检索结果-内蒙古大学图书馆

解剖科学进展 2004年第B8期10卷 39-39页

作者：刘善荣刘厚奇汤淑萍惠宁冀凯宏蒋正戚中田冯根生第二军医大学基础部组织胚胎学教研室，上海200433 第二军医大学附属第一医院妇产科，上海200433 第二军医大学基础部微生物学教研室，上海200433 BurnhamInstitute SanDiegoCA92037USA

目的：对不同发育阶段的人胚胎原始生殖细胞进行定位并比较其体外培养的差异，探讨不同分离方法对人胚胎生殖系细胞体外培养的影响。方法：取4～8周发育阶段的人胚胎，利用组织化学法通过检测原始生殖细胞内碱性磷酸酶及其定位。体外分... 详细信息

目的：对不同发育阶段的人胚胎原始生殖细胞进行定位并比较其体外培养的差异，探讨不同分离方法对人胚胎生殖系细胞体外培养的影响。方法：取4～8周发育阶段的人胚胎，利用组织化学法通过检测原始生殖细胞内碱性磷酸酶及其定位。体外分离人胚胎生殖嵴和肠系膜组织培养，第一次传代后，用碱性磷酸酶标记。

关键词：人胚胎原始生殖细胞碱性磷酸酶体外分离组织化学法生殖系肠系膜胎生发育阶段初步研究

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用体内激活的启动子调控HCV核心抗原表达可增强重组鼠伤寒沙门氏菌的免疫原性

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2003年第3期35卷 266-270页

作者：赵平柯屾王宏卫钱锋戚中田第二军医大学微生物学教研室上海200433 第二军医大学病原生物学教研室第二军医大学微生物学教研室北京100853 解放军总医院基础医学研究所

为提高抗原表达质粒在重组伤寒沙门氏菌中的稳定性以增强重组伤寒沙门氏菌诱导的免疫应答 ,克隆鼠伤寒沙门氏菌pagC基因启动子 ,以其为转录调控元件构建HCV核心抗原表达质粒 ,转化到减毒鼠伤寒沙门氏菌中。体外培养时 ,Mg2 +能够剂量依... 详细信息

为提高抗原表达质粒在重组伤寒沙门氏菌中的稳定性以增强重组伤寒沙门氏菌诱导的免疫应答 ,克隆鼠伤寒沙门氏菌pagC基因启动子 ,以其为转录调控元件构建HCV核心抗原表达质粒 ,转化到减毒鼠伤寒沙门氏菌中。体外培养时 ,Mg2 +能够剂量依赖性抑制该重组菌表达HCV核心抗原。将该重组菌和组成性表达的重组菌分别口服接种BALB/c小鼠 ,观察质粒的稳定性和小鼠的免疫应答。结果表明 ,体内激活的pagC基因启动子能明显提高质粒在重组鼠伤寒沙门氏菌中的稳定性和增强重组菌诱导的体液和细胞免疫应答 ,这为发展高效免疫、成本低廉的口服丙肝疫苗提供了一个新思路

关键词：体内激活的启动子减毒鼠伤寒沙门氏菌丙型肝炎病毒免疫应答

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鼠伤寒沙门菌pagC启动子的克隆与活性分析

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微生物学报 2003年第3期43卷 308-314页

作者：王宏卫赵平张珉朱诗应戚中田第二军医大学微生物学教研室上海200433

从鼠伤寒沙门菌中克隆出pagC启动子 (PpagC) ,构建体内激活的表达质粒pZW ,插入庚型肝炎病毒 (HGV)NS3基因 ,构建出表达质粒pZWNS3。以其转化减毒鼠伤寒沙门菌SL72 0 7,观察PpagC 的启动活性。结果表明 :Mg2 +可抑制PpagC 的启动活性 ,M... 详细信息

从鼠伤寒沙门菌中克隆出pagC启动子 (PpagC) ,构建体内激活的表达质粒pZW ,插入庚型肝炎病毒 (HGV)NS3基因 ,构建出表达质粒pZWNS3。以其转化减毒鼠伤寒沙门菌SL72 0 7,观察PpagC 的启动活性。结果表明 :Mg2 +可抑制PpagC 的启动活性 ,Mg2 +浓度小于50mmol L时培养的重组菌经SDS PAGE和Westernblot检测能高水平表达HGVNS3蛋白。Mg2 +浓度升至 50mmol L时 ,NS3蛋白表达量明显降低。收集以 50mmol LMg2 +的培养基扩增的重组菌 ,灌胃接种C57小鼠 ,检测小鼠的血清抗体、T细胞增殖和CTL反应。结果显示PpagC是一个强的宿主体内激活的启动子 ,为构建以伤寒沙门氏菌为载体的高效免疫口服疫苗提供了一个新的途径。

关键词：鼠伤寒沙门菌 pagC启动子克隆活性镁离子庚型肝炎病毒表达质粒

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山东地区TTV部分基因克隆及测序

山东地区TTV部分基因克隆及测序

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2004年肝病实验室诊断与临床研究专题学术会议

作者：于建国商庆华任诰肖德明尹燕明白薇戚中田张光曙 271000 山东省泰安市解放军第八十八医院感染科肝病研究中心 200433 上海市第二军医大学微生物学教研室 271000 山东省泰安市泰安市中心医院感染科 271000 山东省泰安市泰山医学院附属医院感染科

为探讨山东地区非甲/庚肝炎和肝癌患者TTV感染状况和基因变异的情况,并阐明TTV在人类肝炎中的作用、地位及其传播途径.本研究对非甲/庚型肝炎和肝癌患者血清进行TTVDNA PCR检测,并对其中3例TTV阳性患者进行序列分析.

关键词：病毒性肝炎 TTV 基因克隆基因测序血清

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人IL-12和B7-1基因对HuPBL-SCID小鼠模型中人源肿瘤的协同抑制作用

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2003年第6期35卷 529-535页

作者：高军赵平陈秀华李茂龙建秋谷爱梅吴晓兰曹广文戚中田第二军医大学微生物学教研室第二军医大学微生物学教研室上海200433 上海200040 海军医学研究所流行病学研究室上海市医药工业研究院药理研究室

人IL 12 (hIL 12 )对鼠源的免疫细胞作用较弱 ,进行hIL 12抗瘤研究缺乏有效的动物模型。为此利用荷人瘤的HuPBL SCID小鼠模型 ,将改良的Winnassay细胞免疫功能分析方法应用于评价hIL 12和hB 1协同抗瘤作用。用商业化的非脂质转基因试剂... 详细信息

人IL 12 (hIL 12 )对鼠源的免疫细胞作用较弱 ,进行hIL 12抗瘤研究缺乏有效的动物模型。为此利用荷人瘤的HuPBL SCID小鼠模型 ,将改良的Winnassay细胞免疫功能分析方法应用于评价hIL 12和hB 1协同抗瘤作用。用商业化的非脂质转基因试剂配制单独的hIL 12、hB7 1或hIL 12联合hB7 1的基因转染液。将上述三种基因转染液分别瞬时转基因入人恶性黑色素瘤A375细胞 ,转基因 30min后 ,按组别 (hIL 12组、hB7 1组、hIL 12 +hB7 1组、rhIL 2对照组、HuPBL对照组和肿瘤对照组 )同人外周血淋巴细胞混合接种于SCID小鼠皮下 ,2 0天后处死实验小鼠 ,测得hIL 12和hB7 1的抑瘤率分别为 74 .0 6 %和 6 6 .98% ,联合作用达 93.4 0 % ,rhIL 2和HuPBL对照组无抗瘤作用。同时 ,在此模型上hIL 12联合hB7 1基因对人大肠癌LoVo和人肺癌SPC的抑制率分别为 98.37%和 97.39%。实验建立的各组HuPBL SCID小鼠 2 0天的外周血都含有人IgG(>0 .5mg/L)和极少量人CD3+ 淋巴细胞 (>0 .5个 /10 0个有核细胞 )。hIL 12、hB7 1和hIL 12 +hB7 1组的瘤灶内人淋巴细胞浸润生长 ,肿瘤细胞残存 ,而rhIL 2和HuPBL对照组的瘤灶内人淋巴细胞“似团样”生长 ,肿瘤生长旺盛。表明此HuPBL SCID小鼠模型上的抗瘤机制为局部免疫反应。结果表明以此动物模型可跨

关键词：肿瘤 hIL-12 hB7-1 HuPBL-SCID小鼠基因治疗

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IL-12增强HBV融合抗原DNA疫苗在小鼠诱导的细胞免疫应答

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病毒学报 2003年第1期19卷 83-85页

作者：赵平高军王宏卫曹洁戚中田第二军医大学微生物学教研室上海200433

A plasmid(DNA vaccine)pSC-IL12,coexpressing hepatitis B virus(HBV)envelope-core fusion antigen and murine IL-12,was *** the plasmid was transfected into COS7 cells,HBsAg and HBcAg were detected in cytoplasm,murine IL-12 was detected in ***/c mice were vaccinated intramuscularly with this construct or HBV envelope-core fusion antigen DNA vaccine *** twice immunizations,humoral and cellular immune responses of the mice were *** showed that pSC-IL12 induced weaker antibody but stronger T lymphocyte proliferative response and cytotoxic T lymphocyte response than pSC did,which indicated that HBV fusion antigen and IL-12 coexpressing DNA vaccine may be more useful for therapy of hepatitis B.

关键词：乙型肝炎病毒融合抗原白细胞介素12 DNA疫苗细胞免疫应答

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口服型HCV融合抗原DNA疫苗在小鼠诱导免疫应答

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中国生物化学与分子生物学报 2003年第4期19卷 509-512页

作者：赵平张珉曹洁王宏卫戚中田第二军医大学微生物学教研室上海200433

将编码一个外源信号肽、一个通用型辅助性T淋巴细胞抗原表位和HCV核心包膜蛋白E2融合抗原基因的真核表达质粒pST CE2t(DNA疫苗 )转化到减毒鼠伤寒沙门菌SL72 0 7.将该重组菌口服接种BALB c小鼠 3次 .小鼠的抗HCV核心和E2抗体阳转率分... 详细信息

将编码一个外源信号肽、一个通用型辅助性T淋巴细胞抗原表位和HCV核心包膜蛋白E2融合抗原基因的真核表达质粒pST CE2t(DNA疫苗 )转化到减毒鼠伤寒沙门菌SL72 0 7.将该重组菌口服接种BALB c小鼠 3次 .小鼠的抗HCV核心和E2抗体阳转率分别达 6 0 %和 70 % .体外以重组HCV核心或E2抗原刺激小鼠脾细胞 ,均使之发生明显的增殖反应 ,且小鼠脾细胞能有效杀伤表达HCV核心抗原的同系骨髓瘤细胞SP2 0 .这为研制高效免疫、成本低廉。

关键词：丙型肝炎病毒 DNA疫苗融合抗原免疫应答

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Flt3配体增强HCV核心-包膜E2融合基因DNA疫苗诱导的细胞免疫应答

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生物工程学报 2003年第2期19卷 158-162页

作者：柯金山赵平曹洁于嘉屏戚中田第二军医大学微生物学教研室上海200433 第二军医大学长征医院实验诊断科上海200003

建立一种可高效诱导细胞免疫应答 ,对丙型肝炎病毒 (HCV)感染可能起预防和治疗作用的DNA疫苗。将小鼠Flt3配体 (FL)信号肽和胞外段cDNA插入结构优化的HCV核心包膜E2融合抗原DNA疫苗pST CE2t,构建成pST CE2t FL。将pST CE2t FL转染COS7... 详细信息

建立一种可高效诱导细胞免疫应答 ,对丙型肝炎病毒 (HCV)感染可能起预防和治疗作用的DNA疫苗。将小鼠Flt3配体 (FL)信号肽和胞外段cDNA插入结构优化的HCV核心包膜E2融合抗原DNA疫苗pST CE2t,构建成pST CE2t FL。将pST CE2t FL转染COS7细胞 ,Westernblot和ELISA检测表明该重组质粒能表达HCV核心包膜E2融合抗原和可溶性小鼠FL。分别将pST CE2t、pST CE2t FL和空载体pCI neo肌肉注射接种BALB c小鼠 ,检测小鼠的体液和细胞免疫应答。结果表明两种DNA结构均能在小鼠体内诱生细胞和体液免疫应答 ,但pST CE2t诱导的体液免疫应答强于pST CE2t FL ,而后者诱导的细胞免疫应答明显强于前者。FL能明显增强HCV核心包膜E2融合抗原DNA疫苗诱导的细胞免疫应答 ,对于发展HCV预防和治疗性疫苗有潜在的应用价值。

关键词：丙型肝炎病毒 DNA疫苗 fms样酪氨酸激酶受体3配体细胞免疫应答

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严重急性呼吸综合征相关冠状病毒基因组研究的新技术——RNA干扰

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第二军医大学学报 2003年第6期24卷 581-584页

作者：戚中田第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433

最近 ,严重急性呼吸综合征 (SARS)在全世界约 30个国家和地区散发或流行 ,众多实验室由此展开了针对 SARS病原体的国际联合攻关。目前 ,已经确认其病原体是一种新型冠状病毒 (命名为 SARS- Co V) ,而且该病毒的全基因组测序已经完成。... 详细信息

最近 ,严重急性呼吸综合征 (SARS)在全世界约 30个国家和地区散发或流行 ,众多实验室由此展开了针对 SARS病原体的国际联合攻关。目前 ,已经确认其病原体是一种新型冠状病毒 (命名为 SARS- Co V) ,而且该病毒的全基因组测序已经完成。采用现代分子病毒学实验技术对 SARS病毒的功能基因组进行深入研究 ,有重要的理论和实际意义。作为一种崭新的基因沉默技术 ,RNA干扰无疑将在 SARS病毒基因组研究中发挥重要的作用。

关键词：严重急性呼吸综合征非典型肺炎冠状病毒基因组 RNA干扰测序现代分子病毒学实验技术

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SARS相关冠状病毒及其基因组

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中国生物工程杂志 2003年第5期23卷 1-5页

作者：潘欣戚中田第二军医大学微生物学教研室上海200433

正在全球部分地区流行的严重急性呼吸综合征 (SARS) ,由于其传染性强、危害性大而引起了广泛关注。各国实验室密切协作 ,在数月时间内分离出了SARS冠状病毒 (SARS CoV) ,测定了病毒基因组序列 ,并在猴体内初步再现出SARS CoV所致肺部疾... 详细信息

正在全球部分地区流行的严重急性呼吸综合征 (SARS) ,由于其传染性强、危害性大而引起了广泛关注。各国实验室密切协作 ,在数月时间内分离出了SARS冠状病毒 (SARS CoV) ,测定了病毒基因组序列 ,并在猴体内初步再现出SARS CoV所致肺部疾病与人相似 ,这些工作为遏制SARS的蔓延发挥了重要作用。现就SARS CoV的鉴定、基因组及其产物的结构与功能做一综述。

关键词： SARS 冠状病毒基因组严重急性呼吸综合征

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