检索结果-内蒙古大学图书馆

中国药学杂志 2003年第1期38卷 25-28页

作者：万兴旺黄矛何雅琴李万亥万莉路长林第二军医大学基础医学部新药评价中心上海200433 第二军医大学东方肝胆外科医院国际合作生物信号转导研究中心上海200438 第二军医大学药学院药理学教研室上海200433 第二军医大学长海医院药学部上海200433 第二军医大学基础医学部神经生物学教研室上海200433

目的　研究N 硝基 L 精氨酸 (NO2 Arg)在吗啡、二氢埃托啡精神依赖形成中的作用。方法　采用小鼠腹腔注射吗啡、二氢埃托啡的方法建立小鼠精神依赖的条件性位置偏爱模型 ;采用荧光内过滤法测定小鼠脑内NO的含量 ;小鼠脑内cAMP/cGMP含... 详细信息

目的　研究N 硝基 L 精氨酸 (NO2 Arg)在吗啡、二氢埃托啡精神依赖形成中的作用。方法　采用小鼠腹腔注射吗啡、二氢埃托啡的方法建立小鼠精神依赖的条件性位置偏爱模型 ;采用荧光内过滤法测定小鼠脑内NO的含量 ;小鼠脑内cAMP/cGMP含量采用放射免疫法测定。结果　小鼠吗啡、二氢埃托啡精神依赖形成过程中脑内NO ,cAMP ,cGMP的含量显著上升 ;腹腔注射NO2 Arg 5mg·kg- 1 可抑制吗啡、二氢埃托啡精神依赖升高小鼠脑内NO ,cAMP ,cGMP含量的作用。结论　NO在易化阿片类药物精神依赖形成中可能有一定作用 ;NO2 Arg抑制吗啡。

关键词：吗啡二氢埃托啡精神依赖一氧化氮

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敲除PKD1基因的小鼠胚胎干细胞的建立(英文)

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第二军医大学学报 2003年第1期24卷 5-10页

作者：郁胜强梅长林胡以平王新民第二军医大学长征医院肾内科上海200003 第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室

目的 :通过 PK D1基因打靶载体的胚胎干细胞转染、药物筛选以及分子鉴定 ,获得发生同源重组的胚胎干细胞克隆 ,为产生 PK D 1基因缺陷小鼠品系准备条件。方法 :体外培养小鼠胚胎干细胞 ,用电穿孔的方法进行 PK D1基因打靶载体的转移 ,... 详细信息

目的 :通过 PK D1基因打靶载体的胚胎干细胞转染、药物筛选以及分子鉴定 ,获得发生同源重组的胚胎干细胞克隆 ,为产生 PK D 1基因缺陷小鼠品系准备条件。方法 :体外培养小鼠胚胎干细胞 ,用电穿孔的方法进行 PK D1基因打靶载体的转移 ,并用 G4 18进行筛选培养 ,得到阳性克隆后 ,进一步扩大培养 ,抽提胚胎干细胞的基因组 DNA ,采用 DNA印迹法进行分子鉴定。结果 :经 G4 18筛选培养得到 192个阳性克隆 ,分子鉴定获得 2个发生同源重组的胚胎干细胞克隆。结论 :鉴定得到的 2个同源重组胚胎干细胞克隆 ,为进一步建立 PK

关键词：胚胎干细胞多囊肾病基因敲除

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人胚生殖嵴干细胞多能性调节基因Oct4的克隆及其在大肠杆菌中的表达(英文)

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第二军医大学学报 2003年第9期24卷 937-940页

作者：刘善荣王庆敏杨玲汤淑萍惠宁蒋正戚中田刘厚奇第二军医大学基础医学部组织胚胎学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室第二军医大学长海医院妇产科第二军医大学基础医学部微生物学教研室

目的 :克隆人胚生殖系细胞多能性调节基因Oct4 ,并使其在大肠杆菌中表达。方法 :取 4～ 6周人胚胎分离生殖嵴和背侧肠系膜 ,利用RT PCR技术扩增编码Oct4的全长cDNA ,并插入到原核表达载体 pGEX5T中 ,构建成 pGEX5T Oct4重组质粒。β硫... 详细信息

目的 :克隆人胚生殖系细胞多能性调节基因Oct4 ,并使其在大肠杆菌中表达。方法 :取 4～ 6周人胚胎分离生殖嵴和背侧肠系膜 ,利用RT PCR技术扩增编码Oct4的全长cDNA ,并插入到原核表达载体 pGEX5T中 ,构建成 pGEX5T Oct4重组质粒。β硫代半乳糖苷 (IPTG)诱导使该基因在k80 2菌中表达。结果 :用PCR方法扩增获得大小约 1 .1kb条带 ;全自动测序与GenBank中登录的序列 97%同源。获得了pGEX5T Oct4重组子并在k80 2菌中获得了表达 ,SDS PAGE分析有一特异性的 6 2 0 0 0条带。结论 :扩增和克隆了人胚生殖系细胞多能性调节蛋白Oct4全长cDNA并在大肠杆菌中获得表达。

关键词：人胚生殖嵴干细胞多能性调节基因 Oct4 克隆基因克隆基因表达

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乙型肝炎病毒(adr亚型)preS2-S基因转基因小鼠的建立

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第二军医大学学报 2003年第2期24卷 168-171页

作者：苏小平姚玉成訾晓渊赵书民熊俊李建秀王新民丁佳许燕余宏宇胡以平第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433 第二军医大学长征医院感染科长征医院病理科

目的 :建立可表达乙型肝炎病毒 (adr亚型 )包膜中蛋白的转基因小鼠品系。方法 :通过原核显微注射法制备带有乙型肝炎病毒 (adr亚型 ) pre S2 - S基因的转基因小鼠。应用 PCR方法筛选乙型肝炎病毒 pre S2 - S基因转基因首建者 (founder... 详细信息

目的 :建立可表达乙型肝炎病毒 (adr亚型 )包膜中蛋白的转基因小鼠品系。方法 :通过原核显微注射法制备带有乙型肝炎病毒 (adr亚型 ) pre S2 - S基因的转基因小鼠。应用 PCR方法筛选乙型肝炎病毒 pre S2 - S基因转基因首建者 (founder)小鼠 ,再以免疫组织化学法分析乙型肝炎病毒蛋白在这些小鼠中的表达特性 ,PCR和免疫组化均阳性的转基因小鼠与正常同系异性小鼠交配用于传代培育 ,并用 PCR法检测其子代小鼠。结果 :共注射受精卵 6 9枚。选取存活受精卵 5 8枚分别植入 4只假孕小鼠 ,产仔并存活 2 3只。经尾组织 DNA PCR筛选得到 5只整合 pre S2 - S基因的 founder小鼠 ,免疫组织化学法发现其中3只小鼠的肝脏中表达 HBs Ag,进而对其中表达较强的阳性鼠进行保种。结论 :所建立的乙型肝炎病毒 (adr亚型 ) pre S2 - S基因转基因小鼠品系具有表达乙肝病毒中蛋白的生物学特性。

关键词：乙型肝炎病毒 MHBs 转基因小鼠 preS2-S基因

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长期面神经损伤后其运动神经元睫状神经营养因子的表达

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临床耳鼻咽喉科杂志 2003年第2期17卷 102-104,T003页

作者：郑宏良周水淼李兆基陈世彩黄益灯严进由振东路长林王成海上海第二军医大学长海医院耳鼻咽喉科上海200433 第二军医大学基础医学部神经生物学教研室

目的 :探讨长期面神经损伤后其运动神经元睫状神经营养因子 (CNTF)的表达及分布。方法 :以犬单侧面神经损伤为实验模型 ,采用原位杂交及免疫组织化学技术 ,结合图像分析技术测定面神经核CNTFmRNA及其蛋白表达呈阳性反应的神经元胞体灰... 详细信息

目的 :探讨长期面神经损伤后其运动神经元睫状神经营养因子 (CNTF)的表达及分布。方法 :以犬单侧面神经损伤为实验模型 ,采用原位杂交及免疫组织化学技术 ,结合图像分析技术测定面神经核CNTFmRNA及其蛋白表达呈阳性反应的神经元胞体灰度、体积及数量。结果 :疑核运动神经元能自分泌CNTF ,神经损伤 3周内神经元CNTF基因表达强度及反应的胞体数明显下降 ,而CNTF蛋白表达增强 ,但表达的胞体数无改变 ;4周后前两项指标迅速增高 ,而CNTF表达强度恢复正常 ,反应的胞体数无变化 ;6周后 3指标均始终低于健侧。12～ 32周各项指标均趋向稳定。结论 :长期面神经损伤面神经核仍保持较高水平的CNTF表达。

关键词：面神经神经再生神经生长因子

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乙型肝炎病毒x基因转基因小鼠的表型分析

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第二军医大学学报 2003年第2期24卷 155-158页

作者：熊俊訾晓渊姚玉成金艳花李建秀苏小平王新民倪文君丛文铭胡以平第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433 第二军医大学东方肝胆外科医院病理科

目的 :研究乙型肝炎病毒 X蛋白致转基因小鼠的表型效应。方法 :采用免疫组织化学和组织病理学方法分析转基因小鼠中 X蛋白的表达部位及其病理学改变。结果 :免疫组织化学检测发现 X蛋白在转基因小鼠的肝脏、脾脏、肺脏、肾脏和皮肤组... 详细信息

目的 :研究乙型肝炎病毒 X蛋白致转基因小鼠的表型效应。方法 :采用免疫组织化学和组织病理学方法分析转基因小鼠中 X蛋白的表达部位及其病理学改变。结果 :免疫组织化学检测发现 X蛋白在转基因小鼠的肝脏、脾脏、肺脏、肾脏和皮肤组织中均有表达 ,从 F0 代到 F3代小鼠 ,X蛋白在肝细胞中的分布逐渐从细胞质向细胞核转移。病理学分析显示 ,表达 X蛋白的转基因小鼠出现了皮肤组织结构异常、肝组织和肺组织轻度变性等病理学变化。结论 :乙型肝炎病毒 x基因转基因小鼠的肝脏、脾脏、肺脏、肾脏和皮肤等组织中表达 X蛋白 ,部分转基因小鼠出现的皮肤组织、肝组织和肺组织病理性损伤可能与 X蛋白有关 ;各代转基因小鼠肝细胞中 X蛋白的分布具有规律性的变化 ,可用于研究

关键词：乙型肝炎病毒 x基因转基因小鼠病理学免疫组织化学

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单克隆抗体诱发乙肝转基因小鼠肝组织损伤

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第二军医大学学报 2003年第2期24卷 164-167页

作者：胡卫江余宏宇姚玉成李建秀孙伟郝光荣胡以平第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433 长征医院病理科第二军医大学实验动物中心

目的 :诱导整合有乙型肝炎病毒 (HBV)全基因组、无病理学反应的转基因小鼠产生病理学改变 ,建立研究急性肝炎发生机制及治疗药物筛选的转基因动物模型。方法 :采用尾静脉注射方法将 3种 HBV单克隆抗体 HBs Ab、HBe Ab、HBc Ab分别或混... 详细信息

目的 :诱导整合有乙型肝炎病毒 (HBV)全基因组、无病理学反应的转基因小鼠产生病理学改变 ,建立研究急性肝炎发生机制及治疗药物筛选的转基因动物模型。方法 :采用尾静脉注射方法将 3种 HBV单克隆抗体 HBs Ab、HBe Ab、HBc Ab分别或混合导入整合有 HBV全基因组的转基因小鼠体内 ,使之与体内的抗原结合产生免疫学反应 ,随后进行血清学及常规病理学的研究。结果 :3种单克隆抗体单独或混合处理均引起 HBV转基因小鼠肝细胞的病理学损伤 ,以 HBs Ab及 HBs Ab+HBc Ab混合处理组损伤较为严重 ;但小鼠血清转氨酶基本表现正常。结论 :体液免疫反应可以诱导 HBV转基因小鼠组织细胞发生损伤 ,并产生与急性肝炎相似症状的病理学改变 ,HBs Ab及 HBs Ab+HBc Ab处理的

关键词：乙型肝炎病毒转基因小鼠动物模型单克隆抗体

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内源性阿片肽在正常妊娠和分娩中的变化

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第二军医大学学报 2003年第3期24卷 311-313页

作者：胡电古航洪新如刘彦金志军王成海曹立萍第二军医大学长征医院妇产科上海200003 长海医院妇产科第二军医大学基础医学部神经生物学教研室

目的 :观察内源性阿片肽在正常妊娠及分娩各阶段含量的变化规律。方法 :采用神经肽放射免疫测定方法 ,测定5 0例正常未孕妇女 (对照组 )、4 5例正常妊娠妇女 (早孕、中孕及晚孕 3个时间段 )、4 5例正常平产妇女 (潜伏期、活跃期及分娩... 详细信息

目的 :观察内源性阿片肽在正常妊娠及分娩各阶段含量的变化规律。方法 :采用神经肽放射免疫测定方法 ,测定5 0例正常未孕妇女 (对照组 )、4 5例正常妊娠妇女 (早孕、中孕及晚孕 3个时间段 )、4 5例正常平产妇女 (潜伏期、活跃期及分娩即刻 3个时间段 )和 4 5例产后妇女 (2h、2 4h 2个时间点 )血浆中 3种内源性阿片肽 (β 内啡肽、强啡肽A1 13 及亮啡肽 )含量的变化。结果 :妊娠、分娩不同阶段 ,血浆中 3种内源性阿片肽含量均有不同程度的变化 ;β 内啡肽含量在妊娠期略有上升 ,分娩期开始显著增高 ,至分娩即刻升到最高 ,升高程度是 3种肽中最高的且产后 2 4h降至正常 ;强啡肽A1 13 含量从晚期妊娠开始显著升高 ,并上升至分娩即刻 ,分娩后渐下降 ,整个变化趋势平稳 ;亮啡肽含量在早孕时显著升高 ,而中、晚期降至正常 ,直至分娩即刻时再次显著升高 ,产后 2 4h继续上升至最高。结论 :内源性阿片肽在正常妊娠及分娩各时期有着重要的调节功能。

关键词： β-内啡肽强啡肽A1-13 亮啡肽内源性阿片肽妊娠分娩

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阳离子脂质体介导NF-κB“decoy”ODNs转染巨噬细胞条件的优化

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第二军医大学学报 2003年第8期24卷 856-858,F004页

作者：王建李金宝任绪义邓小明第二军医大学长海医院麻醉科上海200433 第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室

目的 :观察 NF- κB“decoy”ODNs在阳离子脂质体 lipofectin介导下转染小鼠巨噬细胞 J774 .1的优化参数以及在细胞内的分布。方法 :改变 ODN与 lipofectin比率、转染时间 ;用流式细胞仪检测细胞内的相对荧光强度和摄取率评价转染效率 ... 详细信息

目的 :观察 NF- κB“decoy”ODNs在阳离子脂质体 lipofectin介导下转染小鼠巨噬细胞 J774 .1的优化参数以及在细胞内的分布。方法 :改变 ODN与 lipofectin比率、转染时间 ;用流式细胞仪检测细胞内的相对荧光强度和摄取率评价转染效率 ;荧光显微镜观察细胞内荧光分布 ;测定细胞上清乳酸脱氢酶 (L DH)观察细胞损伤情况。结果 :lipofectin介导转染显著提高 J774 .1细胞对 NF- κB“decoy”ODNs的摄取 ;在 2 4孔培养板中 ,NF- κB“decoy”ODNs与 lipofectin比率 (W/ W)为 1∶ 5、转染 6 h时 ,转染效率最佳而细胞毒性相对较低 ;lipofectin介导转染 6 h后 ,细胞内荧光物质主要聚集于细胞核和部分细胞质中 ,而直接转染时荧光物质多分布于细胞质。结论 :lipofectin可增加 NF-κB“decoy”ODNs的细胞摄入并改变其细胞内分布 ;NF-κB“decoy”ODNs与 lipofectin比率 (W/ W)为 1∶ 5、转染 6 h时可获得最佳转染效率。

关键词：阳离子脂质体 NF-κB“decoy”ODNS 基因转染巨噬细胞

来源：评论

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HBVpreS2-S基因诱发的体液免疫引起乙肝转基因小鼠肝组织损伤

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第二军医大学学报 2003年第2期24卷 159-163页

作者：刘红姚玉成葛军辉李建秀苏娟张钦宪胡以平第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433 第二军医大学长征医院病理科郑州大学医学院组织胚胎学教研室郑州450025

目的 :探讨乙型肝炎病毒 (HBV) pre S2 - S基因诱发的体液免疫在乙型肝炎发病机制中的作用。方法 :用含 HBVpre S2 - S基因的质粒 pc DNA3- S2 - S经胫骨前肌肌肉注射免疫正常 BAL B/ c小鼠获得抗血清 ,将抗血清经尾静脉注射到转基因小... 详细信息

目的 :探讨乙型肝炎病毒 (HBV) pre S2 - S基因诱发的体液免疫在乙型肝炎发病机制中的作用。方法 :用含 HBVpre S2 - S基因的质粒 pc DNA3- S2 - S经胫骨前肌肌肉注射免疫正常 BAL B/ c小鼠获得抗血清 ,将抗血清经尾静脉注射到转基因小鼠 BAL B/ c- Tg N(pre S2 - S/ ayw)体内 ,不同时间点静脉采血检测小鼠血清 HBs Ag、抗 HBs抗体、前 S2抗原、前 S2抗体、转氨酶、尿素氮和肌酐的变化 ,并处死动物检查肝、脾、肾、肠、肺和肌肉组织的病理学改变。结果 :DNA免疫正常小鼠后 8～14周 ,抗 HBs抗体的浓度维持在 130～ 14 0 m IU/ ml;免疫后小鼠抗血清转移到转基因小鼠 BAL B/ c- Tg N(pre S2 - S/ ayw)后 2、4、7和 14 d,小鼠血清中未检测到 HBs Ag和前 S2抗原 ,抗 HBs抗体持续阳性 ,前 S2抗体 14 d时转阴 ;AL T2、4 d升高 ,7d恢复到正常 ;AST14 d内始终高于正常值 ,4 d时达高峰 ;尿素氮异常 ,γ- GT与肌酐正常。转基因小鼠肝脏出现急性乙型肝炎的改变 ,初期 (2 d、4 d)血窦内和汇管区有淋巴细胞浸润 ,4 d肝细胞开始肿胀 ;中期 (7d)全小叶出现肝细胞气球样变 ,肝小叶内出现肝细胞点灶性坏死伴单个核细胞浸润 ,汇管区轻度单个核细胞的浸润 ;后期 (14 d)时肝细胞肿胀明显减轻。

关键词：乙型肝炎病毒 preS2-S基因体液免疫转基因小鼠乙型肝炎

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