检索结果-内蒙古大学图书馆

中国生物化学与分子生物学报 2004年第5期20卷 637-642页

作者：赵晶王智贾林涛张立红金明王成济杨安钢第四军医大学生物化学与分子生物学教研室西安710032 第四军医大学免疫学教研室西安710032

通过重组PCR构建了抗HER2单链抗体基因、绿脓杆菌外毒素(PE)转位肽序列和活性型粒酶B(GrBa)基因相融合的sFv23e-PEⅡ-GrBa基因,以及N端包含PE部分转位肽序列的PEⅡ-GrBa基因.将这2种粒酶B嵌合蛋白基因瞬时转染或稳定转染HeLa细胞及SKBR-... 详细信息

通过重组PCR构建了抗HER2单链抗体基因、绿脓杆菌外毒素(PE)转位肽序列和活性型粒酶B(GrBa)基因相融合的sFv23e-PEⅡ-GrBa基因,以及N端包含PE部分转位肽序列的PEⅡ-GrBa基因.将这2种粒酶B嵌合蛋白基因瞬时转染或稳定转染HeLa细胞及SKBR-3细胞.通过间接免疫荧光、细胞计数、MTT、ELISA等方法,观察到细胞浆中表达的PEⅡ-GrBa蛋白直接杀伤其表达细胞;而sFv23e-PEⅡ-GrBa表达后被分泌至细胞外,对产生它的细胞没有杀伤性,但能够特异识别并杀伤HER2阳性肿瘤细胞.结果表明,抗肿瘤表面抗原的抗体能够介导靶向识别,转位结构域可以辅助效应分子活化、转位至细胞液并杀伤细胞,为肿瘤的靶向治疗提供了新的策略.

关键词：粒酶B 嵌合蛋白转位肿瘤杀伤

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

一种简便快速的DNA体外扩增方法(PCR)

引用

中国兽医学报 1989年第2期 210-211页

作者：李宝林第四军医大学生物化学教研室

随着基因工程技术在生物科学尤其是医学和兽医学等领域日益广泛的应用,简便、快速、大量获得一些目的DNA已成为所有基因操作者的共同愿望。许多基因操作及以DNA为基础的检测实验,都要求有一定量的 DNA,按基因工程操作的一般程序,大量获... 详细信息

随着基因工程技术在生物科学尤其是医学和兽医学等领域日益广泛的应用,简便、快速、大量获得一些目的DNA已成为所有基因操作者的共同愿望。许多基因操作及以DNA为基础的检测实验,都要求有一定量的 DNA,按基因工程操作的一般程序,大量获得一种目的基因要经过下列步骤:获取少量纯的目的基因→基因与载体体外重组→转

关键词： DNA 引物多聚酶聚合酶 PCR 体外扩增

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

兔抗人ERA抗血清的制备

引用

细胞与分子免疫学杂志 2001年第1期17卷 73-75页

作者：张俊杰吴元明刘慧萍纪宗玲陈南春陈苏民第四军医大学生物化学与分子生物学教研室

目的在大肠杆菌中表达人ＥＲＡ蛋白（ｈ－ＥＲＡ）和ｈ－ＥＲＡＣ端结构域蛋白，并制备兔抗ｈ－ＥＲＡ抗血清。方法以ＰＣＲ扩增人ｅｒａ基因（ｈ－ｅｒａ）全长ｃＤＮＡ和ｈ－ＥＲＡＣ端的结构域基因，并分别克隆到（Ｈｉｓ）６融... 详细信息

目的在大肠杆菌中表达人ＥＲＡ蛋白（ｈ－ＥＲＡ）和ｈ－ＥＲＡＣ端结构域蛋白，并制备兔抗ｈ－ＥＲＡ抗血清。方法以ＰＣＲ扩增人ｅｒａ基因（ｈ－ｅｒａ）全长ｃＤＮＡ和ｈ－ＥＲＡＣ端的结构域基因，并分别克隆到（Ｈｉｓ）６融合表达载体ＰＲＳＥＴ－Ｃ和非融合表达载体ｐＤＨ中，诱导表达（Ｈｉｓ）６－ｈ－ＥＲＡ融合蛋白和ｈ－ＥＲＡＣ端结构域蛋白。用ｈ－ＥＲＡＣ端结构域蛋白免疫兔，制备兔抗ｈ－ＥＲＡ抗血清，并以Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ对免抗ｈ－ＥＲＡ抗血清进行鉴定。结果大肠杆菌中表达的ｈ－ＥＲＡＣ端结构域蛋白和（Ｈｉｓ）６－ｈ－ＥＲＡ融合蛋白，分别占菌体总蛋白的４０％和８０％。用兔抗血清可检出大肠杆茵中表达的（Ｈｉｓ）６－ｈ－ＥＲＡ融合蛋白。结论ｈ－ＥＲＡ和ｈ－ＥＲＡＣ端结构域蛋白在大肠杆菌中获得高效表达，并成功地制备了兔抗ｈ－ＥＲＡ抗血清。

关键词：人ERA 原核表达抗血清 ERA蛋白制备

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

重组腺病毒介导的转录因子Runx3在神经胶质瘤细胞中的表达及其亚细胞定位

引用

细胞与分子免疫学杂志 2009年第10期25卷 866-869页

作者：白文栋张瑞孟艳玲曹云新王涛赵晶杨安钢第四军医大学国家肿瘤生物重点实验室第四军医大学免疫学教研室陕西西安710032 第四军医大学生物化学与分子生物学教研室陕西西安710032

目的:制备含有融合Flag标签的Runx3基因的复制缺陷型重组腺病毒,感染神经胶质细胞瘤U251,观察外源Runx3在细胞中的表达及亚细胞定位。方法:用PCR的方法扩增Runx3基因,并将Flag标签蛋白的编码基因与RUNX3基因进行融合,构建腺病毒穿梭载体... 详细信息

目的:制备含有融合Flag标签的Runx3基因的复制缺陷型重组腺病毒,感染神经胶质细胞瘤U251,观察外源Runx3在细胞中的表达及亚细胞定位。方法:用PCR的方法扩增Runx3基因,并将Flag标签蛋白的编码基因与RUNX3基因进行融合,构建腺病毒穿梭载体pShuttle-CMV-Runx3,经KpnI/XhoI双酶切鉴定并测序。利用电转化方法将经PmeI线性化的pShuttle-CMV-Runx3穿梭载体导入BJ5183重组细菌,获取重组腺病毒质粒Ad-Runx3,再将经PacI线性化的Ad-Runx3重组病毒骨架质粒转染293A包装细胞,包装并扩增病毒。利用该病毒感染神经胶质细胞瘤U251,用免疫印迹法观察外源Runx3在细胞中的表达,用间接免疫荧光法观察其在细胞内的定位。结果:构建并包装表达Runx3蛋白的重组腺病毒,用重组腺病毒感染U251细胞后,经免疫印迹和间接免疫荧光法检测,可见外源导入的Runx3蛋白在细胞核内的特异性定位。结论:成功制备了含有融合Flag标签的转录因子Runx3基因的重组腺病毒,感染U251细胞,在细胞中观察到该分子表达后定位于细胞核中,为研究Runx3在神经胶质瘤发生中的作用奠定了实验基础。

关键词： Runx3 腺病毒恶性脑胶质瘤细胞

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

出血热病毒抗原与其抗独特型抗体基因的研究

引用

中华医学杂志 1996年第5期76卷 349-351页

作者：高磊陈苏民陈南春赵忠良刘新平第四军医大学生物化学与分子生物学教研室

为了解抗独特型抗体与抗原的基因特征和相互关系。方法采用基因工程方法，从分泌肾病综合征出血热病毒（ＨＦＲＳＶ）内影像型抗独特型人单克隆抗体杂交瘤细胞系（Ｃ８），克隆获得的抗ＨＦＲＳＶＩｄ人单克隆抗体重链和轻链可变区基因... 详细信息

为了解抗独特型抗体与抗原的基因特征和相互关系。方法采用基因工程方法，从分泌肾病综合征出血热病毒（ＨＦＲＳＶ）内影像型抗独特型人单克隆抗体杂交瘤细胞系（Ｃ８），克隆获得的抗ＨＦＲＳＶＩｄ人单克隆抗体重链和轻链可变区基因，并与出血热病毒基因进行了比较。结果抗Ｉｄ人单克隆抗体重链可变区第４５～５５位氨基酸序列和轻链可变区第５８～６８位氨基酸序列，均与出血热病毒Ｇ２膜蛋白的第４４７～４５７位氨基酸序列高度同源，而且同源区域具有相似的蛋白质二级结构。结论抗Ｉｄ人单克隆抗体模拟抗原具有一定的分子基础。

关键词：病毒性出血热肾病综合征

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

重组人骨形成蛋白-3成熟肽的表达、纯化及诱骨活性的研究

引用

生物工程学报 1999年第3期15卷 288-292页

作者：朱帮福蒲勤陈南春陈苏民第四军医大学生物化学与分子生物学教研室

推测人骨形成蛋白３羧基端的１２７氨基酸的肽段为其成熟肽（ｈＢＭＰ３ｍ）。将编码此成熟肽的ｃＤＮＡ插入含ＰＬ启动子的表达质粒ｐＤＨ中，构建表达质粒ｐＤＨＢ３ｍ，转化大肠杆菌ＤＨ５α。４２℃热诱导６ｈ后表达量达到最... 详细信息

推测人骨形成蛋白３羧基端的１２７氨基酸的肽段为其成熟肽（ｈＢＭＰ３ｍ）。将编码此成熟肽的ｃＤＮＡ插入含ＰＬ启动子的表达质粒ｐＤＨ中，构建表达质粒ｐＤＨＢ３ｍ，转化大肠杆菌ＤＨ５α。４２℃热诱导６ｈ后表达量达到最高水平，约占菌体总蛋白２８％；表达产物以包涵体形式存在。包涵体经分离和洗涤后，溶解于尿素，在变性溶解状态下经阳离子交换层析，目的蛋白纯度至少在９５％以上。再经稀释复性。然后将纯化、复性的重组人骨形成蛋白３成熟肽（ｒｈＢＭＰ３ｍ）植入小鼠肌肉间隙，于不同时间取材观察，在局部可见典型的软骨形成、软骨内成骨以及骨组织形成的过程，证实所制备的ｒｈＢＭＰ３ｍ具有明显的异位诱骨活性。

关键词：人骨形成蛋白-3 表达蛋白质纯化诱骨活性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

新型表达载体 pEC34 试用于人 γ 干扰素基因的高表达

引用

生物工程学报 1997年第4期13卷 406-409页

作者：柴玉波陈苏民赵忠良陈南春高辉第四军医大学生物化学与分子生物学教研室

构建了一个新的双顺反子表达载体ｐＥＣ３４，它的第一个顺反子是已高表达的ｅｒａ基因的部分序列，并带有原核翻译增强子。当检测ｐＥＣ３４的可用性时，获得了人γ干扰素的极高表达。目的蛋白占菌体总蛋白的８５５％，诱导后经Ｓ... 详细信息

构建了一个新的双顺反子表达载体ｐＥＣ３４，它的第一个顺反子是已高表达的ｅｒａ基因的部分序列，并带有原核翻译增强子。当检测ｐＥＣ３４的可用性时，获得了人γ干扰素的极高表达。目的蛋白占菌体总蛋白的８５５％，诱导后经ＳＤＳＰＡＧＥ分析，出现分子量为１５５ｋＤａ左右的蛋白表达带，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ结果证实为人γ干扰素。无压力传代３０次表达质粒仍然稳定，表明ｐＥＣ３４可能用作真核蛋白质高表达工程菌株的载体。

关键词：表达载体 γ-干扰素基因表达

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

异种同源钙激活Cl^-通道DNA疫苗抑制哮喘小鼠气道黏液高分泌的研究

引用

中华医学杂志 2004年第4期84卷 329-333页

作者：宋立强李妍戚好文刘新平王吉村第四军医大学西京医院呼吸内科西安710032 第四军医大学西京医院心脏内科西安710032 第四军医大学生物化学和分子生物学教研室

目的　钙激活Cl-通道 (CLCA)家族中小鼠mCLCA3与人hCLCA1是异种同源蛋白 ,两者表达于气道上皮杯状细胞。拟探讨hCLCA1DNA疫苗对哮喘小鼠气道黏液高分泌状况的影响。方法　构建重组真核表达质粒pSecTag2B/hCLCA1,将其作为疫苗肌注法接种... 详细信息

目的　钙激活Cl-通道 (CLCA)家族中小鼠mCLCA3与人hCLCA1是异种同源蛋白 ,两者表达于气道上皮杯状细胞。拟探讨hCLCA1DNA疫苗对哮喘小鼠气道黏液高分泌状况的影响。方法　构建重组真核表达质粒pSecTag2B/hCLCA1,将其作为疫苗肌注法接种给BALB/c小鼠 (隔 2周 1次 ,共4次 )。当酶联免疫吸附法 (ELISA)证实血清中有能结合mCLCA3胞外肽段 (ED)的抗体产生时 ,卵蛋白致敏法制备接种小鼠的哮喘模型。引喘 5d后 ,PAS特染黏蛋白法观察气道杯状细胞数量及分泌功能 ,逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)法检测黏蛋白MUC5ACmRNA水平的变化。设接种pSecTag2B/mCLCA3、空载体pSecTag2B和生理盐水为对照组。结果　ELISA证实疫苗接种 3次后的小鼠血清抗体 ,能有效结合mCLCA3的 3个ED。其中抗体与N 端和C 端ED的结合滴度大于与中间ED的结合滴度。与同样被诱发哮喘的对照组相比 ,疫苗接种组小鼠气道的杯状细胞数量和黏液分泌量明显减少 ,MUC5ACmRNA转录水平下降。结论　hCLCA1DNA疫苗能诱导小鼠产生结合自身mCLCA3胞外肽段的抗体 ,并因此有效减轻了哮喘气道黏液高分泌。

关键词：钙激活Cl^-通道 DNA疫苗哮喘小鼠气道黏液气道上皮杯状细胞

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

白癜风自身免疫机理的研究进展

引用

上海免疫学杂志 1998年第4期18卷 250-252页

作者：兰风华高磊陈苏民第四军医大学生物化学教研室西安710033

白癜风是一种原因不明的常见病.本文围绕白癜风的自身免疫机理,着重介绍白癜风抗黑素细胞自身抗体及相应自身抗原,探讨白癜风与黑色素瘤之间的关系以及白癜风的HLA相关性、遗传背景.最后,讨论了白癜风基础研究的发展方向.

关键词：白癜风自身免疫黑素细胞自身抗体黑色素瘤

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

胃癌特异性转移因子体外白细胞粘附抑制活性研究

引用

上海免疫学杂志 1999年第4期19卷 219-221页

作者：杨敏王国华刘新平药立波苏成芝第四军医大学生物化学教研室西安710032

利用白细胞粘附抑制实验，对胃癌特异性转移因子（ＧＴＦ）的生物学活性及其作用特异性进行了研究。结果表明胃癌特异性转移因子在体外具有白细胞粘附抑制能力，并且这一生物学活性具有抗原特异性（Ｐ＜００１）。

关键词：白细胞粘附抑制胃癌 GTF 免疫学

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：