检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 2000年第2期21卷 120-123页

作者：缪晓辉戚中田孔宪涛第二军医大学长征医院感染科上海200003 第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200003 长征医院实验诊断科

目的 :建立一种敏感、特异和精确的乙型肝炎病毒 (HBV )基因 PCR及其产物的酶联杂交定量分析技术。方法 :(1)常规 PCR法扩增 HBV DNA质粒和血清 HBV DNA,引物 (SP1 ,SP2 )为一对 HBV DNA S区基因特异引物 ,扩增片段长 319bp,SP2 的 5′... 详细信息

目的 :建立一种敏感、特异和精确的乙型肝炎病毒 (HBV )基因 PCR及其产物的酶联杂交定量分析技术。方法 :(1)常规 PCR法扩增 HBV DNA质粒和血清 HBV DNA,引物 (SP1 ,SP2 )为一对 HBV DNA S区基因特异引物 ,扩增片段长 319bp,SP2 的 5′端用生物素修饰。扩增条件经过严格优化组合 ,以最大限度减少非特异片段 ,包括引物二聚体的产生。设定 5个不同梯度的 HBV DNA外参照管 ,制作标准曲线。 (2 )酶联杂交分析 :PCR产物经 10 0℃解链并稀释后 ,与捕获探针 (长 2 0 nt,3′端用氨基修饰 ,借氨基与 DNA- BINDTM反应板结合 )杂交 ;用亲和素 -碱性磷酸酶及相应显色系统检测杂交信号。结果 :目的片段含量较低的 PCR产物 ,在琼脂糖凝胶电泳时未见光带 ,但可被后续的酶联杂交检出 ,故灵敏度可超过普通 PCR定性法。结论 :本定量方法操作相对简单 ,结果数据化 ,不受主观因素干扰 ,灵敏度很高 ,而且省时、省材。

关键词：聚合酶链反应乙型肝炎 HBV DNA

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

中国姥鲨软骨源新生血管抑制因子(Sp8)的分离纯化及生物学活性

引用

第二军医大学学报 2000年第2期21卷 107-110页

作者：陈建鹤焦炳华缪为民王路王梁华缪辉南解放军第422医院内二科广东湛江524005 第二军医大学基础医学部卫生毒理学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部微生物学教研室

目的 :从中国姥鲨软骨组织抽提蛋白质中筛选具有新生血管抑制活性和抗肿瘤活性的分子。方法 :盐酸胍抽提姥鲨软骨蛋白 ,采用超滤和分子筛柱层析等方法分离纯化获得相对分子质量为 8.3× 10 3的蛋白质 (Sp8) ,以体外抑制血管内皮细... 详细信息

目的 :从中国姥鲨软骨组织抽提蛋白质中筛选具有新生血管抑制活性和抗肿瘤活性的分子。方法 :盐酸胍抽提姥鲨软骨蛋白 ,采用超滤和分子筛柱层析等方法分离纯化获得相对分子质量为 8.3× 10 3的蛋白质 (Sp8) ,以体外抑制血管内皮细胞增殖、体内抑制新生血管生长和抑制小鼠移植 S180肉瘤生长作为筛选指标。结果 :Sp8可在体外抑制血管内皮细胞增殖 ,40μg/ml浓度时抑制率为 2 0 % ;在体内具有抑制新生血管生长的作用 ,兔角膜模型抑制率为 72 .7% ,鸡胚模型 (CAM)抑制率为 79% ;并能明显抑制小鼠体内移植 S180肉瘤的生长 (P<0 .0 0 1)。结论 :Sp8介导了鲨鱼软骨中的抗肿瘤活性 ,其作用可能是通过抑制肿瘤诱生新生血管形成这一途径来实现的。

关键词：鲨鱼软骨抑制因子新生血管抗肿瘤活性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

庚型肝炎病毒NS3蛋白在杆状病毒载体中的表达及其抗原性研究

引用

第二军医大学学报 2000年第9期21卷 849-852页

作者：朱分禄任浩朱诗应谢南潘卫董辉戚中田第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433 南昌市传染病医院中心实验室

目的 :利用 Bac- to- Bac HT杆状病毒系统在 Sf9昆虫细胞中表达庚型肝炎病毒 (HGV) NS3蛋白 ,并对表达产物的免疫原性进行研究。方法 :将 HGV NS3基因片段定向克隆至转座载体 p Fast Bac HTa,转化 DH10 Bac感受态细胞 ,37℃振荡培养 4... 详细信息

目的 :利用 Bac- to- Bac HT杆状病毒系统在 Sf9昆虫细胞中表达庚型肝炎病毒 (HGV) NS3蛋白 ,并对表达产物的免疫原性进行研究。方法 :将 HGV NS3基因片段定向克隆至转座载体 p Fast Bac HTa,转化 DH10 Bac感受态细胞 ,37℃振荡培养 4h使发生转座 ,用抗生素平皿筛选重组 bacmid。脂质体介导转染 Sf9昆虫细胞 ,待细胞形态明显改变后收获细胞和培养上清液 ,将上清液再次感染 Sf9细胞以大量表达 HGV NS3重组蛋白。利用 SDS- PAGE和 Western- blotting方法分析重组蛋白。结果 :SDS- PAGE分析发现表达产物在 Mr43810处有一条明显的蛋白带 ,占细胞总蛋白量的 30 %以上 ;应用 Ni- NTA亲和层析柱获得了纯化的重组蛋白 ;Western- blotting显示该抗原可与 HGV RNA阳性血清发生特异反应。结论 :获得了昆虫细胞内表达的 HGV NS3重组蛋白 ,并证明该蛋白有可能用于 HGV感染的抗体检测。

关键词：免疫原性杆状病毒载体庚型肝炎 NS3蛋白

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

人肾细胞癌细胞的原代培养及癌基因表达初步分析

引用

第二军医大学学报 1999年第5期20卷 280-282页

作者：张晓琴曹广文侯建国戚中田第二军医大学基础医学部微生物学教研室第二军医大学长海医院泌尿外科

目的：研究人肾细胞癌（ＲＣＣ）原代细胞生物学特性及其癌基因的表达情况。方法：应用改良的原代肿瘤细胞分离法分离培养７例人ＲＣＣ原代细胞。应用染色体核型分析和免疫组化方法，分析原代细胞核型以及癌基因与抑癌基因的表达。结果... 详细信息

目的：研究人肾细胞癌（ＲＣＣ）原代细胞生物学特性及其癌基因的表达情况。方法：应用改良的原代肿瘤细胞分离法分离培养７例人ＲＣＣ原代细胞。应用染色体核型分析和免疫组化方法，分析原代细胞核型以及癌基因与抑癌基因的表达。结果：用本法培养的原代细胞比其他常规方法所得细胞既多且纯。所培养的人ＲＣＣ原代细胞的癌基因表达分析发现ｂｃｌ－２，ｃ－ｅｒｂＢ－２，ｃ－ｍｅｔ，表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）有轻度至中度表达，而ｐ５３没有表达。结论：人ＲＣＣ原代培养及其癌基因表达检测，为应用原代ＲＣＣ所开展ｅｘｖｉｖｏ的ＲＣＣ基因治疗打下了初步的基础。

关键词：肾肿瘤原代培养癌基因肾细胞癌

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

TGFβ_1基因对肝癌细胞癌基因表达的体外观察

引用

第二军医大学学报 1999年第5期20卷 292-294,F003页

作者：封岩曹广文张晓琴高峰孔宪涛第二军医大学长征医院临床免疫中心第二军医大学基础医学部微生物学教研室

目的：观察转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）转入对人肝癌细胞系癌基因表达的影响。方法：ｐＬ（ＴＧＦβ１）ＳＮ和相应重组病毒上清用脂质体转染包装细胞及肝癌细胞，经Ｇ４１８筛选后，进行免疫组化染色，观察癌基因蛋白表达的改变。... 详细信息

目的：观察转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）转入对人肝癌细胞系癌基因表达的影响。方法：ｐＬ（ＴＧＦβ１）ＳＮ和相应重组病毒上清用脂质体转染包装细胞及肝癌细胞，经Ｇ４１８筛选后，进行免疫组化染色，观察癌基因蛋白表达的改变。结果：提取的ＴＧＦβ１ｃＤＮＡ连接物经酶切鉴定，证明有正向插入及反向插入两类。病毒上清ＴＧＦβ１含量在１６～４１ｎｇ／ｍｌ，套式ＰＣＲ后均出现２９０ｂｐ条带。转基因后肝癌细胞癌基因蛋白免疫组化染色结果：ｃ－ｍｙｃ，ｃ－ｍｅｔ及ｒａｓ癌基因表达，反向ＴＧＦβ１转入者为（＋）～（），而正向转入均为（－）。免疫组化检测其ＴＧＦβ１表达蛋白，空白对照染色（±），正向则为（）。结论：正向插入的ＴＧＦβ１ｃＤＮＡ可使癌基因ｃ－ｍｙｃ，ｃ－ｍｅｔ及ｒａｓ表达减少，提示它在体外对肝癌细胞具有负调控作用。

关键词：肝肿瘤癌基因转化生长因子 TGFβ1

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

Ⅰ型常染色体显性遗传多囊肾病基因诊断与基因突变情况的调查

引用

第二军医大学学报 1999年第3期20卷 137-141页

作者：王立明闵志廉朱有华齐隽缪为民陈建鹤焦炳华第二军医大学长征医院泌尿外科第二军医大学基础医学部微生物学教研室

（１）建立Ⅰ型常染色体显性遗传多囊肾病（ＡＤＰＫＤⅠ）的基因诊断方法；（２）寻找具有普遍意义的突变方式，以优化基因诊断。方法：（１）采用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交和ＰＣＲ方法，调查ＡＤＰＫＤⅠ基因３′端单拷贝区突变情况；（... 详细信息

（１）建立Ⅰ型常染色体显性遗传多囊肾病（ＡＤＰＫＤⅠ）的基因诊断方法；（２）寻找具有普遍意义的突变方式，以优化基因诊断。方法：（１）采用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交和ＰＣＲ方法，调查ＡＤＰＫＤⅠ基因３′端单拷贝区突变情况；（２）ＰＣＲ扩增分析微卫星ＳＭ７。结果：将ＡＨ４与１６例患者的基因组ＤＮＡ进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交后，均显示有正常的１５ｋｂ的杂交片段。对２７例患者ＡＤＰＫＤⅠ基因３′端ＡＨ４和ＪＨ１４两探针间的５．７２ｋｂ基因组ＤＮＡ行ＰＣＲ扩增后，未发现５．５ｋｂ基因组ＤＮＡ缺失。１０９名正常人ＳＭ７ＰＣＲ扩增显示，其多态信息含量（ＰＩＣ）值为０．７６，３个家系的ＳＭ７等位片段与疾病基因连锁关系明确。结论：在汉族中：（１）ＡＤＰＫＤⅠ基因３′端单拷贝区无常见性大片段基因组ＤＮＡ缺失类突变；（２）ＳＭ７所含ＰＩＣ较高，用其可在７０％～８０％的ＡＤＰＫＤⅠ家系中作出基因诊断。

关键词：常染色体显性囊性肾基因诊断基因突变

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

献血员中TT病毒感染的检测及序列分析

引用

第二军医大学学报 1999年第9期20卷 605-607,F003页

作者：任浩钱宝华朱分禄倪武戚中田第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433 第二军医大学长海医院血库第二军医大学长征医院感染科

目的：研究ＡＬＴ正常的献血员中ＴＴＶ（ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｄｖｉｒｕｓ）的感染情况，探讨ＴＴＶ感染的传播途径和致病性。方法：设计ＴＴＶ保守区域的特异性引物，聚合酶链反应（Ｐ ... 详细信息

目的：研究ＡＬＴ正常的献血员中ＴＴＶ（ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｄｖｉｒｕｓ）的感染情况，探讨ＴＴＶ感染的传播途径和致病性。方法：设计ＴＴＶ保守区域的特异性引物，聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法检测１２０例ＡＬＴ正常的献血员，对１例ＴＴＶＤＮＡ阳性标本（ＴＴＶＤ０２６）进行ＰＣＲ产物测序，并与已知ＴＴＶ核苷酸序列比较同源性。结果：１２０例ＡＬＴ正常献血员中有２０例为ＴＴＶＤＮＡ阳性，感染率为１６．７％。同源性分析表明ＴＴＶＤ０２６与ＴＡ２７８，ＧＨ１，ＴＴＶＣＨＮ１和ＴＴＶＣＨＮ２的核苷酸同源性分别为９９％，９９％，９９％和８９％。结论：ＡＬＴ正常的献血员中存在ＴＴＶ的感染；ＴＴＶＤ０２６与ＴＴＶＴＡ２７８，ＧＨ１，ＴＴＶＣＨＮ１和ＴＴＶＣＨＮ２可能属于同一个基因型；输血可能是ＴＴＶ传播的主要途径。

关键词：肝炎病毒 TT病毒序列分析献血员 DNA病毒

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

血透患者血清庚型肝炎病毒RNA及抗体检测

引用

第二军医大学学报 1999年第5期20卷 286-288页

作者：许臻缪晓辉戚中田崔晓红潘卫朱诗应第二军医大学基础医学部微生物学教研室第二军医大学长征医院肾内科第二军医大学长征医院感染科

目的：了解血透患者庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）感染率及与其他肝炎病毒重叠感染的情况。方法：收集５７份血透患者血清标本，根据ＨＧＶＲＮＡ保守片段５′非编码区序列，设计了两对引物，采用逆转录巢式ＰＣＲ扩增ＨＧＶＲＮＡ，以及ＥＩ... 详细信息

目的：了解血透患者庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）感染率及与其他肝炎病毒重叠感染的情况。方法：收集５７份血透患者血清标本，根据ＨＧＶＲＮＡ保守片段５′非编码区序列，设计了两对引物，采用逆转录巢式ＰＣＲ扩增ＨＧＶＲＮＡ，以及ＥＩＡ法检测ＨＧＶＩｇＧ抗体。同时还检测了ＨＢＶＤＮＡ及ＨＣＶＩｇＧ抗体。结果：５７份标本中，４份ＨＧＶＲＮＡ阳性（７．０％），２份ＨＧＶＩｇＧ抗体阳性（３．５％）。ＨＧＶＲＮＡ与ＨＧＶＩｇＧ抗体呈“分离”现象。４份ＨＧＶＲＮＡ阳性标本中２份为ＨＢＶＤＮＡ阳性，２份为ＨＣＶＩｇＧ抗体阳性；其中１份标本ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＩｇＧ抗体均为阳性。结论：血透患者ＨＧＶ感染率高于健康献血员和正常人群，ＨＧＶ可与ＨＢＶ和ＨＣＶ重叠感染。

关键词：血液透析庚型肝炎病毒重叠感染 RNA

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

裸鼠体内组织特异性胞嘧啶脱氨酶抗人类肿瘤的基因治疗

引用

第二军医大学学报 1998年第4期19卷 319-322页

作者：曹广文崔龙高军戚中田第二军医大学基础医学部微生物学教研室第二军医大学长海医院普通外科

目的：研究组织特异性表达的胞嘧啶脱氨酶（ＣＤ）基因在裸鼠体内对人类大肠癌和肝细胞癌的治疗作用。方法：将ＣＤ基因修饰的大肠癌ＬｏＶｏ细胞移植到裸鼠体内，观察对全身给予５－氟胞嘧啶（５－ＦＣ）的反应，用含ＣＤ基因的重组病... 详细信息

目的：研究组织特异性表达的胞嘧啶脱氨酶（ＣＤ）基因在裸鼠体内对人类大肠癌和肝细胞癌的治疗作用。方法：将ＣＤ基因修饰的大肠癌ＬｏＶｏ细胞移植到裸鼠体内，观察对全身给予５－氟胞嘧啶（５－ＦＣ）的反应，用含ＣＤ基因的重组病毒产生细胞和５－ＦＣ治疗人肝癌裸鼠模型，并用ＰＣＲ法确定体内基因转移效果，骨髓涂片检查体内基因治疗对造血细胞的影响。结果：转ＣＤ基因对ＬｏＶｏ细胞的致瘤性无影响，全身给予５－ＦＣ治疗６０ｄ，转ＣＤ基因的大肠癌肿瘤明显缩小；ＣＥＡ启动子调控的ＣＤ（ＣＥＡ／ＣＤ）基因修饰的ＬｏＶｏ细胞形成的肿瘤在５－ＦＣ作用下消退。重组病毒在体内可以感染肿瘤、骨髓细胞，给予５－ＦＣ后取得了一定的抗肝细胞癌效果。ＣＥＡ／ＣＤ治疗组未发现明显的骨髓抑制，而ＬＴＲ调控ＣＤ的治疗组出现了明显的骨髓抑制。结论：组织特异性转录调控序列调控的ＣＤ基因体内基因治疗，较普通启动子调控的ＣＤ基因具有明显的安全性和有效性。

关键词：大肠肿瘤肝肿瘤胞嘧啶脱氨酶基因治疗裸鼠

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

胞嘧啶脱氨酶基因的体外前药转换胃癌细胞的杀伤作用研究

引用

中华消化杂志 1998年第2期18卷 72-75页

作者：程慧玉张忠兵李石张兴荣朱玉平第二军医大学长征医院消化内科第二军医大学基础医学部微生物学教研室

目的建立胃癌组织细胞自杀基因体外前药转换基因治疗方法。方法和结果首先将含ＣＤ基因的重组逆转录病毒载体ｐＣＤ２在ＰＡ３１７细胞中包装、筛选、收获病毒上清及进行病毒滴度测定后，体外转导Ｍ８５胃癌细胞，以ＰＣＲ方法证明ＣＤ... 详细信息

目的建立胃癌组织细胞自杀基因体外前药转换基因治疗方法。方法和结果首先将含ＣＤ基因的重组逆转录病毒载体ｐＣＤ２在ＰＡ３１７细胞中包装、筛选、收获病毒上清及进行病毒滴度测定后，体外转导Ｍ８５胃癌细胞，以ＰＣＲ方法证明ＣＤ基因稳定整合到宿主细胞基因组中，Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析了ＣＤ基因的表达；转基因胃癌细胞在前药５－ＦＣ作用下呈现明显的选择性生长抑制效应。且观察到强效的“旁观者效应”。结论为胃癌组织基因治疗提供了极有意义的资料。

关键词：胃肿瘤基因疗法胞嘧啶脱氨酶

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：