检索结果-内蒙古大学图书馆

癌症 2000年第7期19卷 635-637页

作者：李增山 *** 隋延仿叶菁第四军医大学病理教研室肿瘤抗原肽实验室

目的：研究共刺激分子CD80在肝癌细胞中的表达与MHC－I（Majorhistocompatibilitycomplex）分子相互关系，以探讨在肿瘤细胞所诱发的免疫排斥反应中共刺激分子对抗原提呈机制的影响。方法：通过逆转录病毒载体介导，将CD80基因转入肝癌... 详细信息

目的：研究共刺激分子CD80在肝癌细胞中的表达与MHC－I（Majorhistocompatibilitycomplex）分子相互关系，以探讨在肿瘤细胞所诱发的免疫排斥反应中共刺激分子对抗原提呈机制的影响。方法：通过逆转录病毒载体介导，将CD80基因转入肝癌细胞系HHCC，以流式细胞仪检测其表面MHC－I分子的表达情况。同时检测LAK细胞对转染前后的细胞的杀伤效果。结果：表达CD80的肝癌细胞其表面MHC－I分子表达明显增高（P＜0.01），而γ－INF刺激对细胞表面MHG-I分子的表达情况并无影响（P＞0.05）。LAK细胞对转染后细胞的杀伤作用远远大于未转染组（P＜0．01），而γ-INF刺激前后的细胞毒活性几乎无改变（P＞0．05）。结论：转染CD80后肝癌细胞高表达MHC-I分子，增强抗原提呈作用的同时又表达第二信号—共刺激分子CD80，从而可诱发更强的免疫排斥反应。

关键词：肝癌细胞 CD80 MHC-I 细胞毒基因转染

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HLA-I分子对B7.1共刺激作用的影响

引用

中国免疫学杂志 2001年第9期17卷 466-468页

作者：李增山隋延仿叶菁第四军医大学病理教研室肿瘤抗原肽实验室西安710032

目的 :研究HLA I分子表达与B7 1分子的共刺激作用的相互关系 ,以探讨在肿瘤细胞所诱发的免疫排斥反应中共刺激分子对抗原递呈机制的影响。方法 :通过流式细胞仪 (FCM)检测转染共刺激分子B7 1编码基因前后其表面HLA I分子的表达情况。利... 详细信息

目的 :研究HLA I分子表达与B7 1分子的共刺激作用的相互关系 ,以探讨在肿瘤细胞所诱发的免疫排斥反应中共刺激分子对抗原递呈机制的影响。方法 :通过流式细胞仪 (FCM)检测转染共刺激分子B7 1编码基因前后其表面HLA I分子的表达情况。利用单克隆抗体阻断细胞表面HLA I分子 ,以外周血混合淋巴细胞对阻断前后的细胞行杀伤实验。结果 :表达B7 1的肝癌细胞其表面HLA I分子表达明显增高 (P <0 0 1) ,而γ INF刺激对细胞表面HLA I分子的表达情况并无影响(P >0 0 5 )。T淋巴细胞对转染后细胞的杀伤作用远远大于未转染组 (P <0 0 1) ,当表面HLA I分子被阻断后 ,T淋巴细胞的杀伤效应几乎降至零点。结论 :转染B7 1后肝癌细胞高表达HLA I分子 ,增强抗原提呈作用的同时又表达第二信号—共刺激分子B7 1,从而可诱发更强的免疫排斥反应。

关键词：肝癌细胞 B7.1 HLA-1 细胞毒共刺激作用

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肝癌细胞稳定转染B7.1后的免疫学特性

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细胞与分子免疫学杂志 2000年第2期16卷 148-151页

作者：李增山隋延仿叶菁郭爱林第四军医大学病理学教研室肿瘤抗原肽实验室陕西西安710032

目的探讨赋予肝癌细胞第二信号分子B7.1、增强癌细胞与淋巴细胞之间的识别与激活作用 ,从而达到增强淋巴细胞对肝癌细胞的杀伤或抑制作用。方法利用逆转录方法 ,转染B7.1分子至包装细胞系PA317。筛选获得高滴度的克隆后 ,以病毒上清感... 详细信息

目的探讨赋予肝癌细胞第二信号分子B7.1、增强癌细胞与淋巴细胞之间的识别与激活作用 ,从而达到增强淋巴细胞对肝癌细胞的杀伤或抑制作用。方法利用逆转录方法 ,转染B7.1分子至包装细胞系PA317。筛选获得高滴度的克隆后 ,以病毒上清感染肝癌细胞 ,使其表达B7.1分子 ,最后以LDH释放法测定LAK细胞的细胞毒活性。结果肝癌细胞可稳定表达B7.1分子 ,阳性率达94.3% ,未转染的细胞无表达 ;其所诱发的LAK细胞的细胞毒活性明显强于未转染的肝癌细胞组(P<0.01)。结论B7.1分子在淋巴细胞与癌细胞之间的识别过程中起着重要作用 ,可介导淋巴细胞对癌细胞的粘附和识别 ,从而增强淋巴细胞的杀伤作用。这一结果可为今后进一步深入研究B7.1的作用机制 ,以及与其它细胞因子、粘附分子的相互作用打下基础。

关键词：肝癌细胞 B7.1 免疫学特性

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超抗原葡萄球菌肠毒素A对肝癌细胞免疫原性影响的研究

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中华肝脏病杂志 2001年第6期9卷 343-344页

作者：李增山隋延仿姜永强雷祚荣第四军医大学病理教研室肿瘤抗原肽实验室西安710032 军事医学科学院微生物流行病研究所

目的给肝癌细胞转入超抗原分子葡萄球菌肠毒素A(staphylococcal enterotoxin A,SEA)的编码基因,使其表达这种毒素分子,以增强肝癌细胞的免疫原性,达到增强肝癌细胞诱导免疫排斥反应的目的.方法构建SEA编码基因的逆转录真核表达载体,转... 详细信息

目的给肝癌细胞转入超抗原分子葡萄球菌肠毒素A(staphylococcal enterotoxin A,SEA)的编码基因,使其表达这种毒素分子,以增强肝癌细胞的免疫原性,达到增强肝癌细胞诱导免疫排斥反应的目的.方法构建SEA编码基因的逆转录真核表达载体,转染病毒包装细胞系PA317后,行滴度测定.以高滴度克隆培养上清转导肝癌细胞株HHCC,筛选获得阳性表达株.然后利用外周血混合淋巴细胞进行杀伤实验.结果成功的构建了SEA的逆转录真核表达载体pLXSN-SEA,转导肝癌细胞后,获得表达SEA分子的阳性克隆HHCC-SEA.培养上清中SEA含量在pg的水平.外周血混合淋巴细胞杀伤实验结果显示,T淋巴细胞对转导后肝癌细胞的杀伤率可达45.6%.高于对HHCC 20.7%的杀伤率,T细胞对转导后肝癌细胞杀伤反应的Km值为5.18×104,而HHCC组的Km值为2.92 × 105,与前者的差别有统计学意义.结论肝癌细胞在转入SEA分子的编码基因后,表达出微量的SEA蛋白,却具有较强的免疫激活能力.即表达SEA的肝癌细胞在很低的浓度下,激活的T细胞即可对其达到最大杀伤反应速度,对T细胞的激活能力远远高于HHCC.

关键词：肝癌超抗原分子葡萄球菌肠毒素A 肝癌细胞免疫

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人CD80-Linker-SEA重组毒素的设计及生物学特性预测

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中国免疫学杂志 2001年第1期17卷 10-12页

作者：李增山隋延仿姜永强雷祚荣尚继栋第四军医大学病理教研室肿瘤抗原肽实验室西安710032 军事医学科学院微生物流行病研究所北京100071

目的 :构建人重组CD80 Linker SEA毒素的真核表达载体并预测Linker的合理性和可行性。方法 :应用核酸和蛋白质序列分析软件GolgKey对融合基因及Linker部位翻译后在二级结构水平上的一些生物学特性 ,诸如柔性、抗原性、亲水性及表位等... 详细信息

目的 :构建人重组CD80 Linker SEA毒素的真核表达载体并预测Linker的合理性和可行性。方法 :应用核酸和蛋白质序列分析软件GolgKey对融合基因及Linker部位翻译后在二级结构水平上的一些生物学特性 ,诸如柔性、抗原性、亲水性及表位等加以预测。结果 :CD80 Linker SEA融合基因的氨基酸序列经软件分析 ,并分别与CD80和SEA单独的分析结果相比较 ,发现在二级结构的水平未出现新的抗原性 ,同时在Linker部位具有很低的抗原性 ,亲水性没有改变 ,Linker部位呈中性 ,CD80和SEA具有原来各自的表位特征 ,无新的表位出现。结论 :本研究通过计算机软件对CD80 Linker SEA融合蛋白的预测 ,并与CD80、SEA各加以对比分析和比较 ,以利于在重组过程中有一个合理的设计。

关键词： CD80-Linker-SEA重组毒素生物学特性计算机模

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肿瘤特异性抗原研究与肿瘤特异性免疫治疗

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陕西肿瘤医学 2001年第1期9卷 1-2页

作者：隋延仿第四军医大学病理教研室肿瘤抗原肽实验室西安710032

近一个世纪以来，肿瘤抗原的研究一直处于肿瘤免疫学的核心地位，而肿瘤免疫治疗也随着肿瘤抗原研究的深入不断发展，并形成肿瘤生物治疗的主流。肿瘤免疫学的历史发展过程，说明只有坚持肿瘤抗原研究才能更好的发展肿瘤免疫治疗。

关键词：肿瘤抗原特异性抗原肿瘤免疫学特异性免疫治疗基因疫苗

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葡萄球菌肠毒素A和B7.1双刺激分子共转染人肝癌细胞及其免疫学效应

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中华肝脏病杂志 2003年第6期11卷 375-375页

作者：李增山隋延仿叶菁张秀敏第四军医大学病理教研室肿瘤抗原肽实验室西安710032

超抗原(SAg)是来源于细菌和病毒家族的蛋白组份,可未经处理而直接结合于组织相容性复合物Ⅱ分子并激活含特定Vβ成份的T细胞。为开辟超抗原在T细胞介导的肿瘤免疫排斥中的新途径,我们将葡萄球菌肠毒素A(SEA)超抗原分子及共刺激分子B7.1... 详细信息

超抗原(SAg)是来源于细菌和病毒家族的蛋白组份,可未经处理而直接结合于组织相容性复合物Ⅱ分子并激活含特定Vβ成份的T细胞。为开辟超抗原在T细胞介导的肿瘤免疫排斥中的新途径,我们将葡萄球菌肠毒素A(SEA)超抗原分子及共刺激分子B7.1的基因直接转入人肝癌细胞,从而诱发强的免疫排斥反应。

关键词：葡萄球菌肠毒素A 肝癌细胞免疫学效应超抗原

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可调控的肝癌特异性基因治疗载体的构建

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中华肝胆外科杂志 2004年第10期10卷 687-690页

作者：禄韶英隋延仿李增山叶菁王文张秀敏第四军医大学基础部病理教研室肿瘤抗原肽实验室西安市710032

目的　构建新型AFP顺式作用元件调控的基因表达载体 ,检测该调控元件的特异性和可调控性。方法　PCR扩增截短的AFP基因启动子、增强子 ,将上述片段与含有报告基因强化绿色荧光蛋白基因的载体pEGFP 1的多克隆位点连接 ,构建成为AFP基因... 详细信息

目的　构建新型AFP顺式作用元件调控的基因表达载体 ,检测该调控元件的特异性和可调控性。方法　PCR扩增截短的AFP基因启动子、增强子 ,将上述片段与含有报告基因强化绿色荧光蛋白基因的载体pEGFP 1的多克隆位点连接 ,构建成为AFP基因顺式作用元件调控的肝癌特异性EGFP表达载体 (pEGFP 1 EP)。用脂质体法将表达载体转染表达或不表达AFP的肿瘤细胞系 ,荧光显微镜观测重组AFP顺式作用元件的启动活性 ,并用流式细胞术检测全反式视黄酸对它的抑制作用。结果　成功地将AFP基因启动子、增强子克隆到报告基因载体pEGFP 1的多克隆位点 ,酶切鉴定和DNA序列分析无误 ,荧光显微镜观测证实EGFP能在AFP阳性肝癌细胞特异性表达 ,1× 10 -7M全反式视黄酸对其活性有明显的抑制。结论　AFP顺式作用元件修饰的基因治疗载体 ,在基因转录水平特异性调控目的基因的表达 ,为下一步将其作为肝癌基因治疗载体奠定了基础。

关键词： AFP 治疗肝癌 EGFP 全反式视黄酸基因启动子特异性顺式作用元件表达载体报告基因

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重组人CD80-SEA毒素逆转录病毒真核表达载体的构建

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第四军医大学学报 2001年第3期22卷 275-276页

作者：李增山隋延仿姜永强雷祚荣尚继栋第四军医大学基础部病理学教研室肿瘤抗原肽实验室陕西西安710033 军事医学科学院微生物流行病研究所

0　引言　肿瘤的免疫基因治疗已成为近年来研究的一个热点. 机体免疫系统抗肿瘤的主要方式是T细胞介导的免疫排斥反应，而T细胞被激活并杀伤肿瘤细胞依赖于两类信号，一类是抗原递呈信号，另一类是共刺激信号. 但尚未有人报道将上述两... 详细信息

0　引言　肿瘤的免疫基因治疗已成为近年来研究的一个热点. 机体免疫系统抗肿瘤的主要方式是T细胞介导的免疫排斥反应，而T细胞被激活并杀伤肿瘤细胞依赖于两类信号，一类是抗原递呈信号，另一类是共刺激信号. 但尚未有人报道将上述两种信号结合在一起有效的应用到肿瘤的治疗当中. 我们通过基因工程手段构建同时表达共刺激分子CD80和葡萄球菌肠毒素A（Staphylococcal Enterotoxin A，SEA，一种重要的超抗原）的逆转录病毒真核表达载体，使其表达这两个分子，发挥SEA强特异性激发细胞毒T淋巴细胞（CTL）活性和CD80介导的第二信号共刺激双重作用，建立SEA-B7-1新双识别系统，启动一种全新的免疫排斥机制，并且较好的解决了毒素蛋白融合基因翻译后二级结构及生物活性的预测. 这一研究成果对多数实体瘤具有普遍意义，并将为肿瘤疫苗和基因治疗拓展新的途径.

关键词：肿瘤免疫基因治疗 CD80-SEA毒素逆转录病毒真核表达载体构建

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肿瘤疫苗研究进展

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现代肿瘤医学 2003年第4期11卷 241-244页

作者：隋延仿李增山第四军医大学病理教研室肿瘤抗原肽及生物治疗实验室陕西西安710032

从1893年Coley第一次利用细菌提取物诱发机体对肿瘤的免疫杀伤研究到现在,人们已经基本明确机体在肿瘤细胞的免疫识别和免疫调节过程中的分子机制,在此基础上,研究针对肿瘤细胞的特异性肿瘤疫苗已经成为肿瘤生物治疗的重要手段.

关键词：肿瘤疫苗研究进展免疫杀伤研究免疫识别免疫调节

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