基础医学院医学遗传与发育生物学教研室陕西西安710032

目的研究回输M1型骨髓来源的巨噬细胞(BMDMs)对原位肝肿瘤小鼠模型的治疗作用。方法①分离野生小鼠的骨髓细胞并体外诱导成BMDMs(即M0型巨噬细胞),在IFN-γ+LPS诱导下极化为M1型巨噬细胞。通过肝内接种Luciferase-Hepa1-6细胞建立原位... 详细信息

目的研究回输M1型骨髓来源的巨噬细胞(BMDMs)对原位肝肿瘤小鼠模型的治疗作用。方法①分离野生小鼠的骨髓细胞并体外诱导成BMDMs(即M0型巨噬细胞),在IFN-γ+LPS诱导下极化为M1型巨噬细胞。通过肝内接种Luciferase-Hepa1-6细胞建立原位小鼠肝癌模型。在接种肿瘤7 d后,经尾静脉回输PBS(对照组)、M0型和M1型巨噬细胞,通过小动物活体成像技术检测小鼠肝脏肿瘤的生长状态。接种21 d后,分离并观察肝脏肿瘤大小及称取质量,确定回输不同类型巨噬细胞对小鼠肝脏肿瘤进展的影响。利用流式细胞仪分析肝脏肿瘤癌旁组织内巨噬细胞亚群变化。②分离GFP转基因小鼠的骨髓细胞,诱导分化成M0型和M1型巨噬细胞后经尾静脉回输至肝癌小鼠体内,利用流式细胞仪及免疫荧光等方法检测回输1、3、7 d后肝脏内GFP阳性的BMDMs细胞数。结果与对照组相比,回输M0型和M1型BMDMs均促进了肝肿瘤的生长(P<0.05)。回输M0型或M1型BMDMs后,癌旁组织中枯否细胞增多,骨髓单核来源的炎性巨噬细胞增多(P<0.05)。经尾静脉回输1×10^(6)个M0型或M1型GFP+BMDMs,1 d后约3×10^(3)个细胞驻留于肝脏中,并随着时间增长逐渐减少。结论回输M1型巨噬细胞并未能达到治疗肝肿瘤的目的,反而促进肝肿瘤的生长。

关键词：肝癌巨噬细胞细胞治疗肿瘤相关巨噬细胞

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