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中华医学杂志 2003年第14期83卷 1259-1261页

作者：章翔林绿标姬西团费舟吴景文李侠第四军医大学西京医院全军神经外科研究所西安710032

目的　探讨外源性一氧化氮 (NO)对小鼠神经祖细胞 (NPC)增殖的抑制作用。方法　用含上皮生长因子 (EGF)的培养基原代培养NPC ,以硝普钠 (SNP)作为NO的体外供体。用Griess还原法检测细胞上清液中NO的含量 ;MTT法试验检测活细胞数 ;用含... 详细信息

目的　探讨外源性一氧化氮 (NO)对小鼠神经祖细胞 (NPC)增殖的抑制作用。方法　用含上皮生长因子 (EGF)的培养基原代培养NPC ,以硝普钠 (SNP)作为NO的体外供体。用Griess还原法检测细胞上清液中NO的含量 ;MTT法试验检测活细胞数 ;用含血清培养基诱导NPC分化。结果　 2 4h后细胞上清液中NO含量随SNP浓度的增高而增加 ;经 10 0、15 0、2 0 0 μmol/L的SNP作用后 ,NPC吸光度值分别为 0 .5 4 6± 0 .0 16、0 .4 84± 0 .0 0 7、0 .35 7± 0 .0 0 7,对照组为 0 .6 4 2± 0 .0 2 1;在解除SNP抑制后 ,NPC仍能保持旺盛的增殖能力并能被诱导分化为神经细胞样细胞。结论　外源性NO对培养状态下的小鼠NPC有抑制作用。

关键词：外源性一氧化氮小鼠神经祖细胞细胞增殖细胞培养 Gness还原法 MTT法硝普钠神经元

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经枕下-乙状窦后入路显微手术切除大型听神经瘤

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中华外科杂志 2001年第10期39卷 782-785,T002页

作者：章翔费舟付洛安吴景文张剑宁杨利孙刘卫平顾建文易声禹王占祥贺晓生宋少军第四军医大学西京医院全军神经外科研究所西安710032

目的　探讨手术切除大型听神经瘤 (LAN)的最佳入径。　方法　对术前经CT或MRI证实 ,且肿瘤位于桥脑小脑角区 ,直径≥ 31mm的 2 16例LAN患者 ,采用枕下乙状窦后入路显微手术肿瘤切除术 ;术后评估治疗效果 ,分别比较术前、后的听神经和... 详细信息

目的　探讨手术切除大型听神经瘤 (LAN)的最佳入径。　方法　对术前经CT或MRI证实 ,且肿瘤位于桥脑小脑角区 ,直径≥ 31mm的 2 16例LAN患者 ,采用枕下乙状窦后入路显微手术肿瘤切除术 ;术后评估治疗效果 ,分别比较术前、后的听神经和面神经功能。　结果　肿瘤全切除率79 6 % (172例 ) ;次全切除率 15 3% (33例 ) ;部分切除率 5 1% (11例 ) ;术后病死率 1 4% (3例 )。听神经解剖保留率为 12 5 % (2 7例 ) ,出院时功能保留率为 4 2 % (A级 ,9例 ) ;面神经解剖保留率为 82 4%(178例 ) ,出院时功能保留率为 5 2 8% (House分级 ,Ⅰ～Ⅱ级 94例 )。对 187例患者平均随访 3 9年 ,其中 12 8例 (6 8 4% )恢复良好 ,44例 (2 3 5 % )恢复一般 ,15例 (8 0 % )恢复较差。在恢复较差患者中有 10例 (5 4% )肿瘤复发 (再次手术治愈 )。　结论　经枕下乙状窦后入路显微手术切除大型听神经瘤是一种安全、有效的方法。

关键词：听神经肿瘤手术入路 LAN 显微外科手术经枕下-乙状窦后入路

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人骨形成蛋白-2和透明质酸对脑胶质细胞瘤侵袭性的影响

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中华医学杂志 2002年第2期82卷 90-93页

作者：章翔吴景文李侠付洛安高大宽白红民刘先珍第四军医大学西京医院全军神经外科研究所西安710032

目的　探讨人骨形成蛋白 2 (rhBMP 2 )和透明质酸 (HA)对C6胶质细胞瘤体内侵袭的影响。方法　将携带增强型绿色荧光蛋白 (EGFP)基因的pEGFP N3质粒体外转染C6胶质瘤细胞 ,将C6阳性克隆以立体定向法植入SD大鼠脑实质内 ,建立大鼠胶质瘤... 详细信息

目的　探讨人骨形成蛋白 2 (rhBMP 2 )和透明质酸 (HA)对C6胶质细胞瘤体内侵袭的影响。方法　将携带增强型绿色荧光蛋白 (EGFP)基因的pEGFP N3质粒体外转染C6胶质瘤细胞 ,将C6阳性克隆以立体定向法植入SD大鼠脑实质内 ,建立大鼠胶质瘤移植模型。移植瘤区给予不同剂量的rhBMP 2和HA ,用病理检查、流式细胞计数、荧光显微镜及电子显微镜观察rhBMP 2和HA对胶质瘤侵袭的影响。结果　稳定转染EGFP基因的C6瘤细胞于体内、外均可发出绿色荧光 ,在荧光显微镜下易于区分肿瘤与非肿瘤区 ,并能检测到少量C6瘤细胞的远处侵袭性生长。 10 μl的 5 μg/mlrhBMP 2可明显抑制肿瘤体内侵袭 ;而 10 μl的 10 0 μg/mlHA则具有相反的作用。结论　EGFP标记的C6瘤细胞移植于大鼠脑内 ,可建成稳定的脑胶质细胞瘤体内侵袭动物模型。rhBMP 2降低了C6瘤细胞的体内侵袭性。

关键词：体内 rhBMP-2 侵袭 HA 瘤细胞瘤体人骨形成蛋白-2 EGFP 阳性克隆体外转染

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非清髓性方案在诱导大鼠后肢移植免疫耐受中的应用

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中华外科杂志 2009年第12期47卷 937-940页

作者：潘华王璐张旭东麦海星刘丹刘垠郭树忠第四军医大学西京医院整形外科研究所西安710032 第四军医大学西京医院泌尿外科西安710032 云南省昆明医学院第二附属医院整形外科

目的探讨基于淋巴细胞毒性相关抗原4-抗体重组腺病毒（AdCTLA4-Ig）的非清髓性方案在造血干细胞嵌合体诱导复合组织异体移植免疫耐受中的作用。方法以近交系Brown Norway（RT1^n）大鼠为供体，Lewis（RT1^1）大鼠为受体。以后肢移植当... 详细信息

目的探讨基于淋巴细胞毒性相关抗原4-抗体重组腺病毒（AdCTLA4-Ig）的非清髓性方案在造血干细胞嵌合体诱导复合组织异体移植免疫耐受中的作用。方法以近交系Brown Norway（RT1^n）大鼠为供体，Lewis（RT1^1）大鼠为受体。以后肢移植当天记为day0。实验分4组，A组：受体直接给予同种异体后肢移植，移植前不进行非清髓性预处理，移植后连续100d，每天仅给予低剂量环胞素A（CsA），8mg／kg腹腔注射。B组：受体先给予非清髓性预处理，移植前第33天至移植后第100天，每日用免疫抑制剂三联方案腹腔注射雷帕霉素（RAPA，0．2mg／kg）＋麦考（MMF，20mg／kg）＋甲泼尼龙（MP，10mg／kg），在移植当日及移植前及移植后第30天分3次尾静脉注射AdCTLA4-Ig（5×10^9PFU／d），后肢移植前30d接受单次3Gy（照射率0．5Gy／min）低强度全身照射，不予骨髓移植（BMT）。C组：受体预处理方案同B组，移植前30d，在低强度全身照射后4h内给予单次尾静脉注射供体骨髓细胞（100×10^6cells）。D组：受体预处理方案及BMT方法同C组，但大鼠后肢移植供体为第三方动物WF大鼠。在后肢移植后第100天开始，B、C及D组均停止免疫抑制剂三联方案，每日仅给予低剂量CsA（8mg／kg），连续100d，直至大鼠后肢移植物发生排异反应而坏死。通过外周血嵌合率检测、移植物抗宿主病检测、后肢移植物存活情况观察、移植物组织病理学检查与评价及混合淋巴细胞反应对免疫耐受状态进行分析评价。结果C组外周血嵌合率移植当日为（38．8±10．6）％，并长期保持稳定，移植后第300天为（29．3±11．9）％，均未发生移植物抗宿主病，停止免疫抑制剂三联方案后移植物存活〉200d，A、B、D组均发生免疫排异，后肢移植物分别存活（8±2）、（18±3）及（20±2）d，与C组相比，差异有统计学意义（P〈0．01）。C组移植物病理学检查显示无毛囊炎及血管周围炎等慢性免疫排异现象，混合淋巴细胞反应显示为供体特异性免疫耐受状态。结论基于AdCTLA4-Ig的非清髓性BMT方案可以诱导长期稳定的造血干细胞嵌合体状态，并可以诱导受体对大鼠后肢移植物的供体特异性部分性免疫耐受。

关键词：细胞毒性试验免疫嵌合体移植物非清髓性

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人内皮抑素基因的克隆与表达及其抑瘤作用的实验研究

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中华医学杂志 2001年第13期81卷 783-787页

作者：章翔吴景文费舟傅洛安高大宽屈延第四军医大学西京医院全军神经外科研究所西安710032

目的　克隆人内皮抑素基因 ,检测其表达蛋白的生物学活性 ,应用该蛋白治疗裸鼠皮下人脑胶质瘤。方法　从人肝组织提取mRNA ,用反转录聚合酶链反应技术克隆人内皮抑素基因 ,将其重组入pUC19,双脱氧末端终止法测定其核苷酸序列。构建非融... 详细信息

目的　克隆人内皮抑素基因 ,检测其表达蛋白的生物学活性 ,应用该蛋白治疗裸鼠皮下人脑胶质瘤。方法　从人肝组织提取mRNA ,用反转录聚合酶链反应技术克隆人内皮抑素基因 ,将其重组入pUC19,双脱氧末端终止法测定其核苷酸序列。构建非融合表达载体pDH endo,使其在DH5α内经温度诱导表达 ,纯化该表达蛋白并用鸡胚绒毛膜尿囊膜实验和内皮细胞抑制实验检测其活性。经荷瘤裸鼠皮下注射该蛋白治疗人脑胶质瘤。结果　成功获得 5 5 1bp的人内皮抑素基因 ,测序正确。该诱导表达蛋白分子量为 2 0 0 0 0 ,具有抑制血管生成活性。该蛋白每天 5、10或 2 0mg/kg裸鼠皮下注射可抑制荷瘤裸鼠皮下人脑胶质瘤血管生成和肿瘤生长 (抑瘤率分别为 34 5 % ,76 1%和80 2 % )。结论　人内皮抑素基因的表达和初步应用。

关键词：内皮抑素基因分子克隆抑瘤作用实验研究脑胶质瘤

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白细胞介素8在室管膜肿瘤细胞中的表达及分泌的意义

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中华医学杂志 2001年第7期81卷 396-398页

作者：顾建文章翔李侠迟素敏张万会杜亮第四军医大学西京医院全军神经外科研究所西安710032 第四军医大学西京医院生理教研室西安710032

目的　探讨室管膜肿瘤中白细胞介素 8(IL 8)表达和分泌的意义。方法　采用免疫组织化学法检测 5 0例手术切除的室管膜肿瘤标本中IL 8表达水平 ;双抗体夹心ELISA法测定原代培养的室管膜肿瘤细胞上清液中IL 8含量。结合患者的一般状况 ,... 详细信息

目的　探讨室管膜肿瘤中白细胞介素 8(IL 8)表达和分泌的意义。方法　采用免疫组织化学法检测 5 0例手术切除的室管膜肿瘤标本中IL 8表达水平 ;双抗体夹心ELISA法测定原代培养的室管膜肿瘤细胞上清液中IL 8含量。结合患者的一般状况 ,对不同组织学分型、病理分级及侵袭性的肿瘤的IL 8表达和分泌量进行统计学检验。结果　正常脑组织IL 8表达为阴性或弱阳性 ,而室管膜肿瘤IL 8表达均为阳性。间变型或恶性室管膜瘤每高倍视野中IL 8阳性细胞数目为 417± 38个 ,多于细胞和上皮型室管膜瘤 (P <0 0 1) ;IL 8阳性染色强度为 5 6± 7 5AU ,高于细胞和上皮型室管膜瘤 (P <0 0 1)。间变型或恶性室管膜瘤细胞上清液中IL 8的含量为 6 38μg/L± 87μg/L ,高于细胞和上皮型室管膜瘤 (2 98μg/L± 48μg/L ,P <0 0 1)。侵袭性室管膜肿瘤中IL 8的表达和分泌水平高于非侵袭性室管膜肿瘤 (P <0 0 1)。高恶性室管膜肿瘤细胞中IL 8的表达和分泌高于低恶性或良性室管膜瘤 (P <0 0 1)。IL 8的表达和分泌水平与患者性别、年龄等无明显相关性。结论　高恶性室管膜肿瘤中IL 8表达和分泌显著高于低恶性或良性室管膜肿瘤细胞。IL 8的表达和分泌可能与室管膜肿瘤的发生和发展密切相关。

关键词：白细胞介素8 室管膜肿瘤颅内肿瘤诊断预后

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羊颈动脉脱细胞血管基质的制备及其生物相容性评价

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中国修复重建外科杂志 2010年第7期24卷 843-849页

作者：张蔓菁刘宾杨阳李杨鲁开化昆明医学院第二附属医院整形外科昆明650031 第四军医大学西京医院整形外科全军整形外科研究所

目的研究脱细胞血管基质快速高效的制备方法并对其进行生物相容性评价,为组织工程血管的研究寻找合适的支架材料。方法取20根长50mm新鲜山羊颈动脉经-80℃冷冻、37℃水浴复温,反复冻融3次,在506MPa、4℃条件下超高压处理20min,0.125%SDS... 详细信息

目的研究脱细胞血管基质快速高效的制备方法并对其进行生物相容性评价,为组织工程血管的研究寻找合适的支架材料。方法取20根长50mm新鲜山羊颈动脉经-80℃冷冻、37℃水浴复温,反复冻融3次,在506MPa、4℃条件下超高压处理20min,0.125%SDS中37℃振摇(100r/min)12h,彻底去除细胞后,行HE染色、Masson染色、扫描电镜观察及生物力学测定研究其组织结构的变化;Hoechst33258荧光染色和细胞DNA残留量分析评价脱细胞效果;通过接触细胞毒性实验、MTT活性测试及皮下埋植实验对制备的脱细胞血管基质进行生物相容性分析。皮下埋植实验取清洁级SD大鼠10只,体重200～230g,分为2组(n=5),实验组于大鼠背部皮下埋植结合物理化学方法处理的脱细胞血管基质,对照组埋植单纯物理方法处理的脱细胞血管基质,分别于术后1、2、3、4、8周取出行HE染色观察。结果 HE染色及Masson染色显示脱细胞血管基质无细胞成分残留,保持较完整的胶原成分;扫描电镜观察血管表面以胶原为主,适合细胞黏附;Hoechst33258荧光染色脱细胞血管基质材料未见明显阳性核染色;苯酚-氯仿提取脱细胞血管基质残留DNA含量,电泳检测分析显示其中DNA含量较正常血管显著降低;生物力学检测示脱细胞血管基质最大荷载时的应力及应变与正常血管比较差异无统计学意义,保持了正常血管的力学特征;接触细胞毒性实验与MTT法测定示脱细胞血管基质与细胞有良好的黏附性,细胞毒性为0～1级;实验组皮下埋植术后8周材料周围基本未见炎性细胞,对照组仍有明显淋巴细胞浸润。结论经反复冻融、超高压及小剂量SDS处理的脱细胞血管基质是一种构建组织工程血管的理想支架材料。

关键词：组织工程血管脱细胞血管基质支架材料生物相容性山羊

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小腿后侧逆行筋膜皮瓣修复胫前皮肤软组织缺损

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中华显微外科杂志 1995年第4期18卷 291-292页

作者：韩岩殷奇鲁开化西安第四军医大学西京医院整形外科创伤骨科研究所

小腿后侧逆行筋膜皮瓣修复胫前皮肤软组织缺损韩岩，殷奇，鲁开化小腿胫前中下段皮肤软组织缺损骨外露或贴骨瘢痕处理起来较为困难，如不能良好的覆盖创面则会影响深部组织的进一步处理。以往采用的方法常费时费力或要牺牲主要的血管。... 详细信息

小腿后侧逆行筋膜皮瓣修复胫前皮肤软组织缺损韩岩，殷奇，鲁开化小腿胫前中下段皮肤软组织缺损骨外露或贴骨瘢痕处理起来较为困难，如不能良好的覆盖创面则会影响深部组织的进一步处理。以往采用的方法常费时费力或要牺牲主要的血管。近来我们采用小腿后侧逆行筋膜皮瓣修...

关键词：小腿皮瓣皮肤软组织缺损

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自体软骨碎屑回植对肋软骨修复再生的影响

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中华整形外科杂志 2010年第3期26卷 199-202页

作者：李先慧简彩李运明夏炜张辉郭树忠第四军医大学西京医院全军整形外科研究所西安710032 成都军区总医院质量管理科

目的研究切取自体肋软骨后将软骨碎屑回植包埋人供区软骨膜内,对肋软骨修复和再生的影响.方法取8～10周龄生长期雄性家兔16只随机分成4组,每组4只.实验各组在完整保留软骨膜、肋骨软骨连结处的情况下切取一段肋软骨,对缺损部位采用直... 详细信息

目的研究切取自体肋软骨后将软骨碎屑回植包埋人供区软骨膜内,对肋软骨修复和再生的影响.方法取8～10周龄生长期雄性家兔16只随机分成4组,每组4只.实验各组在完整保留软骨膜、肋骨软骨连结处的情况下切取一段肋软骨,对缺损部位采用直接缝合、软骨碎屑回植后缝合及软骨碎屑回植加生物蛋白胶封闭空隙后缝合3种方法处理,3种处理方法在各实验组家兔两侧肋软骨中两两配对;健康对照组不做任何处理.术后16周处死家兔后观察各组胸廓及修复段的大体形态,常规HE染色病理切片,并行生物力学检测测定各肋软骨修复段的强度.结果各实验组家兔的胸廓整体形态均较良好,各组及各处理方法之间并无明显差别;HE染色病理切片观察可见各组修复组织均主要为纤维组织,回植的小块软骨虽能够有效存活,但无明显增殖.生物力学检测显示：不回植组的修复组织强度为（193.92±41.41）N、回植组为（318.88±28.28）N、生物蛋白胶组为（301.00±39.52）N、健康对照组为（300.54±38.35）N,不回植组明显低于后3组（P〈0.01）.而后3组组间比较差异均无统计学意义（P〉0.05）.结论将软骨碎屑回植虽不能促进透明软骨的再生修复,但能明显加强修复组织的强度,加强胸廓的稳定性,从而间接降低胸廓畸形的发生率.

关键词：肋软骨再生生物力学胸廓畸形

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应用肌皮瓣治疗胸部放射性溃疡合并肋(软)骨炎

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第四军医大学学报 2009年第8期30卷 713-715页

作者：杨力潘勇韩岩马显杰张辉第四军医大学西京医院全军整形外科研究所陕西西安710033

目的:探讨胸部放射性溃疡合并肋(软)骨炎的治疗方法.方法:彻底清除坏死、变性、感染的溃疡组织、肋(软)骨组织,扩大切除周边的瘢痕、纤维化组织后,应用下腹部横行腹直肌肌皮瓣和背阔肌肌皮瓣修复创面并部分再造乳房.结果:本组8例患者,... 详细信息

目的:探讨胸部放射性溃疡合并肋(软)骨炎的治疗方法.方法:彻底清除坏死、变性、感染的溃疡组织、肋(软)骨组织,扩大切除周边的瘢痕、纤维化组织后,应用下腹部横行腹直肌肌皮瓣和背阔肌肌皮瓣修复创面并部分再造乳房.结果:本组8例患者,创面应用下腹部横行腹直肌肌皮瓣4例,应用背阔肌肌皮瓣4例.其中7例伤口均2wk内愈合,1例术后因蒂部隧道周围死腔、积液引发局部感染,经部分拆线减小张力、湿敷换药、补充植皮后闭合创面.结论:应用肌皮瓣修复是治疗胸部皮肤放射性溃疡合并肋软骨炎的好方法.

关键词：辅射损伤溃疡外科手术

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