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第二军医大学学报 2003年第7期24卷 795-797页

作者：郑瑞英梅长林万谟彬孙卫民第二军医大学长海医院感染科上海200433 长征医院肾内科上海200003 基础医学部免疫学教研室

目的 :制备多囊蛋白 1胞内区单克隆抗体 ,并用以观察多囊蛋白 1在肾组织中的分布与表达。方法 :以重组多囊蛋白 1胞内段融合蛋白为抗原 ,采用杂交瘤技术 ,制备产生针对多囊蛋白 1胞内区的单克隆抗体的杂交瘤细胞株 ,并利用所产生的单... 详细信息

目的 :制备多囊蛋白 1胞内区单克隆抗体 ,并用以观察多囊蛋白 1在肾组织中的分布与表达。方法 :以重组多囊蛋白 1胞内段融合蛋白为抗原 ,采用杂交瘤技术 ,制备产生针对多囊蛋白 1胞内区的单克隆抗体的杂交瘤细胞株 ,并利用所产生的单克隆抗体 ,采用标准 En Vision免疫组织化学方法 ,对多囊肾组织、正常成人肾组织和胎肾组织进行染色。结果 :获得 4株稳定分泌抗体且效价为 1∶ 10 6 左右的杂交瘤细胞株 ,传代至第 5 0代仍能稳定分泌抗体 ,效价不变 ;多囊蛋白 1在正常成人肾组织的近端小管、远端小管和集合管的上皮细胞呈弱阳性表达 ,在胎儿肾脏的肾小管上皮细胞呈强阳性 ,在多囊肾组织的囊肿衬里上皮细胞表达明显增强。结论 :成功制备了多囊蛋白 1胞内区单克隆抗体 ,为深入了解多囊蛋白

关键词：多囊蛋白1胞内区单克隆抗体制备基因表达组织分布多囊肾病

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长期面神经损伤后其运动神经元睫状神经营养因子的表达

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临床耳鼻咽喉科杂志 2003年第2期17卷 102-104,T003页

作者：郑宏良周水淼李兆基陈世彩黄益灯严进由振东路长林王成海上海第二军医大学长海医院耳鼻咽喉科上海200433 第二军医大学基础医学部神经生物学教研室

目的 :探讨长期面神经损伤后其运动神经元睫状神经营养因子 (CNTF)的表达及分布。方法 :以犬单侧面神经损伤为实验模型 ,采用原位杂交及免疫组织化学技术 ,结合图像分析技术测定面神经核CNTFmRNA及其蛋白表达呈阳性反应的神经元胞体灰... 详细信息

目的 :探讨长期面神经损伤后其运动神经元睫状神经营养因子 (CNTF)的表达及分布。方法 :以犬单侧面神经损伤为实验模型 ,采用原位杂交及免疫组织化学技术 ,结合图像分析技术测定面神经核CNTFmRNA及其蛋白表达呈阳性反应的神经元胞体灰度、体积及数量。结果 :疑核运动神经元能自分泌CNTF ,神经损伤 3周内神经元CNTF基因表达强度及反应的胞体数明显下降 ,而CNTF蛋白表达增强 ,但表达的胞体数无改变 ;4周后前两项指标迅速增高 ,而CNTF表达强度恢复正常 ,反应的胞体数无变化 ;6周后 3指标均始终低于健侧。12～ 32周各项指标均趋向稳定。结论 :长期面神经损伤面神经核仍保持较高水平的CNTF表达。

关键词：面神经神经再生神经生长因子

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蛇床子素对新生大鼠颅盖骨成骨细胞功能的调节作用

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中国药理学通报 2003年第4期19卷 384-387页

作者：张巧艳秦路平田野苹郑汉臣黄宝康王寅刘祖德第二军医大学药学院生药学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部免疫学教研室上海200433 中国人民解放军455医院上海200052 第二军医大学长征医院骨科上海200003

目的　研究蛇床子素对成骨细胞功能的影响。方法　原代培养新生大鼠颅盖骨成骨细胞 ,3H 胸腺嘧啶掺入法测定成骨细胞的增殖 ;Griess试剂法测定培养上清中NO的含量 ;小鼠胸腺细胞增殖法测定IL 1的含量 ;B9细胞增殖法测定IL 6的含量 ;RT ... 详细信息

目的　研究蛇床子素对成骨细胞功能的影响。方法　原代培养新生大鼠颅盖骨成骨细胞 ,3H 胸腺嘧啶掺入法测定成骨细胞的增殖 ;Griess试剂法测定培养上清中NO的含量 ;小鼠胸腺细胞增殖法测定IL 1的含量 ;B9细胞增殖法测定IL 6的含量 ;RT PCR法检测IL 6的mRNA的表达。结果　蛇床子素抑制成骨细胞自发地或在炎性细胞因子及LPS刺激下产生NO、IL 1及IL 6和IL 6mRNA表达。结论　蛇床子素通过减少NO、IL 1和IL

关键词：蛇床子素骨质疏松成骨细胞一氧化氮细胞因子

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内源性阿片肽在正常妊娠和分娩中的变化

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第二军医大学学报 2003年第3期24卷 311-313页

作者：胡电古航洪新如刘彦金志军王成海曹立萍第二军医大学长征医院妇产科上海200003 长海医院妇产科第二军医大学基础医学部神经生物学教研室

目的 :观察内源性阿片肽在正常妊娠及分娩各阶段含量的变化规律。方法 :采用神经肽放射免疫测定方法 ,测定5 0例正常未孕妇女 (对照组 )、4 5例正常妊娠妇女 (早孕、中孕及晚孕 3个时间段 )、4 5例正常平产妇女 (潜伏期、活跃期及分娩... 详细信息

目的 :观察内源性阿片肽在正常妊娠及分娩各阶段含量的变化规律。方法 :采用神经肽放射免疫测定方法 ,测定5 0例正常未孕妇女 (对照组 )、4 5例正常妊娠妇女 (早孕、中孕及晚孕 3个时间段 )、4 5例正常平产妇女 (潜伏期、活跃期及分娩即刻 3个时间段 )和 4 5例产后妇女 (2h、2 4h 2个时间点 )血浆中 3种内源性阿片肽 (β 内啡肽、强啡肽A1 13 及亮啡肽 )含量的变化。结果 :妊娠、分娩不同阶段 ,血浆中 3种内源性阿片肽含量均有不同程度的变化 ;β 内啡肽含量在妊娠期略有上升 ,分娩期开始显著增高 ,至分娩即刻升到最高 ,升高程度是 3种肽中最高的且产后 2 4h降至正常 ;强啡肽A1 13 含量从晚期妊娠开始显著升高 ,并上升至分娩即刻 ,分娩后渐下降 ,整个变化趋势平稳 ;亮啡肽含量在早孕时显著升高 ,而中、晚期降至正常 ,直至分娩即刻时再次显著升高 ,产后 2 4h继续上升至最高。结论 :内源性阿片肽在正常妊娠及分娩各时期有着重要的调节功能。

关键词： β-内啡肽强啡肽A1-13 亮啡肽内源性阿片肽妊娠分娩

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N-硝基-L-精氨酸对阿片类物质耐受及依赖形成的影响

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中华麻醉学杂志 2003年第6期23卷 451-453页

作者：万兴旺黄矛何雅琴万莉李万亥由振东路长林第二军医大学东方肝胆外科医院国际合作信号转导研究中心上海市200438 第二军医大学基础医学部新药评价中心第二军医大学长海医院药学部第二军医大学药学院药理学教研室第二军医大学基础医学部神经生物学教研室

目的研究N-硝基-L-精氨酸(NO2Arg)对阿片类物质耐受及依赖形成的影响。方法采用剂量递增法建立大鼠吗啡身体依赖模型;用热辐射甩尾法测定大鼠痛阈值的方法监测吗啡耐药程度。身体依赖程度采用皮下注射纳洛酮4 mg·kg-1激发后,测定... 详细信息

目的研究N-硝基-L-精氨酸(NO2Arg)对阿片类物质耐受及依赖形成的影响。方法采用剂量递增法建立大鼠吗啡身体依赖模型;用热辐射甩尾法测定大鼠痛阈值的方法监测吗啡耐药程度。身体依赖程度采用皮下注射纳洛酮4 mg·kg-1激发后,测定大鼠60 min内可数和不可数戒断症状评分的方法进行;小鼠精神依赖采用条件性位置偏爱模型进行评价。结果 NO2Arg可剂量依赖性抑制吗啡耐受的形成。NO2Arg 5 mg·kg-1可显著抑制吗啡依赖大鼠大多数戒断症状。NO2Arg 4 mg·kg-1可使吗啡、二氢埃托啡精神依赖小鼠在偏爱侧停留时间分别由(6.1±2.0)min、(8.0±0.7)min显著增加到(9.3±1.1)min、(9.5±1.2)min 。结论NO2Arg可显著抑制吗啡耐受及依赖的形成,并可逆转已形成的精神依赖性。

关键词：阿片类物质依赖 N-硝基-L-精氨酸吗啡精神依赖戒断症状

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阳离子脂质体介导NF-κB“decoy”ODNs转染巨噬细胞条件的优化

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第二军医大学学报 2003年第8期24卷 856-858,F004页

作者：王建李金宝任绪义邓小明第二军医大学长海医院麻醉科上海200433 第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室

目的 :观察 NF- κB“decoy”ODNs在阳离子脂质体 lipofectin介导下转染小鼠巨噬细胞 J774 .1的优化参数以及在细胞内的分布。方法 :改变 ODN与 lipofectin比率、转染时间 ;用流式细胞仪检测细胞内的相对荧光强度和摄取率评价转染效率 ... 详细信息

目的 :观察 NF- κB“decoy”ODNs在阳离子脂质体 lipofectin介导下转染小鼠巨噬细胞 J774 .1的优化参数以及在细胞内的分布。方法 :改变 ODN与 lipofectin比率、转染时间 ;用流式细胞仪检测细胞内的相对荧光强度和摄取率评价转染效率 ;荧光显微镜观察细胞内荧光分布 ;测定细胞上清乳酸脱氢酶 (L DH)观察细胞损伤情况。结果 :lipofectin介导转染显著提高 J774 .1细胞对 NF- κB“decoy”ODNs的摄取 ;在 2 4孔培养板中 ,NF- κB“decoy”ODNs与 lipofectin比率 (W/ W)为 1∶ 5、转染 6 h时 ,转染效率最佳而细胞毒性相对较低 ;lipofectin介导转染 6 h后 ,细胞内荧光物质主要聚集于细胞核和部分细胞质中 ,而直接转染时荧光物质多分布于细胞质。结论 :lipofectin可增加 NF-κB“decoy”ODNs的细胞摄入并改变其细胞内分布 ;NF-κB“decoy”ODNs与 lipofectin比率 (W/ W)为 1∶ 5、转染 6 h时可获得最佳转染效率。

关键词：阳离子脂质体 NF-κB“decoy”ODNS 基因转染巨噬细胞

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Ir-MEK/ir-LEK在N-硝基-L-精氨酸抑制吗啡耐受形成中的作用

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中国药理学通报 2003年第1期19卷 119-120页

作者：万兴旺黄矛何雅琴万丽李万亥由振东路长林第二军医大学东方肝胆外科医院国际合作生物信号转导研究中心上海200438 第二军医大学基础医学部新药评价中心上海200433 第二军医大学长海医院药学部上海200433 第二军医大学药学院药理学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部神经生物学教研室上海200433

长期应用阿片类镇痛药将导致药物耐受。由于患者对阿片类药物耐受进而造成臧瘾所带来的公共卫生和社会问题日益突出~[1]。N-硝基-L-精氨酸（NO_[2]Arg）是一种经典的一氧化氮合成酶抑制剂~[2]。有研究表明NO_[2]Arg可抑制吗啡镇痛耐受... 详细信息

长期应用阿片类镇痛药将导致药物耐受。由于患者对阿片类药物耐受进而造成臧瘾所带来的公共卫生和社会问题日益突出~[1]。N-硝基-L-精氨酸（NO_[2]Arg）是一种经典的一氧化氮合成酶抑制剂~[2]。有研究表明NO_[2]Arg可抑制吗啡镇痛耐受的形成~[3]，然而关于其作用机制目前还未见文献报道。本文采用剂量递增法模拟临床阿片类药物耐受形成，利用放射免疫法测定大鼠积压脑分区、脊髓和血浆中甲硫脑啡肽（ir-MEK）、亮脑啡肽（ir-LEK）含量，以探讨内源性脑啡肽系统在NO_[2]Arg抑制吗啡镇痛耐受形成中的作用。

关键词： Ir-MEK/ir-LEK N-硝基-L-精氨酸吗啡耐受吗啡一氧化氮脑啡肽

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胶束电动毛细管色谱法测定复方酮康唑霜中酮康唑和特美呋的含量

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第二军医大学学报 2003年第12期24卷 1344-1346页

作者：史国兵武向锋沈娟柴逸峰沈阳军区总医院药剂科沈阳110015 总后药品仪器检验所北京100071 第二军医大学基础医学部免疫学教研室上海200433 第二军医大学药学院药物分析学教研室

目的:毛细管电泳法测定酮康唑霜中酮康唑和特美味的含量。方法:分离缓冲液为胆汁酸钠(70 mmol/L)-三羟甲基氨基甲烷-磷酸(50 mmol/L)(pH 8.14),分离电压30 kV、温度25 C、50 μm(内径)×48.5cm(有效长度40cm)空心熔融石英毛细管柱... 详细信息

目的:毛细管电泳法测定酮康唑霜中酮康唑和特美味的含量。方法:分离缓冲液为胆汁酸钠(70 mmol/L)-三羟甲基氨基甲烷-磷酸(50 mmol/L)(pH 8.14),分离电压30 kV、温度25 C、50 μm(内径)×48.5cm(有效长度40cm)空心熔融石英毛细管柱、检测波长240nm。结果:以丙酸睾酮为内标,酮康唑质量浓度在140.5～702.5 μg/ml、特美呋质量浓度在151～755μg/ml之间成良好的线性关系;加样回收率分别为95.4％～103.9％、95.9％～102.6％,RSD％分别为2.8％～4.2％(n=3)、2.9％～3.6％。结论:本法简便、快速、可靠,可用于该复方制剂中酮康唑及特美呋的含量测定。

关键词：胶束电动毛细管色谱法含量测定复方酮康唑霜酮康唑特美呋真菌感染

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四种根管充填材料的密封性比较

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第二军医大学学报 2003年第4期24卷 434-436页

作者：尚永一曹志中周中华沙继宏武警内蒙古总队医院口腔科呼和浩特010031 第二军医大学长海医院口腔科基础医学部细胞生物学教研室

目的:评价4种根管充填材料的根管密封性能,分析其影响因素。方法:收集新鲜拔除的人完整前牙40颗,随机分成4组,每组10颗牙,分别用氧化锌丁香油糊剂、Vitapex糊剂、Cortisomol糊剂、AH—Plus糊剂加牙胶尖以侧压法进行根管充填。每组随机选... 详细信息

目的:评价4种根管充填材料的根管密封性能,分析其影响因素。方法:收集新鲜拔除的人完整前牙40颗,随机分成4组,每组10颗牙,分别用氧化锌丁香油糊剂、Vitapex糊剂、Cortisomol糊剂、AH—Plus糊剂加牙胶尖以侧压法进行根管充填。每组随机选5颗牙经染色后行微渗漏长度测量;男5颗牙行扫描电镜测量根管壁与根管糊剂间微缝隙宽度。结果:氧化锌丁香油糊剂组、Vitapex糊剂组、Cortisomol糊剂组及AH—Plus糊剂组微渗漏均值分别为(3.04±1.30)、(0.74±0.49)、(0.87±0.44)、(0.60±0.26)mm,微缝隙均值分别为(11.70±5.95)、(3.05±2.75)、(1.55±1.75)、(1.95±1.00)μm,氧化锌丁香油糊剂组微渗漏和微缝隙两项均值显著高于其他各组(P<0.05),其余各组间均值比较无统计学意义。结论:氧化锌丁香油糊剂作为根管糊剂逐渐被淘汰,急需我国自行研制新型根管充填材料。

关键词：根管充填材料密封性比较微渗漏微缝隙氧化锌丁香油糊剂 Vitapex糊剂Cortisomol糊剂 AH—P1us糊剂

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人肿瘤细胞培养上清对树突状细胞表型和功能的影响

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第二军医大学学报 2002年第7期23卷 727-730页

作者：王正昕张明徽李楠王元和付志仁王强曹雪涛第二军医大学长征医院普通外科上海200003 第二军医大学长征医院基础医学部免疫学教研室

目的 :观察肿瘤细胞分泌的可溶性因子对树突状细胞表型和功能的影响 ,以进一步揭示肿瘤的免疫逃逸机制。方法 :体外分离单核细胞 ,加入白细胞介素 4 (IL - 4 )、粒 -巨噬细胞集落刺激因子 (GM- CSF)和肿瘤细胞培养上清体外培养树突状细... 详细信息

目的 :观察肿瘤细胞分泌的可溶性因子对树突状细胞表型和功能的影响 ,以进一步揭示肿瘤的免疫逃逸机制。方法 :体外分离单核细胞 ,加入白细胞介素 4 (IL - 4 )、粒 -巨噬细胞集落刺激因子 (GM- CSF)和肿瘤细胞培养上清体外培养树突状细胞 ,采用流式细胞术、同种异体混合淋巴细胞反应等方法观察肿瘤细胞上清对树突状细胞表型和功能的影响 ,并用逆转录 -聚合酶链反应 (RT- PCR)法检测了免疫抑制因子 IL - 10、血管内皮生长因子 (VEGF)和转化生长因子β1 (TGF-β1 )的 m RNA在人结肠、人卵巢和人肝脏肿瘤细胞中的表达。结果 :当培养体系中加入人肿瘤细胞培养上清后 ,树突状细胞表面 MHC 类分子和 CD80等共刺激分子的表达较低 ,树突状细胞刺激 T细胞增殖能力下降 ,且 IL - 10 m RNA、VEGF m RNA和 TGF-β1 m RNA在 3种肿瘤细胞中均有不同程度的表达。结论 :提示肿瘤细胞培养上清可能抑制树突状细胞的抗原提呈能力 ,肿瘤细胞分泌的免疫抑制因子可能是导致肿瘤微环境中的树突状细胞功能低下、机体的免疫系统无法有效激活和启动抗肿瘤免疫反应的原因之一。

关键词：人肿瘤细胞培养上清树突状细胞表型功能抗原提呈组织相容性抗原Ⅱ类共刺激分子

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