检索结果-内蒙古大学图书馆

细胞与分子免疫学杂志 2024年第5期40卷 385-394页

作者：丁亚鑫侯诗源孙丹妮康华瑞马晓晗刘梓谕刘蓉蓉吴兴安西北大学生命科学学院陕西西安710069 空军军医大学基础医学院微生物与病原生物学教研室陕西西安710032

目的确定汉滩病毒(HTNV)可感染BEAS-2B正常人肺上皮细胞并通过转录组分析HTNV感染诱导的宿主免疫应答和代谢改变。方法采用蛋白免疫印迹、实时荧光定量PCR和免疫荧光实验检测BEAS-2B细胞内的病毒载量,并使用RNA测序技术进行转录组分析... 详细信息

目的确定汉滩病毒(HTNV)可感染BEAS-2B正常人肺上皮细胞并通过转录组分析HTNV感染诱导的宿主免疫应答和代谢改变。方法采用蛋白免疫印迹、实时荧光定量PCR和免疫荧光实验检测BEAS-2B细胞内的病毒载量,并使用RNA测序技术进行转录组分析。结果在HTNV感染的BEAS-2B细胞中,HTNV核衣壳蛋白(NP)和小片段(S)表达均随时间增加。对HTNV感染BEAS-2B细胞48 h的转录组数据分析,得到328个差异基因,基因本体论(GO)富集及京东基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析发现其差异主要集中在干扰素应答及固有免疫模式识别受体相关通路。通过蛋白质互作网络分析发现多个固有免疫应答相关基因,此外筛选到4个编码去整合素和具有血小板反应蛋白基序的金属蛋白酶的基因。通过对代谢通路分析发现3个与萜类骨架生物合成相关的基因,2个与糖酵解/糖异生相关基因和2个类固醇激素生物合成相关基因。此外,差异基因的亚细胞定位分析表明多个差异基因位于线粒体。结论HTNV能有效感染BEAS-2B细胞,可作为体外HTNV感染人肺上皮的细胞模型。生物信息学方法筛选的HTNV感染相关的差异基因及代谢通路,可为研究HTNV感染的分子机制提供理论依据。

关键词：汉滩病毒(HTNV) 生物信息学固有免疫应答代谢

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多倍体肿瘤巨细胞通过细胞衰老逃逸增强治疗抵抗

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中华病理学杂志 2024年第4期53卷 413-418页

作者：徐红何野骏曾淑俊王敏敏孟祥超苟欣张静空军军医大学第一附属医院消化系肿瘤整合防治全国重点实验室/病理科西安710032 空军军医大学基础医学院西安710032

临床相关剂量的抗癌药物均可以导致恶性肿瘤及细胞系发生细胞衰老和凋亡。衰老逃逸是细胞存活和耐药的重要机制,通过逃避凋亡和死亡,细胞重新进入到细胞周期的S期。近年来的研究表明多倍体肿瘤巨细胞(polyploid giant cancer cells,PGCC... 详细信息

临床相关剂量的抗癌药物均可以导致恶性肿瘤及细胞系发生细胞衰老和凋亡。衰老逃逸是细胞存活和耐药的重要机制,通过逃避凋亡和死亡,细胞重新进入到细胞周期的S期。近年来的研究表明多倍体肿瘤巨细胞(polyploid giant cancer cells,PGCC)有助于肿瘤的发生、侵袭、转移和治疗抵抗,这些PGCC的形成是肿瘤细胞发生衰老逃逸的前提,通过去多倍体化的方式,它们能够产生具有增殖活性的子代细胞,进而逃脱细胞衰老。本文就PGCC与细胞衰老和治疗抵抗之间的相关研究进展以及靶向PGCC的治疗策略进行概述,为探索致命性癌症的治疗干预提供一个全新的模式。

关键词：治疗抵抗治疗干预细胞衰老治疗策略抗癌药物细胞存活恶性肿瘤细胞周期

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人工智能在乳房外Paget病病理诊断及鉴别中的应用

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陆军军医大学学报 2024年第16期46卷 1897-1905页

作者：朱一维吴哲陈星材粘永健罗娜张恋吴毅翟志芳陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院皮肤科重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)生物医学工程与影像医学系数字医学教研室重庆400038 重庆医科大学附属第三医院皮肤科重庆401120

目的建立乳房外Paget病(extramammary Paget’s disease,EMPD)组织病理诊断的人工智能(artificial intelligence,AI)诊断模型,并评价其对EMPD诊断及鉴别诊断的效能。方法收集2003年9月至2023年2月于陆军军医大学第一附属医院皮肤科就诊... 详细信息

目的建立乳房外Paget病(extramammary Paget’s disease,EMPD)组织病理诊断的人工智能(artificial intelligence,AI)诊断模型,并评价其对EMPD诊断及鉴别诊断的效能。方法收集2003年9月至2023年2月于陆军军医大学第一附属医院皮肤科就诊并行皮肤组织活检术,且病理明确诊断为EMPD、Bowen病、皮肤鳞状细胞癌(squamous cell carcinoma,SCC)以及表皮增生肥厚为主要病理特征的非肿瘤性皮肤病患者的病理资料。以EMPD为主要研究对象,与Bowen病、SCC以及非肿瘤性皮肤病病理图像进行鉴别,通过ResNet101、DenseNet121深度学习神经网络对4种疾病的组织病理进行分类诊断并评价模型效能。结果ResNet101诊断模型诊断EMPD、Bowen病、SCC及非肿瘤性皮肤病的20倍组织病理图像的AUC值分别为0.97、0.98、1.00、0.96,准确度为(0.925±0.011);40倍组织病理图像AUC值分别为1.00、0.99、1.00、0.97,准确度为(0.943±0.017)。DenseNet121诊断模型诊断EMPD、Bowen病、SCC及非肿瘤性皮肤病的20倍组织病理图像的AUC值分别为0.98、0.95、0.99、1.00,准确度为(0.912±0.034);40倍组织病理图像AUC值分别为0.99、0.96、1.00、1.00,准确度为(0.971±0.012)。表示分类诊断模型能够将EMPD与Bowen病、SCC及非肿瘤性皮肤病等的低倍组织病理图像进行有效区分。ResNet101计算量为786.6 M、参数量为4.5 M,DensNet121计算量为289.7 M、参数量为0.8 M。结论本研究建立的组织病理图像人工智能诊断模型对EMPD的诊断及鉴别诊断具有较高效能,并推荐DenseNet121为皮肤病理图片的诊断模型。

关键词：乳房外Paget病人工智能诊断模型病理诊断

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水蛭素-草酸二维生素E酯脂质体的构建及其体外抗凝作用评价

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陆军军医大学学报 2024年第21期46卷 2475-2484页

作者：杨清华张建祥周振华陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院神经内科重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)药学与检验医学系药剂学教研室重庆400038

目的基于维生素E,构建同时具有过氧化氢清除功能和抗凝作用的脂质体,探讨其是否可以作为急性缺血性脑卒中的治疗方式并评价其体外抗凝作用。方法利用过氧草酸酯键将两分子维生素E(生育酚,VE)化学键合,得到目标化合物草酸二维生素E酯(oxa... 详细信息

目的基于维生素E,构建同时具有过氧化氢清除功能和抗凝作用的脂质体,探讨其是否可以作为急性缺血性脑卒中的治疗方式并评价其体外抗凝作用。方法利用过氧草酸酯键将两分子维生素E(生育酚,VE)化学键合,得到目标化合物草酸二维生素E酯(oxalate vitamin E,OVE);通过酰胺化反应将抗凝药物水蛭素(hirudin)连接到亚油酸(linoleic acid,LA)得到抗凝目标单元亚油酸-水蛭素(LA-hirudin,LH);并通过红外光谱、核磁等手段对所合成的产物进行结构表征。采用薄膜分散法制备水蛭素-草酸二维生素E酯脂质体(hirudin-OVE liposome,HOL),采用激光粒度仪(DLS)和透射电子显微镜(TEM)等方法对脂质体进行表征。选取小鼠脑微血管内皮细胞(mouse brain-derived endothelial cells,bEnd3)和人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)进行细胞实验。通过ELISA测定过氧化氢以及细胞炎症因子TNF-α、IL-6和IL-1β水平,以评价脂质体对细胞氧化应激和炎症水平的影响。采用细胞计数实验(CCK-8)和细胞增殖检测实验(Edu)考察脂质体对细胞数目和细胞增殖情况的影响。取小鼠全血,考察所制备脂质体的抗凝作用。结果核磁结果表明成功合成了OVE,红外谱图结果表明水蛭素和亚油酸成功键合得到亚油酸-水蛭素。透射电镜和激光粒度仪结果表明所制备的脂质体形状为类球形,且粒径分布均匀,平均粒径为161 nm。细胞实验表明,脂质体能够显著抑制模型细胞分泌过氧化氢和炎症因子,具有明显的抗氧化、抗炎作用(P<0.05)。细胞计数实验和细胞增殖检测实验结果证明脂质体能够抑制炎症导致的细胞数目减少、缓解LPS刺激所引起的细胞增殖抑制(P<0.01)。抗凝实验结果表明,脂质体能够显著抑制CaCl 2诱导的凝血反应(P<0.01)。结论基于维生素E成功合成过氧化氢清除性材料OVE,并以抗凝药物水蛭素和OVE制备OVE抗凝脂质体(HOL),该脂质体在细胞层面上具有良好的抗氧化、抗炎效果,并具有显著的抗凝作用。

关键词：过氧化氢清除性脂质体抗炎抗氧化抗凝作用草酸二维生素E酯水蛭素

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芳香烃受体(AhR)激活改善LPS诱导的小鼠抑郁样行为（英文）

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生理学报 2024年第3期76卷 353-364页

作者：王敏源李佳美吴依林张懿胡婷苏文君冯吉峰蒋春雷海军军医大学心理与精神卫生学系应激医学研究室海军第九七一医院神经内科海军军医大学心理与精神卫生学系精神医学教研室

芳香烃受体(aryl hydrocarbon receptor, AhR)在调节氧化应激和免疫反应中的作用越来越被人们所认识，但它在抑郁症中的作用和潜在机制仍不明了。本研究旨在研究内源性AhR配体6-甲酰基吲哚并[3,2-b]咔唑(6-formylindolo[3,2-b]carbazole... 详细信息

芳香烃受体(aryl hydrocarbon receptor, AhR)在调节氧化应激和免疫反应中的作用越来越被人们所认识，但它在抑郁症中的作用和潜在机制仍不明了。本研究旨在研究内源性AhR配体6-甲酰基吲哚并[3,2-b]咔唑(6-formylindolo[3,2-b]carbazole,FICZ)对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的小鼠抑郁症模型的作用及其机制。FICZ (50 mg/kg)处理后，雄性C57BL/6J小鼠腹膜内注射LPS，并在24 h后进行行为学试验。用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)检测小鼠海马和血清中炎症细胞因子(IL-6、IL-1β和TNF-α)浓度，用qPCR和Western blot检测小鼠海马CYP1A1、AhR和NLRP3表达变化。结果显示，相比对照组，单独LPS处理显著下调小鼠海马CYP1A1 mRNA和AhR蛋白表达水平，降低小鼠糖水偏好，延长强迫游泳试验中静止不动时间，提高小鼠海马IL-6和IL-1β水平，提高小鼠血清IL-1β水平，上调小鼠海马NLRP3 mRNA和蛋白表达水平，而FICZ可显著逆转LPS的上述作用。以上结果提示，AhR激活可减弱与抑郁症相关的炎症反应，其机制是下调炎症小体关键成分NLRP3的表达。本研究为AhR在抑郁症发病机制中的作用提供了新的见解，提示AhR是治疗抑郁症的潜在靶点。

关键词：芳香烃受体 NLRP3炎性小体 IL-1β IL-6 抑郁症炎症

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金黄色葡萄球菌巨噬细胞胞内生存关键分泌蛋白筛选体系的构建

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陆军军医大学学报 2024年第8期46卷 815-821页

作者：石姚佳田湉熊廷蓉王于张笑恺邹全明河南大学药学院河南开封475004 陆军军医大学(第三军医大学)药学与检验医学系微生物与生化药学教研室国家免疫生物制品工程技术研究中心重庆400038 陆军军医大学士官学校基础部石家庄050081

目的建立金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,***)巨噬细胞胞内感染状态下分泌蛋白高通量筛选体系,探索金葡菌胞内生存所需关键分泌蛋白。方法利用课题组建立的金葡菌分泌蛋白真核系统表达载体库,通过DNA转染表达技术,得到能够在细... 详细信息

目的建立金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,***)巨噬细胞胞内感染状态下分泌蛋白高通量筛选体系,探索金葡菌胞内生存所需关键分泌蛋白。方法利用课题组建立的金葡菌分泌蛋白真核系统表达载体库,通过DNA转染表达技术,得到能够在细胞内表达金葡菌分泌蛋白的RAW264.7巨噬细胞阵列。金葡菌感染RAW264.7后,清除胞外菌,观察金葡菌胞内生存情况。最后通过构建相应分泌蛋白的过表达及敲除金葡菌验证筛选结果。结果通过探索RAW264.7质粒转染剂量、金葡菌感染复数(multiplicity of infection,MOI)以及感染时间,确立筛选体系的最优质粒转染剂量为1.0μg/孔、MOI为1.0、感染时间为4 h。筛选结果结合相应分泌蛋白过表达和敲除菌株验证,成功筛选出hypothetical protein、Serine protease E等分泌蛋白具有促进胞内金葡菌生存功能。结论成功构建金葡菌巨噬细胞胞内生存关键分泌蛋白筛选体系。

关键词：金黄色葡萄球菌巨噬细胞胞内感染分泌蛋白

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NcRNAs调控TAMs代谢重编程在肿瘤治疗中的研究进展

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中国免疫学杂志 2023年

作者：王赞涵孙志宏秦鸿雁胡昳旸延安大学生命科学学院中国人民解放军空军军医大学基础医学院医学遗传与发育生物学教研室

众所周知，人体内绝大多数RNA是非编码RNA（non-coding RNA，ncRNA），它能够调节细胞生理活动并塑造细胞功能。从表观遗传水平的基因沉默到转录后调控，ncRNA参与到基因调控的各个层面。研究发现，肿瘤相关巨噬细胞（tumor-associated ... 详细信息

众所周知，人体内绝大多数RNA是非编码RNA（non-coding RNA，ncRNA），它能够调节细胞生理活动并塑造细胞功能。从表观遗传水平的基因沉默到转录后调控，ncRNA参与到基因调控的各个层面。研究发现，肿瘤相关巨噬细胞（tumor-associated macrophages，TAMs）代谢重编程可促进肿瘤进展，且与其抗肿瘤（M1）或促肿瘤（M2）表型的活化密切相关。许多ncRNA参与到TAMs的代谢重编程过程中影响肿瘤微环境，并在肿瘤发展中发挥重要作用。提高我们对ncRNA调控TAMs代谢重编程作用的理解，可能有助于开发有效的临床治疗方法。

关键词：非编码RNA 肿瘤相关巨噬细胞代谢重编程

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结核分枝杆菌磷酸二酯酶重组腺病毒黏膜免疫诱导的免疫应答特点

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细胞与分子免疫学杂志 2025年第1期41卷 1-8页

作者：代婷路延之赵瑞华宁唤唤康健郝乐冉李嘉玲常宇骁柏银兰延安大学生命科学学院陕西延安716000 空军军医大学基础医学院微生物与病原生物学教研室陕西西安710032 空军军医大学军事医学创新中心陕西西安710032 宁夏医科大学基础医学院生理学和神经生物学系宁夏银川750001

目的结核分枝杆菌(Mtb)耐药菌株的流行加剧了结核病(TB)的全球负担,凸显了对新的TB治疗策略的需求。方法表达环二腺苷酸(c-di-AMP)分解酶磷酸二酯酶B(CnpB)的重组腺病毒疫苗(rAd-CnpB)经黏膜免疫正常小鼠,单独或联合药物免疫治疗Mtb呼... 详细信息

目的结核分枝杆菌(Mtb)耐药菌株的流行加剧了结核病(TB)的全球负担,凸显了对新的TB治疗策略的需求。方法表达环二腺苷酸(c-di-AMP)分解酶磷酸二酯酶B(CnpB)的重组腺病毒疫苗(rAd-CnpB)经黏膜免疫正常小鼠,单独或联合药物免疫治疗Mtb呼吸道感染小鼠。ELISA检测小鼠血清及肺泡灌洗液(BALF)抗体水平,实时定量PCR检测小鼠肺组织中细胞因子γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素10(IL-10)转录水平,流式细胞术检测肺、脾CD4^(+)、CD8^(+)T细胞亚群细胞比例,ELISA检测脾细胞抗原刺激后的细胞因子IFN-γ、IL-2、IL-10、炎症因子IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)分泌水平,平板计数法计数Mtb感染小鼠肺、脾的荷菌数。结果rAd-CnpB滴鼻免疫可诱导小鼠血清高滴度的IgG,以及BALF中IgG和IgA产生,肺、脾T淋巴细胞亚群改变。rAd-CnpB单独或联合药物治疗Mtb感染小鼠可诱导血清IgG水平、BALF中IgA和IgG水平显著增高,rAd-CnpB免疫促进Mtb感染小鼠的脾细胞CnpB抗原特异性的细胞因子和炎症因子分泌。rAd-CnpB单独或联合药物免疫治疗并不显著影响Mtb呼吸道感染小鼠肺、脾荷菌数。结论rAd-CnpB经黏膜免疫可诱导小鼠显著的黏膜、体液免疫反应,并显著增强Mtb感染小鼠中CnpB特异性细胞免疫应答。

关键词：结核分枝杆菌(Mtb) 环核苷酸磷酸二酯酶B(CnpB) 重组腺病毒免疫治疗

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1-硝基芘通过线粒体损伤致卵巢颗粒细胞功能障碍

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陆军军医大学学报 2023年第9期45卷 947-956页

作者：崔浩楠何世军王立宏杨望杨彬伟凌曦邹鹏张国伟敖琳曹佳陆军军医大学(第三军医大学)军事预防医学系毒理学研究所重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)军事预防医学系环境卫生学教研室重庆400038

目的探讨1-硝基芘(1-nitropyrene,1-NP)通过诱导线粒体损伤对人卵巢颗粒细胞KGN的增殖、周期进展及性激素合成的影响。方法采用不同浓度(0.625、1.25、2.5、5、10μmol/L)1-NP染毒KGN细胞48 h,EdU掺入法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细... 详细信息

目的探讨1-硝基芘(1-nitropyrene,1-NP)通过诱导线粒体损伤对人卵巢颗粒细胞KGN的增殖、周期进展及性激素合成的影响。方法采用不同浓度(0.625、1.25、2.5、5、10μmol/L)1-NP染毒KGN细胞48 h,EdU掺入法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期,ELISA检测细胞培养上清中雌二醇及孕烯醇酮浓度,DCFH-DA探针检测细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,MitoSOX探针检测线粒体超氧化物(mitochondrial superoxides,MitoSOX)水平,JC-1探针检测线粒体膜电位,ATP试剂盒检测细胞内ATP含量,Western blot检测细胞增殖、周期进展、DNA损伤反应以及性激素合成相关蛋白的表达。采用线粒体抗氧化剂IDE、1-NP单独和联合处理细胞,再次检测上述指标。结果不同浓度1-NP染毒后KGN细胞增殖显著降低(P<0.05)。2.5、5、10μmol/L的1-NP处理细胞后,细胞增殖标志物PCNA蛋白表达显著降低,5、10μmol/L的1-NP处理后G2/M期细胞比例显著升高(P<0.05)。1-NP(10μmol/L)处理3 h即可诱导γ-H2AX表达增加(P<0.01);不同浓度1-NP处理后,DNA损伤反应通路蛋白p-ATM、p53和p21cip1表达明显升高(P<0.05),G2/M期阻滞相关蛋白CDK-1和CyclinB1表达明显降低(P<0.05)。此外,1-NP处理后KGN细胞的雌二醇、孕烯醇酮浓度显著下降(P<0.05),性激素合成相关蛋白CYP19、CYP11A1的表达也受到抑制(P<0.05)。线粒体及氧化应激相关指标检测结果显示,1-NP导致KGN细胞中ROS、MitoSOX水平显著升高,线粒体膜电位和ATP水平呈剂量依赖性下降。与10μmol/L 1-NP单独染毒组相比,IDE与1-NP联合处理组G2/M期细胞比例显著下降,雌二醇、孕烯醇酮水平出现一定程度升高,DNA损伤反应、细胞周期进展以及性激素合成相关蛋白的表达也出现明显恢复。同时,IDE与1-NP联合处理显著改善1-NP诱导的线粒体损伤,包括降低细胞ROS和MitoSOX水平,提高线粒体膜电位和ATP水平。结论1-NP可诱导线粒体损伤,造成卵巢颗粒细胞KGN的增殖抑制、周期阻滞、性激素合成障碍,而提高线粒体功能则能部分缓解1-NP诱导的KGN细胞功能障碍。

关键词： 1-硝基芘人卵巢颗粒细胞系周期阻滞性激素线粒体

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利用PiggyBac转座子技术构建NLRC5基因过表达BEAS-2B细胞系及其功能研究

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空军军医大学学报 2025年第4期46卷 526-532页

作者：孙丹妮刘欣悦饶子凡杜岚张湘琳刘梓谕侯诗源沈星刘蓉蓉吴兴安空军军医大学基础医学院微生物与病原生物学教研室陕西西安710032 空军军医大学基础医学院学员五大队陕西西安710032

目的利用PiggyBac转座系统构建稳定表达NLRC5的BEAS-2B细胞系,为后续针对病毒抗原提呈功能的研究提供有力的工具。方法根据NLRC5基因信息扩增目的基因蛋白编码序列,构建目的基因NLRC5的转座子质粒,将辅助质粒和转座子质粒共转染至BEAS-2... 详细信息

目的利用PiggyBac转座系统构建稳定表达NLRC5的BEAS-2B细胞系,为后续针对病毒抗原提呈功能的研究提供有力的工具。方法根据NLRC5基因信息扩增目的基因蛋白编码序列,构建目的基因NLRC5的转座子质粒,将辅助质粒和转座子质粒共转染至BEAS-2B细胞。嘌呤霉素筛选稳定转导的细胞后进行单克隆化,最后对获取的单克隆细胞在分子水平上进行过表达验证。结果成功构建一株NLRC5过表达的BEAS-2B细胞,且该细胞系可维持正常细胞活性与增殖能力。结论通过PiggyBac转座子技术实现了NLRC5的过表达,进而提高了MHC-Ⅰ分子基因的表达。通过对该基因的过表达从而研究NLRC5对MHC-Ⅰ抗原肽提呈途径的调控机制,为理解抗病毒免疫的复杂机制以及开发新的治疗策略提供有力支持。

关键词： NLRC5 PiggyBac转座子基因过表达稳定转染细胞株

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