检索结果-内蒙古大学图书馆

pcDNA3.1(-)-Bcr-Abl及pcDNA3.1(-)-Bcr-Abl T3151突变质粒真核表达载体的构建

现代生物医学进展 2013年第8期13卷 1408-1411,1455页

作者：李瑗春茹懿王秦豪李霞白庆咸第四军医大学西京医院血液内科陕西西安710032 第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室陕西西安710032

目的:将Bcr-Abl及Bcr-Abl T3151突变克隆入pcDNA3.1(-)真核表达载体,为研究靶向降解受体型酪氨酸激酶BCR-Abl,抑制肿瘤细胞生长提供研究基础。方法:pcDNA3.1(-)-Bcr-Abl质粒构建:分别设计引物,通过分段PCR将BCR-ABL克隆入pcDNA3.1(-)。... 详细信息

目的:将Bcr-Abl及Bcr-Abl T3151突变克隆入pcDNA3.1(-)真核表达载体,为研究靶向降解受体型酪氨酸激酶BCR-Abl,抑制肿瘤细胞生长提供研究基础。方法:pcDNA3.1(-)-Bcr-Abl质粒构建:分别设计引物,通过分段PCR将BCR-ABL克隆入pcDNA3.1(-)。首先通过PCR扩增出Bcr-a片段,将其克隆入pcDNA3.1(-)的NheI/XhoI之间;接着将PCR扩增出的Abl-c片段克隆入KpnI/HindIII之间,最后XhoI/KpnI双酶切pGD210,将酶切下片段插入pcDNA3.1(-)的相应位点即可。酶切鉴定及测序正确后,转染293T细胞,Western blot验证质粒的表达。pcDNA 3.1(-)-Bcr-Abl T3151的突变质粒:首先设计引物,第一步以pcDNA3.1(-)-BCR/ABL为模板,以Abl-c-u和ba-M1为引物扩增出A-1:560 bp。第二步,相同模板,以ba-M2和ba-M-down为引物扩增出A-2:870 bp。第三步,以扩增出的A-1和A-2为模板,以Abl-c-u和ba-M-down为引物,扩增出1434 bp的片段A-1+2,以Bcl和Kpn I分别酶切pcDNA3.1(-)-BCR/ABL以及A-1+2,将突变后的A-1+2置换入pcDNA3.1(-)-BCR/ABL。结果:PCR结果显示3.1(-)-Bcr-Abl及3.1(-)-Bcr-Abl T3151突变质粒条带大小符合,重组质粒经酶切鉴定和测序结果正确,转染后可见融合蛋白的表达。结论:成功构建pcDNA3.1(-)-Bcr-Abl及pcDNA 3.1(-)-Bcr-Abl T3151的真核表达载体,并且转染293T细胞后证实其能够正确表达,为后续研究奠定了基础。

关键词： pcDNA3 1(-)-Bcr-Abl pcDNA3 1(-)-Bcr-Abl T3151突变质粒重组质粒 CML 分段PCR

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超速离心机的操作及超速离心技术的应用

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医学理论与实践 2013年第16期26卷 2144-2146页

作者：王媛雷迎峰丁天兵时莹第四军医大学基础部微生物学教研室陕西省西安市710032

以贝克曼公司的Optima L-100xp超速离心机为例,论述了超速离心机的操作规程、使用注意事项及相关离心技术,可为离心机管理人员的管理和实验人员正确使用离心机提供有用的参考,有利于发挥离心机的最大使用效率,以满足医学和生命科学等相... 详细信息

以贝克曼公司的Optima L-100xp超速离心机为例,论述了超速离心机的操作规程、使用注意事项及相关离心技术,可为离心机管理人员的管理和实验人员正确使用离心机提供有用的参考,有利于发挥离心机的最大使用效率,以满足医学和生命科学等相关专业实验人员的实验需要,为实验室的建设发挥更大作用。

关键词：超速离心机操作规程离心技术

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《外科学》全英文教学效果分析与思考

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中华医学教育探索杂志 2013年第4期12卷 335-337页

作者：赵京霞樊菁崔亮张威窦科峰雷伟拓静第四军医大学西京医院外科教研室西安710032 器材设备科预防医学系统计学教研室

目的了解某军医大学外科学全英文教学效果。方法对29名八年制临床医学专业学员，采取课后问卷调查的方式进行研究。采用x^2和非参数秩和检验，分析学员英语水平，教员教学水平、出国经历和职称与学员理解程度的关系。结果出国时间长者... 详细信息

目的了解某军医大学外科学全英文教学效果。方法对29名八年制临床医学专业学员，采取课后问卷调查的方式进行研究。采用x^2和非参数秩和检验，分析学员英语水平，教员教学水平、出国经历和职称与学员理解程度的关系。结果出国时间长者和获得精品课教员称号者授课情况下，学员的理解程度高（P=0．00）；学员英语水平越好，对授课的理解程度越高（P=0．00）；教员的职称对学员理解程度无影响（P=0．10）。结论全英文教学效果与教员英语水平、教学水平以及学员英语水平密切相关。

关键词：外科学全英文教学专业英语分析

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神经科学基础二教学方法改革调查问卷分析

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基础医学教育 2013年第3期15卷 240-243页

作者：魏晓燕庄严刘津平刘莹莹鞠躬第四军医大学基础部神经生物学教研室西安710032 唐都医院感染病科

神经科学基础二是一门新型的讲座性质课程,教研室应用了课堂重点讲授与实验室实际操作相结合的教学方法,并在课程结束后通过调查问卷的方式对整个课程的教学效果进行检测和评价。分析的结果将有助于神经科学教育工作者不断改进教学方法... 详细信息

神经科学基础二是一门新型的讲座性质课程,教研室应用了课堂重点讲授与实验室实际操作相结合的教学方法,并在课程结束后通过调查问卷的方式对整个课程的教学效果进行检测和评价。分析的结果将有助于神经科学教育工作者不断改进教学方法,期望能使课堂讲授更加贴近学生,有效地调动学生的学习积极性,从而提高教学效果。

关键词：神经科学教学方法教学改革

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基于Gateway^(TM)系统Dec1慢病毒表达载体的构建

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中华神经外科疾病研究杂志 2013年第2期12卷 126-129页

作者：李晓明林伟章翔王江张璟张健韩腾龙药立波第四军医大学西京医院神经外科陕西西安710032 第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室陕西西安710032

目的利用GatewayTM技术构建分化型胚胎软骨发育基因1(Dec1)的慢病毒表达载体并建立稳定表达该目的基因的人胶质瘤U87细胞株。方法从人脑胶质瘤组织中提取总RNA,经反转录得到目的 cDNA。设计含有特异性酶切位点的引物,通过逆转录酶-多聚... 详细信息

目的利用GatewayTM技术构建分化型胚胎软骨发育基因1(Dec1)的慢病毒表达载体并建立稳定表达该目的基因的人胶质瘤U87细胞株。方法从人脑胶质瘤组织中提取总RNA,经反转录得到目的 cDNA。设计含有特异性酶切位点的引物,通过逆转录酶-多聚酶链反应(RT-PCR),获得用于重组的Dec1目的基因全长。将目的片段克隆至入门载体(pENTRTM3C)中产生入门克隆。利用GatewayTM技术,将入门克隆中的目的片段转接于目的载体(pLenti6.3/V5-DEST)中产生表达克隆pLenti6.3-Dec1。在293T细胞中包装慢病毒表达载体pLenti6.3-Dec1并转染U87细胞,通过灭瘟素筛选、Western blot鉴定,获得稳定表达Dec1的U87细胞株。结果 Dec1基因全长的获取与慢病毒表达载体pLenti6.3-Dec1的构建经PCR和测序得到证实。用pLenti6.3-Dec1转染U87细胞后,通过灭瘟素筛选,获得稳定表达Dec1的U87细胞株。结论成功构建了pLenti6.3-Dec1慢病毒表达载体并建立稳定表达Dec1的人胶质瘤U87细胞株,为深入研究Dec1分子机制奠定了基础。

关键词：分化型胚胎软骨发育基因1 GatewayTM系统慢病毒表达载体神经胶质瘤

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汶川地震转运与震区住院患者回顾性对比分析

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现代生物医学进展 2013年第17期13卷 3373-3377页

作者：黄志中李运明苑继承陈长生郑万松李刚尹小青第四军医大学唐都医院信息科陕西西安710032 成都军区总医院神经外科四川成都610083 第四军医大学西京医院门诊部陕西西安710032 第四军医大学卫生统计学教研室陕西西安710032

目的:探讨汶川地震转运与震区住院伤病员的特点和疾病谱。方法:采用"军卫一号"医院信息系统,收集整理三所军队医院收治汶川地震伤病员的诊疗信息。对比转运与震区住院伤病员的入院时间、基本情况和诊疗信息的差异。结果:震后... 详细信息

目的:探讨汶川地震转运与震区住院伤病员的特点和疾病谱。方法:采用"军卫一号"医院信息系统,收集整理三所军队医院收治汶川地震伤病员的诊疗信息。对比转运与震区住院伤病员的入院时间、基本情况和诊疗信息的差异。结果:震后第2日震区住院伤病员入院人数最多,为394人;前4日占震后10日内入院人数的80.6%。全部住院伤病员男性730人,占56.5%,女性562人,占43.5%;汉族占95%,羌族、藏族及其他民族占5%;已婚占76.4%;手术率为36.5%;住院天数的中位数为12天;治愈好转率为96.5%,病死率为1%。转运与震区住院伤病员的性别、年龄组、民族、手术与否和治疗结果构成差异具有统计学意义(P<0.05);震区住院伤病员组的住院天数中位数低于转运住院伤病员组(P<0.001)。按照出院第一诊断,损伤或中毒住院伤病员占81.5%;其他疾病前五位为消化系统疾病、呼吸系统疾病、肌肉骨骼和结缔组织疾病、循环系统疾病、症状和体征。结论:地震等灾害后应尽早(灾后3-5天)转运伤病员。震区一线医院和接收转运伤病员医院应科学、合理设置床位、安排陪护人员、招募志愿者。地震第一阶段医疗救援完成后,救援重点应转向内科和慢性疾病,并提前做好应医疗准备。

关键词：汶川地震医疗救援医疗转运对比分析疾病谱国际疾病诊断代码

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异柠檬酸脱氢酶1/2突变与胶质细胞瘤的发生

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中华神经外科疾病研究杂志 2013年第5期12卷 478-480页

作者：杨帆温伟红张剑宁第四军医大学西京医院神经外科陕西西安710032 第四军医大学基础部免疫学教研室陕西西安710032 海军总医院神经外科北京100037

胶质瘤是最常见的中枢神经系统肿瘤。根据组织病理学特点与临床标准世界卫生组织（WHO）将胶质瘤分为I～Ⅳ级，一般认为I级胶质瘤为良性肿瘤，可通过手术切除治愈，且很少发生恶性进展；相比之下Ⅱ、Ⅲ级胶质瘤具有一定侵袭性且恶性程... 详细信息

胶质瘤是最常见的中枢神经系统肿瘤。根据组织病理学特点与临床标准世界卫生组织（WHO）将胶质瘤分为I～Ⅳ级，一般认为I级胶质瘤为良性肿瘤，可通过手术切除治愈，且很少发生恶性进展；相比之下Ⅱ、Ⅲ级胶质瘤具有一定侵袭性且恶性程度更高，预后较差；恶性程度最高且预后最差的是Ⅳ级胶质母细胞瘤（glioblastomamultiforme，GBM）。

关键词：异柠檬酸脱氢酶(IDH1 2) 胶质瘤突变肿瘤代谢

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十五肽BPC-157通过p38 MAPK信号通路途径调节人脐静脉内皮细胞的功能

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生物技术通讯 2013年第2期24卷 183-187页

作者：王丽丽黄同列李维娜刘楠楠张伟张英起肿瘤生物学国家重点实验室第四军医大学药学系生物制药学教研室陕西西安710032 第四军医大学基础部教学实验中心陕西西安710032

目的:初步探究十五肽BPC-157调节人脐静脉内皮细胞(HUVEC)功能的信号通路作用机制。方法:首先利用生物芯片筛选BPC-157参与激活的细胞信号转导通路途径,进而通过real-time PCR证实BPC-157对候选信号通路中相关基因的mRNA表达水平的影响... 详细信息

目的:初步探究十五肽BPC-157调节人脐静脉内皮细胞(HUVEC)功能的信号通路作用机制。方法:首先利用生物芯片筛选BPC-157参与激活的细胞信号转导通路途径,进而通过real-time PCR证实BPC-157对候选信号通路中相关基因的mRNA表达水平的影响,最后采用Western印迹观察BPC-157对候选信号通路中相关蛋白的磷酸化水平影响。结果:10μg/mL BPC-157作用于HUVEC 24 h后,信号转导通路发现者芯片结果显示,与18条信号转导通路相关的96个关键基因中分别有4个基因的mRNA表达水平上调和下调,其中与MAPK信号通路相关的3个关键基因c-Fos、c-Jun和Egr-1的mRNA表达水平显著性上调;低剂量BPC-157(1μg/mL)作用于HUVEC 12 h后,能够促进早期即刻基因c-Fos、c-Jun和Egr-1的mRNA表达水平;10μg/mL BPC-157作用于HUVEC 30 min后,可明显促进ERK1/2、p38蛋白磷酸化。结论:BPC-157可能通过活化MAPK信号转导通路途径后,激活下游早期即刻基因转录,启动靶基因的表达,从而发挥促进HUVEC增殖、迁移等功能。

关键词： BPC-157 人脐静脉内皮细胞基因芯片信号通路

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GFE-1多肽与重组人肿瘤坏死因子α融合蛋白的构建及其体外活性和体内分布研究

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生物技术通讯 2013年第2期24卷 178-182页

作者：周治中李维娜张存刘楠楠张伟张英起肿瘤生物学国家重点实验室第四军医大学药学系生物制药学教研室陕西西安710032 第四军医大学基础部教学实验中心陕西西安710032

目的:构建GFE-1多肽与重组人肿瘤坏死因子α(rmhTNF-α)融合蛋白(GFE-1-rmhTNF),研究该融合蛋白的体外活性和体内分布。方法:利用基因工程方法,将人工合成的编码GFE-1的寡核苷酸片段连接在rmhTNF-α序列的3'端,转入大肠杆菌中诱导表... 详细信息

目的:构建GFE-1多肽与重组人肿瘤坏死因子α(rmhTNF-α)融合蛋白(GFE-1-rmhTNF),研究该融合蛋白的体外活性和体内分布。方法:利用基因工程方法,将人工合成的编码GFE-1的寡核苷酸片段连接在rmhTNF-α序列的3'端,转入大肠杆菌中诱导表达,采用Q-Sepharose FF阴离子层析柱和SP-Sepharose FF阳离子层析柱纯化蛋白,SDS-PAGE和Western印迹鉴定,测定该融合蛋白的体外活性,观察其在小鼠体内的分布情况。结果:构建了融合蛋白GFE-1-rmhTNF,并在大肠杆菌中获得高效表达。体外活性实验显示,GFE-1-rmhTNF对L929细胞有明显的杀伤活性;体内分布实验证实,GFE-1-rmhTNF在小鼠肺组织的富集远高于肝肾组织。结论:构建了融合蛋白GFE-1-rmhTNF,可显著杀伤L929细胞并特异性富集于小鼠肺组织。

关键词：人肿瘤坏死因子 GFE-1多肽融合蛋白体外活性体内分布

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运用学会平台开展微生物学兴趣小组活动探讨

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基础医学教育 2013年第1期15卷 6-8页

作者：黎志东徐志凯王斐斐王平忠第四军医大学基础部微生物学与病原生物学教研室西安710032 陕西师范大学生命科学学院第四军医大学唐都医院传染病科

以学会为平台、以兴趣为导向、以学生为主体,开展观摩实践、科技服务、科技下乡、科普宣传、学术活动等兴趣小组活动,并通过互联网扩大活动效果,通过长期扶持关注学生长远发展,从而充分调动学生学习的积极性和主动性,使学生丰富知识、... 详细信息

以学会为平台、以兴趣为导向、以学生为主体,开展观摩实践、科技服务、科技下乡、科普宣传、学术活动等兴趣小组活动,并通过互联网扩大活动效果,通过长期扶持关注学生长远发展,从而充分调动学生学习的积极性和主动性,使学生丰富知识、开阔视野、锻炼思维、培养创新,提高发现问题、分析问题和解决问题的能力,提高创新精神和创新水平。

关键词：微生物学教学方法兴趣小组

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