检索结果-内蒙古大学图书馆

乙型肝炎病毒表面—核心融合抗原和白细胞介素—12共表达DNA疫苗的免疫原性

中华肝脏病杂志 2003年第7期11卷 443-443页

作者：柯金山赵平吴淑梅戚中田第二军医大学微生物学教研室上海200433 第二军医大学长海医院实验诊断科

乙型肝炎病毒(HBV)特异性细胞免疫应答对急性HBV感染的恢复起关键作用,其中HBV表面抗原和核心抗原均是重要的靶抗原.曾构建HBV表面-核心融合抗原DNA疫苗,可有效诱导小鼠细胞和体液免疫应答,为进一步增强该DNA疫苗诱导细胞免疫应答,在该... 详细信息

乙型肝炎病毒(HBV)特异性细胞免疫应答对急性HBV感染的恢复起关键作用,其中HBV表面抗原和核心抗原均是重要的靶抗原.曾构建HBV表面-核心融合抗原DNA疫苗,可有效诱导小鼠细胞和体液免疫应答,为进一步增强该DNA疫苗诱导细胞免疫应答,在该疫苗分子中增加了小鼠白细胞介素-12(IL-12)基因,观察IL-12对其免疫应答的影响.

关键词：乙型肝炎病毒 HBV 表面-核心融合抗原白细胞介素-12 DNA疫苗免疫原性基因表达

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乙型肝炎病毒表面-核心融合抗原和白细胞介素-12共表达DNA疫苗的免疫原性

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肿瘤研究与临床 2003年第7期 443-443页

目的探讨针型胸腔镜活检术在晚期肺癌病理学诊断和分期中的临床应用价值.方法对经胸部螺旋CT和磁共振(MRI)检查临床诊断为Ⅲa～Ⅳ期肺癌,行痰、胸液细胞学和纤维支气管镜等检查,未能获得病理诊断的94例患者,施行针型胸腔镜肺内原发病灶... 详细信息

目的探讨针型胸腔镜活检术在晚期肺癌病理学诊断和分期中的临床应用价值.方法对经胸部螺旋CT和磁共振(MRI)检查临床诊断为Ⅲa～Ⅳ期肺癌,行痰、胸液细胞学和纤维支气管镜等检查,未能获得病理诊断的94例患者,施行针型胸腔镜肺内原发病灶、纵隔淋巴结、肺内和胸壁转移病灶组织活检术.结果 94例患者中89例经针型胸腔镜取得病理学标本,成功率为95%;术后病理均诊断为肺癌,其中腺癌47例,鳞癌23例,腺鳞癌12例,小细胞肺癌7例.经胸腔镜活检病理检查后,15例(17%)肺癌患者病理分期得到更正;4例发生气胸,11例出现轻度皮下气肿,2例出现少量咯血;89例患者术后8～18个月均获随访并行螺旋CT检查,无胸壁针道的肺癌种植性转移.结论对常规检查方法不能明确病理诊断和病理分期的晚期肺癌患者,针型胸腔镜活检术可作为一种有效的确诊手段.

关键词：肝炎病毒,乙型疫苗,DNA 白细胞介素-12

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柯萨奇B组病毒不同感染状态时干扰素γ水平分析

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中华儿科杂志 2002年第9期40卷 563-564页

作者：陈若华方凤蒋瑾瑾潘卫沈茜第二军医大学附属长海医院儿科上海200433 第二军医大学免疫教研室第二军医大学附属长海医院实验诊断科上海200433

柯萨奇B组病毒（CVB）感染在小儿呼吸道感染疾病中的阳性率达30％~[1]，在病毒性心肌炎为50％左右~[2]。对CVB呼吸道感染的临床特征和免疫学特征，尤其是在不同感染状态时，疾病的特点如何等尚少有资料分析。我们对心肌炎和上呼吸道感... 详细信息

柯萨奇B组病毒（CVB）感染在小儿呼吸道感染疾病中的阳性率达30％~[1]，在病毒性心肌炎为50％左右~[2]。对CVB呼吸道感染的临床特征和免疫学特征，尤其是在不同感染状态时，疾病的特点如何等尚少有资料分析。我们对心肌炎和上呼吸道感染患儿不同CVB感染状态时务清干扰素γ（IFN－γ）变化规律进行了研究，以了解IFN－γ的变化规律，为临床CVB感染性疾病的诊治提供理论依据。

关键词：柯萨奇B组病毒感染状态干扰素γ 儿童 CVB感染

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重组乙型肝炎病毒变异s基因的表达及其抗原性的分析

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细胞与分子免疫学杂志 2002年第6期18卷 565-567,574页

作者：葛军辉张乐之姚玉成刘会敏王新民余宏宇何金胡以平第二军医大学长征医院病理科上海200003 第二军医大学长海医院实验诊断科上海200433 第二军医大学基础部细胞生物学教研室上海200433

目的　构建乙型肝炎病毒 (HBV)变异s基因真核表达载体 ,研究变异所致乙肝表面抗原 (HBsAg)免疫学性状的改变。方法　利用DraⅢ和XhoⅠ双酶切含有突变位点的HBVDNA 1.2拷贝的质粒P3.8Ⅱ ,获得 90 4bp带有突变点的HBV S基因片段。将其置... 详细信息

目的　构建乙型肝炎病毒 (HBV)变异s基因真核表达载体 ,研究变异所致乙肝表面抗原 (HBsAg)免疫学性状的改变。方法　利用DraⅢ和XhoⅠ双酶切含有突变位点的HBVDNA 1.2拷贝的质粒P3.8Ⅱ ,获得 90 4bp带有突变点的HBV S基因片段。将其置换含有HBVDNA(adr亚型 )S和S2片段的真核表达载体 pCMV S2 .S的相应片段 ,从而构建s基因nt5 87G→A突变的真核表达载体 pCMV S2 .S +14 5R ;并转染人肝癌细胞系HepG2 ,以获得分泌变异型HBsAg的细胞系。利用EIA及细胞免疫染色法 ,探讨变异抗原与抗 HBs结合力的变化。结果　构建了HBsAg的第 14 5位甘氨酸→精氨酸突变体的真核表达载体。将其转染哺乳动物细胞后第 3天 ,培养上清中用EIA检测HBsAg呈阳性 ,A值随时间延长而上升 ,但变异型的A值明显低于野生型。变异型与野生型HBsAg细胞免疫化学检测均有部分细胞呈阳性 ,但差别不显著。结论　HBsAg第 14 5位甘氨酸→精氨酸的突变体的真核表达载体表达产物具有良好的抗原性 ,能够与抗 HBs结合。

关键词：重组 s基因乙型肝炎表面抗原变异真核表达免疫细胞化学

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人多种组织中线粒体DNA存在13.1kb片段缺失突变

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第二军医大学学报 2002年第2期23卷 221-223页

作者：张燕王学敏蒋蕾沈茜第二军医大学长海医院实验诊断科上海200433 基础医学部生物化学与分子生物学教研室

目的 :在人外周血细胞中筛选到新的线粒体 DNA大片段缺失突变后 ,进一步探讨该缺失在稳定组织内的分布。方法 :以人外周血细胞及人体多种组织 DNA为模板 ,进行 PCR扩增 ,筛选该突变。结果 :在人外周血细胞及多种稳定组织中发现 13.1kb... 详细信息

目的 :在人外周血细胞中筛选到新的线粒体 DNA大片段缺失突变后 ,进一步探讨该缺失在稳定组织内的分布。方法 :以人外周血细胞及人体多种组织 DNA为模板 ,进行 PCR扩增 ,筛选该突变。结果 :在人外周血细胞及多种稳定组织中发现 13.1kb缺失突变的存在。结论 :这种广泛分布于健康人多种组织中的线粒体

关键词： DNA 线粒体基因缺失基因突变人多种组织

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洗必泰-碘消毒剂的制备及对临床常见病原体灭活作用的观察

中国家庭医学研究

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中国家庭医学研究 2001年第2期1卷 82-84页

作者：张欣荣李东方何邦平王靖李鸿勋凌代文盛华第二军医大学基础部化学教研室上海200433 第二军医大学附属长海医院临床实验诊断科

[目的]探讨洗必泰-碘消毒剂的简单高效制备方法,对照其它消毒剂观察其对临床常见病原体的灭活作用.[方法]以醋酸洗必泰和碘为原料,乙醇为溶剂,在适当条件下制备洗必泰-碘;以几种常用消毒剂为对照,观察比较了洗必泰-碘对几种临床常见细... 详细信息

[目的]探讨洗必泰-碘消毒剂的简单高效制备方法,对照其它消毒剂观察其对临床常见病原体的灭活作用.[方法]以醋酸洗必泰和碘为原料,乙醇为溶剂,在适当条件下制备洗必泰-碘;以几种常用消毒剂为对照,观察比较了洗必泰-碘对几种临床常见细菌、芽孢、真菌及病毒抗原等病原体的灭活作用.[结果]本文制备方法的回收率为76%(以碘计);洗必泰-碘制剂(质量浓度为312～625μg·ml-1)可有效地灭活致病细菌、芽孢和真菌99.99%以上.质量浓度为0.1%(g/ml)的洗必泰-碘制剂对HBsAg阳性血清灭活率为99.95%.[结论]本文报道的洗必泰-碘制备方法高效、简便,其对于临床常见病原体的灭活作用明显优于其它消毒剂.

关键词：洗必泰-碘制备消毒效果

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同个体中HCV高变区1序列变异的研究

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细胞与分子免疫学杂志 2001年第5期17卷 489-489页

作者：方芳潘卫戚中田第二军医大学附属东方肝胆外科医院实验诊断科上海200438 第二军医大学基础部微生物学教研室上海200438

ＨＣＶ高变区１ｈｙｐｅｒｖａｒｉａｂｌｅｒｅｇｉｏｎｏｎｅＨＶＲ１基因变异可能与病毒逃避宿主免疫选择作用有关，是病毒在体内持续存在及ＨＣＶ感染易慢性化的重要原因之一１。近年来研究发现，ＨＶＲ１基因可能对ＨＣＶ的免疫预... 详细信息

ＨＣＶ高变区１ｈｙｐｅｒｖａｒｉａｂｌｅｒｅｇｉｏｎｏｎｅＨＶＲ１基因变异可能与病毒逃避宿主免疫选择作用有关，是病毒在体内持续存在及ＨＣＶ感染易慢性化的重要原因之一１。近年来研究发现，ＨＶＲ１基因可能对ＨＣＶ的免疫预防有重要作用２，３。为此，我们选择了长期、多次进行血液透析的ＨＣＶ感染者作为研究对象，动态观察了ＨＶＲ１的序列变异。以研究其变异极其规律有重要意义。１材料和方法研究对象：血透析患者的血清，由上海医科大学附属中山医院血液透析中心提供。引物设计、ＨＣＶＲＮＡ的提取、逆转录巢式ＰＣＲ、ＤＮＡ序列的测定及相关试剂、仪器参见文献４。２结果５例血透析患者ＨＣＶＨＶＲ１核苷酸及氨基酸序列的变异结

关键词：丙性肝炎病毒高变区1 序列变异

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建立PCR-ELISA定量检测HBVDNA的技术

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肝脏 2000年第4期5卷 216-218页

作者：缪晓辉孔宪涛戚中田上海第二军医大学附属长征医院感染科 200003 上海第二军医大学附属长征医院实验诊断科 200003 第二军医大学微生物学教研室

目的　建立一种敏感、特异和精确的乙型肝炎病毒基因PCR及其产物酶联杂交定量分析技术。方法　制备了一种与野生扩增片段等长的PCR内参照 ;设计了一对HBV基因组S区基因扩增引物 ,上游引物的 5′ 端用生物素修饰 ,可同时扩增长为 319bp... 详细信息

目的　建立一种敏感、特异和精确的乙型肝炎病毒基因PCR及其产物酶联杂交定量分析技术。方法　制备了一种与野生扩增片段等长的PCR内参照 ;设计了一对HBV基因组S区基因扩增引物 ,上游引物的 5′ 端用生物素修饰 ,可同时扩增长为 319bp的野生和内参照片段。两套捕获探针可分别与竞争PCR产物中的野生片段和突变片段杂交。在同一反应管内 ,加入已知量内参照及待测HBVDNA标本 ,进行PCR扩增 ,然后用酶联杂交法进行产物分析。根据Clementi等介绍的公式计算待测标本中的HBVDNA含量。结果　灵敏度达到 10 -3fmol/L。在该法中 ,由于有PCR过程中的特异引物及酶联杂交过程的特异探针两个环节的限制 ,因此具有很高的特异性。结论　竞争PCR及其产物酶联杂交定量法是一种相对精确、灵敏度很高和特异性较强的HBV基因全定量测定技术 ,优于外参照法及其它产物定量法。

关键词： PCR-ELISA 诊断乙型肝炎 HBV-DNA

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竞争PCR及其产物酶联杂交定量检测HBV DNA

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中华肝脏病杂志 2000年第3期8卷 179-179页

作者：缪晓辉孔宪涛戚中田上海第二军医大学附属长征医院感染科 200003 上海第二军医大学附属长征医院实验诊断科 200003 第二军医大学微生物学教研室

我们用与野生模板等长和等效扩增的突变模板作为内参照,通过竞争PCR对HBV基因进行扩增，并引入微反应板酶联杂交技术对扩增产物定量分析。 1. 资料与方法：(1)HBV DNA标准品：质粒pADR-1 DNA 经BamH I酶切线性化后精确定量。(2)PCR2.1-W... 详细信息

我们用与野生模板等长和等效扩增的突变模板作为内参照,通过竞争PCR对HBV基因进行扩增，并引入微反应板酶联杂交技术对扩增产物定量分析。 1. 资料与方法：(1)HBV DNA标准品：质粒pADR-1 DNA 经BamH I酶切线性化后精确定量。(2)PCR2.1-WS319和PCR2.1-MS319质粒：均由长征医院感染科实验室（简称本室）构建。(3)HBV DNA阳性血清抽提物（10份）本室冻存。(4)竞争PCR：在0.2ml薄壁PCR反应管内，每管加入25μl PCR mix、引物EP1和EP2各1μl、按不同实验要求所需的各种模板，加双蒸水，使终体积为50μl。PCR扩增参数: 94℃，5min后；94℃，30s；54℃，30s；72℃，30s，共25个循环；再72℃延伸3min。(5)微反应板酶联杂交定量：由本室建立。(6)野生模板初始量的确定：采用Clementi等[1]介绍的公式: M/W=M'/W'。(7)统计学方法用Student's t检验。

关键词：乙型肝炎 HBV-DNA 竞争PCR 酶联杂交

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酪氨酸酶启动子调控的CD基因治疗恶性黑色素瘤

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第二军医大学学报 1998年第3期19卷 205-208页

作者：曹广文戚中田潘欣张晓琴高军崔龙孔宪涛第二军医大学基础医学部微生物学教研室第二军医大学长海医院普通外科第二军医大学长征医院实验诊断科

目的：克隆酪氨酸酶（Ｔｙｒ）启动子并探索其调控细菌胞嘧啶脱氨酶（ＣＤ）在黑色素瘤基因治疗中的应用价值。方法：用ＰＣＲ法从小鼠恶性黑色素瘤细胞Ｂ１６基因组中克隆Ｔｙｒ启动子片段并与正常序列比较，并于逆转录病毒载体Ｇ１Ｎ... 详细信息

目的：克隆酪氨酸酶（Ｔｙｒ）启动子并探索其调控细菌胞嘧啶脱氨酶（ＣＤ）在黑色素瘤基因治疗中的应用价值。方法：用ＰＣＲ法从小鼠恶性黑色素瘤细胞Ｂ１６基因组中克隆Ｔｙｒ启动子片段并与正常序列比较，并于逆转录病毒载体Ｇ１Ｎａ中调控ＣＤ基因（ＴｙｒＣＤ）。测体外表达和体内抗肿瘤作用。结果：来源于Ｂ１６基因组的Ｔｙｒ启动子重要反式作用位点未见突变。该Ｔｙｒ启动子可使ＣＤ基因在Ｂ１６中特异表达。转ＴｙｒＣＤ的Ｂ１６可以抑制亲代细胞的成瘤作用。含ＴｙｒＣＤ的重组病毒可在体内感染黑色素瘤细胞和骨髓细胞。体内注射５氟胞嘧啶后可使黑色素瘤消退，并对骨髓细胞有保护作用。结论：来源于正常组织或肿瘤组织的Ｔｙｒ启动子指导的ＣＤ基因在恶性黑色素瘤ｉｎｖｉｖｏ基因治疗方面是安全。

关键词：酪氨酸酶胞嘧啶脱氨酶黑色素瘤基因治疗

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